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  • 【专利】 一种防止pH电极头受冲击的pH表取样套管

    作者:赵国付 ; 贾新盛 年份:2016
    摘要:本实用新型公开了一种防止pH电极头受冲击的pH表取样套管,涉及脱硫吸收塔浆液在线pH仪表管道取样装置。该pH表取样套管包括pH表取样套管本体和设于pH表取样套管本体上的连接法兰和阀门;pH表取样套管本体头部设有头部阻挡套管,头部阻挡套管为四抓开口式,头部阻挡套管顶部设有阻挡块,阻挡块全覆盖头部阻挡套管的口径。本实用新型达到的有益效果为:头部阻挡套管和阻挡块分别阻挡水平和垂直方向的冲洗水的压力,保护pH电极玻璃球泡不被冲击破损,同时也防止浆液中大的固体颗粒撞击损坏,pH电极使用寿命延长,降低了运行成本,保证环保设备在线仪表正常测量监督,使简单可行,易于制作,效果良好。
  • 【专利】 pH接近生理pH的可注射的均相壳聚糖水溶液

    作者:A·盖里 ; F·贝尔泰恩 年份:2016
    摘要:本发明涉及可注射的均相壳聚糖水溶液,其包含生理学上可接受的介质中的0.1‑4.5重量%的乙酰化程度小于20%并且重均分子量为100,000‑1,500,000g/mol的壳聚糖,所述溶液的pH大于或等于6.2并且有利地为6.2‑7.2,所述溶液不包含任何乙酰化程度大于20%的壳聚糖,所述溶液在环境温度下是液体并且是均相的。本发明还涉及如前所述的水溶液,其特征在于,其能够通过包括以下步骤的方法来制备:‑通过添加诸如弱酸的酸将壳聚糖溶解在水中,所述弱酸有利地选自由醋酸、乙醇酸、乳酸、谷氨酸及其混合物组成的组,和‑优选在环境温度下,通过透析再调节pH,以得到pH大于或等于6.2,有利地6.2‑7.2,优选6.25‑7.1的水溶液。
  • 【论文】 具有pH可控性的离子通道多肽研究

    作者:任真真 关键词:多肽 ; pH可控性 ; 离子通道 机构:苏州大学 ; 苏州大学 年份:2017
    摘要:pH敏感肽(pH Low Insertion Peptides,pHLIPs)是一类具有一定水溶性,在弱酸性条件下可自发地迅速嵌入脂质体双分子层或细胞膜并形成稳定的α-螺旋结构且随pH值改变完全可逆的膜肽。pHLIPs具有双向运输能力,可以靶向作用于多种疾病组织酸性微环境的细胞,用于疾病诊断和治疗。M2质子通道是流感病毒A脂质双层膜上具有pH-依赖性的质子选择性通道,在病毒感染和复制过程中起重要作用。M2蛋白的四条跨膜α螺旋构成该亲水性的质子通道,M2蛋白跨膜结构域(transmembrane domain of M2 protain,M2TM)通道表面的关键位点氨基酸残基理化特性和静电性直接影响所形成通道的直径和亲水性。本课题根据pH敏感肽和流感病毒A跨膜结构域的工作原理,设计、合成、纯化一系列多肽,通过检测寻找一种具有pH可控性的离子通道多肽,该肽在中性条件下具有水溶性,酸化后,能自发地嵌入脂质体双层膜,形成α-螺旋及阳离子通道。实验中,采用固相多肽合成法(SPPS)合成多肽序列,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)确定目标肽,反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化,冷冻干燥,得到可用于检测的Q系列多肽。检测时,首先利用荧光分光光度计测试Q系列多肽在加入脂质体DMPC前/后以及酸化后色氨酸荧光强度变化和荧光最高点对应波长左移情况,判断多肽随pH值降低进入脂质体膜情况,初步筛选出符合研究要求的具有pH敏感性的多肽序列。然后,将筛选出的多肽序列N端连接荧光试剂NBD,利用NBD-连二亚硫酸荧光淬灭实验确定多肽进入脂质体端。通过实验,初步筛选出AC-Q10,AC-Q11,AC-Q12三个多肽序列具有较好的酸敏感性,符合进一步研究要求;pH值对AC-Q10D,AC-Q10T荧光影响实验进一步表明多肽具有较好的pH可控性;NBD-连二亚硫酸荧光淬灭实验确定多肽入膜端为C端。上述工作为后续多肽离子通道形成和评估实验做了充分准备。
  • 【论文】 高强度pH响应性超分子共聚物水凝胶

    作者:王庆 关键词:高强度 ; pH响应 ; 超分子聚合物凝胶 机构:天津大学 ; 天津大学 年份:2017
    摘要:本文通过一步法采用N-丙烯酰基甘氨酰胺(NAGA)和2-乙烯基-4,6-二氨基-1,3,5-三嗪(VDT)两种双氢键单体,简单方便地制备了高强度pH响应性超分子聚合物水凝胶PNAGA-PVDT。在PNAGA-PVDT共聚物水凝胶中,NAGA组分提供的分子间氢键交联主要负责提高材料的强度,而VDT组分形成的氢键主要提供pH响应性。在pH3溶液中,VDT组分氨基质子化破坏了部分分子间氢键,PNAGA-PVDT水凝胶的力学强度显著降低,而溶胀性能提高。而在pH7.4的溶液中,由于聚合物分子间氢键的重建,PNAGA-PVDT共聚物水凝胶显示较高的力学强度。在所选择的pH范围内,PNAGA-PVDT共聚物水凝胶的拉伸强度最高达1.25 MPa,断裂伸长率达到845%,杨氏模量为69 kPa,压缩强度达到21 MPa。这种具有高强度和pH响应性的PNAGA-PVDT共聚物水凝胶在生物医用和工业生产等领域具有潜在的应用前景。
  • 【论文】 基于神经网络的沼气厌氧发酵pH控制方法研究

    作者:郭雨桐 关键词:pH ; 厌氧发酵 ; 非线性 ; 神经网络 ; 模糊控制 ; 规则自组织 机构:华中科技大学 ; 华中科技大学 年份:2016
    摘要:沼气厌氧发酵利用厌氧微生物进行发酵,产生沼气以获取清洁能源,其中影响微生物代谢过程重要参数为水解液pH值。然而厌氧发酵过程pH值变化存在非线性,时变和时滞的特性,难以建立精确的模型。因此传统控制算法容易产生超调与振荡,导致沼气生产效率不高。针对这种情况,本文开发了一种基于神经网络的规则自组织模糊控制算法。主要研究内容和成果如下:首先,分析厌氧发酵过程pH变化规律,确定pH值控制过程中的控制参数与干扰参数,构建了pH值控制的简化控制模型。其次,研究了基于RBF和BP神经网络的沼气厌氧发酵PH值控制算法。利用神经网络对被控过程的逼近能力,对水解液pH值的变化进行辨识与学习,得到最优的网络结构。再利用仿真检验BP神经网络和RBF神经网络的逼近效果。通过与样本数据的比较,发现二者都能够很好的辨识厌氧发酵过程水解液pH值的变化过程,其中RBF神经网络的辨识效果优于BP神经网络,且训练时间更短,网络结构更为简单。最后,研究了沼气厌氧发酵pH值控制的神经网络-模糊控制设计算法。利用辨识好的网络模型替代实际发酵过程,进行模糊控制设计,并对设计好的模糊控制器进行仿真。针对pH变化的时滞性,在模糊控制器中增加了规则自组织模块,利用校正规则表对前一个时刻的控制作用进行校正,并对模糊控制规则表进行微调,提高控制精度。结果表明,pH值控制过程得到明显改善,其中基于RBF神经网络-规则自组织模糊控制方法控制效果良好,将控制精度从6.8±0.2提高到6.8±0.1。
  • 【论文】 PH超细磷铝酸盐灌浆材料的研究

    作者:杨蓉 关键词:超细磷铝酸盐水泥 ; 低PH ; 流变性能 ; 可灌性能 ; 体积稳定性 机构:武汉理工大学 ; 武汉理工大学 年份:2017
    摘要:本文依托于硅酸盐建筑材料国家重点实验室项目“高放废物深地质处置用磷铝酸盐水泥基封闭材料的应用基础研究”,主要针对深地质处置工程对水泥基封闭材料的需求,拟研究适宜于裂隙隙宽100μm的低PH、高流态化和高耐久性磷铝酸盐水泥基裂隙封闭材料设计和性能调控方法。实验室自制磷铝酸盐水泥,并对其进行二次粉磨,通过掺入微研磨介质和助磨剂来制备超细磷铝酸盐水泥。借助测量灌浆料的保水、流变、力学、PH、体积稳定性能并在室内模拟灌浆液的可灌性,研究水灰比和保水剂、矿物掺合料、减水剂及膨胀剂等调控材料对灌浆材料的影响,得到每组调控材料最好的掺量,用于制备深地质处置中磷铝酸盐水泥基裂隙封闭材料(GRPCSM)。本文的主要研究为以下几个方面:(1)在磷铝酸盐水泥中掺入微研磨介质和不同的助磨剂进行二次粉磨,并借助激光粒径分布和SEM及水化热等测试方法评价不同助磨剂的助磨效果。结果表明:掺入0.09%甘油助磨剂体系D95为13.35μm,达到超细水泥的要求,水泥水化中出现缓凝,并且水化也比较充分。(2)研究水灰比和保水剂、矿物掺合料、减水剂及MgO膨胀剂等调控材料对超细磷铝酸盐水泥性能的影响。实验结果显示:大的水灰比能明显地改善了灌浆材料的流动性能,但也会破坏浆体的稳定性;钠基膨润土和羟丙基甲基纤维素醚一方面能提高浆体的稳定性,另一方面又增加了浆液的粘度;减水剂作为一种表面活性剂提高了浆液的流变性能同时增大析水率和收缩率;掺入膨胀剂MgO能补偿体系的收缩,且MgO活性越大,补偿效果越好。(3)以粉煤灰20%、矿粉10%、膨胀剂MgO-1 4%、聚羧酸系减水剂、保水剂(钠基膨润土10%、羟丙基甲基纤维素0.2%)设计制备GRPCSM,并对其进行性能研究实验。实验显示:所设计的GRPCSM均具有好的浆体稳定性和可灌性,并且GRPCSM的强度都稳定增长不倒缩,但是所设计的GRPCSM部分不满足本项目对灌浆材料粘度小于50 mPa·s的要求。实验得到,当超细磷铝酸盐水泥:粉煤灰:MgO-1:聚羧酸系减水剂:羟丙基甲基纤维素醚=80:20:4:1.5:0.2时,能制备出适宜于裂隙隙宽100μm的低PH、高流态化磷铝酸盐水泥基裂隙封闭材料。
  • 【论文】 pH对棘胸蛙蝌蚪若干生理指标的影响效应

    作者:杨程 关键词:pH ; 棘胸蛙蝌蚪 ; 色差 ; 行为 ; 呼吸与排泄 ; 抗氧化酶 ; ATP 机构:浙江海洋大学 ; 浙江海洋大学 年份:2017
    摘要:以1月龄棘胸蛙蝌蚪[体长(1.694±0.121)cm,体质量(0.548±0.062)g]为实验材料,以经自然曝气48h自来水[水温(24±0.2)℃、pH7.30±0.01、DO(7.30±0.01)mg/L]为实验水源,设置5.5、6.5、7.0、7.5、8.5和9.5等6个pH处理组,在静水停饲的条件下,观察pH对蝌蚪行为活动和尾部皮肤色差Hunter L、A、B值影响的同时,较系统开展了pH对其耗氧率、排氨率和窒息点的影响,以及胁迫和恢复条件下棘胸蛙蝌蚪肝脏抗氧化酶(SOD、CAT、GSH)以及尾部皮肤ATP酶和抗氧化酶(SOD、CAT)活力的变化特征。结果表明:(1)蝌蚪分布水层、集群状况和运动频率与其所处pH值关系紧密,pH 5.5-6.5实验组棘胸蛙蝌蚪分布于水体上层且呈分散特征,且伴有浮头现象;pH 7.0实验组和pH9.5实验组棘胸蛙蝌蚪分布整个水体,且伴有浮头现象;pH 7.5-8.5实验组棘胸蛙蝌蚪分布于整个水体且呈集群特征;pH 5.5-7.0实验组蝌蚪运动频率明显高于其他实验组;(2)L值可表示蝌蚪尾部皮肤色差感应pH的指标,pH 8.5时L值最小,表明pH 8.5为显著改变蝌蚪皮肤色差的临界值;(3)pH 7.5-9.5时的耗氧率在各时段及夜均、昼均和日均均无显著差异(P>0.05),且显著高于其余组别(P<0.05),故pH 7.5为蝌蚪表露正常耗氧特征的最低临界值;各实验组排氨昼夜节律变化均呈夜均>昼均(P<0.05),且其日均排氨率与夜均、昼均排氨率均无显著差异(P>0.05),即蝌蚪排氨率在pH胁迫下未受到影响;窒息点含氧量随pH的升高呈先下降后上升的趋势,且其pH 7.5时窒息点含氧量最低;(4)pH 7.5为蝌蚪肝脏SOD和CAT酶耐受pH胁迫的最适值,pH 8.5为最高临界值,且恢复时长仅需6d可恢复到pH7.0水平;GSH酶在pH 7.5时未受到胁迫。(5)pH 7.5为蝌蚪尾部皮肤SOD和CAT酶耐受pH胁迫的最适值,pH 8.5为最高临界值,且恢复时长仅需6d可恢复到pH7.0水平;ATP酶在pH 7.5时未受到胁迫。
  • 【论文】 pH对褐环粘盖牛肝菌转录组的影响

    作者:杨威 关键词:pH值 ; 褐环粘盖牛肝菌 ; 转录组测序 ; 信号通路 ; 代谢途径 机构:内蒙古农业大学 ; 内蒙古农业大学 年份:2018
    摘要:为了探明环境pH条件对褐环粘盖牛肝菌基因表达的影响,本文测序分析了培养在不同pH环境下的该菌转录组,通过其基因的差异表达推断菌丝体酶活性的变化情况、感受环境pH的机制以及生理代谢的迥异。结果表明,与生长在pH 3.0环境下的菌丝相比,pH 4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、7.0与8.0条件下的菌丝,分别有743、870、1177、1512、1628、3135和2902个基因发生了差异表达,这些差异表达基因在基因本体论数据库中分别注释到2029、2368、2733、3125、3168、4626和4728个功能,在京都基因与基因组百科全书中分别定位到76、81、108、121、116、180和177个代谢途径。根据ICL及MS基因的表达量变化情况,发现乙醛酸的累积量与草酸产量随pH的变化趋势一致,呈正相关。根据FUM、CS及MDH基因的表达量变化情况,发现pH6.0条件下乙醛酸、琥珀酸和草酰乙酸累积量较高,7.0、8.0条件下乙醛酸、琥珀酸和苹果酸含量较高,帮助菌丝体适应和调节环境pH。菌丝体质膜上MAPK信号通路、氯离子通道、ABC转运体、G蛋白偶联的信号转导和MFS底物转运体被激活,从而感受环境pHpH4.5、6.0条件下,脂肪酸代谢、卟啉和叶绿素代谢、类固醇生物合成、牛磺酸、亚牛磺酸代谢、丁酸代谢、丙酮酸代谢和甘氨酸、丝/苏氨酸代谢等诸多代谢途径的活性较高,是菌丝体在该pH条件下生长适宜的重要因素。
  • 【论文】 pH响应控释水滑石基核壳材料的制备

    作者:黄清军 关键词:水滑石 ; 中空介孔二氧化硅 ; pH刺激-响应 ; 核壳材料 ; 5-FU缓释 机构:湘潭大学 ; 湘潭大学 年份:2016
    摘要:刺激响应型复合材料在药物释放领域的应用越来越广泛,研究也越来越受到重视。刺激响应型复合材料可响应温度、pH、磁场、化学物质等环境刺激的微小变化,实现药物的自律式控制释放。基于此,本论文以构建pH响应型药物载体为目标,开展了p H刺激-响应水滑石基中空介孔二氧化硅核壳材料(FU/HMS@LDH)的制备以及五氟尿嘧啶(5-FU)的可控释放研究,具体工作如下。将镁铝硝酸根水滑石(LDH-NO_3)前体在甲酰胺溶剂中剥离,采用XRD和TEM等表征手段,证实了材料已被剥离成不规则LDH纳米晶片。采用剥离-重组法将剥离的LDH纳米晶片通过静电相互作用与5-FU发生自组装,制备5-FU插层水滑石(FU/LDH)。系统研究了FU/LDH体外释放行为特征,5-FU的释放对环境pH有显著依赖性,随释放环境pH的降低,释放速率显著增加。FU/LDH的释放行为均符合Bhaskar模型所描述的粒内扩散机理。以CaCO_3微球为硬模板,制备中空介孔二氧化硅纳米粒子(HMS),并将5-FU负载在HMS上制成HMS载药粒子(FU/HMS)。成功将LDH纳米晶片包覆在FU/HMS粒子表面,组装具规整核壳结构的FU/HMS@LDH核壳载药粒子。在FU/HMS粒子表面包覆LDH纳米晶片作为开关分子,构筑p H刺激-响应药物控制释放系统。采用SEM、TEM、XRD、SAXD、BET/BJH、TG-DTG和UV-vis DRS等手段表征FU/HMS和FU/HMS@LDH核壳材料的形貌和结构,用以验证HMS表面功能化过程。研究了pH响应下5-FU的可控释放行为,FU/HMS@LDH核壳材料实现了在中性条件下“零释放”,酸性条件下大量释放的效果,这种可控释放性能可作为药物载体实现生物体pH环境下药物的可控释放。
  • 【论文】 还原和pH双敏感核交联阿霉素胶束药物

    作者:陈天冬 关键词:还原敏感性;pH响应性;儿茶酚铁离子络合物;核交联纳米胶束 机构:华东师范大学 ; 华东师范大学 年份:2018
    摘要:近年来,纳米胶束体系及其在药物传递系统中的应用引起了人们的普遍关注。纳米胶束药物传递体系具有提高药物稳定性和溶解度,减少毒副作用,可控药物释放及被动靶向性等优点,已越来越多的被应用于肿瘤靶向治疗中。本论文的研究内容主要分三个部分。第一部分:用迈克尔加成聚合方法合成含有二硫键和胺基的聚(β-胺基酯),分别用聚乙二醇(PEG)和3,4-二羟基苯乙酸修饰,合成还原可降解的两亲性接枝聚合物,并利用核磁共振氢谱对其结构进行表征;第二部分:采用透析法将该接枝聚合物组装成胶束,加入铁离子,与聚合物中的儿茶酚基团形成pH响应的络合物,从而得到核交联的聚合物胶束,研究了该核交联胶束对肿瘤微环境的还原敏感性和pH响应性;第三部分:用透析法制备载阿霉素的核交联胶束,研究了其在模拟的肿瘤微环境中的药物释放行为,探究了A549肺癌细胞对该载药胶束的吞噬行为,并利用噻唑蓝(MTT)法评价了其对A549细胞的细胞毒性。结果表明:聚合物纳米胶束对模拟的肿瘤微环境具有很好的还原敏感性且核交联胶束对模拟的肿瘤微环境具有良好的pH响应行为;载阿霉素的核交联胶束能够有效的保护所包载的药物,在血液环境下,能够保持胶束的稳定,避免药物在到达病灶前发生泄漏;到达肿瘤组织细胞外时,对肿瘤组织微酸性环境响应,聚(β-胺基酯)中的三级胺质子化,胶束发生电荷反转,其Zeta电位从-1.75 mV转变为+3.09 mV,由于肿瘤细胞膜的膜电位为负,胶束的电位转变增强了肿瘤细胞对该胶束药物的吞噬;胶束药物吞噬进入肿瘤细胞核内体/溶酶体后,在核内体/溶酶体高浓度谷胱甘肽(GSH)的还原作用下,二硫键断裂,在核内体/溶酶体较低pH值下,儿茶酚-铁离子络合物从多配位体变为单配位体,胶束解体,释放被包载的药物,从而抑制肿瘤细胞生长。
  • 【论文】 巯基—烯点击反应制备pH响应型聚合物

    作者:吴娟 关键词:智能大分子 ; β-硫代丙酸酯 ; pH响应性聚合物 ; 巯基-烯点击反应 机构:湖南大学 ; 湖南大学 年份:2018
    摘要:如今,癌症已经严重影响了人类的身心健康。目前,药物治疗、化疗、放疗、手术等手段可在一定程度上控制病情,但是上述治疗癌症的传统方法存在某些方面的缺陷。传统的药物输送方式对健康细胞的伤害较大、毒副作用较强,而智能药物输送系统输送抗肿瘤药物具有毒副作用小、生物相容性好、滞留时间长、载药量大等优点。因此,在抗癌药物输送的研究中,智能高分子材料应运而生。在靶向控制和输送抗肿瘤药物方面,可生物降解的两亲性聚合物胶束在药物纳米载体的应用方面具有很大的优势。在水溶液中时,两亲性聚合物的疏水部分向分子内部收缩,亲水部分向外展开,形成具有核-壳结构的纳米胶束,可用于包载疏水性的抗癌药物。另外,为了增加抗肿瘤药物在癌细胞内的释放量,可以在聚合物链段中引入一些pH敏感基团,例如,缩醛键、β-硫代丙酸酯、氨基等。基于大量文献调研,本文利用巯基-烯点击化学反应合成了三种不同结构的两亲性三嵌段聚合物,其中两种聚合物主链上带缩酮结构,另一种同时具有缩酮结构和β-硫代丙酸酯结构。利用核磁共振氢谱(1HNMR)以及凝胶渗透色谱(GPC)表征并分析聚合物的结构和性质。利用荧光光谱仪,并用尼罗红(Nile Red)作为荧光探针分子测定聚合物的临界胶束浓度(CMC),结果表明随着聚合物疏水链段的增加,聚合物的临界胶束浓度减小。另外,通过动态光散射仪(DLS)以及透射电子显微镜(TEM)对聚合物胶束的粒径大小和形态进行了表征。并通过测定包裹尼罗红(Nile Red)的聚合物胶束在不同pH缓冲溶液中的荧光强度随时间的变化,探讨了聚合物胶束的pH响应性。在pH=7.4的缓冲溶液中,两亲性三嵌段聚合物Pb胶束能够稳定存在,尼罗红几乎没有释放;但在pH=5的酸性环境中,包裹在内核中的尼罗红缓慢释放。进一步利用动态光散射仪(DLS)测定了在pH=5的缓冲溶液中两亲性聚合物Pb胶束粒径大小随时间的变化,实验结果发现随着时间的变化,胶束的粒径大小从144 nm扩大到255 nm,最后又缩小到55 nm,这是由于β-硫代丙酸酯结构的水解,导致聚合物胶束主链断裂。在pH=7.4的缓冲溶液中,包裹在Pb胶束内核中的模拟药物尼罗红基本不释放,而在pH=5.0的缓冲溶液中,尼罗红缓慢释放,说明了这种聚合物胶束具有很好的pH响应性。因此,这种两亲性三嵌段聚合物Pb是一种很有前景的药物传递载体材料,能够将其应用于疏水抗癌药物的运输和释放过程中。
  • 【论文】 发酵液pH对乳酸乳球菌有氧呼吸的影响

    作者:施为家 关键词:发酵液pH ; 血红素 ; 乳酸乳球菌 ; 有氧呼吸效率 机构:安徽农业大学 ; 安徽农业大学 年份:2016
    摘要:乳酸乳球菌广泛应用于发酵乳制品的生产,在外源基因表达及活菌疫苗制品等方面也具有重要的应用价值。而发酵剂的细胞密度是决定发酵剂性能、提高发酵产量和降低生产成本的关键因素,因此乳酸乳球菌的高密度培养则显得尤为重要。乳酸乳球菌属于兼性厌氧菌,胞内缺乏完整的呼吸链,其产能方式为发酵。研究表明,当外源血红素存在时,乳酸乳球菌可以产生有氧呼吸所需的关键酶,形成完整的电子传递链,其产能方式由发酵转变为有氧呼吸,其生物量和生存力都得到显著提升。pH值对包括营养物质的吸收和胞内酶活性等诸多细胞生理方面具有十分重要的影响。在实际工业大规模生产中pH值是一个比较常用的发酵控制参数,因此,研究乳酸乳球菌在什么样的发酵液pH值培养条件下其有氧呼吸效率最高,这对于工业上利用有氧呼吸来获得乳酸乳球菌高细胞密度培养物具有较强的实践意义。基于以上分析,本实验通过测定不同发酵条件(发酵液pH值、通气、添加血红素)下乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)菌株生物量、发酵液残糖量,对比研究了发酵液pH值对菌体得率和有氧呼吸效率的影响,优化建立了一种酸化丙酮法测定胞内血红素浓度的分光光度计法,并研究了发酵液pH值与胞内血红素积累之间的关系。主要研究结果如下:1.在仅通气(A条件)下,乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)最大生物量比通气且添加4μg/m L血红素(HA条件)下的小很多,只有后者的40%,并且其生长速率在对数前期就低于后者,对数期比后者长3 h,这表明添加外源血红素能使乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)进行全程的有氧呼吸,而不是先发酵后呼吸。在这两个培养条件下,发酵液pH值均随着培养时间延长而下降,发酵终点pH值基本一致,但A条件下发酵液pH下降速度明显高于HA条件下的,表明有氧呼吸条件下酸胁迫依然存在,但胁迫程度低于发酵条件下的。将乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)菌株培养在通气、添加血红素且pH恒定为6.5条件下(HPA6.5)时,最高生物量比HA条件下的高很多;不通气添加4μg/m L血红素并控制pH值为6.5(HP6.5)条件下乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)的最高生物量比HPA6.5条件下的明显降低,并且最高生物量下的菌体得率只有HPA6.5的67%,这表明在消除酸胁迫条件下乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)在有氧呼吸生长过程中将还原糖转化成生物量的能力明显高于发酵条件下的。2.将发酵液控制在不同pH值下(5、5.5和6)分别进行有氧呼吸和发酵培养。结果表明,HPA5.0、HPA5.5、HPA6.0和HPA6.5条件下的乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)最高菌体得率分别比相应不通气条件下的(即HP5.0、HP5.5、HP6.0、HP6.5条件)增加了244%、180%、94%、和50%,因此,在pH 5~6.5范围内,pH值对细胞有氧呼吸效率影响存在如下趋势:pH 5>5.5>6>6.5。3.当乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)发酵液浊度(OD600)>2时,在血红素浓度为0.1-4μg/m L范围内,采用波长为380 nm的酸性丙酮分光光度计法可准确地测定胞内血红素浓度。4.在HPA条件基础上控制乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)发酵液pH值分别为6.5、6.0、5.5和5.0,测定胞内血红素浓度变化曲线。结果表明,发酵液pH值对细胞吸收血红素能力的影响存在如下趋势:pH5.5>pH6>pH5>pH6.5。对比分析不同培养条件下胞内血红素浓度与生物量、有氧呼吸效率之间的关系,发现HPA5.5条件下时生物量最高与pH 5.5的环境更能促进乳酸乳球菌NZ9000(p NZ8148)胞内积累血红素,从而促进其进行有氧呼吸。
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