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  • 【期刊】 风疹病毒多表位诊断抗原的制备与评价

    刊名:病毒学报 作者:苏秋东 ; 郭敏卓 ; 邱丰 ; 贾志远 ; 卢学新 ; 孟庆玲 ; 田瑞光 ; 毕胜利 ; 伊瑶 关键词:风疹病毒 ; 多表位抗原 ; 原核表达 ; 层析纯化 ; GST标签 机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 ; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 ; 北京出入境检验检疫技术中心 年份:2016
    摘要:原核表达与层析纯化获取风疹病毒(Rubella Virus,RV)多表位诊断抗原,并初步评价其抗原性。将RV衣壳蛋白C aa 3~29、aa 96~123以及包膜糖蛋白E1aa208~247三个主要免疫显性表位串联,密码子优化后全基因合成;利用基因重组技术将多表位串联片段插入带有GST标签的表达质粒中,在大肠杆菌中进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化目的蛋白;利用Western Blot(WB)技术对目的蛋白抗原性进行鉴定,并建立RV-IgM抗体检测ELISA技术,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力。获取高度均质的RV多表位诊断抗原,WB实验表明目的蛋白不但可以被anti-GST单克隆抗体识别,还可以被anti-RV多克隆抗体、RV-IgM阳性血清相应抗体所识别。分别对48份RV急性感染病例的阳性血清、阴性血清和健康人血清进行检测,发现一致性优异。原核表达与层析纯化可以获取抗原性良好的RV多表位诊断抗原,偶联HRP后可以作为检测抗原应用于RV-IgM ELISA血清学检测中。
  • 【期刊】 2006-2015年江西省风疹病毒野毒株基因特性研究

    刊名:现代预防医学 作者:龚甜 ; 熊英 ; 张艳妮 ; 施勇 ; 周珺 关键词:风疹病毒 ; 基因特性 ; 江西省 机构:江西省疾病预防控制中心 ; 江西省疾病预防控制中心 年份:2016
    摘要:目的 研究江西省近10年风疹病毒野毒株的基因特性,为江西省的风疹防控提供技术支撑.方法 采集江西省2006-2015年风疹疑似病例咽拭子标本,用Vero/SLAM细胞对标本进行病毒分离培养,再对细胞分离物进行核酸的提取,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对细胞分离物进行风疹病毒核酸鉴定,采用RT-PCR对风疹病毒核酸检测阳性标本扩增病毒糖蛋白E1基因,对其核苷酸序列进行测定,运用生物学软件对测定序列进行处理分析.结果 江西省2006-2015年风疹病毒野毒株分属于2个基因型:1E基因型(14株)和2B基因型(20株),1E基因型为江西省2005-2013年风疹病毒流行唯一基因型,并在2015年被2B基因型替代.1E和2B基因型各毒株之间E1基因核苷酸同源性分别为97.6%~ 99.9%和99.2%~ 99.9%,与疫苗株BRDII株核苷酸同源性分别为89.4%~ 89.9%和92.6%-93.0%,氨基酸同源性为98.8%~99.6%;氨基酸序列相对保守,未发现重要抗原位点的改变.结论 1E基因型和2B基因型为江西省2006-2015年风疹病毒流行的基因型,2B基因型为2015年首次在江西省发现,并为当年的绝对优势基因型.
  • 【期刊】 风疹病毒减毒活疫苗猴体神经毒力试验

    刊名:药物评价研究 作者:葛鹏[1] ; 兰天龙[1] ; 石慧颖[2] ; 李小唤[2] ; 胡雷[1] ; 周博宇[1] ; 徐德璐[1] ; 刘艳菊[1] ; 任红梅[2] 关键词:风疹病毒减毒活疫苗 猴 神经毒力 丘脑给药 组织病理学 机构:天津药物研究院新药评价有限公司 ; 天津药物研究院新药评价有限公司 年份:2016
    摘要:目的评价风疹病毒减毒活疫苗的潜在神经毒力。方法普通级恒河猴随机分为2组,风疹病毒减毒活疫苗组10只,对照组2只,采用猴脑定位的方法将风疹病毒减毒活疫苗接种于猴两侧丘脑,对照组接种等体积生理盐水;检测血清抗体效价;并观察动物是否产生抽搐、癫痫、共济失调、震颤等神经毒力症状,以及风疹病毒减毒活疫苗对一般体征、饮食、体温的影响;风疹病毒减毒活疫苗组疫苗接种后20 d、对照组接种后31 d进行脑部及脊髓大体解剖和组织病理学检查,以评价该疫苗的神经毒力。结果猴丘脑注射疫苗后,风疹病毒减毒活疫苗组动物血清抗体效价呈阳性,免疫应答较好,对照组均呈阴性;动物未出现情绪激怒、呕吐、颈强直、抽风惊厥等神经毒力症状;动物外观、行为活动、饮食情况、体温等各方面均未见明显异常;组织病理学检查未见药物引起脑及脊髓的明显病理学改变。结论风疹病毒减毒活疫苗在猴体中不具有神经毒力。
  • 【期刊】 育龄妇女风疹病毒化学发光法检测结果分析

    刊名:《医学信息》 作者:何卫东 ; 刘明春 ; 陈秋月 ; 邱晓蔚 ; 杨宝圩 ; 蔡月真 关键词:风疹病毒 ; 化学发光免疫分析法 ; IGM ; IGG ; 育龄妇女 机构:福建省石狮市妇幼保健院检验科 ; 福建省石狮市妇幼保健院检验科 年份:2018
    摘要:目的使用化学发光免疫分析技术对孕前及孕早期育龄妇女进行风疹病毒定量检测,通过对检测结果进行分析,了解本地区孕前及孕早期妇女风疹病毒的感染状况,为制定孕前及孕早期保健措施提供依据。方法对2015年5月-2018年4月来我院进行孕前检查和孕早期建卡的1052例育龄妇女进行风疹病毒特异性抗体IgM和IgG的定量检测,并对检测结果进行统计分析。结果育龄妇女中RV-IgM总阳性率为0.86%,RV-IgG总阳性率为80.13%。曾经感染过风疹病毒或接种疫苗有保护性抗体(IgM-/IgG+)总体比例为79.46%(836/1052),对风疹病毒易感的妇女(IgM-/IgG-)总体比例为19.68%(207/1052)。孕前组及孕早期组(IgM-/IgG-)比例分别为9.20%、27.07%,总体比例为19.68%;(Ig M-/Ig G+)比例分别为89.43%、72.45%,总体比例为79.46%;(IgM+/IgG-)比例分别为0.46%、0,总体比例为0.19%;(IgM+/IgG+)比例分别为0.92%、0.49%,总体比例为0.67%。孕前组RV-IgM及RV-IgG阳性率高于孕早期组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 CLIA法对风疹病毒IgM抗体和IgG抗体的准确检测,为诊断和随访风疹病毒急性感染,评估孕前及孕早期育龄妇女的免疫状态,以及为可疑育龄妇女选择适当的预防措施提供了基本的工具和依据。RV-IgG阳性率较高,对育龄妇女具有一定的保护作用,防治重点可放于RV-IgG阴性的育龄妇女。
  • 【期刊】 风疹病毒感染致极重度感音神经性聋2例

    刊名:临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 作者:马晶 ; 万浪 ; 徐芬 ; 岑瑞祥 关键词:风疹病毒 ; ; 感音神经性 年份:2015
    摘要:1病例报告例1,患儿,男,半岁,早产儿。母亲诉孕1个月余时曾出现低热、面部及后脖耳后出现少数淡红色皮疹,时间1~2d。在当地医院检查示风疹病毒的IgG和IgM均为阳性,后症状改善,未予后续随访。患儿出生时听力筛查双耳均未通过。42d听力复筛仍未通过,3个月进入听力学诊断程序。DPOAE示:双耳各频率均未记录到DPOAE。ABR示:双耳在97dBnHL刺激声下均未引出任何波形。听觉稳态
  • 【期刊】 中国大陆流行的风疹病毒的变异变迁规律研究

    刊名:病毒学报 作者:朱贞 ; 蔡茹 ; 崔爱利 ; 张燕 ; 毛乃颖 ; 许松涛 ; 姬奕昕 ; 王慧玲 ; 张盛 ; 许文波 ; 吴宏伟 关键词:风疹病毒 ; 基因型 ; 变异变迁规律 机构:安徽理工大学医学院 ; 安徽理工大学医学院 ; 北华大学附属医院 年份:2017
    摘要:从分子水平上探讨1999~2015年中国大陆流行的风疹病毒动态变异变迁规律。方法依据全国麻疹/风疹实验室网络的风疹病毒学监测数据,对1999~2015年中国流行风疹病毒进行分子进化分析。1999~2015年从全国29个省市(除新疆和西藏外)共获得风疹病毒株1737株,分属于4个基因型(1E,1F,2A和2B基因型):11E基因型风疹病毒自2001年首次分离到之后,替代1F基因型风疹病毒成为2001~2013年中国流行风疹病毒的优势基因型,并从年代上可分为两个进化分支[Cluster A(2004-2015)和Cluster B(2001-2009)],然而自2011年其检出比例逐渐下降,至2015年该比例仅为1.3%;21F基因型风疹病毒在地理上局限于中国,而在2002年之后未再监测到,推测其在中国的传播可能已被阻断;32A基因型风疹病毒株均来自于疫苗相关病例;42000~2015年间中国至少有4个不同的2B基因型风疹病毒传播链(Lineage1-4),2B基因型风疹病毒在2010年之前只有零星的流行,一直处于弱势,但自2011年输入型2B基因型风疹病毒(Lineage 3)的检出构成比逐年增高,并在2014~2015年成为中国流行风疹病毒的主要基因型。通过对中国连续16年风疹病毒变异变迁规律的研究,系统地掌握了其进化和流行规律,同时也为中国风疹控制和将来消除提供了重要的病毒学监测数据。
  • 【期刊】 半巢式PCR法在鉴定风疹病毒标本基因型中的应用

    刊名:国际病毒学杂志 作者:杜慧 ; 王伟 ; 郭玉 ; 刘岩 ; 张振国 关键词:风疹病毒 ; 基因型 ; 半巢式PCR ; 分子流行病学 ; [Key word] Rubella virus 机构:河北省疾病预防控制中心免疫规划所 ; 河北省疾病预防控制中心免疫规划所 年份:2017
    摘要:目的在无法成功分离风疹病毒的前提下鉴定风疹病毒阳性标本的基因型,从而全面完整地了解河北省风疹病毒基因型的特征.方法采用半巢式PCR法,将盲传三代风疹病毒核酸检测为阴性而咽拭子标本风疹病毒核酸检测为阳性的风疹疑似病例咽拭子标本进行核酸扩增、序列测定和分析.结果检测的11份风疹疑似病例咽拭子标本中有6份为2B基因型风疹病毒,5份为1E基因型风疹病毒,11份标本与相应的各基因型参考株同源性高,重要抗原位点未发生变异.结论使用半巢式PCR法能够成功地鉴定出盲传为阴性的风疹病毒基因型,丰富了风疹病毒基因库,并为更全面地了解河北省风疹病毒分子流行病学提供依据.
  • 【期刊】 自发生物素化风疹病毒重组诊断抗原的制备

    刊名:中华实验和临床病毒学杂志 作者:苏秋东[1] ; 郭敏卓[2] ; 邱丰[1] ; 贾志远[1] ; 卢学新[1] ; 孟庆玲[1] ; 田瑞光[1] ; 高燕[1] ; 毕胜利[1] ; 伊瑶[1] 关键词:BirA酶底物 风疹病毒E1抗原 原核表达 生物素化抗原 机构:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室 ; 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室 年份:2016
    摘要:目的 获取原核表达过程中自发生物素化的风疹病毒(Rubella Virus,RV)重组抗原E1(RV-E1),并初步评价其抗原性.方法 将2×BirA酶底物(BSP)插入到RV-E1抗原优势表位区域aa 148-295的羧基端,硫氧还蛋白(Thioredoxin,TRX)插入到RV-E1的氨基端,密码子优化后全基因合成;在大肠埃希进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化获取生物素化的RV-E1抗原;利用Western Blotting技术对目的蛋白进行鉴定,并建立风疹病毒IgM抗体检测方法,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力.结果 获取高度均质的生物素化的可溶性RV-E1抗原,WB实验表明目的蛋白不但可以被RV-E1抗原和TRX抗原单克隆抗体识别,而且可以被标记HRP的链霉亲和素所识别.分别对50份风疹病毒感染阳性血清、阴性血清和健康人血清进行检测,发现一致性优异.结论 RV-E1诊断抗原携带BSP,可以在大肠埃希菌表达过程中自发共价结合生物素分子,并可以作为新型诊断抗原应用于生物素-亲和素ELISA血清学检测中.
  • 【期刊】 2013年西安地区风疹病毒的分离与基因特征研究

    刊名:《现代检验医学杂志》 作者:吴瑞 ; 杨杨 ; 朱贞 ; 司源 ; 刘继锋 ; 马超锋 关键词:风疹病毒 ; 西安地区 ; 基因型别 ; 基因特征 机构:西安市疾病预防控制中心 ; 西安市疾病预防控制中心 ; 中国疾病预防控制中心 ; 陕西省疾病预防控制中心 年份:2015
    摘要:目的 了解西安地区风疹病毒基因特征,为风疹控制工作提供分子流行病学的基线数据.方法 采集西安地区2013年3起农村学校风疹暴发疫情中27个病例的27份咽拭子标本及6份尿液标本,利用RT-PCR法检测风疹病毒核酸,阳性者接种Vero SLAM细胞分离病毒,并利用RT-PCR方法鉴定分离到的毒株,对分离到的风疹病毒进行基因序列测定,利用BIOEDIT,MAGA6.0软件进行风疹病毒基因特征分析.结果 27份咽拭子标本中共25份风疹核酸阳性,6份尿液标本均为风疹核酸阳性;从风疹核酸阳性标本分离病毒,25份咽拭子标本和6份尿液标本分别分离到18株和5株风疹病毒株.9株测序成功,经鉴定全部属于1E型基因型.结论 2013年西安地区分离到的风疹病毒株与我国的主要基因型一致,应加强对西安地区风疹血清学诊断、病毒学和血清流行病学监测.
  • 【期刊】 风疹病毒IgG抗体检测试剂盒国家监督抽验工作

    刊名:中国药事 作者:曲守方 ; 黄杰 ; 于婷 关键词:监督抽验 ; 风疹病毒IgG抗体 ; 参考品 ; 酶联免疫法 ; 化学发光法 ; 准确性 ; 特异性 ; 检测限 机构:中国食品药品检定研究院 ; 中国食品药品检定研究院 年份:2017
    摘要:目的:按照国家体外诊断试剂抽验工作方案,评价风疹病毒IgG抗体检测试剂盒(酶联免疫法和化学发光法)的质量.方法:分别使用风疹病毒IgG抗体国家参考品和企业参考品对抽验的试剂盒进行准确性、特异性、检测限和重复性项目检测.结果:使用企业参考品按照产品注册标准进行检测,17批次试剂盒的抽验合格为16批.使用国家参考品检测,检验合格为10批,其中6批次试剂盒将国家阴性参考品检测为阳性,1批次试剂盒将国家检测限参考品检测为可疑.结论:使用国家参考品和企业参考品产生了抽验结果差异,建议在今后国家体外诊断试剂监督抽验工作中,继续探讨使用国家参考品作为统一的评判标准,以加强相关产品的监管工作.
  • 【期刊】 风疹病毒E1蛋白与受体结合特定结合域的预测

    刊名:中国生物制品学杂志 作者:邢家强 ; 刘晓凡 ; 窦强 ; 林杰 ; 魏至栋 关键词:风疹病毒 ; E1蛋白 ; 三维结构 ; 同源模建 ; 分子对接 机构:兰州生物制品研究所有限责任公司 ; 兰州生物制品研究所有限责任公司 年份:2014
    摘要:目的同源模建E1蛋白及其受体髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)的三维结构,应用分子对接的方法预测E1蛋白与其受体MOG的候选结合氨基酸残基。方法采用MODELLER程序预测E1蛋白及其受体MOG的三维结构,并应用CASTp server进行活性口袋的预测;采用ProtScale进行疏水性分析,应用基于隐马尔可夫模型(HMM)算法的SMART程序搜索蛋白序列的motif;采用PyMOL-APBS软件设计E1蛋白及其受体MOG分子的腔介质结构,分析其表观静电势,应用PLATINUM程序进行分子对接,寻找其结合位点。结果 E1蛋白由3个结构域组成,其中D1、D3处于结构的底部,形成一个大的口袋,C-末端与D2的一侧形成另一个大的口袋,其余口袋主要集中在D2上半部的融合面中;MOG的结构模型为8个反平行的β折叠组成的一个β折叠桶,预测结构的主链构象的所有氨基酸均处于允许区。在MOG N-末端1~17位的氨基酸残基形成一个motif(low complexity region),46~127位的氨基酸残基形成了一个motif V型免疫球蛋白样结构域(Immunoglobulin V-Type,IGv);low complexity region段氨基酸残基表现为强疏水性。MOG N-末端的5个残基基序及ARG101~GLU107构成的β转角共同形成一个突起的结构,插入到E1蛋白的活性口袋中,与口袋中的ALA86、TYR90、TYR101、PHE102、ASN103、GLY105、SER107、TYR109、ALA122、PHE123、HIS125、SER126相互结合。结论应用计算机模拟技术预测了E1蛋白与其受体MOG结合的特定结合域,为今后进一步研究其相互作用奠定了基础。
  • 【期刊】 2013年西安地区风疹病毒的分离与基因特征研究

    刊名:现代检验医学杂志 作者:吴瑞[1] 杨杨[1] 朱贞[2] 司源[3] 刘继锋[1] 马超锋[1] 关键词:西安地区 风疹病毒 基因型别 基因特征 机构:西安市疾病预防控制中心 ; 西安市疾病预防控制中心 年份:2015
    摘要:目的 了解西安地区风疹病毒基因特征,为风疹控制工作提供分子流行病学的基线数据.方法 采集西安地区2013年3起农村学校风疹暴发疫情中27个病例的27份咽拭子标本及6份尿液标本,利用RT-PCR法检测风疹病毒核酸,阳性者接种Vero SLAM细胞分离病毒,并利用RT-PCR方法鉴定分离到的毒株,对分离到的风疹病毒进行基因序列测定,利用BIOEDIT,MAGA6.0软件进行风疹病毒基因特征分析.结果 27份咽拭子标本中共25份风疹核酸阳性,6份尿液标本均为风疹核酸阳性;从风疹核酸阳性标本分离病毒,25份咽拭子标本和6份尿液标本分别分离到18株和5株风疹病毒株.9株测序成功,经鉴定全部属于1E型基因型.结论 2013年西安地区分离到的风疹病毒株与我国的主要基因型一致,应加强对西安地区风疹血清学诊断、病毒学和血清流行病学监测.
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