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  • 【期刊】 马齿苋多糖对Tau蛋白磷酸化影响的研究

    刊名:中国农学通报 作者:康洁 关键词:马齿苋多糖 ; 神经细胞 ; Tau蛋白 ; GSK激酶 ; 磷酸化 机构:商丘师范学院生命科学系 ; 商丘师范学院生命科学系 年份:2010
    摘要:研究马齿苋多糖对神经细胞骨架微管结合蛋白-Tau蛋白的磷酸化影响。通过构建基因表达载体pEGFP-Tau-s3和转染表达载体pEGFP-Tau-s3到3T3细胞,创造体外神经细胞骨架研究模型;并通过共转染pEGFP-Tau-s3与pcDNA-GSK-3β到3T3细胞、荧光显微观察和Western blotting试验,证明了马齿苋多糖对Tau蛋白的磷酸化影响,可以抑制GSK激酶对Tau蛋白的磷酸化。说明马齿苋多糖对神经细胞微管骨架有保护作用
  • 【期刊】 NAC对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白过度磷酸化影响的研究

    刊名:临床和实验医学杂志 作者:曹帆帆[1] 张登海[1] 王莹[1] 彭彬[1] 张雪[1] 徐莉敏[2] 关键词:NAC Aβ25-35 Tau蛋白 过度磷酸化 机构:第二军医大学附属公利医院中法合作中心实验室 ; 第二军医大学附属公利医院中法合作中心实验室 年份:2016
    摘要:目的探讨N-乙酰基半胱氨酸(NAC)对β淀粉样蛋白片段25-35(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白过度磷酸化的影响。方法用凝聚态Aβ25-35刺激SH-SY5Y细胞,建立Tau蛋白过度磷酸化的细胞模型。分为空白组、对照组和试验组。空白组为未刺激的细胞,对照组给予20μmol·L^-1的Aβ25-35作用6 h,试验组先给予10 mmol·L^-1的NAC作用24 h,然后给予20μmol·L^-1的Aβ25-35共同作用6 h。通过蛋白免疫印迹法检测CDK 5的两个亚基CDK5和P35/P25的蛋白水平,以及Tau蛋白在Thr 212和Ser396位点的磷酸化水平;采用荧光酶标法检测氧自由基(ROS)。对三组细胞的CDK5和P35/P25的蛋白水平、Thr 212和Ser396位点的磷酸化水平和ROS进行比较。结果三组细胞ROS荧光值比较结果显示,空白组ROS荧光值为231±19,对照组为359±23,试验组为264±32。空白组最低,对照组最高,试验组ROS荧光值明显高于空白组(P〈0.05),但低于对照组(P〈0.05)。空白组Tau蛋白在T212和S396磷酸化水平分别为1.03±0.09、1.04±0.05,对照组分别为1.63±0.54、1.72±0.34,试验组分别为1.31±0.09、1.21±0.05,空白组最低,对照组最高,试验组细胞明显高于空白组(P〈0.05),但低于对照组(P〈0.05)。空白组CDK5、P35分别为1.00±0.06、1.00±0.18,对照组分别为0.75±0.14、1.12±0.13,试验组分别为0.19±0.21、0.99±0.09。空白组、对照组与试验组CDK5、P35相比较无显著差异(P〉0.05)。空白组P25水平为1.10±0.16、对照组为1.69±0.20,试验组为1.19±0.03,空白组最低,对照组最高,试验组P25值低于对照组,P25值高于空白组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论 NAC可以降低Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白磷酸化水平。
  • 【期刊】 Complexin蛋白对神经母瘤细胞化的影响及机制研究

    刊名:《现代生物医学进展》 作者:龚吉红 ; 蒋伟 ; 李小红 ; 林显光 ; 阳小飞 关键词:神经细胞分化 ; complexin ; N2a细胞 ; 神经递质释放 机构:中南民族大学生物医学工程学院脑认知国家民委重点实验室、膜离子通道与药物研发实验室 ; 中南民族大学生物医学工程学院脑认知国家民委重点实验室、膜离子通道与药物研发实验室 ; 生命科学学院 年份:2016
    摘要:目的:探讨Complexin蛋白对神经母瘤细胞化的影响及机制。方法:采用神经母瘤细胞(N2a)作为实验材料,在其中过表达Complexin蛋白以及其突变体后,利用激光共聚焦显微镜拍照并利用Image J软件对N2a细胞的分化比率、突起数量以及突起生长长度进行统计学分析。结果:在N2a细胞中过表达Cpx蛋白后,细胞分化率比对照组(即转染空白对照质粒)增加约2倍。Cpx1-86和Cpxpoorclamp突变体可促进N2a细胞的分化,而Cpx27-134突变体对N2a细胞分化无明显影响。随着时间的延长,过表达野生型Cpx蛋白和其N端缺失突变体都不能显著增加细胞突起的数量;但在转染4天后,过表达野生型Cpx蛋白能显著增加分化细胞的突起长度,而其N端缺失突变体不能引起突起长度的增加。结论:Complexin蛋白主要通过其N端序列促进神经母瘤细胞(N2a)的分化,增加分化后突起的长度,但对突起数量没有明显影响
  • 【期刊】 胰岛素对APPsw细胞tau蛋白磷酸化的影响及机制研究

    刊名:中华行为医学与脑科学杂志 作者:王旭[1] 高素杰[2] 于嵩[1] 王玥[1] 关键词:胰岛素 Tau蛋白 SH-SY5Y细胞 APPsw 机构:辽宁中医药大学组织胚胎学教研室 ; 辽宁中医药大学组织胚胎学教研室 年份:2014
    摘要:目的 采用过度表达APPsw基因的SH-SY5Y细胞(APPsw细胞),体外观察不同浓度的胰岛素对APPsw细胞tau蛋白磷酸化的影响.方法 应用Western blot技术检测APPsw细胞tau蛋白磷酸化的表达;应用免疫荧光双标与共聚焦激光扫描显微镜检测APPsw细胞内p-GSK-3β和p-tau的共表达.结果 Western blot结果显示,与对照组相比,1 000 nM的胰岛素使APPsw细胞内Thr231和Ser396位点上的tau蛋白磷酸化表达水平分别降低到(68.91±13.55)和(45.53±22.16) (P< 0.05);共聚焦显微镜检测结果显示p-tau和p-GSK-3β主要分布于细胞质中,而且在APPsw细胞中二者的表达有一定关系.结论 胰岛素抑制APPsw细胞tau蛋白的过度磷酸化,其机制可能与GSK-3β蛋白活性减小有关.
  • 【期刊】 胰岛素对APPsw细胞tau蛋白磷酸化的影响及机制研究

    刊名:中华行为医学与脑科学杂志 作者:王旭[1] 高素杰[2] 于嵩[1] 王玥[1] 关键词:胰岛素 Tau蛋白 SH-SY5Y细胞 APPsw 机构:辽宁中医药大学组织胚胎学教研室 ; 辽宁中医药大学组织胚胎学教研室 年份:2014
    摘要:目的 采用过度表达APPsw基因的SH-SY5Y细胞(APPsw细胞),体外观察不同浓度的胰岛素对APPsw细胞tau蛋白磷酸化的影响.方法 应用Western blot技术检测APPsw细胞tau蛋白磷酸化的表达;应用免疫荧光双标与共聚焦激光扫描显微镜检测APPsw细胞内p-GSK-3β和p-tau的共表达.结果 Western blot结果显示,与对照组相比,1 000 nM的胰岛素使APPsw细胞内Thr231和Ser396位点上的tau蛋白磷酸化表达水平分别降低到(68.91±13.55)和(45.53±22.16) (P< 0.05);共聚焦显微镜检测结果显示p-tau和p-GSK-3β主要分布于细胞质中,而且在APPsw细胞中二者的表达有一定关系.结论 胰岛素抑制APPsw细胞tau蛋白的过度磷酸化,其机制可能与GSK-3β蛋白活性减小有关.
  • 【期刊】 PARP-1对高糖诱导的心肌细胞增殖的影响及机制研究

    刊名:现代生物医学进展 作者:李青 ; 刘昕 ; 范博渊 ; 倪雅娟 ; 刘平 关键词:心肌细胞 ; 高糖 ; PARP-1 ; 增殖 机构:西安交通大学第二附属医院心内科 ; 西安交通大学第二附属医院心内科 年份:2019
    摘要:目的:研究PARP-1对高糖诱导的心肌细胞增殖的影响及可能机制。方法:用高糖处理H9C2细胞,qRT-PCR和Western blot检测细胞中PARP-1 m RNA和蛋白水平。H9C2细胞转染PARP-1 si RNA和si RNA control,q RT-PCR和Western blot检测细胞中PARP-1 m RNA和蛋白水平。用高糖处理转染PARP-1 si RNA后的H9C2细胞,CCK-8检测细胞增殖情况,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平,Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白的表达。结果:高糖诱导的H9C2细胞中PARP-1 m RNA和蛋白水平明显高于正常培养的H9C2细胞(P<0.05)。PARP-1 si RNA能够明显下调H9C2细胞中PARP-1 m RNA和蛋白水平。高糖处理后H9C2细胞存活率明显降低,细胞中MDA水平升高,细胞中SOD水平降低,细胞内的PCNA水平降低,p38MAPK磷酸化水平升高,与正常培养的H9C2细胞相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。用高糖培养下调PARP-1的H9C2细胞,细胞存活率有所升高,细胞中MDA水平降低,细胞中SOD水平也升高,细胞中PCNA水平升高,细胞中p38MAPK磷酸化水平降低,与单纯高糖培养的细胞相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:PARP-1在高糖诱导的心肌细胞中表达上调,可能通过激活p38MAPK信号途径,增加细胞脂质氧化应激抑制心肌细胞增殖。
  • 【期刊】 软脂酸诱导的HepG2细胞糖代谢紊乱及机制研究

    刊名:中国药理学通报 作者:龚受基 ; 刘仲华 ; 黄建安 ; 王丽丽 ; 杨新河 关键词:软脂酸 ; HepG2 ; 糖脂代谢 ; 糖原 ; 荧光PCR ; AMPK 机构:国家植物功能成分利用工程技术研究中心 ; 国家植物功能成分利用工程技术研究中心 ; 湖南农业大学茶学教育部重点实验室 ; 桂林医学院基础医学院 ; 孝感学院生命科学技术学院 年份:2011
    摘要:目的探讨软脂酸诱导HepG2细胞糖代谢紊乱特征及二甲双胍和辛伐他丁对糖代谢的影响。方法以软脂酸诱导HepG2细胞产生糖脂代谢紊乱,用二甲双胍和辛伐他丁进行治疗,检测各组糖原、总胆固醇、甘油三酯累积量,用荧光定量PCR检测糖脂代谢相关基因AMP活化蛋白激酶(AMPK)α-2、葡萄糖转运体(GLUT)2、肝脂肪酶(HL)、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK)、固醇调节元件结合蛋白(SREBP)1、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)2等的表达。结果软脂酸诱导HepG2细胞总胆固醇、甘油三酯升高(P<0.05),糖脂代谢相关基因表达异常。二甲双胍和辛伐他丁治疗后,细胞总胆固醇、甘油三酯累积明显下降,糖原累积上升;AMPKα-2、GLUT2、HL mRNA表达上升,G6pase、PEPCK、SREBP1、ACC2 mRNA表达下降。结论软脂酸诱导HepG2细胞出现糖脂代谢异常,经二甲双胍和辛伐他丁治疗后异常情况改善。
  • 【期刊】 远志皂苷元对PC12细胞tau蛋白磷酸化和O-GlcNAc糖基化的影响

    刊名:天津中医药 作者:陈玉静 ; 黄小波 ; 陈文强 ; 王宁群 关键词:远志皂苷元 ; PC12细胞 ; tau蛋白 ; O-GlcNAc糖基化 ; 磷酸化 机构:首都医科大学宣武医院 ; 首都医科大学宣武医院 年份:2013
    摘要:[目的]观察远志皂苷元对体外培养的PC12细胞tau蛋白磷酸化和O-GlcNAc糖基化的影响。[方法]应用低糖培养PC12细胞模拟O-GlcNAc糖基化水平的下降,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测细胞存活率;采用Western blot方法检测O-GlcNAc糖基化和tau蛋白磷酸化水平。[结果]远志皂苷元能明显改善PC12细胞存活率,与对照组相比,模型组O-GlcNAc糖基化表达降低,tau蛋白磷酸化水平升高。与模型组相比,远志皂苷元处理组未发生O-GlcNAc糖基化表达降低,tau蛋白未发生过度磷酸化。[结论]tau蛋白磷酸化在某些位点受到O-GlcNAc糖基化修饰的负性调节,远志皂苷元在一定程度上可以升高O-GlcNAc糖基化表达,降低tau蛋白磷酸化水平。
  • 【期刊】 HIV-1包膜糖蛋白gp120对骨代谢影响及机制的研究进展

    刊名:中华实验和临床感染病杂志(电子版) 作者:陈宗锋 ; 张强 关键词:人类免疫缺陷病毒 ; gp120蛋白 ; 骨代谢 ; 骨质疏松 机构:泰山医学院研究生部 ; 泰山医学院研究生部 ; 首都医科大学附属北京地坛医院骨科 年份:2015
    摘要:HIV感染人群骨量减少和骨质疏松的发生率远高于普通人群。HIV感染人群患骨质疏松和骨量减少的危险因素,除了一般人群面对的危险因素之外,还包括病毒本身、抗病毒药物等危险因素。其中,gp120对骨代谢的影响是HIV病毒本身引起骨质疏松的重要机制之一。本文将对gp120的前期研究进行总结,便于深入研究HIV病毒本身对骨代谢的影响
  • 【期刊】 Syntaxin蛋白对神经母瘤细胞化的影响及机制研究(英文)

    刊名:生物化学与生物物理进展 作者:刘孟雪 ; 林寅 ; 荣伊 ; 阳小飞 机构:Laboratory ; Laboratory ; Cognitive ; Science ; Laboratory ; Medical ; Information ; Analysis ; Tumor ; Diagnosis ; Treatment ; Laboratory ; Membrane ; Channels ; Medicine ; College ; Biomedical ; Engineering ; South-Central ; University ; Nationalities 年份:2017
    摘要:<正>Dear Editor,Synaptic vesicle fusion is mediated by the SNARE(for soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment receptor)proteins and SM(for"Sec1-Munc18 like")protein in neurons~([1-2]).Syntaxin-1,SNAP25 and synaptobrevin-2 form a four-helical bundle to force presynaptic membrane fusion~([3]).Among synaptic SNARE proteins,syntaxin-1 contains
  • 【期刊】 高糖培养对神经细胞株EGR2蛋白表达的影响及其意义

    刊名:国际检验医学杂志 作者:张华 ; 刘艳丽 ; 何雪琴 ; 刘兴晖 关键词:高糖 ; 神经膜细胞 ; 糖尿病 机构:湖北医药学院附属东风医院检验科 ; 湖北医药学院附属东风医院检验科 ; 上海市公利医院检验科 年份:2014
    摘要:目的研究不同浓度葡萄糖对神经细胞早期生长反应蛋白2(EGR2)表达产生的影响。方法将神经细胞株用两种不同浓度的葡萄糖培养后,分组为正常葡萄糖浓度组(5.5mmol/L,N组)和高糖组(25mmol/L,H组),用免疫细胞化学法和蛋白质印迹法研究EGR2蛋白表达情况。结果 H组EGR2蛋白表达比N组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高糖导神经细胞株EGR2蛋白表达升高,EGR2可能在糖尿病导致的神经病变中发挥作用。
  • 【期刊】 牛磺酸对高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的影响及机制

    刊名:科学技术与工程 作者:张喆 ; 朱宁 ; 刘明琛 ; 沈丽敏 ; 马蓓洁 ; 刘春颖 ; 刘新霞 ; 王恩军 关键词:牛磺酸 ; 高糖 ; H9c2心肌细胞 ; 凋亡 ; 磷脂酞肌醇3激酶 机构:河北大学医学院 ; 河北大学医学院 ; 保定市第一中心医院 ; 河北大学预防医学与卫生事业管理系 年份:2017
    摘要:探讨牛磺酸对高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的影响及其作用机制,以H9c2心肌细胞,分3组:正常对照组(CN组,葡萄糖浓度为5.5 mmol·L~(-1))、高糖组(HG组,葡萄糖浓度为25.5 mmol·L)、牛磺酸干预组(TAU组,葡萄糖浓度为25.5mmol·L~(-1)基础上加终浓度为40 mmol·L~(-1)牛磺酸)。48 h后,采用MTT检测心肌细胞活力,荧光酶标仪检测胞内ROS含量,RT-PCR法检测PI3KmRNA表达量,ELISA法检测磷酸化Akt蛋白(phospho-Akt,p-Akt)蛋白含量,比色法检测Caspase3水平,并采用Annexin-V/PI结合流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:高糖诱导48 h后细胞活力下降(P<0.001),ROS含量升高(P<0.001),PI3KmRNA水平与p-Akt蛋白含量降低(P<0.001),Caspase3活性升高(P<0.001);并伴有凋亡率显著增加(P<0.001);与HG组相比,牛磺酸干预可显著提高细胞活力(P<0.001),降低ROS含量(P<0.001),增加PI3KmRNA表达(P<0.01)与p-Akt蛋白含量(P<0.05),降低Caspase3活性(P<0.001),抑制细胞凋亡(P<0.001)。说明牛磺酸可通过PI3K/Akt途径降低细胞内氧化应激水平和Caspase3活性,抑制高糖诱导H9c2心肌细胞的凋亡。
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