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  • 【专利】 一种重型工程用低平板车的牵引结构

    作者:陈少良 ; 陈广 年份:2018
    摘要:本发明公开了一种重型工程用低平板车的牵引结构,包括十字连接轴,所述十字连接轴的顶部活动连接有托板,并且托板的顶部贯穿有牵引销,所述牵引销延伸至托板底部的一端贯穿十字连接轴并延伸至十字连接轴的内部,所述十字连接轴的顶端和底部分别固定第一车头连接座和第二车头连接座,所述十字连接轴左端的表面固定连接有车身连接座,本发明涉及低平板车技术领域。该重型工程用低平板车的牵引结构,能够很好的进行牵引,大大的提高了装置的牵引效果,能够有效的降低十字连接轴与连接座之间的摩擦,避免了灰尘进入到耐磨隔套的内部,增加了整体的使用寿命,避免了给使用者带来的损失,便于使用者进行使用,安全可靠。
  • 【期刊】 胡杨PeREM1.3过表达提高烟草耐盐性的机制

    刊名:北京林业大学学报 作者:陈少良 ; 张会龙 ; 武霞 ; 尧俊 ; 赵楠 ; 赵瑞 ; 李金克 ; 沈昕 关键词:胡杨 ; remorin蛋白 ; 抗盐性 ; 活性氧 ; 转基因烟草 机构:北京林业大学林木分子设计育种高精尖创新中心北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学林木分子设计育种高精尖创新中心北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学实验室与设备管理处 年份:2019
    摘要:【目的】盐害作为一类非生物胁迫严重危害了农作物的生存以及产量。Remorin作为一类植物特有的蛋白质在植物适应环境过程中具有重要功能。本研究克隆了胡杨remorin蛋白PeREM1. 3的编码基因PeREM1. 3,并研究PeREM1. 3基因在植物耐盐性中的作用。【方法】笔者将基因构件35S::PeREM1. 3转入模式植物烟草中,在盐胁迫条件下,通过生理生化的方法对表达PeREM1. 3的转基因烟草进行基因功能的分析。【结果】研究显示PeREM1. 3蛋白定位于细胞质膜上,其编码基因PeREM1. 3的开放阅读框(ORF)长600 bp,编码199个氨基酸。胡杨中PeREM1. 3能够响应盐胁迫和渗透胁迫表达上调。结果表明,在烟草中过表达PeREM1. 3明显地提高了耐盐性。过表达PeREM1. 3的烟草转基因株系中抗氧化物酶如SOD、POD和CAT活性显著提高,降低了活性氧水平,调控活性氧平衡。另外植物抗逆相关基因SOS1、HAK、NHA1、VAG1和PMA4的转录水平显著增高,调控K~+/Na~+平衡。【结论】这些结果说明PeREM1. 3蛋白通过维持植物的活性氧平衡和K~+/Na~+平衡来提高植物的耐盐性。
  • 【期刊】 胡杨果糖-1,6-二磷酸醛缩酶的定位及功能研究

    刊名:基因组学与应用生物学 作者:陈少良 ; 胡月 ; 张帆 ; 申泽丹 ; 于瑞 ; 赵瑞 ; 沈昕 关键词:胡杨 ; 果糖-1 ; 6-二磷酸醛缩酶 ; 原核表达 ; 亚细胞定位 ; 耐盐性 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 年份:2013
    摘要:将从胡杨中克隆的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因(PeALD)构建到pGEX-4T-1载体上,经IPTG诱导成功获得融合蛋白GST:PeALD,并将蛋白进行纯化,其大小约为52 kD,转化大肠杆菌的耐盐性实验表明,PeALD基因的成功表达有利于提高大肠杆菌菌株的耐盐性。为研究该基因编码蛋白在植物细胞中的定位,将基因的ORF区构建到定位表达载体pMDC85上,通过PEG介导的拟南芥瞬时转化法观察融合蛋白PeALD:GFP在细胞中的定位情况,结果显示该蛋白定位于胞质中,由此说明实验克隆得到的该胡杨果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因编码的是胞质蛋白。烟草种子在盐培养基上的萌发实验结果显示转基因烟草具有更高的耐盐性;烟草水培苗经200 mmol/L NaCl处理一周后,可溶性糖的质谱检测结果显示转基因植株中葡萄糖的含量有很大提高。表明胡杨果糖-1,6-二磷酸醛缩酶通过促进糖酵解和有氧呼吸途径来提高植物对盐胁迫的适应性。
  • 【期刊】 胡杨PeSOS1对拟南芥盐诱导H_2O_2信号途径的调控

    刊名:西北农林科技大学学报(自然科学版) 作者:陈少良 ; 王美娟 ; 王洋 ; 申泽丹 ; 马旭君 ; 撒刚 ; 邓澍荣 ; 刘丹丹 ; 张玉红 ; 沈昕 关键词:胡杨 ; 盐胁迫 ; 转基因拟南芥 ; 质膜Na+/H+逆向转运蛋白 ; SOS1 ; H2O2信号 ; K+/Na+平衡 ; 离子流 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 房山区琉璃河镇大陶村委会 年份:2015
    摘要:【目的】研究胡杨质膜Na+/H+逆向转运蛋白(SOS1)通过H2O2信号途径对盐胁迫的感知和适应作用。【方法】克隆胡杨质膜SOS1基因(PeSOS1),并将其转化到拟南芥中,比较野生型和转PeSOS1基因拟南芥在100mmol/L NaCl胁迫下的萌发率,根长,干质量,K+、Na+和Ca2+含量,活体植株根尖离子流(K+、Na+和H+)的流动情况,H2O2的产生和抗氧化酶活性的变化以及抑制剂对根尖离子流的影响,分析100mmol/L NaCl胁迫下异源表达PeSOS1基因拟南芥与野生型拟南芥耐盐性的差异。【结果】在NaCl胁迫下,转PeSOS1基因拟南芥株系的萌发率、根长和干质量明显高于野生型拟南芥;转PeSOS1基因拟南芥K+和Ca2+含量也高于野生型拟南芥,而Na+含量较野生型拟南芥低。100mmol/L NaCl处理后,转PeSOS1基因拟南芥中K+和Na+的平衡(K+/Na+值)与NaCl胁迫前相比下降幅度较小。转PeSOS1基因植株在NaCl胁迫下能更快地产生H2O2,并使抗氧化酶保持较高的活性。SOS1抑制剂阿米洛利(Amiloride)对NaCl胁迫下野生型和转基因拟南芥根尖离子流的变化有明显影响,用质膜NADPH氧化酶抑制剂DPI(抑制H2O2的产生)处理后,转PeSOS1基因拟南芥根尖K+内流减弱,Na+外流和H+内流增强,植株维持K+和Na+平衡的能力减弱。【结论】在拟南芥中异源表达PeSOS1基因可促进H2O2快速产生,维持了SOS1mRNA的稳定性,调控了K+和Na+平衡,并激活了抗氧化防御系统,因而显著提高了其耐盐性。
  • 【期刊】 胡杨PeSOS1对拟南芥盐诱导H2O2信号途径的调控

    刊名:《西北农林科技大学学报:自然科学版》 作者:陈少良 ; 王美娟 ; 王洋 ; 申泽丹 ; 马旭君 ; 撒刚 ; 邓澍荣 ; 刘丹丹 ; 张玉红 ; 沈昕 关键词:胡杨 ; 盐胁迫 ; 转基因拟南芥 ; 质膜Na+/H+逆向转运蛋白(SOS1) ; H2O2信号 ; K+/Na+平衡 ; 离子流 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 房山区琉璃河镇大陶村委会 年份:2015
    摘要:【目的】研究胡杨质膜Na+/H+逆向转运蛋白(SOS1)通过H2O2信号途径对盐胁迫的感知和适应作用。【方法】克隆胡杨质膜SOS1基因(PeSOS1),并将其转化到拟南芥中,比较野生型和转PeSOS1基因拟南芥在100mmol/L NaCl胁迫下的萌发率,根长,干质量,K+、Na+和Ca2+含量,活体植株根尖离子流(K+、Na+和H+)的流动情况,H2O2的产生和抗氧化酶活性的变化以及抑制剂对根尖离子流的影响,分析100mmol/L NaCl胁迫下异源表达PeSOS1基因拟南芥与野生型拟南芥耐盐性的差异。【结果】在NaCl胁迫下,转PeSOS1基因拟南芥株系的萌发率、根长和干质量明显高于野生型拟南芥;转PeSOS1基因拟南芥K+和Ca2+含量也高于野生型拟南芥,而Na+含量较野生型拟南芥低。100mmol/L NaCl处理后,转PeSOS1基因拟南芥中K+和Na+的平衡(K+/Na+值)与NaCl胁迫前相比下降幅度较小。转PeSOS1基因植株在NaCl胁迫下能更快地产生H2O2,并使抗氧化酶保持较高的活性。SOS1抑制剂阿米洛利(Amiloride)对NaCl胁迫下野生型和转基因拟南芥根尖离子流的变化有明显影响,用质膜NADPH氧化酶抑制剂DPI(抑制H2O2的产生)处理后,转PeSOS1基因拟南芥根尖K+内流减弱,Na+外流和H+内流增强,植株维持K+和Na+平衡的能力减弱。【结论】在拟南芥中异源表达PeSOS1基因可促进H2O2快速产生,维持了SOS1mRNA的稳定性,调控了K+和Na+平衡,并激活了抗氧化防御系统,因而显著提高了其耐盐性。
  • 【期刊】 过表达秋茄C2H2型锌指蛋白基因KcZFP提高烟草耐盐性

    刊名:基因组学与应用生物学 作者:陈少良 ; 于瑞 ; 胡月 ; 黄旭新 ; 申泽丹 ; 韩彦莎 ; 邓澍荣 ; 赵瑞 ; 沈昕 关键词:秋茄 ; C2H2型锌指蛋白 ; 转基因烟草 ; 耐盐性 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 年份:2013
    摘要:基因转录调节是植物对非生物胁迫适应机制的一个重要方面,转录调节因子在胁迫信号转导途径中调节下游基因的表达,在建立植物对胁迫适应性过程中起到重要作用。锌指蛋白是功能多样的转录调节因子蛋白家族,家族成员在植物响应非生物胁迫方面扮演着重要角色。本研究以秋茄C2H2型锌指蛋白编码基因KcZFP为目的基因,在烟草中过表达KcZFP,分析C2H2型锌指蛋白在植物耐盐性中的作用。研究结果显示:转基因株系中,KcZFP表达量显著提高。过表达KcZFP的烟草植株的耐盐性明显提高,在200mmol/LNaCl处理的条件下,KcZFP过表达烟草中脯氨酸水平远高于野生型植株。对光合作用参数比较分析显示,在KcZFP过表达植株中净光合速率受盐胁迫的影响小于野生型植株,光合系统在一定程度上得到了保护。研究结果说明KcZFP作为转录调节因子参与了植物的渗透调节,对植物的耐盐性具有贡献。
  • 【期刊】 秋茄KcTIP1基因克隆及其对植物耐盐性作用的研究

    刊名:西北农林科技大学学报(自然科学版) 作者:陈少良 ; 鲁彦君 ; 韩彦莎 ; 李妮亚 ; 侯佩臣 ; 黄旭新 ; 邓澍荣 ; 赵瑞 ; 沈昕 关键词:秋茄 ; 烟草 ; KcTIP1基因 ; 耐盐性 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 海南师范大学生物学院 ; 国家农业信息化工程技术研究中心 年份:2013
    摘要:【目的】从秋茄中克隆液泡膜水通道蛋白KcTIP1基因,并研究其对植物耐盐性的作用机制。【方法】以秋茄幼嫩叶片为材料,通过PCR扩增克隆KcTIP1基因并构建其表达载体,采用根癌农杆菌介导法,用含重组质粒的农杆菌转化烟草植株,通过卡那霉素筛选和转基因烟草基因组PCR、RT-PCR鉴定,获得转基因再生植株;并选取其中2个阳性株系和野生型株系进行盐处理,测定野生型烟草(对照)与盐处理烟草根、茎、叶鲜质量,光合参数,叶片组织Na+、K+浓度以及根尖Na+、K+的流速。【结果】成功克隆得到了KcTIP1基因,对其编码蛋白氨基酸序列进行分析表明,秋茄KcTIP1包含MIP家族的特征序列SGGHVNPAVT和2个保守的NPA(Asn-Pro-Ala)位点。RT-PCR检测结果显示,KcTIP1基因在转基因烟草株系中成功表达。盐胁迫后,转基因烟草植株根、茎、叶鲜质量,叶片净光合速率,蒸腾速率,叶片组织Na+、K+积累和根尖Na+、K+内流幅度均高于野生型烟草。【结论】KcTIP1具有与其他水通道蛋白类似的蛋白结构和酶学功能,KcTIP1基因过表达可以提高转基因烟草的抗盐能力。
  • 【期刊】 盐胁迫下外生菌根菌Paxillus抗氧化酶活性的变化

    刊名:安徽农业科学 作者:陈少良 ; 包斯琴 ; 李静 ; 孙健 ; 马旭君 关键词:Paxillus involutus ; MAJ ; NAU ; 抗氧化酶活性 ; 耐盐性 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 年份:2012
    摘要:[目的]通过测定2种菌株的抗氧化酶活性来研究其抗盐机理。[方法]以外生菌根真菌Paxillus involutus的2种菌株MAJ和NAU作为材料,研究在不同NaCl浓度(0、100、200、500 mmol/L)处理条件下抗氧化酶活性的变化。[结果]100 mmol/L NaCl可以促进菌株MAJ和NAU的增长及其生物量的增加;短期盐胁迫(1 d)诱导了菌株MAJ中SOD、CAT和POD活性的升高,但随着盐处理时间的延长,这些酶活性在100和200 mmol/L盐胁迫下均有所降低;而菌株NAU在长期盐胁迫(9 d)下能更好地维持各抗氧化酶活性,尤其是APX、GPX和POD。[结论]盐处理的菌株抗氧化酶活性明显高于对照菌株。
  • 【期刊】 盐胁迫下硫化氢调控杨树根系的离子流

    刊名:植物生理学报 作者:陈少良 ; 朱会朋 ; 孙健 ; 赵楠 ; 马旭君 ; 张玉红 ; 沈昕 关键词:胡杨 ; 群众杨 ; K+/Na+平衡 ; NaHS ; 非损伤微测技术 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 年份:2013
    摘要:本文应用非损伤微测技术(non-invasive micro-test technique,NMT)研究了H2S对盐胁迫下耐盐的胡杨和不耐盐的群众杨根部K+、Na+和H+流速的影响。结果表明,两种杨树根系在瞬时(100mmol·L-1NaCl)和短期(24h,50mmol·L-1NaCl)盐胁迫下呈现出K+外流,这种盐诱导的根部K+外流能被50mol·L-1NaHS抑制。此外,H2S能增加短期盐胁迫下Na+的外排,而Na+的外流被Na+/H+逆向转运体抑制剂amiloride或者质膜H+泵抑制剂sodium orthovanadate有效抑制。盐胁迫下,H2S对不耐盐的群众杨根系K+外流的抑制作用和对Na+/H+逆向转运的促进作用高于耐盐的胡杨。据此推测,H2S是通过上调杨树根系胞质膜Na+/H+逆向转运体系(H+泵和Na+/H+逆向转运体),促进Na+和H+逆向跨膜转运,并且,H+泵通过抑制去极化激活的离子通道来限制盐诱导的K+外流。
  • 【期刊】 秋茄硫氧还蛋白调控活性氧平衡增强烟草耐盐机制研究

    刊名:北京林业大学学报 作者:陈少良 ; 荆晓姝 ; 孙苑玲 ; 向敏 ; 钱泽勇 ; 郎涛 ; 赵瑞 ; 沈昕 关键词:红树 ; 秋茄 ; 硫氧还蛋白 ; 过氧化氢酶 ; 抗坏血酸过氧化物酶 ; AsA-GSH循环 ; NaCl胁迫 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 海南师范大学生命科学学院 年份:2015
    摘要:硫氧还蛋白(Trxs)能调控细胞的氧化还原状态,在木本植物中Trxs与耐盐性的关系尚未研究。本文克隆了非泌盐红树秋茄的硫氧还蛋白基因KcTrxf,并研究KcTrxf在植物耐盐性中的作用。qRT-PCR结果显示,秋茄在盐胁迫下KcTrxf表达量上调,并且叶片中的非蛋白巯基(NPTs)的含量上升。KcTrxf基因的开放阅读框(ORF)长585bp,编码194个氨基酸,是一类定位于叶绿体中的f类硫氧还蛋白。将重组的35S:KcTrxf表达载体转入模式植物烟草中进行耐盐性分析,结果表明,KcTrxf提高了烟草的耐盐性。NaCl处理下,野生型烟草叶片中膜质氧化,并且积累大量活性氧,使叶绿素含量以及叶绿素a/b比值明显下降。转基因烟草一方面通过提高过氧化氢酶(CAT)以及抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性来清除H2O2,另一方面通过调节抗坏血酸-谷胱甘肽循环中(AsA-GSH cycle)的关键酶单脱氧抗坏血酸还原酶(MDAR)以及谷胱甘肽还原酶(GR)的活性来增加还原型谷胱甘肽水平,同时,还增加了叶片中非蛋白巯基的含量,进而清除活性氧,减少盐害引起氧化胁迫。因此,盐胁迫下转基因烟草中的叶绿素含量以及叶绿素a/b维持较高水平,从而维持较高的光合速率和生长状态。
  • 【期刊】 胡杨PeAPY1和PePY2在提高植物抗旱耐盐性上的功能解析

    刊名:基因组学与应用生物学 作者:陈少良 ; 檀叶青 ; 邓澍荣 ; 孙苑玲 ; 赵瑞 ; 荆晓姝 ; 申泽丹 ; 钱泽勇 ; 张会龙 ; 沈昕 关键词:PeAPY ; eATP ; 抗盐耐旱 ; 气孔 ; 失水率 ; 生长发育 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 年份:2014
    摘要:胡杨(Populus euphratica Oliv.)是典型的抗旱耐盐树种,广泛用于干旱盐碱地带的造林绿化。本实验室前期研究结果表明,盐胁迫下胡杨腺苷三磷酸双磷酸水解酶(Apyrase)基因(PeAPY)的转录水平上调,表明该基因可能在胡杨的抗盐性功能上发挥作用。已有研究证明APY是水解eATP的关键酶,而eATP是植物细胞重要的信使分子,调控植物的生长发育及抗性反应。本研究以PeAPY过表达拟南芥株系、拟南芥apy1、apy2突变体和野生型拟南芥为实验材料,分析了胡杨PeAPY对植物抗旱和耐盐能力的影响。研究结果表明,PeAPY1和PeAPY2转基因株系的抗旱性明显提高,这可能与PeAPY1和PeAPY2过表达减少了叶片表皮的气孔密度,降低了叶片的失水速率,从而提高了植株的保水能力有关。此外,我们还发现PeAPY1和PeAPY2转基因株系耐盐能力有所提高:在盐胁迫条件下,过表达PeAPY1和PeAPY2转基因植物的种子萌发率和生长、成活率均明显高于突变体apy1、apy2和野生型拟南芥(NaCl处理的浓度分别为0,50 mmol/L,100 mmol/L,150 mmol/L,200 mmol/L)。这可能是由于盐处理条件下,PeAPY通过降低盐诱导的eATP浓度,阻止了eATP诱导的细胞凋亡。综上所述,胡杨PeAPY的过表达能够提高植物对盐胁迫、干旱胁迫的耐受性,PeAPY对eATP浓度调控及其对植物抗逆性的具体机制有待进一步研究。
  • 【期刊】 初始盐胁迫下ABA与CaM对胡杨叶片气体交换的调控

    刊名:林业科学 作者:陈少良 ; 张云霞 ; 石勇 ; 王瑞刚 ; 李妮亚 ; 邵杰 ; 张华 ; 李静 ; 孙健 关键词:胡杨 ; 叶片 ; 脱落酸 ; ABA ; 钙调素 ; CaM ; 气体交换 机构:北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京林业大学生物科学与技术学院 ; 北京100083湖北民族学院生物资源保护与利用湖北省重点实验室 年份:2008
    摘要:以典型的耐盐树木胡杨(Populus euphratica)为试验材料,研究叶片气体交换对初始盐胁迫的响应机制。在初始盐胁迫下,胡杨叶片ABA和CaM水平提高,叶片气孔导度、蒸腾速率和净光合速率相应迅速下降,表明ABA和Ca2+.CaM参与了胡杨盐诱导的气孔关闭。5mmol.L-1钨酸钠(ABA合成抑制剂)、10mmol.L-1EGTA(胞外Ca2+螯合剂)和5mmol.L-1 LaCl3(Ca2+通道抑制剂)处理胡杨根部,对照苗木叶片的EVAP、Gs和Pn未受到影响,却提高了盐处理苗木(50mmol.L-1NaCl,4h)的气体交换。结果显示,盐诱导内源ABA和CaM水平的提高导致了胡杨叶片的气孔关闭,这是因为:1)钨酸钠处理降低了盐处理苗木的ABA水平,增加了CaM的含量;2)EGTA或LaCl3处理显著降低了胡杨叶片的CaM水平,但ABA水平显著升高。此外,通过茎导入ABA来模拟盐诱导内源ABA水平的提高,发现茎部导入的ABA(10μmol.L-1)能使胡杨叶片ABA和CaM水平迅速升高,叶片Gs、EVAP和Pn相应迅速下降,而先于ABA导入的5mmol.L-1LaCl3或5mmol.L-1EGTA虽然提高了ABA的水平,但却显著降低了CaM水平,ABA诱导胡杨的气孔关闭也受到明显抑制。研究结果显示,钨酸钠、EGTA和LaCl3的使用,都能抑制盐诱导胡杨的气孔关闭,因此,在初始盐胁迫诱导胡杨气孔关闭的过程中,ABA和CaM很可能是共同作用:诱导胞质Ca2+水平升高,激活外向的K+通道和Cl-通道,诱导气孔关闭,从而降低经由蒸腾流进行的根冠盐离子运输。
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