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  • 【期刊】 miRNA-19b过表达对P19细胞分化的影响

    刊名:临床和实验医学杂志 作者:杨利民 ; 王淮燕 ; 许国锋 ; 刘雪华 ; 秦大妮 ; 余章斌 ; 王永清 关键词:miRNA-19b ; P19细胞 ; 分化 机构:苏州大学附属第三医院儿科 ; 苏州大学附属第三医院儿科 年份:2015
    摘要:目的通过过表达miRNA-19b,研究miRNA-19b对P19细胞分化的影响。方法脂质体2000转染miRNA-19b过表达质粒与空载质粒进入P19细胞,通过杀稻瘟菌素筛选出稳定株;实时定量聚合酶链反应检测miRNA-19b表达水平以及分化基因(c Tn T、ANP、GATA4)的表达水平。结果 miRNA-19b过表达载体与细胞系成功建立(P<0.05);在P19细胞分化过程中,miRNA-19b过表达组心肌标志物均显著高于对照组(P均<0.05)。miRNA-19b显著促进P19细胞向心肌细胞分化。结论 miRNA-19b可以显著促进P19细胞向心肌细胞的分化,为以后其用于心脏发育的进一步研究奠定基础。
  • 【期刊】 肝纤维化进程中miRNA-19b表达变化的研究

    刊名:现代生物医学进展 作者:郭晓东 ; 熊璐 ; 张红萍 ; 周艳贤 ; 杨美 ; 章方莉 ; 刘树红 ; 李进 关键词:肝纤维化 ; 微小RNA-19b ; 荧光实时定量聚合酶链反应 ; 大鼠 机构:解放军第302医院 ; 解放军第302医院 ; 军医进修学院 ; 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 年份:2013
    摘要:目的:观察微小RNA(miRNA)-19b在肝纤维化大鼠肝脏组织的表达,探讨miRNA-19b在肝纤维化进程中的作用。方法:将20只SD大鼠随机分成正常对照组和肝纤维化模型组。采用改良式复合因素法复制大鼠肝纤维化模型,分别在6、7周后,取各组大鼠肝脏组织,用荧光实时定量PCR方法检测miRNA-19b的表达。结果:6周后肝纤维化模型组大鼠肝脏组织miRNA-19b的表达低于正常对照大鼠组(P<0.05),7周模型组大鼠肝脏组织miRNA-19b的表达低于6周模型组(P<0.05)。结论:miRNA-19b在肝纤维化大鼠肝脏组织中表达降低,可能与纤维化进程相关,且可能成为肝纤维的诊断以及预后的一个指标。
  • 【期刊】 孕期母血清miRNA-19b诊断胎儿先天性心脏病的初步评价

    刊名:心脏杂志 作者:沙莉 ; 朱莎莎 ; 余章斌 ; 韩树萍 关键词:心脏病,先天性 ; miRNA-19b ; 诊断标志物 机构:南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科 ; 南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科 年份:2015
    摘要:目的探讨孕期母血清miRNA在胎儿先天性心脏病(CHD)诊断中的临床价值。方法选取2009年7月~12月27例我院孕中期CHD胎儿孕妇为研究对象,同时收集27例与病例组在孕妇年龄、胎儿孕周基本匹配的胎儿无畸形的孕妇作为对照组,采用Real-time PCR检测miRNA-19b的表达水平,采用ROC曲线下面积(area under the curve,AUC),对miRNA-19b诊断CHD胎儿的准确性进行初步评价。结果通过检测孕期母血清miRNA-19b的表达水平,结果表明胎儿CHD病例组孕妇血清miRNA-19b水平显著高于对照组(P<0.01),对miRNA-19b预测胎儿CHD的准确性进行分析,结果表明AUC分别为0.79。结论孕期母血清miRNA-19b可以预测胎儿CHD的发生风险,作为胎儿CHD的诊断标志物。
  • 【期刊】 miRNA-19b对结肠癌细胞增殖活性的影响

    刊名:世界华人消化杂志 作者:程秀琴 ; 张迎娣 ; 张红杰 关键词:结肠肿瘤 ; miR-19b ; 细胞增殖 ; 细胞周期 机构:南京医科大学第一附属医院消化内科 ; 南京医科大学第一附属医院消化内科 年份:2015
    摘要:目的:探讨mi R-19b对结肠癌细胞HT-29增殖的影响及可能的机制.方法:生物信息学软件预测mi R-19b的靶基因,采用脂质体介导的转染方法将mi R-19b模拟物或抑制物转染到人结肠癌细胞系H T-29;检测转染后m i R-19b和靶基因的表达;利用CCK8试剂盒检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测mi R-19b对细胞增殖周期的影响.结果:在结肠癌细胞HT-29中高表达mi R-19b可显著降低细胞因子信号转导抑制蛋白3(suppressor of cytokine signaling,SOCS3)的表达(P<0.01),促进信号转导与转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的磷酸化及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达(P<0.01);相反,抑制mi R-19b后细胞内SOCS3蛋白的表达显著增加(P<0.01),STAT3的磷酸化及cyclin D1的表达均下降(P<0.01).HT-29细胞内mi R-19b的变化不影响细胞中SOCS3的m RNA水平.同时,CCK8检测发现升高mi R-19b的水平可促进细胞的增殖(P<0.05或P<0.01),流式结果表明高表达mi R-19b后处于增殖期细胞比例较对照组升高(P<0.01),降低mi R-19b的水平,增殖期的细胞比例下降(P<0.05或P<0.01),抑制细胞的增殖(P<0.01).结论:mi R-19b的表达可影响结肠癌细胞周期,促进结肠癌细胞的增殖活性,可能通过靶向调控SOCS3的表达来实现.
  • 【期刊】 20(S)-原人参二醇通过调控miRNA-19b诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的观察

    刊名:郑州大学学报(医学版) 作者:杨晓艳 ; 覃熙媛 ; 李楠 ; 罗志勇 ; 杨芳 关键词:MCF-7细胞 ; 20(S)-原人参二醇 ; miRNA-19b ; TNFα ; 凋亡 机构:中南大学湘雅公共卫生学院流行病与卫生统计学系 ; 中南大学湘雅公共卫生学院流行病与卫生统计学系 ; 苏州市立医院北区体检中心 ; 中南大学生命科学学院生物化学与分子生物学系 年份:2017
    摘要:目的:研究20(S)-原人参二醇[20(S)-PPD]通过调控miRNA-19b的表达诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡以及相关作用的机制。方法:采用MTT比色法检测30、40、50、60、70、80μmol/L 20(S)-PPD处理48 h对MCF-7细胞存活率的影响;real-time PCR检测30、50、80μmol/L 20(S)-PPD处理MCF-7细胞48 h后miRNA-19b相对表达量的变化;DNA甲基化转移酶(DNMT)活性检测试剂盒检测30、50、80μmol/L 20(S)-PPD处理MCF-7细胞48 h对DNMT活性的影响。将MCF-7细胞分成瞬时转染miRNA阴性对照模拟物+空白培养液组、瞬时转染miRNA-19b模拟物+20(S)-PPD组、瞬时转染miRNA-19b模拟物+空白培养液组、瞬时转染miRNA阴性对照模拟物+20(S)-PPD组,real-time PCR检测4组细胞miRNA-19b表达量的变化,Western blot检测4组细胞中TNFα蛋白表达量的变化,流式细胞术检测4组细胞的凋亡率。结果:20(S)-PPD可剂量依赖性地降低MCF-7细胞的存活率。随着20(S)-PPD剂量的升高,miRNA-19b的表达量降低(P<0.05)。80μmol/L的20(S)-PPD可增强DNMT活性(P<0.05)。转染miRNA-19b模拟物后,miRNA-19b的表达量上升,TNFα蛋白的表达受到抑制,细胞凋亡率降低;而加入65μmol/L 20(S)-PPD后,miRNA-19b的表达下调,TNFα蛋白的表达上调,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论:20(S)-PPD可能通过甲基化作用抑制miRNA-19b的表达,进而促进TNFα的表达,诱导MCF-7细胞凋亡。
  • 【期刊】 20(S)-原人参二醇通过调控miRNA-19b诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的观察

    刊名:郑州大学学报:医学版 作者:杨晓艳[1,2] ; 覃熙媛[3] ; 李楠[1] ; 罗志勇[3] ; 杨芳[1] 关键词:MCF-7细胞 20(S)-原人参二醇 miRNA-19b TNFα 凋亡 机构:中南大学湘雅公共卫生学院流行病与卫生统计学系 ; 中南大学湘雅公共卫生学院流行病与卫生统计学系 ; 苏州市立医院北区体检中心 年份:2017
    摘要:目的:研究20(S)-原人参二醇[20(S)-PPD]通过调控miRNA-19b的表达诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡以及相关作用的机制。方法:采用MTT比色法检测30、40、50、60、70、80μmol/L 20(S)-PPD处理48 h对MCF-7细胞存活率的影响;real-time PCR检测30、50、80μmol/L 20(S)-PPD处理MCF-7细胞48 h后miRNA-19b相对表达量的变化;DNA甲基化转移酶(DNMT)活性检测试剂盒检测30、50、80μmol/L 20(S)-PPD处理MCF-7细胞48 h对DNMT活性的影响。将MCF-7细胞分成瞬时转染miRNA阴性对照模拟物+空白培养液组、瞬时转染miRNA-19b模拟物+20(S)-PPD组、瞬时转染miRNA-19b模拟物+空白培养液组、瞬时转染miRNA阴性对照模拟物+20(S)-PPD组,real-time PCR检测4组细胞miRNA-19b表达量的变化,Western blot检测4组细胞中TNFα蛋白表达量的变化,流式细胞术检测4组细胞的凋亡率。结果:20(S)-PPD可剂量依赖性地降低MCF-7细胞的存活率。随着20(S)-PPD剂量的升高,miRNA-19b的表达量降低(P〈0.05)。80μmol/L的20(S)-PPD可增强DNMT活性(P〈0.05)。转染miRNA-19b模拟物后,miRNA-19b的表达量上升,TNFα蛋白的表达受到抑制,细胞凋亡率降低;而加入65μmol/L 20(S)-PPD后,miRNA-19b的表达下调,TNFα蛋白的表达上调,细胞凋亡率升高(P〈0.05)。结论:20(S)-PPD可能通过甲基化作用抑制miRNA-19b的表达,进而促进TNFα的表达,诱导MCF-7细胞凋亡。
  • 【论文】 MiRNA-19a和miRNA-19b对梅花鹿鹿茸组织中TGF-βRⅡ调控作用的研究

    作者:闫语多 关键词:miRNA ; 梅花鹿 ; 鹿茸软骨细胞 ; TGF-βRⅡ ; 细胞增殖 机构:吉林农业大学 ; 吉林农业大学 年份:2017
    摘要:鹿茸是雄性梅花鹿额骨顶部能够每年周期性脱落与再生的骨质器官,也是哺乳动物中唯一脱落后可完全再生的附属器官。其以惊人的速度每年完全再生一次而不发生任何癌变,这在哺乳动物中是绝无仅有的。因此,鹿茸也就成为了一种研究器官再生及癌症治疗的理想医学模型。鹿茸的周期性发育受到多种因素的调控,包括生长因子、激素、光照和温度等。MicroRNA(mi RNA)是真核生物基因组非编码区转录加工生成的内源性小分子单链非编码RNA,具有局部发夹结构,广泛存在于包括单细胞藻类在内的所有真核生物中,其结构在生物进化过程中表现出了高度的保守性。miRNA与mRNA的3,UTR结合后能够在不影响靶基因mRNA转录的前提下抑制其翻译。超过半数以上的哺乳动物蛋白质非编码区基因受到miRNA的调控。有研究表明,miRNA能够通过调控鹿茸细胞中相关生长因子的表达进而调控鹿茸细胞的增殖。Ⅱ型转化生长因子受体(TGF-βRⅡ)是TGF-β通路中的一种高亲和力受体,其负责接收并传递信号,是一种磷酸化蛋白。mi RNA-17-92基因簇是脊椎动物中一类保守的基因簇,其包含mi RNA-17-3p、mi RNA-17-5p、mi RNA-18a、miRNA-19a、miRNA-19b、miRNA-20a、miRNA-92a等7个成员。有研究表明,miRNA-17-92基因簇对TGF-β通路的信号传递会产生显著影响。但是,目前国内外关于梅花鹿miRNA-17-92基因簇对TGF-βRⅡ的转录调控作用的研究尚未见报道。本研究采集分离梅花鹿鹿茸软骨组织并进行体外细胞培养及软骨细胞的鉴定,利用TargetScan和miRanda两种生物信息学软件联合分析TGF-βRⅡ的3'端非编码区部分序列(3'UTR),预测能够与其相互作用的miRNA。根据课题组前期制备的梅花鹿鹿茸miRNA芯片对miRNA-17-92基因簇成员进行分析,筛选出在鹿茸顶端软骨及间充质两种组织中差异表达显著的mi RNA。合成TGF-βRⅡ的3'端非编码区序列(3'UTR),并构建TGF-βRⅡ基因3'UTR野生型及突变型双荧光素酶报告基因载体并进行荧光素酶活性检测以验证miRNA靶基因。再将人工合成的miRNA模拟物转染鹿茸软骨细胞,MTT法检测转染miRNA模拟物后软骨细胞体外增殖速率的变化;Western blot分析梅花鹿TGF-βRⅡ蛋白的相对表达水平及miRNA对IGF-1、TGF-β2等其它细胞生长因子表达的影响。鹿茸软骨细胞鉴定结果表明:成功反转录了梅花鹿软骨特异性基因ColX部分序列,序列长度为1771bp,与GeneBank中报道的梅花鹿ColX基因序列相似性为99%,结合对软骨细胞形态的观察比较,软骨细胞鉴定成功,分离的细胞可以用于后续实验。软件分析结果表明:miRNA-19a和miRNA-19b在TGF-βRⅡ的3'UTR上存在结合位点,鹿茸miRNA芯片分析结果表明:miRNA-19a和miRNA-19b在鹿茸顶端不同组织中存在差异表达,说明mi RNA-19a和miRNA-19b可能会对该mRNA的表达发挥一定影响。为了进一步探讨miRNA-19a和mi RNA-19b对梅花鹿鹿茸TGF-βRⅡ的转录调控作用及其与鹿茸细胞生长的关系,成功构建了含有miRNA-19a和miRNA-19b结合位点的TGF-βRⅡ基因3'UTR野生型及突变型双荧光素酶报告基因载体。荧光素酶活性检测结果显示:与阴性对照组相比,转染了野生型质粒和两种miRNA的细胞荧光素酶活性明显降低,而转染突变型质粒和两种miRNA的细胞组荧光素酶活性无明显变化。这一结果证明:TGF-βRⅡ是受miRNA-19a和miRNA-19b调控的靶基因,与前期预测结果一致。MTT法和western bloting结果显示,鹿茸软骨细胞的体外增殖受到抑制,TGF-βRⅡ蛋白及IGF-1和TGF-β2等其它细胞生长因子的相对表达水平下降,且呈时间依赖性。
  • 【期刊】 microRNA-19a; miRNA-19b; miRNA-21; miRNA-106b~25 cluster; miRNA-181a; miRNA-181b

    刊名:Science-Business eXchange 作者:None 年份:2008
    摘要: