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  • 【期刊】 过表达胡杨PeRIN4基因拟南芥提高质膜H~+-ATPase活性和耐盐性

    刊名:北京林业大学学报 作者:陈少良 ; 张一南 ; 王洋 ; 张会龙 ; 尧俊 ; 邓佳音 ; 赵瑞 ; 沈昕 关键词:胡杨 ; 耐盐性 ; 质膜H+-ATPase ; RIN4蛋白 ; 转基因拟南芥 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 年份:2017
    摘要:本文克隆了RIN4(RPM1-interacting protein 4)在胡杨中的同源基因PeRIN4,并在拟南芥中进行过表达,通过研究转基因株系的耐盐表型、质膜H~+-ATPsae活性及H~+、Na~+、K~+等的动态离子流,揭示了PeRIN4基因在植物响应和适应盐胁迫环境中的作用。利用定位载体p Green0029-PeRIN4-GFP瞬时转化拟南芥叶肉细胞原生质体的方法,对胡杨PeRIN4蛋白进行亚细胞定位,发现该蛋白定位在细胞的胞质中。耐盐表型实验结果显示,在100 mmol/L NaCl处理下,拟南芥PeRIN4过表达株系(OE1和OE8)的生存率和根长均明显高于野生型(WT)和转空载体拟南芥(VC),说明PeRIN4基因能够提高拟南芥的耐盐性。与WT和VC相比,拟南芥PeRIN4过表达株系质膜H~+-ATPsae的活性较高。动态离子流数据显示,在盐胁迫下,PeRIN4过表达株系外排H~+和Na~+离子的能力强于野生型和转空载体拟南芥,然而K+的外流却弱于WT和VC。因此,PeRIN4蛋白具有调节质膜H~+-ATPsae活性的功能。拟南芥质膜H~+-ATPsae活性的提高主要有两方面的作用:一是可以增强H+泵的质子动力势,驱动Na~+/H~+逆向转运蛋白,提高Na~+外排的能力;二是抑制质膜的去极化,减少K+离子通过去极化激活的外向型K~+通道(DA-KORCs)和非选择性阳离子通道(DA-NSCCs)外流,维持了K~+/Na~+平衡,从而提高PeRIN4转基因拟南芥的耐盐性。
  • 【期刊】 胡杨PeAPY1和PeAPY2调控拟南芥耐盐机制研究

    刊名:北京林业大学学报 作者:陈少良 ; 邓佳音 ; 张艳丽 ; 张一南 ; 赵瑞 ; 李金克 ; 周晓阳 ; 刘香芬 关键词:PeAPY1 ; PeAPY2 ; 盐胁迫 ; 膜透性 ; 胞外ATP ; H2O2 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学分析测试中心 ; 河北石家庄市城市水系管理处 年份:2017
    摘要:本文研究了胡杨apyrase基因(Pe APY1和Pe APY2)对植物耐盐性的影响。以Pe APY1和Pe APY2过表达拟南芥、拟南芥Atapy1和Atapy2突变体、野生型(WT)拟南芥及空载体(VC)为实验材料,研究盐胁迫条件下的植物根长、相对电导率、细胞活力、H_2O_2水平、eATP浓度、抗氧化酶活性的变化。研究结果显示:低盐浓度(50 mmol/L NaCl)对拟南芥各基因型的生长和生理生化指标没有显著影响;而高盐浓度(100 mmol/L NaCl)抑制了各株系的根长生长、细胞活力和抗氧化酶(超氧化物歧化酶/SOD、抗坏血酸过氧化酶/APX、过氧化氢酶/CAT)活性,却提高了相对电导率、H_2O_2水平和eATP浓度。但与Atapy突变体株系相比较,Pe APY过表达株系受高盐胁迫的影响较小。主要是由于Pe APY1/2的过表达提高了apyrase酶活,下调了eATP浓度及其诱发的活性氧水平,同时,过表达株系还通过保持抗氧化酶活性来抑制H_2O_2的水平,从而降低活性氧及其对膜脂的过氧化,保持了膜的稳定性、细胞活力和生长,最终提高了植物耐盐性。
  • 【专利】 一种重型工程用低平板车的牵引结构

    作者:陈少良 ; 陈广 年份:2018
    摘要:本发明公开了一种重型工程用低平板车的牵引结构,包括十字连接轴,所述十字连接轴的顶部活动连接有托板,并且托板的顶部贯穿有牵引销,所述牵引销延伸至托板底部的一端贯穿十字连接轴并延伸至十字连接轴的内部,所述十字连接轴的顶端和底部分别固定第一车头连接座和第二车头连接座,所述十字连接轴左端的表面固定连接有车身连接座,本发明涉及低平板车技术领域。该重型工程用低平板车的牵引结构,能够很好的进行牵引,大大的提高了装置的牵引效果,能够有效的降低十字连接轴与连接座之间的摩擦,避免了灰尘进入到耐磨隔套的内部,增加了整体的使用寿命,避免了给使用者带来的损失,便于使用者进行使用,安全可靠。
  • 【专利】 一种重型工程用低平板车

    作者:陈少良 ; 陈广 年份:2018
    摘要:本发明公开了一种重型工程用低平板车,包括车身,所述车身的顶部从左到右分别固定连接有左梁总成、中间梁总成和右梁总成,所述车身的顶部固定连接有第一护栏,所述车身的一端通过连接架固定连接有鹅颈车头,所述车身顶部的一侧固定连接有尾部连接架,所述尾部连接架的两侧均设置有旋转轴套,所述尾部连接架的顶部固定连接有翻板总成,本发明涉及技术领域。该重型工程用低平板车,车架主体材料采用高强钢材料,为车架整体载荷奠定基础,体积大,结构稳定性强,车尾悬架结构特殊设计,设计成独立部件,通过设计的液压系统可以使翻板总成打开,降落到地面,并与地面形成一定的角度,工作强度小,工作效率高。
  • 【期刊】 外生菌根真菌Paxillus involutus吸收Cd2+及H2O2对Cd2+内流的调控作用

    刊名:北京林业大学学报 作者:陈少良 ; 朱智梅 ; 张玉红 ; 撒刚 ; 刘建 ; 马旭君 ; 邓晨 ; 赵瑞 关键词:Paxillus involutus ; MAJ ; NAU ; 镉胁迫 ; Ca2+通透性离子通道 ; 非损伤微测技术 ; 离子流 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 年份:2018
    摘要:[目的]本文研究了外生菌根真菌Paxillus involutus对Cd2+的吸收作用以及H2O2对Cd2+内流的调控作用.[方法]以Paxillus involutus的2种菌株MAJ和NAU为研究材料,利用50μmol/L CdCl2对材料进行24 h处理,应用非损伤微测技术测定菌丝的Cd2+和Ca2+离子流.[结果]结果显示,Cd2+处理后,MAJ和NAU菌丝的Cd2+内流增强,同时也显著促进了Ca2+的内流.Ca2+通道抑制剂(Verapamil、GdCl3、TEA)处理后,Cd2+和Ca2+内流强度均明显减弱,表明Cd2+是通过钙通透性离子通道(CaPCs)进入菌丝细胞的.Cd2+处理促进了Cd2+和Ca2+的内流,很可能是Cd2+激活了菌丝质膜的CaPCs.Ca2+和Cd2+的竞争性实验结果显示,高浓度的Ca2+抑制菌株MAJ和NAU的Cd2+内流;反过来,测试液中Cd2+浓度的提高也明显降低了Ca2+的内流强度,这证明Ca2+和Cd2+是竞争性地通过CaPCs进入菌丝细胞的.此外还发现,H2O2(1.0 mmol/L)能增强菌丝的Cd2+和Ca2+内流,而ROS清除剂DMTU却显著抑制了菌株对Ca2+和Cd2+的吸收,表明H2 O2在调控菌丝细胞CaPCs介导Cd2+内流的过程中具有重要作用.[结论]综上,外生菌根真菌Paxillus involutus对Cd2+具有富集作用并且可以通过H2O2激活CaPCs促进Cd2+内流.
  • 【期刊】 外生菌根真菌Paxillus involutus吸收Cd2+及H2O2对Cd2+内流的调控作用

    刊名:北京林业大学学报 作者:陈少良 ; 朱智梅 ; 张玉红 ; 撒刚 ; 刘建 ; 马旭君 ; 邓晨 ; 赵瑞 关键词:Paxillus ; involutus ; MAJ ; NAU ; 镉胁迫 ; Ca2+通透性离子通道 ; 非损伤微测技术 ; 离子流 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 年份:2018
    摘要:【目的】本文研究了外生菌根真菌Paxillus involutus对Cd2+的吸收作用以及H2O2对Cd2+内流的调控作用。【方法】以Paxillus involutus的2种菌株MAJ和NAU为研究材料,利用50μmol/L Cd Cl2对材料进行24 h处理,应用非损伤微测技术测定菌丝的Cd2+和Ca2+离子流。【结果】结果显示,Cd2+处理后,MAJ和NAU菌丝的Cd2+内流增强,同时也显著促进了Ca2+的内流。Ca2+通道抑制剂(Verapamil、Gd Cl3、TEA)处理后,Cd2+和Ca2+内流强度均明显减弱,表明Cd2+是通过钙通透性离子通道(Ca PCs)进入菌丝细胞的。Cd2+处理促进了Cd2+和Ca2+的内流,很可能是Cd2+激活了菌丝质膜的Ca PCs。Ca2+和Cd2+的竞争性实验结果显示,高浓度的Ca2+抑制菌株MAJ和NAU的Cd2+内流;反过来,测试液中Cd2+浓度的提高也明显降低了Ca2+的内流强度,这证明Ca2+和Cd2+是竞争性地通过Ca PCs进入菌丝细胞的。此外还发现,H2O2(1.0 mmol/L)能增强菌丝的Cd2+和Ca2+内流,而ROS清除剂DMTU却显著抑制了菌株对Ca2+和Cd2+的吸收,表明H2O2在调控菌丝细胞Ca PCs介导Cd2+内流的过程中具有重要作用。【结论】综上,外生菌根真菌Paxillus involutus对Cd2+具有富集作用并且可以通过H2O2激活Ca PCs促进Cd2+内流。
  • 【期刊】 胡杨PeREM1.3过表达提高烟草耐盐性的机制

    刊名:北京林业大学学报 作者:陈少良 ; 张会龙 ; 武霞 ; 尧俊 ; 赵楠 ; 赵瑞 ; 李金克 ; 沈昕 关键词:胡杨 ; remorin蛋白 ; 抗盐性 ; 活性氧 ; 转基因烟草 机构:北京林业大学林木分子设计育种高精尖创新中心北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学林木分子设计育种高精尖创新中心北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学实验室与设备管理处 年份:2019
    摘要:【目的】盐害作为一类非生物胁迫严重危害了农作物的生存以及产量。Remorin作为一类植物特有的蛋白质在植物适应环境过程中具有重要功能。本研究克隆了胡杨remorin蛋白PeREM1. 3的编码基因PeREM1. 3,并研究PeREM1. 3基因在植物耐盐性中的作用。【方法】笔者将基因构件35S::PeREM1. 3转入模式植物烟草中,在盐胁迫条件下,通过生理生化的方法对表达PeREM1. 3的转基因烟草进行基因功能的分析。【结果】研究显示PeREM1. 3蛋白定位于细胞质膜上,其编码基因PeREM1. 3的开放阅读框(ORF)长600 bp,编码199个氨基酸。胡杨中PeREM1. 3能够响应盐胁迫和渗透胁迫表达上调。结果表明,在烟草中过表达PeREM1. 3明显地提高了耐盐性。过表达PeREM1. 3的烟草转基因株系中抗氧化物酶如SOD、POD和CAT活性显著提高,降低了活性氧水平,调控活性氧平衡。另外植物抗逆相关基因SOS1、HAK、NHA1、VAG1和PMA4的转录水平显著增高,调控K~+/Na~+平衡。【结论】这些结果说明PeREM1. 3蛋白通过维持植物的活性氧平衡和K~+/Na~+平衡来提高植物的耐盐性。
  • 【期刊】 胡杨PeSOS1对拟南芥盐诱导H2O2信号途径的调控

    刊名:《西北农林科技大学学报:自然科学版》 作者:陈少良 ; 王美娟 ; 王洋 ; 申泽丹 ; 马旭君 ; 撒刚 ; 邓澍荣 ; 刘丹丹 ; 张玉红 ; 沈昕 关键词:胡杨 ; 盐胁迫 ; 转基因拟南芥 ; 质膜Na+/H+逆向转运蛋白(SOS1) ; H2O2信号 ; K+/Na+平衡 ; 离子流 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 房山区琉璃河镇大陶村委会 年份:2015
    摘要:【目的】研究胡杨质膜Na+/H+逆向转运蛋白(SOS1)通过H2O2信号途径对盐胁迫的感知和适应作用。【方法】克隆胡杨质膜SOS1基因(PeSOS1),并将其转化到拟南芥中,比较野生型和转PeSOS1基因拟南芥在100mmol/L NaCl胁迫下的萌发率,根长,干质量,K+、Na+和Ca2+含量,活体植株根尖离子流(K+、Na+和H+)的流动情况,H2O2的产生和抗氧化酶活性的变化以及抑制剂对根尖离子流的影响,分析100mmol/L NaCl胁迫下异源表达PeSOS1基因拟南芥与野生型拟南芥耐盐性的差异。【结果】在NaCl胁迫下,转PeSOS1基因拟南芥株系的萌发率、根长和干质量明显高于野生型拟南芥;转PeSOS1基因拟南芥K+和Ca2+含量也高于野生型拟南芥,而Na+含量较野生型拟南芥低。100mmol/L NaCl处理后,转PeSOS1基因拟南芥中K+和Na+的平衡(K+/Na+值)与NaCl胁迫前相比下降幅度较小。转PeSOS1基因植株在NaCl胁迫下能更快地产生H2O2,并使抗氧化酶保持较高的活性。SOS1抑制剂阿米洛利(Amiloride)对NaCl胁迫下野生型和转基因拟南芥根尖离子流的变化有明显影响,用质膜NADPH氧化酶抑制剂DPI(抑制H2O2的产生)处理后,转PeSOS1基因拟南芥根尖K+内流减弱,Na+外流和H+内流增强,植株维持K+和Na+平衡的能力减弱。【结论】在拟南芥中异源表达PeSOS1基因可促进H2O2快速产生,维持了SOS1mRNA的稳定性,调控了K+和Na+平衡,并激活了抗氧化防御系统,因而显著提高了其耐盐性。
  • 【期刊】 建筑暖通设计中的问题及改进措施

    刊名:中国新技术新产品 作者:陈少良 关键词:建筑 ; 暖通设计 ; 问题 ; 措施 机构:深圳市建筑设计研究总院有限公司 ; 深圳市建筑设计研究总院有限公司 年份:2015
    摘要:随着我国城镇化进程的加快,建筑行业得到了突飞猛进的发展,高层建筑越来越多,暖通设计作为人们提高生活水平的标准,人们对设备的要求也越来越高,暖通设计的科学性和合理性直接影响着住户的舒服程度,也是衡量暖通设计质量的标准。本文就近几年来建筑暖通设计中的问题展开讨论,并提出改善暖通设计的具体措施,希望能对建筑暖通设计的发展和普及提供帮助。
  • 【期刊】 胡杨Ring finger E3连接酶PeRH2提高烟草耐旱机制研究

    刊名:基因组学与应用生物学 作者:陈少良 ; 钱泽勇 ; 张会龙 ; 荆晓姝 ; 申泽丹 ; 邓澍荣 ; 赵瑞 ; 沈昕 关键词:胡杨 ; Ring finger E3连接酶PeRH2 ; 亚细胞定位 ; 抗旱性 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 年份:2015
    摘要:近期研究表明泛素化在植物胁迫响应中扮演一个关键的角色。作为泛素-蛋白酶体系统(UPS)中的关键酶,泛素E3连接酶更是在细胞的新陈代谢中起着重要的作用。本文从胡杨中克隆了一个C端含有Ring finger结构域的蛋白(152个氨基酸)编码基因(Pe RH2),经过序列比对推断该基因编码产物为泛素E3连接酶,属于Ring finger家族中的Ring-H2构型。研究显示,甘露醇胡杨苗木在255 mmol/L甘露醇胁迫下,叶片Pe RH2表达量上调。拟南芥原生质体中瞬时表达融合质粒p Yellow0029-Pe RH2的研究表明,Pe RH2蛋白定位于细胞核。以农杆菌介导法将Pe RH2转入烟草,Sq RT-PCR结果显示,Pe RH2在转基因烟草中获得过表达。在255 mmol/L甘露醇处理下,转基因烟草幼苗耐受渗透胁迫的能力高于野生型和转空载体烟草。干旱处理后,转基因烟草的叶片保水力明显高于野生型和转空载体烟草,而叶片相对电导率、MDA的含量也要低于野生型和转空载体烟草。因此,过表达Pe RH2能够提高烟草的抗旱能力。
  • 【期刊】 胡杨PeSOS1对拟南芥盐诱导H2O2信号途径的调控

    刊名:西北农林科技大学学报:自然科学版 作者:陈少良 ; 王美娟 ; 王洋 ; 申泽丹 ; 马旭君 ; 撒刚 ; 邓澍荣 ; 刘丹丹 ; 张玉红 ; 沈昕 关键词:胡杨 盐胁迫 转基因拟南芥 质膜Na+/H+逆向转运蛋白(SOS1) H2O2信号 K+/Na+平衡 离子流 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 年份:2015
    摘要: 【目的】研究胡杨质膜Na+/H+逆向转运蛋白(SOS1)通过H2O2信号途径对盐胁迫的感知和适应作用。【方法】克隆胡杨质膜SOS1基因(PeSOS1),并将其转化到拟南芥中,比较野生型和转PeSOS1基因拟南芥在100mmol/L NaCl胁迫下的萌发率,根长,干质量,K+、Na+和Ca2+含量,活体植株根尖离子流(K+、Na+和H+)的流动情况,H2O2的产生和抗氧化酶活性的变化以及抑制剂对根尖离子流的影响,分析100mmol/L NaCl胁迫下异源表达PeSOS1基因拟南芥与野生型拟南芥耐盐性的差异。【结果】在NaCl胁迫下,转PeSOS1基因拟南芥株系的萌发率、根长和干质量明显高于野生型拟南芥;转PeSOS1基因拟南芥K+和Ca2+含量也高于野生型拟南芥,而Na+含量较野生型拟南芥低。100mmol/L NaCl处理后,转PeSOS1基因拟南芥中K+和Na+的平衡(K+/Na+值)与NaCl胁迫前相比下降幅度较小。转PeSOS1基因植株在NaCl胁迫下能更快地产生H2O2,并使抗氧化酶保持较高的活性。SOS1抑制剂阿米洛利(Amiloride)对NaCl胁迫下野生型和转基因拟南芥根尖离子流的变化有明显影响,用质膜NADPH氧化酶抑制剂DPI(抑制H2O2的产生)处理后,转PeSOS1基因拟南芥根尖K+内流减弱,Na+外流和H+内流增强,植株维持K+和Na+平衡的能力减弱。【结论】在拟南芥中异源表达PeSOS1基因可促进H2O2快速产生,维持了SOS1mRNA的稳定性,调控了K+和Na+平衡,并激活了抗氧化防御系统,因而显著提高了其耐盐性。
  • 【期刊】 暖通设计中绿色节能技术的应用分析

    刊名:中国新技术新产品 作者:陈少良 关键词:暖通设计 ; 绿色节能技术 ; 应用 ; 研究 机构:深圳市建筑设计研究总院有限公司 ; 深圳市建筑设计研究总院有限公司 年份:2015
    摘要:本文将对暖通绿色节能设计过程中存在的问题进行分析,并在基础上就暖通设计中绿色节能技术的应用,谈一下自己的观点和认识,以供参考。