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  • 【期刊】 银杏内酯B抑制血小板CD40Ligand表达的分子机制研究

    刊名:中国药理学通报 作者:齐若梅 ; 闫琰 ; 赵革新 ; 陈北冬 ; 鲍利 ; 吴伟 关键词:银杏内酯B ; 血小板 ; 胶原 ; PI3K ; Akt ; CD40Ligand 机构:北京中医药大学 ; 北京中医药大学 年份:2012
    摘要:目的探讨银杏内酯B(ginkgolide B)对活化血小板CD40 Ligand(CD40L)的影响以及相关的分子机制。方法取正常人血分离血小板,用不同浓度银杏内酯B孵育血小板5 min,然后用胶原(collagen)刺激血小板活化。用Westernblot分析PI3K表达,Akt磷酸化,CD40L的变化。结果①用collagen刺激血小板聚集,银杏内酯B(0.2、0.4、0.6 g.L-1)预处理血小板5 min,血小板聚集率明显降低,聚集率分别为77%,60%和48%。②Western blot结果显示胶原刺激血小板活化后CD40L表达明显增加,银杏内酯B以剂量依赖方式抑制了CD40L表达。③银杏内酯B对胶原刺激的血小板PI3K表达无明显影响。④collagen刺激血小板活化后Akt的磷酸化增加,银杏内酯B抑制了Akt磷酸化。结论银杏内酯B能够有效抑制collagen诱导的血小板聚集以及CD40L的表达,并明显抑制了Akt磷酸化,表明银杏内酯B能够通过PI3K/Akt信号传导通路抑制血小板活化。
  • 【期刊】 银杏内酯B抑制高糖诱导内皮细胞TLR4及炎症蛋白表达

    刊名:中国药理学通报 作者:齐若梅 ; 孙文佳 ; 孙杰 ; 陈北冬 ; 赵艳阳 关键词:银杏内酯B ; TLR4 ; PAF受体 ; 内皮细胞 ; 高糖 ; Akt ; NF-κB 年份:2015
    摘要:目的评价银杏内酯B对高糖诱导内皮细胞TLR4表达的影响以及分子机制。方法使用人原代脐静脉内皮细胞,用高糖刺激内皮细胞,用Western blot分析TLR4、炎症蛋白表达以及Akt磷酸化。免疫荧光检测NF-κB核转位。结果高糖(30 mmol·L-1)刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达明显增加,PAF受体抑制剂银杏内酯B(0.6 g·L-1)和CV3988(30μmol·L-1)分别抑制了TLR4及PAF受体表达。银杏内酯B有效地抑制了高糖刺激内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达。分子机制的研究表明,银杏内酯B明显抑制了高糖诱导的Akt磷酸化,以及NF-κB p65的核转位。结论高糖刺激内皮细胞TLR4和PAF受体表达增高,银杏内酯B能够抑制高糖刺激TLR4、PAF受体和炎症蛋白表达,分子机制与抑制Akt磷酸化以及NF-κB活化相关。
  • 【期刊】 银杏内酯B对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

    刊名:中国药理学通报 作者:齐若梅 ; 刘熹昀 ; 赵革新 ; 鲍利 ; 陈北冬 ; 吴伟 关键词:银杏内酯B ; ApoE基因敲除小鼠 ; 动脉粥样硬化 ; RANTES ; PAF受体拮抗剂 ; 血小板释放 机构:卫生部北京医院老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 ; 卫生部北京医院老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 年份:2011
    摘要:目的探讨银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法 12只8周龄C57BL/6J小鼠为正常组,24只8周龄♂ApoE-/-小鼠为阳性模型组以及药物组;药物组每天给予GB 0.6 mg灌胃。8周后处死小鼠,用病理学方法观察小鼠动脉斑块、脂质沉积以及巨噬细胞表达。用ELISA方法测定血浆RAN-TES含量。结果电镜结果显示模型组动脉斑块较大,血管内膜损伤明显,而GB组小鼠动脉内表面损伤明显减轻,斑块较小。HE染色显示了同样的结果,模型组斑块较大,GB组斑块较小。血浆RANTES测定正常组为123.81 ng.L-1,模型组为359.16 ng.L-1,GB组为193.36 ng.L-1,各组之间差异存在统计学意义(P<0.01)。结论 GB能有效地减轻ApoE-/-小鼠的动脉粥样硬化损伤,并降低血浆RANTES含量,其药理学机制可能与抑制血小板功能相关。
  • 【期刊】 银杏内酯B抑制高糖诱导内皮细胞凋亡及机制研究

    刊名:中国药理学通报 作者:齐若梅 ; 陈坤 ; 张明 ; 陈北冬 ; 赵艳阳 ; 吴伟 关键词:银杏内酯B ; 高糖 ; 人脐静脉内皮细胞 ; 细胞凋亡 机构:国家老年医学中心 ; 国家老年医学中心 ; 卫生部老年医学重点实验室 年份:2017
    摘要:目的 探讨银杏内酯B对高糖诱导的内皮细胞凋亡的影响及相关的分子机制.方法 使用脐静脉血管内皮细胞作为细胞模型,分为对照组、高糖组、银杏内酯B处理组.用Transwell实验检测内皮细胞迁移,AnnexinⅤ试剂盒检测细胞凋亡,荧光试剂盒检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,Western blot检测Bax,Bcl-2,caspase-3的表达以及p53的磷酸化.结果 高糖(30 mmol·L-1)处理组内皮细胞迁移数量明显降低,迁移率为(66.6±15.6)%,而银杏内酯B(0.6 g·L-1)处理增加了内皮细胞的迁移数量,迁移率为(94.8±11.4)%.高糖处理导致内皮细胞ROS水平增高2.75倍,与高糖处理组比较,0.6 g·L-1银杏内酯B完全抑制了高糖诱导的ROS产生.流式细胞仪分析表明,高糖刺激内皮细胞凋亡率为(53.8±2.6)%,银杏内酯B处理组内皮细胞凋亡率为(44.0±3.1)%.对凋亡相关蛋白的分析表明,高糖组Bax、caspase-3表达增加,Bcl-2表达降低,银杏内酯B处理抑制了Bax、caspase-3表达,并增加了Bcl-2表达.此外,高糖处理增加了内皮细胞p53表达及磷酸化,而银杏内酯B抑制高糖刺激的p53活化.结论 银杏内酯B能抑制高糖诱导的内皮细胞凋亡,改善内皮细胞迁移功能,对高糖引起的内皮细胞损伤具有保护作用.
  • 【期刊】 硝普钠对过氧化氢诱导增龄大鼠血小板活化影响

    刊名:心肺血管病杂志 作者:齐若梅 ; 管斯斯 ; 陈北冬 ; 鲍利 ; 吴伟 ; 张珊 关键词:血小板 ; 过氧化氢 ; 一氧化氮 ; 血管舒张因子刺激磷酸蛋白 ; 心脏疾病 机构:北京卫生部北京医院 ; 北京卫生部北京医院 ; 卫生部北京老年医学研究所卫生部北京老年医学重点实验室 ; 武汉市中心医院干部科 ; 华中科技大学附属仁济医院 年份:2010
    摘要:目的:探讨过氧化氢对增龄大鼠血小板活化及NO(nitric oxide)供体硝普钠,对过氧化氢诱导下血小板活化的影响。方法:使用8个月龄、13个月龄Wistar大鼠血小板悬浮液,测定一氧化氮(nitricoxide,NO)、环磷鸟苷(cGMP)含量、血管舒张因子刺激的磷酸蛋白(vasodilator-stimulated phosphoprotein,VASP)磷酸化以及活性氧族(reactive oxygen species,ROS)水平。结果:过氧化氢刺激血小板活化时,8个月龄、13个月龄大鼠的血小板NO含量均有降低,硝普钠以剂量依赖的方式增加了大鼠血小板内的NO含量,但2组之间差异无统计学意义;硝普钠能明显增强8个月龄大鼠过氧化氢刺激的血小板VASP磷酸化水平,但对13个月龄大鼠血小板的VASP磷酸化无明显影响;硝普钠明显增加了8个月龄大鼠细胞内cGMP含量,但对13个月龄大鼠cGMP的产生无明显影响;硝普钠对2组大鼠血小板ROS产生没有抑制作用。结论:硝普钠明显增加8个月龄大鼠过氧化氢刺激血小板的cGMP含量以及VASP磷酸化,但硝普钠对8个月龄和13个月龄大鼠血小板NO产生的影响差异无统计学意义。硝普钠对13个月龄大鼠血小板VASP磷酸化以及cGMP产生的影响较小。提示老龄机体血小板功能改变与cGMP活性下降、VASP磷酸化水平降低相关。这一结果为今后抗血栓药物研究提供了新的思路靶点。
  • 【期刊】 尿微量白蛋白在中老年人体检筛查中的意义

    刊名:中国卫生检验杂志 作者:齐若梅 ; 鲍利 ; 管斯斯 ; 陈北冬 ; 吴伟 关键词:尿微量白蛋白 ; 体检 ; 高血压 ; 糖尿病 年份:2010
    摘要:目的:分析了尿微量白蛋白在中老年人群的体检发生率以及相关的危险因素。方法:收集体检人群的晨尿,用ELESA方法分析尿微量白蛋白含量,用Western blot方法观察尿微量白蛋白片段。结果:195例体检人群尿微量白蛋白增高者57例,阳性率为29.2%。尿微量白蛋白定量检测结果显示,尿微量白蛋白增高与血糖、甘油三酯、收缩压和舒张压增高有密切相关性。统计学处理有显著差异。其中17例体检首次发现尿微量白蛋白阳性,占体检人数的8.7%。尿微量白蛋白片段的分析也显示白蛋白片段与尿微量白蛋白浓度呈正相关性。结论:体检筛查尿微量白蛋白对于发现血管损伤有重要的临床意义,尿微量白蛋白阳性与血糖、甘油三酯、血压等异常有密切相关性,对于疾病的早期诊断、早期治疗能够提供有意义的生物学信息。因此,尿微量白蛋白的检查不仅局限于患者,在普通人群的筛查也是十分必要的。
  • 【期刊】 银杏内酯B对内皮细胞的保护作用及分子机制研究

    刊名:中国药理学通报 作者:齐若梅 ; 马丽娜 ; 陈北冬 ; 赵艳阳 ; 鲍利 ; 吴伟 ; 李兴广 关键词:银杏内酯B ; 人脐静脉内皮细胞 ; LOX-1 ; Akt ; SIRT1 ; Nrf2 机构:北京中医药大学 ; 北京中医药大学 年份:2013
    摘要:目的探讨银杏内酯B对氧化型低密度脂蛋白刺激脐静脉内皮细胞保护作用的分子机制。方法分别用银杏内酯B 0.2、0.4、0.6 g.L-1预孵育内皮细胞1 h,再加入ox-LDL(0.1 g.L-1)刺激细胞。用Western blot检测Lectin-likeoxidized LDL receptor-1(LOX-1)、PI3K、Nrf2、SIRT1表达及Akt磷酸化。结果 1.ox-LDL刺激内皮细胞LOX-1表达增加,银杏内酯B以剂量依赖方式抑制了LOX-1表达。2.银杏内酯B有效地抑制了ox-LDL刺激的Akt磷酸化,但对PI3K的表达无影响。3.ox-LDL刺激内皮细胞SIRT1表达降低,银杏内酯B有意义地增加了细胞SIRT1表达。4.ox-LDL刺激细胞抗氧化应激蛋白Nrf2表达明显增加,银杏内酯B下调了Nrf2的表达。结论银杏内酯B对内皮细胞保护作用与抑制LOX-1表达、Akt磷酸化,启动细胞内源性保护机制相关。
  • 【期刊】 硝普钠对增龄机体血小板功能影响的研究

    刊名:中国药理学通报 作者:齐若梅 ; 管斯斯 ; 姜秀新 ; 鲍利 ; 吴伟 关键词:血小板 ; 一氧化氮 ; 衰老 ; 硝普钠 机构:北京大学第五临床医学院卫生部北京医院 ; 北京大学第五临床医学院卫生部北京医院 年份:2008
    摘要:目的探讨硝普钠对增龄机体血小板功能的影响。方法8mon、13mon Wistar大鼠,腹主动脉抗凝取血,分离富血小板血浆。使用硝普钠(SNP)前孵育血小板5min,然后用胶原诱导血小板活化。使用一氧化氮(NO)测定试剂盒测定不同年龄组动物血小板NO含量。利用Western blot方法分析VASP(vasodilator-stimulated phosphoprotein)磷酸化。使用6mon、36mon新西兰白兔颈总动脉取血分离血小板,测定血小板聚集。结果一氧化氮(nitric oxide,NO)的测定表明,硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)处理的血小板以剂量依赖方式增加了血小板细胞内NO含量,在胶原诱导血小板活化的状态,13mon组大鼠血小板NO产生明显低于8mon组动物,两组之间差异有显著性(P<0.05)。VASP磷酸化结果显示8mon大鼠血小板的VASP磷酸化程度更强。血小板聚集实验显示3、10μmol.L-1SNP预处理6mon新西兰白兔血小板,聚集率分别为31%和4%。同样浓度SNP预处理36mon新西兰白兔的血小板,聚集率分别为88%和77%,两者之间差异有显著性。结论一氧化氮供体SNP具有增加血小板NO含量、抑制血小板功能的作用。SNP对血小板功能抑制的效果与年龄有相关性,高龄动物血小板NO产生以及VASP磷酸化程度降低,其分子机制可能与NO/cGMP通道的活性下降相关。这一结果为血栓研究提供了一个新的思路。
  • 【期刊】 银杏内酯B对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

    刊名:中国动脉硬化杂志 作者:齐若梅 ; 刘熹昀 ; 鲍利 ; 吴伟 关键词:银杏内酯B ; 阿司匹林 ; 血小板第4因子 ; RANTES ; 动脉粥样硬化 机构:卫生部北京医院老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 ; 卫生部北京医院老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 年份:2011
    摘要:目的评价银杏内酯B对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响。方法选用8周龄雄性ApoE-/-小鼠,给予高脂饮食喂养。将动物分为模型组、银杏内酯B(GB)组和阿司匹林(ASA)组。8周后处死小鼠,进行血脂测定和血浆炎症蛋白ELISA测定,免疫组织化学法分析主动脉斑块。用健康人血小板分析血小板聚集,使用检测血小板聚集仪检测血小板聚集。Western Blotting法分析Akt磷酸化。结果银杏内酯B组小鼠血浆趋化因子RANTES水平下降了47%,阿司匹林组下降了69%,与模型组比较差异有显著性。与模型组比较,血小板第4因子(PF4)水平银杏内酯B组下降了45%(P<0.05),阿司匹林组下降了11%(P>0.05)。主动脉油红O染色显示与模型组比,银杏内酯B组脂质沉积减少40%,阿司匹林组减少31%,差异有统计学意义。巨噬细胞染色表明银杏内酯B组和阿司匹林组主动脉斑块处巨噬细胞浸润比模型组分别减少51%和11%,差异均有统计学意义。斑块局部炎症蛋白分析表明,与模型组比较,血管细胞黏附分子1(VCAM-1)表达在银杏内酯B组减少69%,阿司匹林组减少32%,差异有统计学意义。银杏内酯B组RANTES表达比模型组减少51%(P<0.05),在阿司匹林组减少10%。银杏内酯B组PF4表达比模型组减少51%(P<0.05),在阿司匹林组减少23%(P<0.05)。银杏内酯B组CD40L表达减少39%,阿司匹林组减少12%,差异均有统计学意义。体外实验血小板功能分析显示,0.6 g/L银杏内酯B能明显抑制胶原诱导的血小板聚集,并降低胶原诱导的Akt磷酸化水平。结论银杏内酯B(血小板活化因子受体拮抗剂)能够有效地减轻或延缓ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的进展,减轻斑块的形成以及斑块局部炎症蛋白和炎症细胞浸润;它能够有效地抑制血小板聚集,并阻碍PI3K下游分子Akt磷酸化。因此我们推测,银杏内酯B抑制动脉粥样硬化的效果与银杏内酯B抑制PI3K通道的活化相关。
  • 【期刊】 Trizol法提取大鼠耳蜗髓磷脂P0蛋白质

    刊名:中国耳鼻咽喉头颈外科 作者:齐若梅 ; 汤黎 ; 郑明秀 ; 雷雳 关键词:大鼠 ; 耳蜗 ; 髓磷脂P0蛋白质 机构:昆明医学院第二附属医院耳鼻咽喉科 ; 昆明医学院第二附属医院耳鼻咽喉科 ; 昆明医学院第二附属医院耳鼻咽喉科 ; 首都医科大学 ; 卫生部北京老年病研究所 年份:2008
    摘要:目的用Trizol法提取大鼠耳蜗髓磷脂P0蛋白质(myelin protein P0,P0蛋白),与传统的蛋白裂解液裂解法比较蛋白提取效果,分析Trizol法的优势。方法Trizol法和传统的蛋白裂解液裂解法分别提取200g~250g Wistar大鼠(雌雄不限)耳蜗P0蛋白,用WesternBlot法及考马斯亮兰(Bradford)法比较两种方法提取P0蛋白含量及效果。结果Trizol法提取的大鼠耳蜗P0蛋白与传统的蛋白裂解液裂解法提取的含量相当,效果肯定。结论Trizol法与传统的蛋白裂解液裂解法提取的蛋白效果相当,但Trizol法简化了操作步骤,节省了单独提取蛋白质所需的蛋白酶抑制剂,节约样本,节省时间,提高工作效率,减少了蛋白和核酸降解的机会,有着更好的前景。
  • 【期刊】 Trizol法提取大鼠耳蜗髓磷脂PO蛋白质

    刊名:中国耳鼻咽喉头颈外科 作者:齐若梅 ; 汤黎 ; 郑明秀 ; 雷雳 关键词:大鼠 ; 耳蜗 ; 髓磷脂PO蛋白质 机构:昆明医学院第二附属医院耳鼻咽喉科 ; 昆明医学院第二附属医院耳鼻咽喉科 ; 首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科 ; 耳鼻咽喉头颈科学教育部重点实验室首都医科大学 ; 卫生部北京老年病研究所 年份:2008
    摘要:目的用Trizol法提取大鼠耳蜗髓磷脂PO蛋白质(myelin protein PO,PO蛋白),与传统的蛋白裂解液裂解法比较蛋白提取效果,分析Trizol法的优势。方法Trizol法和传统的蛋白裂解液裂解法分别提取200g-250gWistar大鼠(雌雄不限)耳蜗PO蛋白,用Western Blot法及考马斯亮兰(Bradford)法比较两种方法提取PO蛋白含量及效果。结果Trizol法提取的大鼠耳蜗PO蛋白与传统的蛋白裂解液裂解法提取的含量相当,效果肯定。结论Trizol法与传统的蛋白裂解液裂解法提取的蛋白效果相当,但Trizol法简化了操作步骤,节省了单独提取蛋白质所需的蛋白酶抑制剂,节约样本,节省时间,提高工作效率,减少了蛋白和核酸降解的机会,有着更好的前景。
  • 【期刊】 茶多酚抑制人血管内皮细胞分泌单核细胞趋化蛋白1的研究

    刊名:中国心血管杂志 作者:齐若梅 ; 陈北冬 ; 沈恂 关键词:内皮细胞 ; 抗氧化剂 ; 茶多酚 ; 单核细胞趋化蛋白质类 ; 氧化型低密度脂蛋白 机构:卫生部北京医院 ; 卫生部北京医院 ; 卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 ; 中国科学院生物物理研究所 年份:2012
    摘要:目的通过对人血管内皮细胞炎性分子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的检测,评价茶多酚在血脂异常中对血管内皮的保护作用及其作用机制。方法应用人血管内皮细胞为研究模型,在基础或者氧化型低密度脂蛋白刺激的条件下,给予不同剂量的茶多酚,并与其他抗氧化剂水溶性维生素E(Trolox)、银杏提取物(EGb761)相比较,检测不同时间点细胞培养基当中的MCP-1含量。结果 24 h内浓度小于200μmol/L的茶多酚对内皮细胞没有明显的毒性作用,并且可以剂量依赖性地抑制内皮MCP-1的分泌(均为P<0.05)。与未处理组及其他抗氧化剂组相比,茶多酚处理组显著地降低了MCP-1的基因表达和蛋白分泌水平,并呈剂量依赖性,表现出较好的内皮保护及抗炎作用。结论与其他抗氧化剂相比,茶多酚可以在脂质氧化的条件下更好地通过抑制炎性因子的表达和分泌来保护内皮细胞。
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