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  • 【期刊】 嗜热链球菌KLDSSM胞外多糖生物合成途径的分析

    刊名:食品工业科技 作者:霍贵成 ; 丁秀云 ; 蒙月月 ; 李柏良 关键词:嗜热链球菌KLDS SM ; 糖转运系统 ; 糖核苷酸 ; EPS基因簇 ; 生物信息分析 机构:东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 ; 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 年份:2017
    摘要:为了从遗传水平上探究嗜热链球菌KLDS SM合成胞外多糖(EPS)的能力,本研究从糖被转运进入胞内、糖核苷酸合成及EPS基因簇三方面所涉及的基因进行了相关分析。结果发现,该菌能够转运葡萄糖、乳糖、蔗糖、海藻糖及甘露糖5种糖,具有代谢葡萄糖、乳糖、果糖、蔗糖、海藻糖与甘露糖形成糖酵解中间代谢产物的酶类,拥有合成EPS前体物质UDP-葡萄糖、UDP-半乳糖、UDP-N-乙酰基葡糖胺、UDP-呋喃半乳糖与d TDP-鼠李糖的潜力。同时序列比对分析发现该菌具有一个与高产EPS的菌株ASCC 1275一致性极高的EPS基因簇,且EPS初步产量测定约为331 mg/m L,表明该菌是一株高产EPS潜力菌株,具有较大的应用潜能。
  • 【期刊】 乳酸菌联合酵母菌发酵制备一种新型沙棘酒

    刊名:中国酿造 作者:霍贵成 ; 徐敏 ; 杜金城 ; 丁秀云 ; 于上富 关键词:乳酸菌 ; 酵母 ; 沙棘酒 ; 发酵 机构:东北农业大学食品学院 ; 东北农业大学食品学院 年份:2016
    摘要:该试验采用生物降酸的方式,利用乳酸菌联合酵母的发酵方法,克服传统果酒发酵时间长、发酵不易控制、风味较差等缺点,制备一种新型的适合大众饮用的沙棘酒。通过单因素及正交试验研究接菌量(乳酸菌/酵母菌)、发酵温度及发酵时间对沙棘酒品质的影响。结果表明,当接菌比例(乳酸菌/酵母菌)为3%∶5%,发酵温度为30℃,发酵时间为96 h时,所制的沙棘酒感官评分为93分。
  • 【期刊】 10株乳酸杆菌吸附铅离子及抗氧化能力的比较

    刊名:食品工业科技 作者:霍贵成 ; 于上富 ; 靳妲 ; 丁秀云 ; 徐敏 关键词:氧化损伤 ; 乳杆菌 ; 抗氧化性 ; 生物吸附 机构:东北农业大学食品学院 ; 东北农业大学食品学院 ; 乳品科学教育部重点实验室 年份:2016
    摘要:为了筛选出高吸附铅离子且具高抗氧化能力的菌株,本文对10株乳杆菌进行了铅离子吸附研究,以DPPH·清除力、还原能力、羟自由基清除及抗脂质过氧化能力为指标进行了体外抗氧化能力的评定。结果表明:不同乳杆菌之间的清除铅离子能力不同,抗氧化能力也不相同,其中德式乳杆菌保加利亚亚种KLDS1.0207具有高吸附铅离子和高抗氧化能力,该菌株铅离子去除率达79.18%,还原能力达99.00μmol/L的半胱氨酸当量,DPPH·清除率为50.40%,羟自由基清除率26.88%,抗脂质过氧化能力达15.62%。此菌株可用于体内缓解铅中毒造成的氧化损伤的研究。
  • 【期刊】 基于基因水平研究乳酸乳球菌的有氧呼吸代谢

    刊名:现代食品科技 作者:霍贵成 ; 刘飞 ; 李柏良 ; 杜金城 ; 于上富 ; 丁秀云 ; 徐敏 关键词:乳酸乳球菌 血红素 有氧呼吸链 同源性 细胞色素氧化酶 机构:东北农业大学 ; 东北农业大学 ; 乳品科学教育部重点实验室 年份:2016
    摘要:本研究旨在对能和不能有氧呼吸代谢的乳酸乳球菌呼吸链基因同源性和细胞色素氧化酶活力进行分析,为确定乳酸乳球菌的有氧呼吸必要条件奠定基础。首先,分别测定已筛选到的菌株KLDS4.0325和KLDS4.1102在发酵和有氧呼吸代谢时的生长曲线;其次,提取KLDS4.1102的基因组DNA,随后利用PCR扩增其呼吸链编码基因并进行DNA测序;最后,从GenBank数据库下载KLDS4.0325的呼吸链编码基因序列,利用DNAMAN软件比较这两株菌呼吸链编码基因的同源性,并测定这两株菌的细胞色素氧化酶活性。结果表明在有氧呼吸条件下KLDS4.0325的生物量和pH都显著增大,而KLDS4.1102在两种条件下呈现一致的生长趋势,呼吸链编码基因的同源性分析显示KLDS4.1102具备完整的呼吸链,而酶活测定结果却显示KLDS4.1102无细胞色素氧化酶活性,这表明KLDS4.1102不能进行有氧呼吸代谢不是由于编码基因缺陷造成的,可能是某些编码基因不能正常表达,导致其细胞色素氧化酶不能正常发挥作用。
  • 【期刊】 嗜热链球菌CRISPR序列的检测及原间隔序列预测

    刊名:现代食品科技 作者:霍贵成 ; 李婉 ; 王娜娜 ; 张丹青 关键词:嗜热链球菌 同源性 重复序列 间隔序列 机构:东北农业大学 ; 东北农业大学 ; 乳品科学教育部重点实验室 年份:2016
    摘要:CRISPR基因座中的间隔序列能够提供特异性免疫使宿主得以对抗那些携带相同序列的入侵元件,本研究旨在预测实验室3株嗜热链球菌的原间隔序列,为探究其抗噬菌体机制奠定基础。本文检测了3株嗜热链球菌的CRISPR序列,预测嗜热链球菌CRISPR基因座的活性,构建重复序列的系统发育树,并对间隔序列进行同源性分析。结果显示供试菌S0含有3个CRISPR,S4仅含1个CRISPR,79含有4个CRISPR,CRISPR1基因座活性最高,CRISPR2基因座最不活跃。重复序列与标准菌株的相应重复序列高度保守,不同CRISPR的间隔序列在内容及数目上高度可变,它们的原间隔序列绝大部分来源于噬菌体,少数来源于质粒或染色体序列。供试菌79与嗜热链球菌MN-BM-A02及嗜热链球菌ASCC 1275的4个CRISPR序列均高度一致,推测其菌株同源性较高。验证了间隔序列是由宿主遭受噬菌体等外源基因元件侵染而获得的。
  • 【期刊】 粪便微生物粗提液修复溃疡性结肠炎的研究

    刊名:食品工业科技 作者:霍贵成 ; 徐敏 ; 边鑫 ; 杜金城 ; 丁秀云 ; 于上富 关键词:粪便微生物粗提液 ; 溃疡性结肠炎 ; 结肠 ; 血清 机构:东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 ; 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 年份:2016
    摘要:研究了粪便微生物粗提液对溃疡性结肠炎修复作用的影响。将64只健康小鼠随机分为4组,即完全空白组(n=20)、肠炎空白组(n=20)、SASP(柳氮硫胺吡啶)组(n=12)和FMT(粪便微生物移植)组(n=12),处理组小鼠自由饮用3%葡聚糖硫酸钠盐(DSS)溶液8 d,建立溃疡性结肠炎(UC)模型,并于建模第8 d,解剖完全空白组、肠炎空白组小鼠各8只,以验证UC模型是否建立成功。造模后,SASP组、FMT组同时分别给予柳氮硫胺吡啶片及鼠源粪便微生物提取液干预治疗4周,灌胃频率2 d/次,然后进行为期两周的后续观察,期间观察各组小鼠表观状态、体重变化,结肠组织长度变化,结肠组织病理学改变,并测定各组血清IL-1β、IL-6、TNF-α的浓度变化。结果表明:与肠炎空白组小鼠相比,粪便微生物移植疗法使小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低(p<0.05),并使结肠长度及体重显著增加,结肠组织更加完整。因此证实,粪便微生物提取液对溃疡性结肠炎具有较好的治疗作用,具有应用于临床医学的潜力。
  • 【期刊】 牛初乳生长因子粗提物修复溃疡性结肠炎的研究

    刊名:中国乳品工业 作者:霍贵成 ; 刘宾 ; 王晓明 ; 曹凤波 ; 周晶 ; 杨丽杰 关键词:初乳 ; 生长因子 ; 溃疡性结肠炎 ; 二胺氧化酶 ; D-乳酸 机构:东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 ; 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 年份:2015
    摘要:研究了牛初乳生长因子粗提物对溃疡性结肠炎修复作用影响。实验设正常对照组,模型对照组,SASP(柳氮磺胺吡啶)组和初乳生长因子粗提物治疗组。后3组大鼠自由饮用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液7 d,建立UC模型。造模后,后2组同时分别给予柳氮磺胺吡啶及牛初乳生长因子粗提物干预治疗7天。期间观察3th,5th,7th天大鼠疾病活动指数(DAI),结肠组织病理形态学改变,测定大鼠血浆二胺氧化酶(DAO)活性和血浆D-乳酸浓度变化。结果表明:与模型组相比,SASP组和治疗组大鼠DAI评分、DAO活性、D-乳酸含量显著下降,结肠及其黏膜质量显著增加,结肠组织形态更加完整。与对照组相比,SASP组和治疗组大鼠各项指标都得到显著性恢复。因此证实,牛初乳生长因子粗提物对溃疡性结肠炎具有治疗作用。
  • 【期刊】 高产纯L-乳酸的乳酸乳球菌的发酵条件探究

    刊名:食品工业 作者:霍贵成 ; 周颖 ; 高晓峰 关键词:L-乳酸 ; 光学纯度 ; 发酵条件 机构:东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 ; 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 年份:2015
    摘要:为了研究一株分离自新疆牧民家庭自制酸马奶中的乳酸乳球菌KLDS4.0325产L-乳酸的能力,以L-/D-乳酸试剂盒验证该菌种在发酵过程中L-乳酸的光学纯度为100%。在已优化的培养基上,进行产酸条件的探究,研究发现该菌株在最适发酵温度为33℃,最适p H 8.0,最佳发酵转速为120 r/min,在24 h产酸量达到最大值。
  • 【期刊】 测定三种乳蛋白抗原性间接竞争ELISA法的建立

    刊名:食品工业 作者:霍贵成 ; 李媛媛 ; 刘宾 ; 曹凤波 ; 王晓明 关键词:αs-酪蛋白 ; β-乳球蛋白 ; 牛血清白蛋白 ; 间接竞争ELISA ; 致敏性 机构:乳品科学教育部重点实验室 ; 乳品科学教育部重点实验室 年份:2015
    摘要:为检测牛乳中主要致敏蛋白的抗原性,以商业兔抗αs-酪蛋白、兔抗β-乳球蛋白、兔抗牛血清白蛋白(BSA)多克隆抗体为一抗,标记HRP的羊抗兔Ig G为二抗,TMB为底物,对牛乳中主要致敏蛋白:αs-酪蛋白、β-乳球蛋白、BSA建立间接竞争ELISA(ic ELISA)。结果表明,αs-酪蛋白、β-乳球蛋白及BSA抗原包被质量浓度分别为5,2和2μg/m L。一抗最佳稀释倍数分别为1∶800,1∶400和1∶300。建立的三种蛋白的ic ELISA的线性检测范围分别为15.625~1 000 ng/m L、31.25~1 000 ng/m L和62.5~2 000 ng/m L。三种乳蛋白包被条件均为4℃,12 h,酶标二抗的最佳稀释倍数为1∶1 200,以1%的明胶作为封闭液。三种乳蛋白ic ELISA的3个浓度添加试验的批内及批间最大变异率分别为5.16%,7.46%,6.6%和6.78%,6.81%,6.06%,三种蛋白建立的ic ELISA回收率在94.34%~109.92%。表明所建立的方法重复性好,灵敏度高,可用于牛乳中此三种蛋白致敏性的测定。
  • 【期刊】 多菌种共固定化发酵制备枸杞红枣乳酸饮料

    刊名:中国酿造 作者:霍贵成 ; 徐敏 ; 田辉 ; 杜金城 ; 丁秀云 ; 于上富 关键词:固定化 ; 乳酸菌 ; 枸杞 ; 红枣 ; 乳酸饮料 机构:东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 ; 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 年份:2015
    摘要:该研究以枸杞汁和红枣汁为主要原料,采用海藻酸钠包埋乳酸菌的发酵方式,采用多菌种共固定化发酵制备枸杞红枣乳酸饮料。结果表明,最佳条件为枸杞汁、红枣汁体积比1∶2,氯化钙物质的量浓度0.05 mol/L,海藻酸钠质量分数7%,接种量10%,发酵时间35 h,蔗糖添加量9%,添加甜味剂、乳酸钙等辅料,可调配成酸甜可口、营养丰富的枸杞红枣乳酸饮料;该研究为工业化生产品质优良的乳酸饮料提供理论依据,并且对提高水果产业的附加值具有十分重要的现实意义。
  • 【期刊】 乳酸杆菌对感染大肠杆菌小鼠肠黏膜免疫的影响

    刊名:中国乳品工业 作者:霍贵成 ; 周晶 ; 周颖 ; 曹凤波 ; 刘宾 关键词:副干酪乳杆菌 ; 植物乳杆菌 ; 大肠杆菌 ; s Ig A ; 细胞因子 机构:东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 ; 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 年份:2015
    摘要:分析了小鼠感染大肠杆菌O157:H7及补充副干酪乳杆菌KLDS1.0351和植物乳杆菌KLDS1.0986后小鼠肠粘膜中细胞因子IL-2、IL-6、IFN-γ及s Ig A的变化,结合小鼠的表观特征探究两株乳酸杆菌对大肠杆菌引起的疾病的治疗作用。将小鼠分为空白组、对照组、KLDS1.0351和KLDS1.0986,建立大肠杆菌模型成功后,再连续补充两株乳酸杆菌一周,采集小肠用ELISA试剂盒测定上述3种细胞因子及s Ig A的质量浓度。结果表明:KLDS1.0351和KLDS1.0986能够提高感染大肠杆菌小鼠的体质量;感染大肠杆菌后,s Ig A和IL-6在第5天达到最大值,第7天开始下降,IFN-γ和IL-2在第3天达到最大值,在第5天开始下降。补充两株乳酸杆菌后,3种细胞因子和s Ig A的质量浓度升高,且与其他两组差异显著。本试验证实KLDS1.0351和KLDS1.0986能对大肠杆菌感染引起的腹泻和体质量减轻起到缓解的作用,两株菌株能显著促进感染大肠杆菌小鼠肠粘膜中IFN-γ、IL-2、IL-6及肠道中s Ig A的分泌,提高机体免疫力。
  • 【期刊】 L-乳酸脱氢酶基因在乳酸乳球菌KLDS4.0325中的表达

    刊名:现代食品科技 作者:霍贵成 ; 周颖 ; 高晓峰 ; 刘飞 ; 谷春涛 关键词:乳酸乳球菌KLDS4.0325 ; L-乳酸脱氢酶基因 ; 基因表达 机构:东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 ; 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室 年份:2015
    摘要:本文研究了在m RNA转录水平上三种L-乳酸脱氢酶基因在乳酸乳球菌KLDS4.0325不同生长阶段的表达情况。以16s r RNA作为内参基因,应用实时荧光定量PCR技术测定不同生长阶段的菌体中L-乳酸脱氢酶基因(ldh、ldh X和ldh B)表达的动态变化规律。该菌株的生长曲线呈S型,培养2~6 h为菌体的生长对数期,随后进入稳定期。生长曲线的测定表明该菌株生长力极其旺盛;16s r RNA、ldh、ldh X和ldh B基因的扩增效率曲线显示,内参基因与目的基因的扩增效率一致且接近100%,这说明利用相对荧光定量法能够较好的反应目的基因的表达量;ldh、ldh X和ldh B基因在菌体生长的3个时间点(6 h、9 h和12 h)都有一定量的表达,随着菌体的不断生长,基因表达的变化均呈现显著性上升趋势,且上升幅度不断增加,在12 h时基因表达量达到最大值。其中ldh基因在的表达量在菌体生长的3个时间点存在显著性差异,而ldh X、ldh B基因的表达量存在极显著差异。
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