·
搜索结果:找到“HPLC”相关结果54080条
排序: 按相关 按相关 按时间降序
  • 【论文】 二氧化硅核壳微球在传统HPLC中的应用研究

    作者:刘艳娜 关键词:核壳微粒 ; 快速分离 ; 色谱饼 ; 传统HPLC 机构:西北大学 ; 西北大学 年份:2018
    摘要:高效液相色谱自开发之初,就一直致力于高效快速分离。从上个世纪起,高效液相色谱的固定相基质就一直在更新换代。截止目前,研究最热的当属核壳微粒。核壳微粒作为第五代分离介质材料,获得广泛关注的原因绝不是作为先前固定相材料的绝对替代者,而是融合了传统无孔微粒与全多孔微粒各自的优良性能。核壳微粒的内部结构为无孔实心核,因而具备较快的传热性能,而且在一定程度上增加了基质的机械稳定性;位于外部的壳层结构,一方面可以提供一定的孔隙率,使核壳具备一定的载样能力,更重要的是,能够通过缩短溶质分子在多孔壳层内部的传质路径来加快固-液两相之间的传质速率,从而实现快速分离。近年来,亚-2μm核壳微粒与超高效液相色谱技术的结合,进一步刷新了核壳微粒在快速分离方面的卓越记录。但不能否认的一点是,核壳微粒在常规液相色谱上的快速分离分析仍然存在一定挑战,基于此,本论文将核壳技术与内径远远大于柱长的、具有低压快速分离优势的色谱饼技术相结合,研究了其在常压液相色谱仪上对生物大分子的快速分离情况。文章主要分为以下四个部分:1.文献综述这部分主要概述了快速高效液相色谱分离技术,对亚-2μm无孔微粒、亚-2μm全多孔微粒、核壳技术及色谱饼技术的基本原理及实际应用进行了一定的介绍,并对各种快速分离手段的优缺点进行了探讨和分析。2.SiO_2@SiO_2核壳微球的制备及性能优化这里主要对核壳微球的合成方法进行了简要介绍。在本课题组的工作基础上,利用PICA法制备了不同粒径的单分散SiO_2@Si O_2核壳微球,依次优化了无孔硅胶核的合成条件、改性条件以及SiO_2@SiO_2核壳微球的制备条件,并对自合成的不同规格的核壳微粒进行了表征,成功制备出了粒径可控的、形貌良好的单分散SiO_2@SiO_2核壳微球。3.SiO_2@SiO_2核壳微球在反相模式下的应用研究依据蛋白分离的短柱理论,将粒径大小分别为2.3μm、2.9μm及4.4μm的反相C18改性核壳填料装填于不同柱长的色谱柱中进行整体蛋白的分离。由于传统色谱仪的耐压范围有限,进一步将上述三种粒径大小的填料装填于不同规格的色谱饼中进行分离测试,结果表明,借助色谱饼的低压快速分离优势,核壳微粒能在常规色谱仪上实现快速分离,可在8 ml/min的流速条件下于2.5 min之内完成七种标准蛋白混样的快速分离。4.SiO_2@SiO_2核壳微球在疏水模式、亲水模式下的应用研究进一步利用PEG-600、δ-葡萄糖酸内酯对SiO_2@SiO_2核壳微球进行疏水改性和亲水改性,然后装填于1×1 cm的色谱饼中,分别在疏水模式、亲水模式下对蛋白进行了分离,结果显示,疏水核壳色谱饼能在0.8 min梯度内完成了8种标准蛋白混合物的分离,进一步刷新了常压色谱的快速分离速度;亲水色谱饼的分离效果较好,有待进一步优化。
  • 【专利】 一种蛇毒纤溶酶的反相HPLC检测方法

    作者:白淑敏 ; 吕晓利 ; 孔双泉 ; 宋梦薇 ; 马胜楠 ; 梁丽娜 ; 梁冬娜 年份:2018
    摘要:本发明涉及一种蛇毒纤溶酶的反相HPLC检测方法。所述检测方法的检测条件为:(1)反相柱:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;(2)流动相A为:0.1%的三氟乙酸的5%乙腈溶液;(3)流动相B为:0.08%的三氟乙酸的80%乙腈溶液。本发明通过建立专属性强及重现性、稳定性、及精密度良好的含量测定方法,能够有效控制纤溶酶的质量,使纤溶酶质量达到稳定、可控、高效及安全。
  • 【论文】 生物样品中新疆紫草脂溶性成分的HPLC分析

    作者:古力扎努·阿合买提 关键词:新疆紫草 ; 大鼠 ; 生物样品 ; 高效液相色谱法 机构:新疆医科大学 ; 新疆医科大学 年份:2016
    摘要:目的:建立检测新疆紫草脂溶性成分的HPLC法,并应用于体内外药物浓度的测定,考察新疆紫草脂溶性成分在体内的处置情况。方法:(1)通过比较不同流动相的分离效果及影响因素,建立了用于测定新疆紫草脂溶性成分体内外浓度的HPLC法。(2)考察了方法学指标;(3)比较分析了不同有机溶剂萃取、酸化和碱化处理血液等方法对血中药物萃取效果的影响。(4)考察了血浆与血清样品的适用性和影响。(5)考察新疆紫草脂溶性成分在不同酸碱环境及模拟胃液、模拟肠液中的稳定性试验。(6)给于大鼠灌胃给药,分别于给药前及给药后不同时间采血,分离血清和血浆,收集给药前及给药后的48小时内的尿液和粪便,进行HPLC分析,测定这些样品中左旋紫草素、乙酰紫草素、去氧紫草素、β-β二甲基丙烯酰紫草素等单一成分的浓度。结果:(1)色谱条件为:色谱柱COSMOIL C18-AR-Ⅱ谱柱(250mm×4.6mm,5um);流速:1.0m L/min;柱温:(25)℃;检测波长:275nm,流动相A液-乙腈,B液-甲酸:水(0.5:300)(v/v)溶液,进样量20μl,梯度洗脱,0~10min(60-40)%;15~30min(70-30)%;30~35min(60-40)%;检测时间35min。在该色谱条件下,新疆紫草脂溶性提取物中左旋紫草素、乙酰紫草素、β-β二甲基丙烯酰紫草素得到较好的分离。(2)方法学指标符合规定:日间精密度试验中各目标峰保留时间RSD<1%,样品12h内稳定相对峰面积RSD<3%,重复性试验相对峰面积RSD<3%;(3)血浆和血清样品中药物提取分离条件为,样品先用等体积的稀盐酸酸化,用乙酸乙酯萃取3次,乙腈沉淀蛋白。血浆样品在5μg/ml~500μg/m浓度范围内与峰面积呈良好线性关系,回归方程为左旋紫草素:y=20.613x+979.88;乙酰紫草素:y=24.254x-57.209;β-β二甲基丙烯酰紫草素:y=48.406x+3180.5;相关系数分别为0.997、0.9957、0.9935。(4)样品的适用性方面,血浆样品较适合于疆紫草脂溶性提取物成分的测定,在血清样品中添加适量的肝素后,峰形和峰面积得到了改善。(5)新疆紫草脂溶性成分(左旋紫草素、乙酰紫草素、β-β二甲基丙烯酰紫草素)在pH2.5磷酸盐缓冲液及人工胃液中相对稳定,但随着时间的延长,含量呈缓慢下降趋势;在pH5.8磷酸盐缓冲液呈明显的下降趋势;随着pH值的上升,含量下降迅速。(6)经大鼠灌胃给药后0~48小时内血样、尿液中均未检测到新疆紫草脂溶性提取物所含有原型物质特有峰。而在粪便中发现有左旋紫草素、乙酰紫草素、β-β二甲基丙烯酰紫草素等成分的峰。结论:大鼠灌胃后的血液样品及尿液中未检测到新疆紫草脂溶性提取物,而在粪便发现有该提取物的相关成分,说明新疆紫草脂溶性提取物在胃肠道几乎不吸收或吸收很少,其吸收、分布、代谢、排泄过程有待于进一步深入研究。
  • 【论文】 鸦葱总黄酮纯化方法及HPLC指纹图谱的研究

    作者:高敬宇 关键词:鸦葱 ; 黄酮 ; 大孔树脂 ; 纯化 ; 指纹图谱 ; 高效液相色谱 ; 含量测定 机构:吉林大学 ; 吉林大学 年份:2015
    摘要:鸦葱(Scorzonera austriaca Willd.)为菊科鸦葱属植物,为多年生草本,是一种传统中草药,在国内主要分布于东北、华北以及西北部分地区。药理实验表明,鸦葱的黄酮提取物具有保肝活性,因此对鸦葱中黄酮类化合物的研究具有很大的必要性。本论文以鸦葱为原料,对鸦葱总黄酮进行提取分离,通过大孔树脂精制鸦葱总黄酮,对精制黄酮的HPLC指纹图谱进行研究,并对三种黄酮碳苷单体化合物建立HPLC-UV含量测定方法。由此为鸦葱的质量控制提供了有力保障,也为其抗肝炎病毒的药理活性研究奠定了基础。 研究成果如下: 1、对鸦葱中黄酮类化学成分进行提取分离。鸦葱全草10kg用70%乙醇冷浸提取3次,每次7天,提取液过滤后浓缩除醇,乙醚萃取,合并水层,经D101型大孔树脂柱吸附,收集60%乙醇洗脱组分,减压回收乙醇,干燥,得鸦葱粗黄酮提取物267g。通过硅胶柱色谱、ODS柱色谱等分离纯化手段,得到3个黄酮苷类化合物:5,7,3′,4′-四羟基-6-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷,5,7,3′,4′-四羟基-8-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷和5,7,4′-三羟基-8-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷。 2、建立鸦葱中黄酮类化合物含量测定的方法。以5,7,4′-三羟基-8-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷为对照品,以AlCl3-MeOH为显色剂,醋酸-醋酸钠缓冲溶液PH=5,采用紫外-可见分光光度法,检测波长390nm,测定吸光度,建立线性回归方程,用于测定鸦葱中总黄酮的含量。 3、采用大孔树脂对鸦葱总黄酮纯化进行研究。通过静态吸附及动态吸附性试验发现D4020型大孔树脂对鸦葱总黄酮具有较好的吸附和解吸附性能,并且纯化物中黄酮成分含量最高,故确定D4020型大孔树脂作为精制鸦葱总黄酮的最佳树脂。将鸦葱粗黄酮提取物用水溶解过滤后上样于D4020型大孔树脂柱,先以5%乙醇溶液洗脱,除去糖、蛋白质和萜类等杂质,再收集10%-30%乙醇溶液洗脱部分,得到纯化后的鸦葱黄酮类化合物,黄酮含量提高至90%以上。 4、鸦葱精制黄酮HPLC指纹图谱的建立。依照上述方法对12批鸦葱药材的粗黄酮提取物进行纯化,以已经分离得到的5,7,3′,4′-四羟基-6-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷色谱峰为参照,通过对色谱条件进行单因素考察建立精制后鸦葱总黄酮的HPLC特征指纹图谱。确定色谱条件为Phenomenex Gemini5μm C18110A(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相A为色谱乙腈、B为0.1%甲酸-超纯水,流速0.8ml·min-1,柱温25℃,检测波长337nm,进样量10μL。梯度洗脱程序是0.01~7.00min,97~86%B;7.01~30.00min,86~83%B;30.01~60.00min,83~65%B;60.01~65.00min,65~0%B。标定14个共有峰构成鸦葱精制黄酮的特征指纹图谱,峰面积占总峰面积90%以上,其中3个共有峰与对照品相对应。12批鸦葱精制黄酮的HPLC指纹图谱相似度均在0.9以上,一致性良好,由此建立了共有模式图。 5、采用HPLC-UV法建立鸦葱中三种黄酮苷类成分5,7,3′,4′-四羟基-6-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷,5,7,3′,4′-四羟基-8-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷和5,7,4′-三羟基-8-C-β-D-吡喃葡萄糖碳苷的含量测定方法。经方法学验证线性关系良好,具有良好的精密度和稳定性,加样回收率在98%~99%之间。应用此法对12批次鸦葱精制黄酮样品进行成分的含量测定,在不同批次中含量的差异,体现了鸦葱中黄酮成分的个体特征。
  • 【论文】 三叶青HPLC指纹图谱的质量评价及快速繁育研究

    作者:王静 关键词:三叶青 ; 块根 ; HPLC指纹图谱 ; 质量评价 ; 快速繁育 机构:浙江理工大学 ; 浙江理工大学 年份:2016
    摘要:三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)是葡萄科崖爬藤属植物,其全草均可入药,块根最佳,民间常用于治疗小儿高热惊厥、肺炎等多种疾病,近年来研究发现三叶青是低毒抗癌药物之一。本文以三叶青块根为研究对象,采用常规检测、HPLC指纹图谱结合多指标成分定量分析、化学计量学等方法,对不同产地、不同部位、不同储存条件的三叶青块根进行综合质量评价研究,并建立了三叶青组织培养快速繁育体系,以期为三叶青质量控制及优良种苗繁育提供更为全面的参考依据,从而加强对三叶青药材的可持续开发利用和资源保护。1.通过对五个产地(浙江杭州、浙江金华、浙江舟山、广西、贵州)的三叶青块根的水分、浸出物含量进行检测,发现含水量范围为6.4%~11.2%,平均含水量约为8.5%,70%乙醇热浸浸出物含量范围为6.7%~14.9%,平均浸出物含量约为9.8%。通过对杭州天惠医药科技有限公司、寿仙谷药业有限公司、杭州华东中药饮片有限公司(寿星牌)三个公司生产的三叶青粉进行检测,发现三个公司的样品含水量均在11.2%以下,浸出物含量均在6.7%以上。2.通过对来自六个不同产地(浙江杭州、浙江台州、江西上饶、广西南宁、贵州凯里、重庆忠县)的三叶青样品进行HPLC指纹图谱比较,模拟得出对照指纹图谱,并采用化学计量学方法(相似性分析、聚类分析、主成分分析)进行分析得出浙江杭州、浙江台州、江西、重庆四个产地聚为一类,广西、贵州两个产地聚为一类。此外,通过主成分分析得到累积贡献率达80.016%的三个主成分,其中峰19、14、15对主成分1贡献率较高,峰1、7、4、18对主成分2贡献率较高,峰6、21对主成分3贡献率较高,说明这几个峰所代表的化学成分是主要特征成分,但仍需进一步的鉴定确认。3.选用虎杖苷、白皮杉醇、烟花苷、白藜芦醇、山奈酚五种指标成分,采用高效液相色谱法(HPLC)对来自六个产地(浙江杭州、浙江台州、江西上饶、广西南宁、贵州凯里、重庆忠县)的块根成分含量进行检测,结果显示三种酚类成分(虎杖苷、白皮杉醇、白藜芦醇)总含量在重庆、浙江杭州较高,而在广西、贵州较低;两种黄酮类成分(烟花苷、山奈酚)总含量则在广西、贵州较高,浙江杭州、台州较低。这与本文中三叶青药材HPLC指纹图谱的聚类结果较为一致,因此,可依据这五种指标成分的含量对药材来源进行初步鉴定。通过对来自浙江杭州同一批三叶青新鲜根样品的块根、须根、去皮根(块根去掉根皮剩余部分)、根皮四个不同部位进行五种指标成分含量比较,发现三种酚类成分(虎杖苷、白皮杉醇、白藜芦醇)总含量由高到低依次为块根、须根、去皮根、根皮,而两种黄酮类成分(烟花苷、山奈酚)总含量由高到低依次为须根、块根、去皮根、根皮。值得注意的是,在须根中,五种指标成分总含量可占到块根的84.69%,其须根值得进一步开发利用。通过对在25℃、4℃条件下储存的三叶青新鲜块根(真空包装)进行四种指标成分(虎杖苷、白皮杉醇、槲皮素、山奈酚)含量比较,发现样品在25℃储存1个月,虎杖苷、白皮杉醇含量出现大幅度下降,槲皮素、山奈酚轻度降低,2个月则出现腐烂现象,而在4℃储存5个月时才出现轻微软烂,且四种成分含量变化不明显。因此,真空包装后三叶青新鲜块根在4℃条件下储存效果优于25℃,建议在4℃条件下储存并于5个月内食用。4.以三叶青带腋芽的半木质化茎段为外植体材料,诱导侧枝的发生,通过继代、生根、移栽等过程,建立了三叶青快速繁育体系。结果表明,带腋芽的半木质化茎段(3~8节)作为外植体好于带芽茎尖;最佳腋芽诱导培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.025 mg/L NAA;最佳侧枝增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.025 mg/L NAA,组培苗生长势下降时可加入低浓度GA(0.025 mg/L)以提高组培苗高度;最佳生根培养基为1/2 MS+1.5 mg/L IBA;移栽成活率可达到90%以上,在大田中长势良好。该体系激素浓度配比低,操作简便,繁殖效率高,适合三叶青种苗的规模化和规范化育苗。
  • 【专利】 一种3-氨基哌啶异构体的HPLC分析方法

    作者:刘方方 ; 郝忠翠 ; 孙凤霞 ; 郝飞飞 ; 蒲寒莹 ; 张琛 年份:2016
    摘要:本发明公开了一种3-氨基哌啶异构体的HPLC分析方法。该方法以(R)-α-甲基-2-萘乙酰氯为衍生化试剂与3-氨基哌啶进行快速双衍生化反应,通过反相高效液相色谱与紫外检测器联用对3-氨基哌啶异构体进行测定,属于药物分析技术领域。该方法衍生反应条件温和、快速,检测灵敏度高、重复性好、易于标准化操作,可用于有效地检测3-氨基哌啶异构体,适用于工业化生产3-氨基哌啶过程中对3-氨基哌啶异构体的质量控制。
  • 【专利】 测定磺胺嘧啶混悬液中有关物质的HPLC

    作者:李丹凤 ; 何虹 ; 黄慧 ; 罗意珊 ; 卢日刚 ; 朱健萍 ; 刘庄蔚 ; 朱荣 年份:2018
    摘要:本发明公开了一种测定磺胺嘧啶混悬液中有关物质的HPLC法,采用乙腈‑0.3%醋酸铵为流动相进行梯度洗脱;采用流动相乙腈‑0.3%醋酸铵来溶解对照品,样品采取先加入定量的氢氧化钠试液溶解后再加流动相稀释。研究表明,采用本发明的流动相和洗脱方式,磺胺嘧啶浓度线性关系良好,能检测出大量的杂质峰,且杂质峰与主峰均能得到有效分离,杂质平均加样回收率高;同时,溶液的制备直接采用流动相来溶解对照品,样品采取先加入定量的氢氧化钠试液溶解后再加流动相稀释,方法操作简便,且可以避免溶剂的影响。可见,本发明专属性强,准确度高,重现性良好,可用于磺胺嘧啶混悬液的质量控制。
  • 【专利】 一种雌酚酮有关物质的HPLC分析方法

    作者:李金涛 ; 王咏 ; 李杰 年份:2017
    摘要:本发明属于甾体激素药物分析方法领域,特别涉及一种雌酚酮有关物质的HPLC分析方法,主要参数包括:选用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱;采用流动相梯度洗脱,流动相的组成为水、甲醇及乙腈;在适当流速和柱温下进行高效液相色谱分析,记录色谱图。本发明能有效的洗脱、分离和定量雌酚酮原料药中的杂质,使杂质峰与主峰完全分离,且分析速度快,同时该方法也可单独适用于雌酚酮杂质A样品或杂质D样品的有关物质检测。
  • 【专利】 一种酶解-HPLC法检测舒洛地特的方法

    作者:马小来 ; 李浩杰 ; 张紫恒 ; 李锂 年份:2015
    摘要:本发明公开了一种酶解-HPLC法检测舒洛地特的方法,所述方法包括下述步骤:a、舒洛地特的完全酶解:向舒洛地特溶液中,加入酶I、酶II、酶III的混合酶溶液,室温酶解;b、HPLC法分析:取降解产物做SAX-HPLC分析;c、二糖单元种类和含量的计算:根据现有的8个标准肝素双糖的洗脱时间,确定供试品肝素二糖单元的种类和含量,计算各双糖所占百分含量。
  • 【期刊】 两种HPLC法测定沙丁胺酮的对比

    刊名:辽宁化工 作者:王鑫 ; 孙银玲 ; 刘宏大 ; 薛雁 ; 邸伟庆 关键词:高效液相色谱法 ; 硫酸沙丁胺醇 ; 沙丁胺酮 ; 方法学 机构:辽宁远大诺康生物制药有限公司 ; 辽宁远大诺康生物制药有限公司 年份:2017
    摘要:目的建立硫酸沙丁胺醇原料药中沙丁胺酮的HPLC检测方法。方法采用《中华人民共和国药典》2015版中硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂中杂质沙丁胺酮的测定方法和《欧洲药典》9.0中收载的原料药中杂质沙丁胺酮收载的测定方法进行比较,选取适用的方法并进行方法学验证。结果两种HPLC方法均能检测原料药中沙丁胺酮含量,但《中华人民共和国药典》2015版中的方法分离效果更佳。结论优选《中华人民共和国药典》2015版收载的HPLC方法作为硫酸沙丁胺醇原料药中沙丁胺酮的检测方法。
  • 【专利】 一种醋香附HPLC指纹图谱的构建方法

    作者:张超 ; 郭菲 ; 陈智 ; 张学兰 ; 李慧芬 ; 杨立梅 年份:2018
    摘要:本发明提供了一种醋香附HPLC指纹图谱的构建方法:将醋香附饮片粉末以甲醇提取获得供试品溶液;以α‑香附酮、香附烯酮、5‑羟甲基糠醛为对照品;测定10批以上醋香附并进行分析比较,得到由12个共有特征峰构成的醋香附HPLC指纹图谱。本发明构建指纹图谱的方法精密度、重现性及稳定性均良好;通过指纹图谱中共有峰的有无,可有效地对醋香附饮片的质量进行整体描述和评价,保证饮片质量的稳定性及临床用药的有效性与安全性。
  • 【专利】 一种3-氨基哌啶异构体的HPLC检测方法

    作者:孙凤霞 ; 蒲寒莹 ; 孔飞飞 ; 张琛 ; 周蒙 ; 白少玲 年份:2016
    摘要:本发明公开了一种3-氨基哌啶异构体的HPLC检测方法。本发明采用(R)-α-甲基-2-萘乙酰氯为衍生化试剂与3-氨基哌啶进行快速单衍生化反应,然后使用普通反相HPLC-UV对3-氨基哌啶的衍生物进行对映体过量率的测定。该方法操作简单、快速、重现性好、灵敏度高、易于标准化操作,可用于工业化生产中对3-氨基哌啶的分离检测和质量控制。
上一页 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 下一页 跳转