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  • 【会议】 MALDI-TOF MS在临床常见厌氧菌鉴定中的应用研究

    作者:黄声雷 ; 周春妹 ; 胡必杰 ; 马艳 ; 单玉璋 ; 叶相如 机构:复旦大学附属中山医院 ; 复旦大学附属中山医院 年份:2014
    摘要:目的评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对临床厌氧菌的快速鉴定中的应用。方法收集复旦大学附属中山医院临床分离的42株厌氧菌,采用MALDI-TOF-MS技术(使用的是Vitek MS)和APIAN板条方法比较,两种方法不一致的菌株采用16S rRNA测序作为金标准。结果 42株厌氧菌,包含6个属的14种细菌。采用Vitek MS方法属水平鉴定的为40株(95.2%),种水平鉴定的38株(90.5%),采用APl20AN鉴定到属的为37株(88.1%),鉴定到种的为29株
  • 【会议】 念珠菌血症患者临床特点和预后相关因素分析

    作者:黄声雷 ; 叶相如 ; 胡必杰 ; 马坚 ; 高晓东 ; 周晴 ; 周昭彦 ; 周春妹 关键词:念珠菌属 ; 菌血症 ; 疾病特征 ; 预后 ; 危险因素 机构:复旦大学附属中山医院呼吸科 ; 复旦大学附属中山医院呼吸科 ; 复旦大学附属中山医院医院感染管理科 ; 复旦大学附属中山医院微生物实验室 年份:2013
    摘要:目的:了解念珠菌血症患者的临床和微生物特征,探讨影响其预后的危险因素。方法:回顾性分析2008年1月至2012年12月复旦大学附属中山医院血培养念珠菌阳性病例,对其病原菌种类、药敏结果、基础疾病、治疗及预后情况进行统计,并采用单因素及多因素回归分析方法对念珠菌血症死亡相关的危险因素进行分析。结果:共收集138例念珠菌血症患者资料,其中男98例,女40例,平均年龄(61.3±16.6)岁;每年出院患者中的发病率为0.34‰~0.51‰。血培养分离到白念珠菌72株(52.2%),近平滑念珠菌29株(21.0%),热带念珠菌16株(11.6%)。药敏结果显示,念珠菌对三唑类抗真菌药物的敏感率为90.9%~97.4%;而热带念珠菌对三唑类的敏感率仅为55.6%~83.3%。念珠菌血症患者的病死率为39.1%(54/138),归因病死率31.9%(44/138)。多因素回归分析显示急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)≥20分(OR=8.025,95%CI:2.032~31.696,P=0.003)、低白蛋白血症(OR=6.213,95%CI:1.849~20.879,P=0.003)及合并细菌血流感染(OR=5.541,95%CI:1.576~19.487,P=0.008)、留置导尿管(OR=13.776,95%CI:1.402~135.352,P=0.024)是其死亡独立危险因素,而拔除或更换中心静脉置管(OR=0.231,59%CI:0.075~0.716,P=0.011)及血培养前30d内手术史(OR=0.206,95%CI:0.050~0.857,P=0.030)是其死亡的保护性因素。结论:念珠菌血症以白念珠菌引起为主,病死率仍较高,APACHEⅡ评分≥20分、低蛋白血症、留置导尿管和合并细菌血流感染是死亡独立危险因素,拔除或更换中心静脉置管及血培养前30d内手术史是预后保护性因素。
  • 【期刊】 泌尿生殖道支原体感染的优化检测方案研究

    刊名:检验医学 作者:黄声雷 ; 吴磊 ; 周运恒 ; 陈向明 ; 王国江 ; 刘瑛 ; 陈峰 ; 冯景 ; 唐群力 ; 汪瑞忠 ; 房华 ; 赵虎 ; 方毅 ; 周春妹 ; 唐振华 ; 陆庭嫣 ; 汤瑾 ; 王坚镪 ; 韩立中 ; 肖淑珍 ; 胡伟忠 ; 杨阳 ; 顾伟鸣 关键词:支原体 ; 解脲脲原体 ; 人型支原体 ; 培养 ; 检测方法 ; 标准化 机构:上海市皮肤病医院检验科 ; 上海市皮肤病医院检验科 ; 武警上海市总队医院检验科 ; 上海市嘉定区南翔医院性病科 ; 上海交通大学医学院附属新华医院检验科 ; 上海市奉贤区中心医院检验科 ; 浦东新区人民医院检验科 ; 复旦大学附属华东医院检验科 ; 复旦大学附属中山医院检验科 ; 上海交通大学医学院附属中国福利会国际和平妇幼保健院检验科 ; 上海交通大学附属第六人民医院检验科 ; 上海交通大学医学院附属瑞金医院临床微生物科 年份:2015
    摘要:目的通过优化支原体培养的方法和流程建立新的检查方案,提高检测解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)感染的准确性。方法优化支原体固体和液体组合培养的检测模式,制定了一套可操作性的标准化实验方案,遴选11家二级以上医疗机构,对随机入选病例的泌尿生殖道分泌物样本开展联合研究。相关的实验数据进行统计分析,评价临床应用前景。结果 747例样本总体阳性率45.1%(337/747),其中Uu阳性率41.1%(307/747),Mh阳性率13.9%(104/747)。Uu和Mh原始样本接种的阳性符合率分别为92.6%和94.0%(P均<0.01)。Uu和Mh转种后的阳性符合率分别为97.5%和96.1%(P均>0.05)。液体培养变色后转种提高了固体培养的敏感性。有17例液体培养阳性的样本经过原代和转种2次固体培养,均没有观察到菌落。固体培养降低了液体培养的假阳性。固体培养与液体培养同时接种样本,明显缩短了固体培养的检测周期。超过85%的支原体在24 h以内观察到菌落,而48 h以内固体培养与液体培养的阳性率几乎没有差别。结论以固体和液体组合培养的检测模式,尽管增加了检验成本,但对泌尿生殖道支原体感染的检测具有更高的敏感性和特异性,新检测方案可以在临床推广应用。
  • 【期刊】 结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的价值

    刊名:中华医院感染学杂志 作者:黄声雷 ; 周晴 ; 胡必杰 ; 周春妹 ; 高晓东 ; 蒋文海 ; 王学理 ; 阴忆青 关键词:结核分枝杆菌 ; 结核感染T细胞斑点试验 ; 诊断 ; 敏感性 ; 特异性 机构:复旦大学附属中山医院感染管理科 ; 复旦大学附属中山医院感染管理科 ; 复旦大学附属中山医院临床微生物实验室 ; 复旦大学附属中山医院信息科 年份:2013
    摘要:目的分析结核感染T细胞斑点(TSPOT.TB)试验在结核病诊断中的价值。方法回顾性调查2012年1-12月复旦大学附属中山医院行TSPOT.TB试验的成人患者的临床资料,根据微生物、病理结果及临床表现明确是否存在结核分枝杆菌感染,分析TSPOT.TB试验在结核病诊断中的敏感性及特异性。结果共查阅733份患者病历资料,明确诊断结核分枝杆菌感染的患者44例,其中37例试验结果呈阳性,敏感性为84.1%,明确排除结核分枝杆菌感染的患者78例,其中67例试验结果呈阴性,特异性为85.9%;分层分析发现当抗原A和抗原B孔的数值,二者之一>20时,敏感性61.4%,特异性92.3%;二者均>20时,敏感性40.9%,特异性97.4%。结论结核感染T细胞斑点(TSPOT.TB)试验特异性较高,尤其当抗原A孔和B孔斑点数均>20时,强烈提示结核感染,而敏感性相对较低。
  • 【期刊】 念珠菌血症患者临床特点及预后相关因素分析

    刊名:中华医学杂志 作者:黄声雷 ; 叶相如 ; 胡必杰 ; 高晓东 ; 马坚 ; 周晴 ; 周昭彦 ; 周春妹 关键词:念珠菌属 ; 菌血症 ; 疾病特征 ; 预后 ; 危险因素 机构:复旦大学附属中山医院呼吸科 ; 复旦大学附属中山医院呼吸科 ; 复旦大学附属中山医院医院感染管理科 ; 复旦大学附属中山医院微生物实验室 年份:2013
    摘要:目的 了解念珠菌血症患者的临床和微生物特征,探讨影响其预后的危险因素.方法 回顾性分析2008年1月至2012年12月复旦大学附属中山医院血培养念珠菌阳性病例,对其病原菌种类、药敏结果、基础疾病、治疗及预后情况进行统计,并采用单因素及多因素回归分析方法对念珠菌血症死亡相关的危险因素进行分析.结果 共收集138例念珠菌血症患者资料,其中男98例,女40例,平均年龄(61.3±16.6)岁;每年出院患者中的发病率为0.034% ~0.051%.血培养分离到白念珠菌72株(52.2%),近平滑念珠菌29株(21.0%),热带念珠菌16株(11.6%).药敏结果显示,念珠菌对三唑类抗真菌药物的敏感率为90.9%~97.4%;而热带念珠菌对三唑类的敏感率仅为55.6% ~83.3%.念珠菌血症患者的病死率为39.1%(54/138),归因病死率31.9%(44/138).多因素回归分析显示急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)≥20分(OR=8.025,95%CI:2.032 ~31.696,P=0.003)、低白蛋白血症(OR=6.213,95%CI:1.849~ 20.879,P=0.003)及合并细菌血流感染(OR=5.541,95% CI:1.576 ~ 19.487,P=0.008)、留置导尿管(OR=13.776,95%CI:1.402~135.352,P=0.024)是其死亡独立危险因素,而拔除或更换中心静脉置管(OR=0.231,59% CI:0.075 ~0.716,P=0.011)及血培养前30 d内手术史(OR=0.206,95%CI:0.050~0.857,P=0.030)是其死亡的保护性因素.结论 念珠菌血症以白念珠菌引起为主,病死率仍较高,APACHEⅡ评分≥20分、低蛋白血症、留置导尿管和合并细菌血流感染是死亡独立危险因素,拔除或更换中心静脉置管及血培养前30 d内手术史是预后保护性因素.
  • 【期刊】 上海地区临床分离念珠菌的耐药性监测

    刊名:中国感染与化疗杂志 作者:黄声雷 ; 慎慧 ; 郭建 ; 张旻 ; 孔雯娜 ; 肖晶晶 ; 吴文娟 ; 刘云 ; 陈险峰 ; 谢潋滟 ; 汤荣 ; 董郭平 ; 李莉 ; 孙燕 ; 李敏 ; 徐阳飏 ; 张静华 ; 奚卫 ; 蔡金凤 ; 陈祝俊 ; 李丽 ; 秦惠宏 ; 舒文 ; 曹文俊 ; 王爱敏 ; 卫颖珏 ; 黄卫春 ; 张雯雁 ; 赵虎 ; 袁轶群 ; 沈振华 ; 房华 关键词:真菌耐药性监测 ; 药物敏感性试验 ; 念珠菌 ; 侵袭性真菌感染 机构:同济大学附属东方医院南院检验科 ; 同济大学附属东方医院南院检验科 ; 上海长海医院 ; 上海长征医院 ; 上海交通大学医学院附属瑞金医院 ; 上海交通大学附属第一人民医院 ; 上海东方肝胆外科医院 ; 复旦大学附属华山医院 ; 上海交通大学附属儿童医院 ; 上海市胸科医院 ; 同济大学附属第十人民医院 ; 复旦大学附属中山医院 ; 上海交通大学医学院附属仁济医院 ; 上海市公共卫生临床中心 ; 复旦大学附属肿瘤医院 ; 上海交通大学医学院附属瑞金医院北院 ; 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院 ; 复旦大学附属儿科医院 ; 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心 ; 复旦大学附属华东医院 ; 复旦大学附属金山医院 ; 上海市浦东新区公利医院 ; 上海市浦东新区人民医院 年份:2019
    摘要:目的了解上海地区临床分离念珠菌的菌株分布以及对常用抗真菌药物的敏感性和耐药性。方法对上海地区27所医院临床分离念珠菌采用微量液基稀释法按统一方案进行抗真菌药物敏感性试验。按CLSI M60(2017年)判断结果。结果收集2017年8月1日-2018年4月30日上述医院临床分离念珠菌共354株,其中白念珠菌占41.81%(148/354),近平滑念珠菌占23.73%(84/354),热带念珠菌占15.54%(55/354),光滑念珠菌占9.32%(33/354),其他念珠菌占9.60%(34/354)。白念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌耐药率与以往报道比较偏低或基本持平,无增长趋势,主要是对唑类抗真菌药物具有一定的耐药性。白念珠菌对氟康唑耐药率为1.45%、剂量依赖性敏感(SDD)率为4.35%,对伏立康唑耐药率和中介率均为2.17%;近平滑念珠菌对氟康唑呈现1.20%的SDD率,对伏立康唑呈现1.20%的中介率;光滑念珠菌对氟康唑表现出6.06%的耐药率和93.94%的SDD率;热带念珠菌耐药率呈增长趋势,对氟康唑表现出41.82%的耐药率和12.73%的SDD率,对伏立康唑表现出40.00%的耐药率和12.73%的中介率。白念珠菌、近平滑念珠菌、热带念珠菌对棘白菌素类药物尚未出现耐药菌株,仅1株光滑念珠菌对卡泊芬净耐药。结论上海地区临床念珠菌的分离率及菌株分布与国内外报道基本一致,临床分离菌株对常用抗菌药物的耐药率基本稳定,热带念珠菌对唑类抗真菌药物的耐药率呈上升趋势,应该引起临床医师重视。同时应进一步加强医院感染防控措施,继续做好真菌耐药性监测工作。
  • 【期刊】 中试循环输水管道系统中建立嗜肺军团菌生物膜

    刊名:中华医院感染学杂志 作者:黄声雷 ; 周昭彦 ; 胡必杰 ; 陶黎黎 ; 于玲玲 ; 高晓东 关键词:中试管道系统 ; 医院 ; 嗜肺军团菌 ; 生物膜 机构:复旦大学附属中山医院呼吸科 ; 复旦大学附属中山医院呼吸科 年份:2010
    摘要:目的模拟医院供水系统,建立代表上海地区自来水特征的新型中试循环输水管道系统,研究军团菌定植供水系统的能力;评估水流的停滞和层流状态对嗜肺军团菌生物膜的影响。方法采用培养技术和共聚焦激光扫描显微镜动态监测嗜肺军团菌进入生物膜达到稳态的过程。结果军团菌黏附和进入生物膜后开始增殖,第5周达到稳态,95.8%的嗜肺军团菌分布在生物膜内;管壁军团菌定植数量在层流状态明显高于停滞状态,平均值为7.8×104CFU/cm2和1.5×103CFU/cm2。结论中试循环输水管道中成功建立嗜肺军团菌生物膜;生物膜在军团菌增殖中起重要作用;水流停滞不会促进军团菌增殖。
  • 【期刊】 ICU环境中耐碳青酶烯类鲍氏不动杆菌污染的调查

    刊名:中华医院感染学杂志 作者:黄声雷 ; 鲍容 ; 胡必杰 ; 周昭彦 ; 周春妹 ; 谢红梅 ; 高晓东 ; 王文娟 ; 任金兰 ; 崔扬文 ; 沈燕 关键词:鲍氏不动杆菌 ; 重症监护病房 ; 耐药 ; 医院感染 ; 环境微生物 机构:复旦大学附属中山医院微生物实验室 ; 复旦大学附属中山医院微生物实验室 ; 复旦大学附属中山医院感染管理科 年份:2010
    摘要:目的调查耐碳青酶烯类鲍氏不动杆菌(CRAB)在ICU环境中的污染情况。方法对上海市21所医院不同ICU环境进行采样,采用ChromID ESBLs筛选耐三代头孢菌素鲍氏不动杆菌,并用琼脂稀释法确认是否为CRAB。结果共采集438份环境微生物标本,其中二级医院104份,三级医院334份;CRAB平均检出率为14.6%;三级医院CRAB检出率(17.7%)明显高于二级医院(4.8%),差异有统计学意义(P<0.01);CRAB最高检出浓度达(1×107)CFU/cm2,呼吸机表面CRAB检出率明显高于心电监测仪(P=0.026)和输液泵表面(P=0.009)。结论上海市ICU环境中普遍存在CRAB污染,应加强ICU环境消毒和耐药菌监测,预防和控制CRAB感染。
  • 【期刊】 上海市6所医院供水系统36株军团菌体外药敏结果分析

    刊名:中华医院感染学杂志 作者:黄声雷 ; 胡必杰 ; 于玲玲 ; 周春妹 ; 谢红梅 ; 高晓东 关键词:军团菌 ; 最低抑菌浓度 ; 琼脂稀释法 ; 医院供水系统 机构:复旦大学附属中山医院呼吸科 ; 复旦大学附属中山医院呼吸科 ; 复旦大学附属中山医院医院感染管理科 年份:2011
    摘要:目的评估4种抗菌药物对医院环境中分离军团菌的体外抗菌活性,为临床治疗军团菌感染选择抗菌药物提供参考。方法收集2009年5-9月上海市6所医院供水系统中军团菌分离株36株,其中嗜肺军团菌血清1型(Lp-1)19株,嗜肺军团菌血清2-15型(Lp2-15)6株,其他军团菌属细菌(L.spp)11株,使用酵母琼脂培养基(BYE),采用琼脂稀释法药敏试验,孵育48h分别测定左氧氟沙星(LEV)、莫西沙星(MXF)、阿奇霉素(AZM)和红霉素(ERY)4种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果 4种药物的MIC范围分别为:LEV 0.015~0.06 mg/L,MXF 0.06~0.5 mg/L,ERY 0.125~1 mg/L,AZM 0.03~1 mg/L,MIC50、MIC90分别为LEV0.0150、.06 mg/L,MXF 0.06、0.06 mg/L,AZM 0.25、0.5 mg/L,ERY 0.5、1 mg/L;4种药物的抑菌商数(IQ)分别为LEV=185.13±49.98,MXF=53.61±28.03,AZM=30.40±28.94,ERY=9.83±6.52。结论氟喹诺酮类药物的体外抗军团菌的活性优于大环内酯类,同类抗菌药物比较,左氧氟沙星的体外抗军团菌活性优于莫西沙星,阿奇霉素的体外活性优于红霉素。
  • 【期刊】 MALDI-TOF质谱快速鉴定非结核分枝杆菌方法的建立和评价

    刊名:中华检验医学杂志 作者:黄声雷 ; 周昭彦 ; 胡必杰 ; 鲍容 ; 马坚 ; 谢红梅 关键词:分枝杆菌属 ; RNA,核糖体,16S ; 光谱法,质量,基质辅助激光解吸电离 ; 可行性研究 机构:复旦大学附属中山医院临床微生物实验室 ; 复旦大学附属中山医院临床微生物实验室 年份:2013
    摘要:目的 建立基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定非结核分枝杆菌(NTM)的方法,评估其快速鉴定临床和环境分离NTM的可行性、准确性和重复性.方法 回顾性收集2012年1至3月上海复旦大学附属中山医院微生物实验室临床分离NTM 15株及2011至2012年医院供水系统环境分离NTM 68株.比较3种样本前处理和蛋白抽提方案,采用MALDI-TOFMS技术检测临床和环境分离NTM,并以16S rRNA测序结果为对照.结果 3种方法均鉴定出相同细菌,但方法1的鉴定值高于其他2种方法.对生长于Middle brook 7H10琼脂平板的83株共10个种的NTM进行鉴定,与16S rRNA测序结果比较,所有菌株均能鉴定至属水平,67株(80.7%)鉴定至种,6株鉴定到复合群水平,鉴定值大于1.700的NTM占81.9% (68/83),且重复性好.培养后获得的菌落从前处理至鉴定完成仅需1.5h.结论 MALDI-TOF MS可快速准确地鉴定临床和环境分离的NTM,在临床实验室常规鉴定方面有着较好的应用前景.
  • 【期刊】 1647例呼吸道感染病原体的IgM抗体检测结果分析

    刊名:中华医院感染学杂志 作者:黄声雷 ; 谢红梅 ; 胡必杰 ; 马艳 ; 周春妹 ; 周昭彦 ; 鲍容 关键词:呼吸道感染 ; 成人 ; 流行病学 ; 病毒 ; 军团菌 ; 肺炎支原体 机构:复旦大学附属中山医院临床微生物室 ; 复旦大学附属中山医院临床微生物室 ; 复旦大学附属中山医院医院感染管理科 年份:2012
    摘要:目的了解9种呼吸道病原体的IgM抗体检测结果及流行情况。方法使用9种呼吸道病原体检测试剂(Pneumoslide IgM)检测2011年3月-2012年2月医院门诊与住院患者血清中呼吸道病原体:嗜肺军团菌血清1型(LP1)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸合胞病毒(RSV)、流感病毒A(INFA)、流感病毒B(INFB)和副流感病毒1、2、3(PIVs)的检出情况及季节性变化。结果共检测1647份血清,410份阳性,阳性率为24.9%;流感病毒(INFs),包括INFA、INFB,为阳性率最高的病原体,阳性率为9.2%;居第2~5位的分别是RSV、PIVs、MP、LP1,阳性率依次为8.7%、5.4%、5.0%、2.1%;RSV与MP在3月的阳性率均为最高,分别为24.0%、19.2%;INFA夏季的阳性率最高,达16.8%,而INFB在1、2月份和7、8月份的阳性率均较高;LP1夏季的阳性率显著高于冬季(P=0.016);26~64岁年龄组患者的病原体阳性率高于≤25岁和≥65岁年龄组患者(P=0.001)。结论 INFs是引起呼吸道感染的最重要的病原体;应做好防范工作,在重点季节预防相应病原体的流行和传播。
  • 【期刊】 评估SDS在MALDI-TOF MS直接鉴定阳性血培养样本中的应用价值

    刊名:检验医学 作者:黄声雷 ; 周春妹 ; 沈佳瑾 ; 马艳 ; 李华茵 关键词:十二烷基硫酸钠 ; 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 ; 血培养 ; 直接检测 机构:复旦大学附属中山医院呼吸科 ; 复旦大学附属中山医院呼吸科 年份:2018
    摘要:目的 评价十二烷基硫酸钠(SDS)前处理方法在提高基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)直接鉴定阳性血培养样本准确率中的作用.方法 收集2016年3—9月阳性血培养瓶378瓶,试验前采用分离胶促凝管富集病原菌,试验后期增加SDS的洗涤过程,得到纯化的菌体后采用MALDI-TOF MS直接鉴定.同时对阳性血培养样本进行常规转种培养,获得纯菌落后采用MALDI-TOF MS鉴定,以此为最终结果,比较2种不同前处理方法的鉴定准确率.结果 未使用SDS洗涤的血样本87例,其中单种细菌感染的血样本83例,种鉴定准确率为73.5%,有4例为复数菌感染.使用SDS洗涤的血样本286例,其中单种细菌感染的血样本277例,种鉴定准确率为82.7%,有9例为复数菌感染.改良后革兰阳性菌的鉴定准确率从65.7%增加至90.5%,酵母的鉴定准确率从11.1%增加至50.0%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 使用SDS洗涤处理的血培养阳性样本采用MALDI-TOF MS 直接鉴定,可提高血培养中主要病原菌的鉴定准确率,且操作简便、快速,成本低廉,适合在临床微生物实验室中应用.
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