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  • 【期刊】 风疹病毒多表位诊断抗原的制备与评价

    刊名:病毒学报 作者:苏秋东 ; 郭敏卓 ; 邱丰 ; 贾志远 ; 卢学新 ; 孟庆玲 ; 田瑞光 ; 毕胜利 ; 伊瑶 关键词:风疹病毒 ; 多表位抗原 ; 原核表达 ; 层析纯化 ; GST标签 机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 ; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 ; 北京出入境检验检疫技术中心 年份:2016
    摘要:原核表达与层析纯化获取风疹病毒(Rubella Virus,RV)多表位诊断抗原,并初步评价其抗原性。将RV衣壳蛋白C aa 3~29、aa 96~123以及包膜糖蛋白E1aa208~247三个主要免疫显性表位串联,密码子优化后全基因合成;利用基因重组技术将多表位串联片段插入带有GST标签的表达质粒中,在大肠杆菌中进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化目的蛋白;利用Western Blot(WB)技术对目的蛋白抗原性进行鉴定,并建立RV-IgM抗体检测ELISA技术,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力。获取高度均质的RV多表位诊断抗原,WB实验表明目的蛋白不但可以被anti-GST单克隆抗体识别,还可以被anti-RV多克隆抗体、RV-IgM阳性血清相应抗体所识别。分别对48份RV急性感染病例的阳性血清、阴性血清和健康人血清进行检测,发现一致性优异。原核表达与层析纯化可以获取抗原性良好的RV多表位诊断抗原,偶联HRP后可以作为检测抗原应用于RV-IgM ELISA血清学检测中。
  • 【期刊】 风疹病毒减毒活疫苗猴体神经毒力试验

    刊名:药物评价研究 作者:葛鹏[1] ; 兰天龙[1] ; 石慧颖[2] ; 李小唤[2] ; 胡雷[1] ; 周博宇[1] ; 徐德璐[1] ; 刘艳菊[1] ; 任红梅[2] 关键词:风疹病毒减毒活疫苗 猴 神经毒力 丘脑给药 组织病理学 机构:天津药物研究院新药评价有限公司 ; 天津药物研究院新药评价有限公司 年份:2016
    摘要:目的评价风疹病毒减毒活疫苗的潜在神经毒力。方法普通级恒河猴随机分为2组,风疹病毒减毒活疫苗组10只,对照组2只,采用猴脑定位的方法将风疹病毒减毒活疫苗接种于猴两侧丘脑,对照组接种等体积生理盐水;检测血清抗体效价;并观察动物是否产生抽搐、癫痫、共济失调、震颤等神经毒力症状,以及风疹病毒减毒活疫苗对一般体征、饮食、体温的影响;风疹病毒减毒活疫苗组疫苗接种后20 d、对照组接种后31 d进行脑部及脊髓大体解剖和组织病理学检查,以评价该疫苗的神经毒力。结果猴丘脑注射疫苗后,风疹病毒减毒活疫苗组动物血清抗体效价呈阳性,免疫应答较好,对照组均呈阴性;动物未出现情绪激怒、呕吐、颈强直、抽风惊厥等神经毒力症状;动物外观、行为活动、饮食情况、体温等各方面均未见明显异常;组织病理学检查未见药物引起脑及脊髓的明显病理学改变。结论风疹病毒减毒活疫苗在猴体中不具有神经毒力。
  • 【期刊】 风疹病毒感染致极重度感音神经性聋2例

    刊名:临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 作者:马晶 ; 万浪 ; 徐芬 ; 岑瑞祥 关键词:风疹病毒 ; ; 感音神经性 年份:2015
    摘要:1病例报告例1,患儿,男,半岁,早产儿。母亲诉孕1个月余时曾出现低热、面部及后脖耳后出现少数淡红色皮疹,时间1~2d。在当地医院检查示风疹病毒的IgG和IgM均为阳性,后症状改善,未予后续随访。患儿出生时听力筛查双耳均未通过。42d听力复筛仍未通过,3个月进入听力学诊断程序。DPOAE示:双耳各频率均未记录到DPOAE。ABR示:双耳在97dBnHL刺激声下均未引出任何波形。听觉稳态
  • 【期刊】 中国大陆流行的风疹病毒的变异变迁规律研究

    刊名:病毒学报 作者:朱贞 ; 蔡茹 ; 崔爱利 ; 张燕 ; 毛乃颖 ; 许松涛 ; 姬奕昕 ; 王慧玲 ; 张盛 ; 许文波 ; 吴宏伟 关键词:风疹病毒 ; 基因型 ; 变异变迁规律 机构:安徽理工大学医学院 ; 安徽理工大学医学院 ; 北华大学附属医院 年份:2017
    摘要:从分子水平上探讨1999~2015年中国大陆流行的风疹病毒动态变异变迁规律。方法依据全国麻疹/风疹实验室网络的风疹病毒学监测数据,对1999~2015年中国流行风疹病毒进行分子进化分析。1999~2015年从全国29个省市(除新疆和西藏外)共获得风疹病毒株1737株,分属于4个基因型(1E,1F,2A和2B基因型):11E基因型风疹病毒自2001年首次分离到之后,替代1F基因型风疹病毒成为2001~2013年中国流行风疹病毒的优势基因型,并从年代上可分为两个进化分支[Cluster A(2004-2015)和Cluster B(2001-2009)],然而自2011年其检出比例逐渐下降,至2015年该比例仅为1.3%;21F基因型风疹病毒在地理上局限于中国,而在2002年之后未再监测到,推测其在中国的传播可能已被阻断;32A基因型风疹病毒株均来自于疫苗相关病例;42000~2015年间中国至少有4个不同的2B基因型风疹病毒传播链(Lineage1-4),2B基因型风疹病毒在2010年之前只有零星的流行,一直处于弱势,但自2011年输入型2B基因型风疹病毒(Lineage 3)的检出构成比逐年增高,并在2014~2015年成为中国流行风疹病毒的主要基因型。通过对中国连续16年风疹病毒变异变迁规律的研究,系统地掌握了其进化和流行规律,同时也为中国风疹控制和将来消除提供了重要的病毒学监测数据。
  • 【期刊】 2013年西安地区风疹病毒的分离与基因特征研究

    刊名:《现代检验医学杂志》 作者:吴瑞 ; 杨杨 ; 朱贞 ; 司源 ; 刘继锋 ; 马超锋 关键词:风疹病毒 ; 西安地区 ; 基因型别 ; 基因特征 机构:西安市疾病预防控制中心 ; 西安市疾病预防控制中心 ; 中国疾病预防控制中心 ; 陕西省疾病预防控制中心 年份:2015
    摘要:目的 了解西安地区风疹病毒基因特征,为风疹控制工作提供分子流行病学的基线数据.方法 采集西安地区2013年3起农村学校风疹暴发疫情中27个病例的27份咽拭子标本及6份尿液标本,利用RT-PCR法检测风疹病毒核酸,阳性者接种Vero SLAM细胞分离病毒,并利用RT-PCR方法鉴定分离到的毒株,对分离到的风疹病毒进行基因序列测定,利用BIOEDIT,MAGA6.0软件进行风疹病毒基因特征分析.结果 27份咽拭子标本中共25份风疹核酸阳性,6份尿液标本均为风疹核酸阳性;从风疹核酸阳性标本分离病毒,25份咽拭子标本和6份尿液标本分别分离到18株和5株风疹病毒株.9株测序成功,经鉴定全部属于1E型基因型.结论 2013年西安地区分离到的风疹病毒株与我国的主要基因型一致,应加强对西安地区风疹血清学诊断、病毒学和血清流行病学监测.
  • 【期刊】 2006-2015年江西省风疹病毒野毒株基因特性研究

    刊名:现代预防医学 作者:龚甜 ; 熊英 ; 张艳妮 ; 施勇 ; 周珺 关键词:风疹病毒 ; 基因特性 ; 江西省 机构:江西省疾病预防控制中心 ; 江西省疾病预防控制中心 年份:2016
    摘要:目的 研究江西省近10年风疹病毒野毒株的基因特性,为江西省的风疹防控提供技术支撑.方法 采集江西省2006-2015年风疹疑似病例咽拭子标本,用Vero/SLAM细胞对标本进行病毒分离培养,再对细胞分离物进行核酸的提取,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对细胞分离物进行风疹病毒核酸鉴定,采用RT-PCR对风疹病毒核酸检测阳性标本扩增病毒糖蛋白E1基因,对其核苷酸序列进行测定,运用生物学软件对测定序列进行处理分析.结果 江西省2006-2015年风疹病毒野毒株分属于2个基因型:1E基因型(14株)和2B基因型(20株),1E基因型为江西省2005-2013年风疹病毒流行唯一基因型,并在2015年被2B基因型替代.1E和2B基因型各毒株之间E1基因核苷酸同源性分别为97.6%~ 99.9%和99.2%~ 99.9%,与疫苗株BRDII株核苷酸同源性分别为89.4%~ 89.9%和92.6%-93.0%,氨基酸同源性为98.8%~99.6%;氨基酸序列相对保守,未发现重要抗原位点的改变.结论 1E基因型和2B基因型为江西省2006-2015年风疹病毒流行的基因型,2B基因型为2015年首次在江西省发现,并为当年的绝对优势基因型.
  • 【期刊】 半巢式PCR法在鉴定风疹病毒标本基因型中的应用

    刊名:国际病毒学杂志 作者:杜慧 ; 王伟 ; 郭玉 ; 刘岩 ; 张振国 关键词:风疹病毒 ; 基因型 ; 半巢式PCR ; 分子流行病学 ; [Key word] Rubella virus 机构:河北省疾病预防控制中心免疫规划所 ; 河北省疾病预防控制中心免疫规划所 年份:2017
    摘要:目的在无法成功分离风疹病毒的前提下鉴定风疹病毒阳性标本的基因型,从而全面完整地了解河北省风疹病毒基因型的特征.方法采用半巢式PCR法,将盲传三代风疹病毒核酸检测为阴性而咽拭子标本风疹病毒核酸检测为阳性的风疹疑似病例咽拭子标本进行核酸扩增、序列测定和分析.结果检测的11份风疹疑似病例咽拭子标本中有6份为2B基因型风疹病毒,5份为1E基因型风疹病毒,11份标本与相应的各基因型参考株同源性高,重要抗原位点未发生变异.结论使用半巢式PCR法能够成功地鉴定出盲传为阴性的风疹病毒基因型,丰富了风疹病毒基因库,并为更全面地了解河北省风疹病毒分子流行病学提供依据.
  • 【期刊】 风疹病毒E1蛋白与受体结合特定结合域的预测

    刊名:中国生物制品学杂志 作者:邢家强 ; 刘晓凡 ; 窦强 ; 林杰 ; 魏至栋 关键词:风疹病毒 ; E1蛋白 ; 三维结构 ; 同源模建 ; 分子对接 机构:兰州生物制品研究所有限责任公司 ; 兰州生物制品研究所有限责任公司 年份:2014
    摘要:目的同源模建E1蛋白及其受体髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)的三维结构,应用分子对接的方法预测E1蛋白与其受体MOG的候选结合氨基酸残基。方法采用MODELLER程序预测E1蛋白及其受体MOG的三维结构,并应用CASTp server进行活性口袋的预测;采用ProtScale进行疏水性分析,应用基于隐马尔可夫模型(HMM)算法的SMART程序搜索蛋白序列的motif;采用PyMOL-APBS软件设计E1蛋白及其受体MOG分子的腔介质结构,分析其表观静电势,应用PLATINUM程序进行分子对接,寻找其结合位点。结果 E1蛋白由3个结构域组成,其中D1、D3处于结构的底部,形成一个大的口袋,C-末端与D2的一侧形成另一个大的口袋,其余口袋主要集中在D2上半部的融合面中;MOG的结构模型为8个反平行的β折叠组成的一个β折叠桶,预测结构的主链构象的所有氨基酸均处于允许区。在MOG N-末端1~17位的氨基酸残基形成一个motif(low complexity region),46~127位的氨基酸残基形成了一个motif V型免疫球蛋白样结构域(Immunoglobulin V-Type,IGv);low complexity region段氨基酸残基表现为强疏水性。MOG N-末端的5个残基基序及ARG101~GLU107构成的β转角共同形成一个突起的结构,插入到E1蛋白的活性口袋中,与口袋中的ALA86、TYR90、TYR101、PHE102、ASN103、GLY105、SER107、TYR109、ALA122、PHE123、HIS125、SER126相互结合。结论应用计算机模拟技术预测了E1蛋白与其受体MOG结合的特定结合域,为今后进一步研究其相互作用奠定了基础。
  • 【期刊】 2013年西安地区风疹病毒的分离与基因特征研究

    刊名:现代检验医学杂志 作者:吴瑞[1] 杨杨[1] 朱贞[2] 司源[3] 刘继锋[1] 马超锋[1] 关键词:西安地区 风疹病毒 基因型别 基因特征 机构:西安市疾病预防控制中心 ; 西安市疾病预防控制中心 年份:2015
    摘要:目的 了解西安地区风疹病毒基因特征,为风疹控制工作提供分子流行病学的基线数据.方法 采集西安地区2013年3起农村学校风疹暴发疫情中27个病例的27份咽拭子标本及6份尿液标本,利用RT-PCR法检测风疹病毒核酸,阳性者接种Vero SLAM细胞分离病毒,并利用RT-PCR方法鉴定分离到的毒株,对分离到的风疹病毒进行基因序列测定,利用BIOEDIT,MAGA6.0软件进行风疹病毒基因特征分析.结果 27份咽拭子标本中共25份风疹核酸阳性,6份尿液标本均为风疹核酸阳性;从风疹核酸阳性标本分离病毒,25份咽拭子标本和6份尿液标本分别分离到18株和5株风疹病毒株.9株测序成功,经鉴定全部属于1E型基因型.结论 2013年西安地区分离到的风疹病毒株与我国的主要基因型一致,应加强对西安地区风疹血清学诊断、病毒学和血清流行病学监测.
  • 【期刊】 2013年西安地区风疹病毒的分离与基因特征研究

    刊名:现代检验医学杂志 作者:吴瑞[1] 杨杨[1] 朱贞[2] 司源[3] 刘继锋[1] 马超锋[1] 关键词:西安地区 风疹病毒 基因型别 基因特征 机构:西安市疾病预防控制中心 ; 西安市疾病预防控制中心 年份:2015
    摘要:目的 了解西安地区风疹病毒基因特征,为风疹控制工作提供分子流行病学的基线数据.方法 采集西安地区2013年3起农村学校风疹暴发疫情中27个病例的27份咽拭子标本及6份尿液标本,利用RT-PCR法检测风疹病毒核酸,阳性者接种Vero SLAM细胞分离病毒,并利用RT-PCR方法鉴定分离到的毒株,对分离到的风疹病毒进行基因序列测定,利用BIOEDIT,MAGA6.0软件进行风疹病毒基因特征分析.结果 27份咽拭子标本中共25份风疹核酸阳性,6份尿液标本均为风疹核酸阳性;从风疹核酸阳性标本分离病毒,25份咽拭子标本和6份尿液标本分别分离到18株和5株风疹病毒株.9株测序成功,经鉴定全部属于1E型基因型.结论 2013年西安地区分离到的风疹病毒株与我国的主要基因型一致,应加强对西安地区风疹血清学诊断、病毒学和血清流行病学监测.
  • 【期刊】 风疹病毒诱导细胞凋亡分子机制的研究进展

    刊名:病毒学报 作者:李振梅 ; 褚福禄 ; 刘颖 ; 王志玉 关键词:风疹病毒 ; 衣壳蛋白 ; 细胞凋亡 ; 信号通路 ; 细胞病理改变 机构:山东大学公共卫生学院 ; 山东大学公共卫生学院 ; 病毒学研究室实验畸形学教育部重点实验室 年份:2013
    摘要:风疹病毒是披膜病毒科风疹病毒属的唯一成员,能够诱导细胞发生细胞凋亡。Ras-Raf-MEK-ERK和PI3KAkt信号通路是病毒增殖与细胞生存的必要通路,在细胞凋亡过程中起着必不可少的作用。p53蛋白和TAp63蛋白能够进入细胞核与DNA特异结合,抑制Bcl-2的表达,促进Bax的表达,导致线粒体内外膜间的物质(细胞色素C等)释放,进而引起caspase级联反应,最终导致细胞凋亡。本文从风疹病毒感染的细胞系,病毒感染导致的细胞病理改变和病毒诱导的细胞凋亡信号通路及其相关因子等方面对风疹病毒诱导细胞凋亡的分子机制进行了综述。
  • 【期刊】 风疹病毒松叶株全基因序列测定与分析

    刊名:中国生物制品学杂志 作者:刘晨鸣 ; 冯德杰 ; 赵雅静 ; 魏然 ; 魏至栋 ; 高雪军 ; 朱莉萍 关键词:风疹病毒 ; 松叶株 ; 基因组 ; 序列分析 机构:兰州生物制品研究所有限责任公司 ; 兰州生物制品研究所有限责任公司 年份:2012
    摘要:目的对我国现用风疹病毒(Rubella virus,RV)疫苗生产毒株松叶株(Matsuba)进行全基因组测序,分析其在减毒过程中的遗传与变异特点,为其安全性评价及遗传学质量控制的标准化提供依据。方法利用RT-PCR法分段扩增我国现用Matsuba疫苗株主代种子基因组全序列,分别将产物插入到T-A克隆载体pGEM-T easy中,构建病毒cDNA文库,进行全基因组序列测定与分析。结果我国现用Matsuba疫苗株主代种子基因组全长9 762 nt,含2个ORF,分别位于核苷酸41~6388位和6512~9700位,编码2 116、1 062个氨基酸;与GenBank中登录的Matsuba.GMK3野毒株和Matsuba疫苗株核苷酸同源性分别为97.5%和99.9%,氨基酸同源性分别为98.8%和99.9%;其在减毒的过程中共有37个氨基酸位点发生变异,其中非结构蛋白P150有18个氨基酸位点发生突变,结构蛋白E1和E2主要抗原位点氨基酸未发生变异,E1-177位糖基化位点突变丢失。结论我国现用风疹病毒Matsuba疫苗株与同类减毒株具有较高的同源性,其主要的抗原位点在减毒保种过程中高度保守,为在分子水平上保证Matsuba株毒种及其生产疫苗的安全性提供了依据。