搜索结果:找到“魏景艳”相关结果38条
排序: 按相关 按相关 按时间降序
  • 【专利】 基因工程法制备重组谷胱甘肽过氧化物酶

    作者:魏景艳 ; 宋健 ; 邢瑞庆 年份:2013
    摘要:本发明的基因工程法制备重组谷胱甘肽过氧化物酶属于生物技术的领域。先将靶基因组装到分泌型原核表达载体上,用基因突变法通过营养缺陷型原核表达系统或营养缺陷型和SPP低温联合表达系统,将GPX的催化基团SeCys引入到GPX的底物结合部位,结果赋予其高的GPX的活性;或者先将靶基因连同SeCys插入序列组装到分泌型哺乳类细胞表达载体上,再将SeCys插入序列结合蛋白2组装到胞内型哺乳类细胞表达载体上,将两种载体共转染同一哺乳细胞株,在亚硒酸钠存在下用哺乳细胞合成GPX。本发明方法简单,重组GPX活力和产量高、稳定性好,避免包涵体复性造成的产率下降和失活,从而解决天然GPX来源有限和性质不稳定问题。
  • 【专利】 一种高活力小分子量谷胱甘肽过氧化物酶GPX3突变体

    作者:魏景艳 ; 宋健 年份:2017
    摘要:一种高活力小分子量谷胱甘肽过氧化物酶GPX3突变体,属于谷胱甘肽过氧化物酶技术领域。本发明以人GPX3为模板,通过计算机模拟肽链删除和定点突变,得到一种新型的高活力小分子量谷胱甘肽过氧化物酶GPX3突变体,其氨基酸序列如SEQ ID No:1~12所示。其与某些天然人GPX相比较,其不含有半胱氨酸,具有更高的GPX活力和更好的稳定性。产物的蛋白活力显著高于已报道的任何GPX3突变体,能利用血清中低浓度的GSH清除有害自由基,细胞生物学实验证实对过氧化氢损伤的心肌细胞有更强的保护作用。这些优点均有利于大规模生产,解决了天然GPX来源不足、性质不稳定和活力低的问题,在生物制药方面有广阔的应用前景。
  • 【期刊】 人谷胱甘肽过氧化物酶的生物信息学分析

    刊名:北华大学学报(自然科学版) 作者:魏景艳 ; 郭笑 ; 陈冬雪 ; 韩笑 ; 孙晶波 ; 徐广宇 ; 盛瑜 ; 安丽萍 关键词:谷胱甘肽过氧化物酶 ; 生物信息学 ; 蛋白质结构 机构:北华大学药学院 ; 北华大学药学院 ; 吉林大学药学院 年份:2016
    摘要:目的 应用生物信息学技术,全面了解人谷胱甘肽过氧化物酶(Human Glutathione Peroxidase,hGPx)蛋白家族的理化性质、结构及功能.方法 以NCBI中报道的hGPx家族8个成员为研究对象,利用ProtParam,NetNGlyc,NetOGlyc,NetPhos,SOPMA,Clustal W,Pymol,MEGA 5.05等多种生物信息学软件,分别对其分子量、等电点、亲水性、糖基化、磷酸化和结构等方面进行分析,并建立其分子系统进化树.结果 通过比对发现:hGPx超家族8个成员的物理性质存在明显差异,而在结构及功能上存在相似特征.结论 hGPx是一类具有明确酶活性的硒蛋白,具有清除体内过量的ROS、保护机体免受氧化损伤的作用.
  • 【专利】 可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法

    摘要:本发明的可溶性人源含硒单链抗体酶的制备方法属于生物技术领域。以谷胱 甘肽衍生物为靶抗原,通过免疫亲和筛选法对重组噬菌体展示人单链抗体库进行 筛选,得到单链抗体B3和D8。将单链抗体基因组装到分泌型原核或真核表达 载体上,转化大肠杆菌或酵母细胞,在原核或真核中表达并纯化单链抗体蛋白; 用化学突变法在抗体的底物结合部位引入GPX的催化基团SeCys。或用基因突 变技术和营养缺陷型大肠杆菌直接表达在底物结合部位含有GPX催化基团的可 溶性单链抗体蛋白,赋予抗体以GPX的催化活性。本发明的制备方法简单;制 备的人源含硒单链抗体酶活力高;所表达的蛋白为可溶性;有利于大规模生产, 在生物制药方面有广阔的应用前景。
  • 【期刊】 含硒抗体模拟谷胱甘肽过氧化物酶的研究进展

    刊名:吉林医药学院学报 作者:魏景艳 ; 徐俊杰 ; 吕士杰 关键词:谷胱甘肽过氧化物酶 ; 硒代半胱氨酸 ; 单链抗体 ; 单域抗体 机构:吉林医药学院基础医学院 ; 吉林医药学院基础医学院 ; 吉林大学药学院 年份:2010
    摘要:谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)是生物体内一种重要的抗氧化酶,具有清除过氧化氢和脂质过氧化物等多种功能,也是治疗和预防多种疾病的潜在药物,对其进行人工模拟具有重要意义。利用抗体酶技术模拟GPX是一个重要的研究方向,近年来以含硒抗体模拟GPX取得了较好成果,呈现出了抗体人源化、分子小型化、催化位点清晰化的发展趋势,本文将对这三个发展趋势加以简要综述。
  • 【期刊】 量子点标记的斑点免疫渗滤分析定量检测cTnI

    刊名:高等学校化学学报 作者:魏景艳 ; 范佳 ; 宋健 ; 毕丽荣 ; 周广宇 ; 张皓 ; 杨柏 关键词:心肌肌钙蛋白I ; 特异性抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体 ; 斑点免疫渗滤 ; 量子点 机构:吉林大学药学院 ; 吉林大学药学院 ; 吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室 ; 吉林大学电子科学与工程学院 ; 吉林大学中日联谊医院 ; 吉林大学化学学院 年份:2009
    摘要:利用量子点良好的光谱特征和光化学稳定性,结合免疫分析技术,对心肌肌钙蛋白I(cTnI)特异性进行定量检测.用量子点标记cTnI的单克隆抗体(2F11),通过SDS-PAGE电泳证明标记成功.斑点免疫膜渗滤法证明标记后的2F11仍具有良好的生物学活性,再将标记并纯化后的2F11与NC膜上不同浓度的cTnI进行免疫反应,使用Im ageM aster图像分析软件对膜上荧光斑点图像进行定量分析.应用此方法测得cTnI的浓度和斑点处相对荧光值有良好的线性关系(R2=0.9966),最低检出值为120 ng.
  • 【期刊】 量子点与人源抗谷胱甘肽单链抗体的连接与表征

    刊名:高等学校化学学报 作者:魏景艳 ; 徐俊杰 ; 王诗雯 ; 赵虹 ; 陈桂秋 ; 霍锐 ; 田莉 ; 段玉晶 ; 李敏杰 ; 杨柏 关键词:量子点 ; 人源单链抗体 ; 谷胱甘肽过氧化物酶 ; GPX ; 共价结合 ; 印迹 机构:吉林大学药学院 ; 吉林大学药学院 ; 吉林大学中日联谊医院中心实验室 ; 吉林大学中日联谊医院中心病理科 ; 吉林大学化学学院超分子结构与材料国家重点实验室 ; 吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室 年份:2009
    摘要:用已构建的表达载体pPELB-B3,在大肠杆菌Rosetta中可溶性表达人源抗谷胱甘肽(GSH)单链抗体B3(scFv-B3),经N i2+螯合亲和层析纯化后,用点印迹法验证了其与GSH结合的特异性.将水相合成的半导体纳米粒子(半导体量子点,QD s)在N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC)的作用下,与scFvs连接.光谱分析和膜印迹结果表明,scFvs成功地共价连接到QD s表面,所得的QD-scFvs复合物能够较好地识别GSH.荧光显微镜观察QD-scFvs与人乳腺癌细胞MCF-7的作用结果,初步判断QD-scFvs能够跨膜进入细胞.
  • 【期刊】 试谈小学语文朗读训练的要求和原则

    刊名:科海故事博览·科教创新 作者:魏景艳 关键词:小学语文 ; 阅读教学 ; 要求和原则 机构:通辽市科尔沁区明仁小学 ; 通辽市科尔沁区明仁小学 年份:2010
    摘要:朗读,是将无声的书面语言转换为有声语言的过程,是一种眼、口、耳、脑协同作用的创造性阅读活动.在小学语文阅读教学中,朗读是一种最重要最经常的训练.
  • 【期刊】 量子点偶联抗体型夹心免疫传感法检测心肌肌钙蛋白I

    刊名:高等学校化学学报 作者:魏景艳 ; 宋健 ; 范佳 ; 宋大千 ; 毕丽荣 ; 周广宇 ; 张皓 ; 杨柏 关键词:心肌肌钙蛋白I ; 特异性抗心肌肌钙蛋白I抗体 ; 夹心免疫传感法 ; 量子点 ; 生物传感器 机构:吉林大学电子科学与工程学院 ; 吉林大学电子科学与工程学院 ; 吉林大学药学院 ; 吉林大学化学学院 ; 吉林大学中日联谊医院 年份:2009
    摘要:将纳米量子点(QD)的放大作用与夹心免疫传感技术相结合,首次应用量子点标记抗体和表面等离子体共振生物传感器(SPR)对心肌肌钙蛋白I(cTn I)进行特异性定量检测.利用N-羟基琥珀酰(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)将量子点偶联到cTn I的单克隆抗体2F11上,再利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)验证偶联是否成功,膜印迹法证明标记后的2F11具有良好的生物学和免疫学活性,最后以蛋白A为基底膜、特异性抗心肌肌钙蛋白I多克隆抗体为第一抗体(捕捉抗体)、QD标记的抗心肌肌钙蛋白I单克隆抗体2F11为第二抗体(检测抗体),用表面等离子体共振生物传感器构建了对心肌肌钙蛋白I具有特异性的夹心免疫传感法,并成功用于检测心肌肌钙蛋白I.本法的检测范围为0.4~15μg/L,检出限为0.4μg/L,较未标记夹心法和直接法分别提高了约2倍和10倍.
  • 【期刊】 谷胱甘肽过氧化物酶及其合成机制

    刊名:生物物理学报 作者:魏景艳 ; 于扬 关键词:谷胱甘肽过氧化物酶 ; 硒代半胱氨酸 ; 硒蛋白合成 机构:吉林大学药学院 ; 吉林大学药学院 年份:2013
    摘要:谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)是在抗氧化防御系统中起到重要作用的一类功能蛋白质,它能够清除多种过氧化物并保护组织细胞免受过氧化损伤。GPx的缺乏会引起多种疾病的发生,因此具有潜在的药用价值。其强大的催化能力主要归功于催化位点中的硒代半胱氨酸(selenocysteine,Sec)。但由于Sec插入到蛋白质中需要一种特殊机制,且这种机制在真核和原核生物中并不相同,很难利用传统基因工程方法在大肠杆菌中制备含硒GPx蛋白。文章对GPx的种类、结构、功能及其表达机制的研究进展进行综述,并总结了几种向蛋白质中引入Sec的方法,以期为开发重组含硒GPx或其替代物提供新思路。
  • 【专利】 睾丸特异性蛋白50人源抗体的制备及用途

    摘要:本发明提供一种睾丸特异性蛋白50人源单链抗体的制备方法,利用噬菌 体抗体呈现技术,以人睾丸特异性蛋白50为靶抗原,通过免疫亲和筛选法对重 组噬菌体人抗体可变区基因文库进行筛选。分离并克隆TSP50特异性单链抗体 基因AI、AII和C8。继而把单链抗体基因AI、AII和C8分别插入到含有组氨 酸尾的原核表达载体PelB中,转化Rosetta菌,通过IPTG诱导表达外源蛋白, 将菌体裂解后用Ni-NTA柱亲和层析,得到纯化的单链抗体,ELISA鉴定其可以 和TSP50全蛋白和50肽特异结合;并用基因工程的手段将此人源单链抗体大量 表达。本发明还公开了睾丸特异性蛋白50人源单链抗体在女性乳腺癌等TSP50 相关性疾病的诊断和治疗用途。
  • 【期刊】 量子点偶联抗体型夹心免疫传感法检测心肌肌钙蛋白Ⅰ

    刊名:高等学校化学学报 作者:魏景艳 ; 宋健 ; 范佳 ; 宋大千 ; 毕丽荣 ; 周广宇 ; 张皓 ; 杨柏 关键词:心肌肌钙蛋白Ⅰ ; 特异性抗心肌肌钙蛋白Ⅰ抗体 ; 夹心免疫传感法 ; 量子点 ; 生物传感器 机构:吉林大学电子科学与工程学院 ; 吉林大学电子科学与工程学院 ; 吉林大学药学院 ; 吉林大学化学学院 ; 吉林大学中日联谊医院 年份:2009
    摘要:将纳米量子点(QD)的放大作用与夹心免疫传感技术相结合,首次应用量子点标记抗体和表面等离子体共振生物传感器(SPR)对心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)进行特异性定量检测.利用N-羟基琥珀酰(NHS)和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)将量子点偶联到cTnⅠ的单克隆抗体2F11上,再利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)验证偶联是否成功,膜印迹法证明标记后的2F11具有良好的生物学和免疫学活性,最后以蛋白A为基底膜、特异性抗心肌肌钙蛋白Ⅰ多克隆抗体为第-抗体(捕捉抗体)、QD标记的抗心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体2F11为第二抗体(检测抗体),用表面等离子体共振生物传感器构建了对心肌肌钙蛋白Ⅰ具有特异性的夹心免疫传感法,并成功用于检测心肌肌钙蛋白Ⅰ.本法的检测范围为0.4~15μg/L,检出限为0.4μg/L,较未标记夹心法和直接法分别提高了约2倍和10倍.