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  • 【会议】 鲢鱼小清蛋白定量检测竞争性ELISA法的建立

    作者:阮密密 ; 蔡秋凤 ; 王锡昌 ; 刘光明 ; 张琳 ; 刘源 ; 曹敏杰 关键词:小清蛋白 ; 单克隆抗体 ; 竞争性ELISA ; 定量 ; 淡水鱼 机构:集美大学生物工程学院 ; 集美大学生物工程学院 ; 上海海洋大学食品学院 年份:2012
    摘要:鱼类是主要的致敏食物之一,痕量的过敏原即可能导致过敏患者产生严重的过敏反应。因此,有必要建立灵敏度高、特异性好的针对主要过敏原小清蛋白的检测方法。本研究以纯化的淡水鲢鱼小清蛋白免疫Balb/c小鼠,取小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合后,经筛选获得抗鲢鱼小清蛋白单克隆抗体。ELISA和Western blot结果表明,制备的抗小清蛋白单克隆抗体的效价高,特异性好。利用该单克隆抗体建立了对鱼类小清蛋白进行定量检测的竞争性ELISA法。该方法检测限可达0.04 mg/kg食物,定量限为0.3 mg/kg食物;组内差异系数和组间差异系数分别为4.4%和8.4%,表明建立的检测方法重复性较好。将建立的竞争性ELISA法用于检测不同鱼类肌肉中小清蛋白的含量,结果显示,白色肉中小清蛋白的含量约为红色肉的4~20倍。采用本方法以鲢鱼丸为样品研究漂洗次数对鱼肉制品中小清蛋白含量的影响,发现漂洗可有效降低小清蛋白含量。但是,即使经过10次漂洗后的鱼丸中仍然含有少量小清蛋白。本研究建立的检测方法有望用于水产品加工过程及制品中痕量鱼类过敏原小清蛋白的监测。
  • 【期刊】 鲫和鳜主要过敏原小清蛋白的基因克隆及序列分析

    刊名:水产学报 作者:阮密密 ; 蔡秋凤 ; 刘光明 ; 曾伶俐 ; 苏文金 ; 曹敏杰 关键词: ; ; 小清蛋白 ; 基因克隆 ; 生物信息学分析 机构:集美大学生物工程学院 ; 集美大学生物工程学院 ; 集美大学福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室 ; 上海海洋大学食品学院 年份:2012
    摘要:小清蛋白(parvalbumin,PV)是鱼类的主要过敏原,为分析淡水鱼PV的序列及结构特征,采用RT-PCR方法,从鲫和鳜肌肉中分别克隆得到2种小清蛋白的基因序列。生物信息学分析结果显示,4种基因的序列长度均为330 bp,编码109个氨基酸残基,推导分子量在11.6 ku左右,等电点为4.45~4.69。氨基酸序列分析表明,克隆得到的这4种PV序列均含有丙氨酸-14、亮氨酸-16、半胱氨酸-19、苯丙氨酸-67、谷氨酰胺-69以及苏氨酸-79等β型PV特征性残基序列,表明克隆的目的基因均为β型PV。鲫的2种PV序列相似性为80.73%,鳜的2种PV的序列相似性为83.49%。对克隆得到的PV序列进行空间结构分析显示,这4种PV序列均含有3个螺旋-松弛-螺旋结构,即EF-手型结构,其中靠近C端功能域的两个手型结构为Ca2﹢结合位点。
  • 【会议】 拟穴青蟹精氨酸激酶的克隆表达、纯化及免疫活性分析

    作者:阮密密 ; 毛海燕 ; 曹敏杰 ; 蔡秋凤 ; 张凌晶 ; 刘光明 关键词:拟穴青蟹 ; 精氨酸激酶 ; 克隆表达 ; 生物信息学分析 ; 纯化 ; 免疫活性分析 机构:集美大学生物工程学院福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室 ; 集美大学生物工程学院福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室 年份:2012
    摘要:目的克隆拟穴青蟹(Scylla paramamosain)精氨酸激酶(arginine kinase,AK)基因,简称ScyP2;表达、纯化具有免疫活性的重组AK,为研究拟穴青蟹AK的过敏性及其构效关系奠定基础。方法提取拟穴青蟹肌肉总RNA,设计基因特异性引物,采用RT-PCR及RACE(cDNA末端快速扩增)方法克隆Scy P2的基因片段;获得Scy p2的完整开放阅读框后,与pET-28a载体连接并转化大肠埃希氏菌(E.coli)BL21,诱导表达并纯化重组AK,采用甲壳类动物过敏患者血清检测其免疫学活性。结果 Scy p2 cDNA序列全长1457 bp,开放阅读框为1074 bp,编码357个氨基酸(GenBank/EBI数据库登录号:JN828652),其理论分子量为40.29 kDa,等电点为6.44。生物信息学分析结果显示,AK位于215~218残基处具有一个N-糖基化位点,位于271-278残基处具有ATP:guanido phosphor-transferase活性位点,有9个B-cell抗原表位。免疫学实验表明重组AK与甲壳类动物过敏患者血清IgE具有良好的结合活性,抑制性免疫印迹实验表明天然AK与重组AK具有共同的IgE结合位点。结论本研究克隆表达了Scy p2,结果提示重组AK与天然AK具有共同的IgE结合位点。
  • 【期刊】 阮义忠 一幅照片是关于一个秘密的另一个秘密

    刊名:三月风 作者:张立洁 年份:2005
    摘要:阮义忠1950年生于台湾宜兰县头城镇。经历了联考落榜、杂志编辑、从军服役后,开始自学摄影,1992年创办《摄影家》杂志。自1999年起,投入为台湾佛教慈济慈善基金会制作志工传列和摄影记录的工作。其撰述《当代摄影大师》、《当代摄影新锐》和《摄影美学七问》,对海峡两岸的摄影学子有深远的影响。其摄影集《北埔》、《人与土地》、《台北谣言》、《四季》等在国内外受到注目,作品为法国巴黎现代美术馆、水之堡摄影美术馆、尼普斯摄影博物馆和英国的维多利亚暨艾伯
  • 【期刊】 中共秘密党员阮致中的传奇人生

    刊名:党史纵览 作者:詹剑锋 年份:2018
    摘要:<正>阮致中,化名王佐、朱建平、朱旭平等,1911年7月生于安徽省铜陵县阮村一个富裕中农家庭,在家读私塾时名唤阮泰德。其父阮宝山,母亲宋氏,家有兄弟姐妹8人,他排行老三。1919年,8岁的阮致中开始接受启蒙教育,在乡村私塾就读8年半,1930年辍学在家一边自学一边参加劳动,1933年开始在家乡担任小学教员。1937年抗日战争全面爆发后,新四军抗日民运工作队在他的家乡开展抗日宣传,
  • 【期刊】 唐金密会阮伟 武林大会加速国际化进程

    刊名:中华武术 作者:王涛 关键词:国际化进程 ; ; 中央电视台 ; 美国市场 ; 拳击 ; 赛事 ; 总经理 ; 成都 年份:2008
    摘要:11月7日,吸引广大拳击迷关注的WBC世界拳王争霸赛在成都举行。颇多争议的拳击赛事推广人唐金出现在这里,在此期间现身成都的还有一位国内的赛事推广人、中视体育推广有限公司的董事总经理阮伟,作为中央电视台“武林大会”的出品人,阮伟的兴趣完全不在这场拳击赛事上,而是为了武林大会的海外推广……二人在此间进行了密谈,共同商讨如何将“武林大会”推入美国市场。
  • 【期刊】 大梁与首阳——阮籍五言《咏怀诗》的两个政治密码

    刊名:阜阳师范学院学报(社会科学版) 作者:王尧美 关键词:《咏怀诗》 ; 大梁 ; 首阳 机构:山东大学国际教育学院 ; 山东大学国际教育学院 年份:2005
    摘要:阮籍82首五言《咏怀诗》显示了政治压力下的诗歌特征,大梁和首阳两个重复率极高的地理名称,是其重 要的政治密码,它们从两个侧面,表现了阮籍既想逃避政治,又不能忘怀政治的矛盾心态。
  • 【期刊】 揭开阮公佛显灵的秘密

    刊名:科学与无神论 作者:张梓材 年份:2007
    摘要:四会市柑榄乡有座远近闻名的阮公佛,因为它"灵",所以远至广西、湖南、江西三省都有不少群众来烧香祈福.它怎么"灵"呢?那里的神棍巫婆凭借阮公佛的"灵"能"上刀山"、"过火炼"、"抓油锅",为群众"消灾祈福".
  • 【期刊】 阮述《往津日记》引发的学术因缘——以香港大学饶宗颐学术馆藏戴密微、饶宗颐往来书信为中心

    刊名:社会科学论坛 作者:龚敏 关键词:《往津日记》 ; 戴密微 ; 饶宗颐 ; 陈荆和 ; 学术因缘 机构:香港大学饶宗颐学术馆 ; 香港大学饶宗颐学术馆 年份:2011
    摘要:阮述是越南阮朝末年重要官员,于1880年、1882年两次奉旨经香港、广州,复往上海、天津等地。他在第二次出中撰有《往津日记》行使日程一册,其中记述的资料尤能凸显当时中、法、越三国之间的复杂关系,对于研究19世纪后期中越外交关系、历史和文化交流等,不失为重要之材料。本文以阮述《往津日记》为中心,从学术史的角度探述戴密微、饶宗颐、陈荆和三位先生与《往津日记》的学术因缘。
  • 【期刊】 阮千瑞:"本地密语"

    刊名:艺术界 作者:梁昆 年份:2011
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