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  • 【期刊】 氯化两面针碱体外逆转KB/ADM细胞多药耐药性的研究

    刊名:中国实验方剂学杂志 作者:张华君 ; 刘华钢 ; 梁燕 ; 冯燕英 ; 李俊威 关键词:氯化两面针碱 ; KB/ADM细胞 ; 多药耐药性 机构:广西医科大学药学院 ; 广西医科大学药学院 年份:2015
    摘要:目的:探讨氯化两面针碱(nitidine chloride,NC)对人口腔鳞癌耐阿霉素(ADM)细胞株KB/ADM多药耐药性(MDR)的逆转作用,开发低毒高效的抗肿瘤药物多药耐药逆转剂。方法:人口腔鳞癌多药耐药细胞KB/ADM常规培养至细胞数为1×106,随机分为多药耐药细胞组(KB/ADM细胞组),阳性药物维拉帕米组(VRP,5μmol·L-1),NC低剂量组(0.375mg·L-1),NC中剂量组(0.75 mg·L-1),NC高剂量组(1.5 mg·L-1)5组,每组3个平行样本。分别加入同体积的培养基,5μmol·L-1VRP,0.375,0.75,1.5 mg·L-1NC处理48 h,MTT法分别检测各组细胞对化疗药物ADM,长春新碱(VCR),依托泊苷(VP-16),羟基喜树碱(HCPT)敏感性;流式细胞仪检测P糖蛋白的表达;RT-PCR法检测多药耐药基因-1(MDR1)的表达。结果:与多药耐药细胞组比较,阳性药物VRP组,NC低、中、高剂量组KB/ADM细胞对ADM,VCR,VP-16,HCPT的IC50值明显下降(P<0.01,P<0.05);阳性药物VRP组,NC低、中、高剂量组KB/ADM细胞P糖蛋白的表达分别为(10.60±1.11)%,(68.57±2.56)%,(28.29±1.98)%,(8.03±1.46)%,与多药耐药细胞组(97.33±1.61)%比较明显下降(P<0.01);阳性药物VRP组、NC低、中、高剂量组分别使KB/ADM的多药耐药性基因(MDR1)相对表达下降39%,22%,46%,69%(P<0.01)。结论:氯化两面针碱能有效逆转KB/ADM多药耐药性,具有良好的抗肿瘤药物多药耐药逆转作用。
  • 【期刊】 SRB法检测As_2O_3对KB细胞和Tca8113细胞毒性的研究

    刊名:口腔颌面外科杂志 作者:刘思思 ; 鲁大鹏 关键词:三氧化二砷 ; As2O3 ; SRB显色法 ; KB细胞 ; Tca8113细胞 机构:首都医科大学口腔医学院口腔细胞生物学实验室 ; 首都医科大学口腔医学院口腔细胞生物学实验室 年份:2010
    摘要:目的:采用SRB(Sulforhodamine B)法研究三氧化二砷(As2O3)对人口腔鳞癌KB细胞和Tca8113的细胞毒性。方法:采用SRB法检测As2O3作用于KB细胞和Tca8113细胞前后的A值变化。结果:SRB法检测结果显示在KB组,1、1×10-1、1×10-2、1×10-3、1×10-4μg/mL质量浓度的As2O3所对应的A值分别为0.11、0.21、0.26、0.27、0.27;在Tca8113组,1、1×10-1、1×10-2、1×10-3、1×10-4μg/mL质量浓度的As2O3对应的A值分别为0.48、0.81、0.93、0.97、0.97。结论:As2O3对人口腔鳞癌KB细胞和Tca8113细胞的增殖有明显抑制作用,癌细胞抑制率呈现出剂量依赖性效应关系。
  • 【期刊】 牙周膜干细胞对口腔表皮样癌KB细胞增殖影响的研究

    刊名:中华肿瘤防治杂志 作者:王建波 ; 丁刚 ; 王清 ; 魏立梅 关键词:牙周膜 ; 间充质干细胞 ; 口腔癌 ; 细胞增殖 机构:潍坊医学院附属益都中心医院药剂科 ; 潍坊医学院附属益都中心医院药剂科 ; 潍坊医学院附属益都中心医院口腔科 ; 潍坊市人民医院牙科 年份:2015
    摘要:目的探讨牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)对口腔表皮样癌细胞KB细胞增殖的影响及其机制。方法取拔除的阻生第三磨牙和正畸减数牙,采用酶消化法分离PDLSCs。应用Transwell培养小室将PDLSCs和KB细胞以不同的比例混合培养,建立共培养体系。48h后,应用MTT法观察KB细胞增殖情况。在部分实验的培养体系中加入抗IL-6抗体,同法观察KB细胞增殖。收集共培养48h的KB细胞,通过流式细胞术检测其凋亡情况,RT-PCR法检测其Caspase-3的表达,蛋白质印迹法检测其β-catenin表达情况。收集PDLSCs,采用RT-PCR法检测其IL-6的表达。结果 PDLSCs与KB细胞共培养48h,PDLSCs∶KB细胞数量比为1∶1时,吸光度值为1.33±0.18,与单独KB细胞组的2.65±0.33相比,差异有统计学意义,P=0.041;PDLSCs∶KB细胞数量比为5∶1时,吸光度值为1.06±0.18,与单独KB细胞组相比,差异有统计学意义,P=0.001。表明PDLSCs能够显著抑制KB细胞的增殖。PDLSCs∶KB细胞数量比为1∶1时,KB细胞的凋亡率为(39±5)%,与单独KB细胞组的(15±4)%相比,P=0.022;PDLSCs∶KB细胞数量比为5∶1时,KB细胞的凋亡率为(51±7)%,与单独KB细胞组相比,P=0.001。在PDLSCs与KB细胞的共培养体系中,加入抗IL-6抗体后,PDLSCs抑制KB细胞的增殖作用显著减轻。RT-PCR实验发现,共培养48h后的PDLSCs的IL-6表达升高。蛋白质印迹法检测结果发现,培养48h后的KB细胞β-catenin表达无明显变化。结论 PDLSCs能抑制口腔表皮样癌KB细胞的增殖和促进KB细胞凋亡。
  • 【期刊】 KB细胞和CCL227细胞与肿瘤球细胞超微结构的比较

    刊名:现代肿瘤医学 作者:时伟红 ; 刘冬娟 关键词:口腔癌 ; 结肠癌 ; 超微结构 ; 肿瘤球细胞 机构:中国医科大学实验动物学部 ; 中国医科大学实验动物学部 ; 中国医科大学组织学与胚胎学教研室 年份:2012
    摘要:目的:比较人口腔癌KB细胞和结肠癌CCL227细胞与肿瘤球细胞的超微结构,为肿瘤干细胞研究提供更多的资料。方法:使用有血清培养液培养两种肿瘤细胞,无血清培养液分别诱导两种肿瘤细胞生成肿瘤球。常规方法制备KB细胞、CCL227细胞KB肿瘤球细胞、CCL227肿瘤球细胞透射电子显微镜切片,透射电子显微镜观察、拍照。结果:在四组样本中,细胞基本表现两种形态。一种细胞表面有突起,核糖体、线粒体数量相对较多。另一种细胞表面无突起,细胞核周围出现微丝,核糖体、线粒体数量减少,核内染色质出现靠边,后一种细胞在肿瘤球细胞中较多见。结论:伴随生理功能的改变,肿瘤干细胞的结构也发生了一些改变,这些改变可能会使蛋白合成下降。
  • 【期刊】 口腔鳞癌细胞KB和Tca8113中的SP细胞含量分析

    刊名:北京口腔医学 作者:刘三霞 ; 鲁大鹏 关键词:口腔鳞状细胞癌细胞系 ; SP细胞 机构:首都医科大学口腔医学院 ; 首都医科大学口腔医学院 年份:2010
    摘要:目的探讨两种口腔鳞状细胞细胞KB和Tca8113中的侧群细胞的含量,寻找口腔鳞癌肿瘤干细胞存在的依据。方法采用有限稀释法对口腔鳞癌细胞KB和Tca8113细胞株经Hoechst 33342/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染色后,采用流式细胞仪测定,分析两细胞株中侧群细胞的含量。结果口腔鳞癌细胞KB和Tca8113中具有不同的表型,即侧群细胞和非侧群细胞。在体外培养中,KB和Tca8113细胞株中侧群细胞含量分别为0.6%和2.3%。经维拉帕米阻断后,侧群细胞含量均明显降低,分别降为0和0.1%。结论 KB和Tca8113细胞株中均存在侧群细胞,但含量较少。
  • 【期刊】 miR-490-3p逆转MCF-7/ADM细胞对阿霉素耐药性的影响

    刊名:临床肿瘤学杂志 作者:王晓先 ; 孔凡君 ; 李飞 ; 张硕 关键词:乳腺癌 ; miR-490-3p ; 阿霉素耐药 ; 耐药蛋白 机构:解放军456医院药学部 ; 解放军456医院药学部 年份:2015
    摘要:目的探讨miR-490-3p在阿霉素(ADM)耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADM中的表达情况及其对MCF-7/ADM细胞增殖、凋亡和ADM耐药的影响。方法以野生型人乳腺癌细胞系MCF-7及其耐药型细胞系MCF-7/ADM为研究对象,用实时荧光定量PCR(q PCR)比较两种细胞中miR-490-3p的表达水平,将miR-490-3p的过表达载体pc DNA3.1(+)-miR-490-3p瞬时转染至MCF-7/ADM细胞(过表达组)后采用q PCR检测转染效果,同时设pc DNA3.1(-)空载体对照组和空白对照组;采用MTT法测定转染pc DNA3.1(+)-miR-490-3p对各组MCF-7/ADM细胞增殖能力的影响,测定ADM对MCF-7/ADM细胞的增殖抑制率并计算半数抑制浓度(IC50)及逆转倍数以评价对ADM敏感性的变化;分别于瞬时转染48 h后用Annexin V/FITC流式细胞术检测各组MCF-7/ADM细胞的凋亡率,Western blotting检测耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp),乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达,荧光分光光度计检测胞内ADM药物浓度,流式细胞仪检测P-gp活性。结果MCF-7/ADM细胞中miR-490-3p的表达水平为0.24±0.07,显著低于野生型MCF-7细胞的1.02±0.03(P<0.05);过表达组瞬时转染24~96 h的miR-490-3p水平持续升高,均高于空载体对照组和空白对照组(P<0.05);过表达组的增殖抑制率随转染时间的延长而增加,转染24、48、72和96 h的增殖抑制率依次为(17.52±1.87)%、(31.67±2.79)%、(45.09±1.88)%和(61.82±2.52)%,高于空载体对照组(P<0.05);ADM对过表达组的IC50值为(11.27±2.34)μg/ml,低于空白对照组的和空载体对照组(P<0.05),且过表达组相对于空白对照组和空载体对照组的逆转倍数分别为3.35倍和3.39倍;与其余两组相比,过表达组的MCF-7/ADM细胞早、晚期凋亡率和细胞内药物浓度均升高,P-gp、BCRP和MRP1表达及P-gp活性均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-490-3p可逆转MCF-7/ADM细胞ADM的耐药性,可能通过降低耐药蛋白表达及抑制P-gp活性有关,且升高其水平可抑制细胞增殖并诱导凋亡。
  • 【期刊】 白杨素对口腔鳞状细胞KB细胞凋亡的影响及其机制

    刊名:中南大学学报(医学版) 作者:谢雅馨 ; 彭小宁 关键词:口腔鳞状细胞癌 ; 白杨素 ; 线粒体膜电位 ; 凋亡 ; 蛋白激酶B ; 磷脂酰肌醇3-激酶 机构:四川大学华西口腔医学院 ; 四川大学华西口腔医学院 ; 吉首大学医学院 年份:2019
    摘要:目的:探讨白杨素对口腔鳞状细胞KB细胞凋亡的影响及其机制,为临床上口腔鳞状细胞癌的治疗提供思路。方法:用不同浓度白杨素(1,2,4,8,16和32μmol/L)处理KB细胞24 h,采用MMT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,化学发光法检测caspase-3/7活性,JC-1法检测KB细胞线粒体膜电位的变化,蛋白质印迹检测蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)的活化。结果:白杨素以浓度依赖方式抑制KB细胞增殖并诱导其凋亡,促进caspase-3/7的活化,降低KB细胞线粒体膜电位;同时抑制AKT和PI3K磷酸化。结论:白杨素诱导KB细胞凋亡作用可能与线粒体功能障碍和抑制PI3K/AKT通路相关。
  • 【期刊】 苦参碱对人膀胱癌BIU-87/ADM细胞多药耐药的影响

    刊名:中国中医药信息杂志 作者:左陵君 ; 张耘新 ; 段建敏 关键词:苦参碱 ; BIU-87/ADM细胞 ; 多药耐药 ; 逆转 机构:兰州大学第二医院泌尿外科 ; 兰州大学第二医院泌尿外科 年份:2016
    摘要:目的探讨苦参碱对人膀胱癌BIU-87/ADM细胞多药耐药逆转作用的机制。方法 MTT法检测细胞生长抑制率;荧光分光光度计检测阿霉素(ADM)的蓄积和外排;免疫印迹法检测P-糖蛋白(P-gp)表达;P-gp-GloTMAssay System试剂盒检测P-gp ATP酶活性。结果经ADM作用后,与敏感细胞株BIU-87存活率比较,耐药细胞株BIU-87/ADM存活率明显增加(P<0.001),苦参碱呈剂量依赖地降低BIU-87/ADM细胞存活率(P<0.01),而对敏感细胞株BIU-87细胞存活率无显著影响。苦参碱呈剂量依赖地增加ADM在BIU-87/ADM细胞中蓄积水平,抑制ADM细胞内外排。苦参碱明显抑制P-gp蛋白表达,降低P-gp ATP酶活性。结论苦参碱通过抑制BIU-87/ADM细胞P-gp蛋白和ATP酶活性,减弱P-gp外排功能,增加细胞ADM蓄积,从而发挥对人膀胱癌BIU-87/ADM细胞多药耐药的逆转作用。
  • 【期刊】 大黄素对K562/ADM细胞阿霉素耐药的抑制作用

    刊名:中国药科大学学报 作者:朱雅琪 ; 严方 ; 狄斌 ; 严佳 ; 李佳常 ; 李运曼 关键词:大黄素 ; K562/ADM ; 耐药抑制 ; P-gp ; Bcr-Abl ; STAT5 机构:中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室 ; 中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室 ; 中国药科大学药学医学基础实验中心 ; 中国药科大学生理学教研室 年份:2014
    摘要:探讨大黄素抑制人慢性粒细胞白血病细胞耐阿霉素变异株K562/ADM的药效学及作用机制。以维拉帕米为阳性药,阿霉素为工具药,采用MTT法测定大黄素与阿霉素合用对细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪考察了大黄素对于阿霉素诱导K562/ADM细胞周期阻滞和凋亡的促进作用;并采用Western blot法检测了大黄素对P-gp、Bcr-Abl和STAT5蛋白表达的影响;进一步通过P-gp单克隆藻红蛋白键合UIC2抗体结合实验探讨了大黄素是否是P-gp的底物。实验结果显示,大黄素与阿霉素合用可显著抑制K562/ADM的增殖,并呈量效关系;可促进阿霉素诱导的K562/ADM细胞G2/M期周期阻滞和细胞凋亡;不同剂量的大黄素可有效抑制P-gp、Bcr-Abl、STAT5蛋白表达及磷酸化;UIC2抗体结合实验结果则表明大黄素可能不是P-gp的底物。因此,大黄素能够在体外有效抑制K562/ADM阿霉素耐药,其机制可能不是通过底物竞争性抑制作用,而是与大黄素直接降低P-gp、Bcr-Abl及STAT5蛋白表达和磷酸化有关。
  • 【期刊】 硒化壳聚糖对K562/ADM细胞生物学行为的影响

    刊名:中国老年学杂志 作者:邓守恒 ; 蔡晓军 ; 潘东风 ; 李芳 ; 李林均 ; 陈萍 关键词:硒化壳聚糖 ; K562/ADM细胞 ; 多药耐药 ; 生物学行为 机构:湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心 ; 湖北医药学院附属人民医院肿瘤中心 年份:2014
    摘要:目的观察硒化壳聚糖对体外培养慢性粒细胞多药耐药白血病细胞株K562/阿霉素(ADM)细胞生物学行为的影响。方法硒化壳聚糖作用于体外培养的K562/ADM细胞12、24 h,应用流式细胞法检测细胞凋亡,软件拟合计算细胞周期;应用免疫印迹法检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;应用RT-PCR法检测MDR-1 mRNA水平。结果硒化壳聚糖能够明显增强ADM对K562/ADM细胞的诱导凋亡作用,阻滞细胞周期于G1期(P<0.05,P<0.01),下调P-gp表达和MDR-1 mRNA水平(P<0.05,P<0.01),硒化壳聚糖浓度越高,作用效果越显著。结论硒化壳聚糖能够通过下调MDR-1基因和P-gp表达,阻滞细胞周期于G1期来诱导细胞凋亡,进而对体外培养的K562/ADM细胞耐药生物学行为产生逆转。
  • 【期刊】 沉默MDR1基因逆转SGC7901/ADM细胞对紫杉醇的耐药性

    刊名:基因组学与应用生物学 作者:李妍 ; 邵淑丽 ; 李旭艳 ; 张伟伟 ; 孙婴宁 ; 肖越 关键词:SGC7901/ADM细胞 ; MDR1 ; RNAi ; 紫杉醇 机构:齐齐哈尔大学生命科学与农林学院 ; 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院 年份:2016
    摘要:本研究利用短发夹sh RNA(short hairpin RNA)沉默SGC7901/ADM细胞MDR1基因,从而逆转SGC7901/ADM细胞对紫杉醇的耐药性。根据MDR1基因序列设计并合成编码sh RNA的DNA模板,构建3种靶向MDR1基因重组干扰载体,稳定转染SGC7901/ADM细胞,q RT-PCR检测MDR1 m RNA表达水平,Western blotting检测MDR1蛋白表达水平,MTT法检测细胞对紫杉醇的敏感性。结果表明,成功构建了靶向MDR1基因的3种重组表达载体,分别转染SGC7901/ADM细胞后均能不同程度沉默MDR1基因的表达,其中p2.1-3对MDR1沉默效果最好,m RNA和蛋白的沉默效率分别为78.5%和45%。紫杉醇对细胞的IC50值由(3.147±0.494)μmol/L降至(0.714±0.059)μmol/L,逆转率达到(78.22±1.906)%。结果表明,靶向MDR1的干扰表达载体能够抑制MDR1基因的表达,从而逆转SGC7901/ADM细胞对紫杉醇的耐药性。
  • 【期刊】 ADAM15在舌癌耐药细胞系Tca8113/ADM表达的实验研究

    刊名:广东牙病防治 作者:黄敏 ; 邝晓聪 ; 姚金光 ; 关艳 关键词:舌癌 ; ADAM15 ; Tca8113/ADM ; 耐药 ; 蛋白免疫印迹法 机构:右江民族医学院口腔系 ; 右江民族医学院口腔系 ; 广西医科大学病理教研室 年份:2013
    摘要:目的研究舌癌阿霉素(adriamycin,ADM)耐药细胞系Tca8113/ADM及其亲本细胞系Tca8113肿瘤转移相关蛋白去整合素-金属蛋白酶15(adamalysin15,ADAM15)的表达水平,从肿瘤耐药的角度对舌癌的耐药与ADAM15的关系进行初步探讨。方法用蛋白免疫印迹技术检测Tca8113/ADM及Tca8113亲本细胞系的ADAM15蛋白表达水平。结果 ADAM15在Tca8113亲本细胞系和Tca8113/ADM细胞系的表达分别为0.244±0.231和1.217±0.494,两者差异具有统计学意义(P=0.001)。结论肿瘤转移相关蛋白ADAM15在Tca8113/ADM细胞系的表达高于其在亲本细胞的表达,提示舌癌的阿霉素耐药细胞系的转移性可能比其亲本细胞更强。
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