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  • 【专利】 一种禽肿瘤病三重荧光PCR检测试剂盒及其检测方法

    摘要:本发明涉及生物检测技术领域,具体涉及一种J亚群禽白血病、马立克和网状内皮组织增生症病毒检测用三重荧光PCR检测试剂盒及其检测方法。所述检测试剂盒包括三重荧光PCR检测混合液、阴性对照品和阳性对照品;其中,所述三重荧光PCR检测混合液中含有分别用于扩增、检测J亚群禽白血病、马立克和网状内皮组织增生症病毒的三对引物及其各自对应的探针,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑9所示。利用本发明的试剂盒和引物探针能快速检测J亚群禽白血病、马立克和网状内皮组织增生病病毒,具有操作简便、灵敏度高、特异性好等优点;及时发现和确诊可疑病例,提高对三种肿瘤病的监测水平。
  • 【会议】 实验性鸡源巴氏杆菌感染小鼠的动态病理学观察

    作者:邵华斌 ; 谷长勤 ; 曾哲 ; 胡薛英 ; 张万坡 ; 程国富 关键词:小鼠 ; 鸭源巴氏杆菌 ; 人工感染 ; 动态病理变化 机构:华中农业大学动物医学院,武汉,430070 ; 华中农业大学动物医学院,武汉,430070 ; 湖北省农科院畜牧兽医研究所,武汉,430064 年份:2015
    摘要:  多杀性巴氏杆菌是一种危害畜禽养殖业的常见菌,禽类中以鸭对其最敏感。国外学者用死亡率来评估使用小鼠来研究出血性败血症的发病机制的适宜性,国内许多研究集中在不同的感染途径下,巴氏杆菌的致病性强弱及细菌在体内的分布及定位,本实验的重点在于以小白鼠为动物模型,通过人工感染巴氏杆菌,观察其对小白鼠致病性的作用,以期探求巴氏杆菌的致病机理。用禽源巴氏杆菌人工感染小鼠,动态观察其主要组织的病变特点。
  • 【会议】 白羽肉鸡产气荚膜梭菌的分离与鉴定

    作者:邵华斌 ; 艾地云 ; 张腾飞 ; 詹丽超 ; 罗玲 ; 王红琳 关键词:产气荚膜梭菌 ; 分离鉴定 ; 基因分型 ; 白羽肉鸡 机构:华中农业大学动物医学院 ; 华中农业大学动物医学院 年份:2014
    摘要:通过培养特性、紫牛乳鉴别反应、革兰氏染色、生化反应及PCR毒素基因检测,对2013年5月~10月从湖北大冶市收集的215份鸡肠样品、从汉川市采集的110份鸡肛门棉拭子样品进行鸡产气荚膜梭菌的分离鉴定。结果从325份样品中分离鉴定出35株(10.8%)产气荚膜梭菌,35株产气荚膜梭菌PCR都只扩增出α毒素基因条带,其毒素基因分型均为A型。本研究对控制白羽肉鸡坏死性肠炎的发生与流行意义重大。
  • 【专利】 一种基于SOPC的点对多点系统动态帧结构模块

    作者:邵华斌 ; 杨喜光 ; 吕先望 年份:2012
    摘要:本实用新型公开了一种基于SOPC的点对多点系统动态帧结构模块,包括控制器(1)、FLASH存储器(2)、串口芯片(3)、无线发送模块(4)、无线接收模块(5)、帧结构配置模块(6)和电源(12)。它采用SOPC软件方法实现点对多点TDD系统时隙的动态分配协议,实现了时隙的动态灵活划分,提高了点对多点系统的传输效率,提高了系统容量。具有实现简单、传输效率较高、性能稳定可靠、容量易于扩展等优点,在点对多点TDD通信系统中有着比较广泛的应用前途。
  • 【期刊】 禽巴氏杆菌链霉素耐药株转录组测序与分析

    刊名:中国预防兽医学报 作者:邵华斌 ; 汪最 ; 孔令严 ; 卢琴 ; 罗青平 关键词:禽源多杀性巴氏杆菌 ; 转录组测序 ; GO功能分析 ; KEGG功能分析 ; ARDB分析 机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 长江大学动物科学学院 ; 农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室 年份:2018
    摘要:为鉴定禽源多杀性巴氏杆菌(Pm)链霉素(Str)敏感株与耐药株(MIC=1024μg/mL)在转录组水平上的差异,本研究采用RNA-seq技术对Str敏感株与耐药株进行双向测序,筛选得到差异表达基因,通过GO、KEGG和ARDB数据库对差异表达基因进行分组和富集性分析,并利用荧光定量PCR对筛选出的差异表达基因进行验证。结果显示,共筛选获得625个差异表达基因,其中包括581个上调基因和44个下调基因。通过GO功能富集分析显示差异表达基因多数发挥细胞膜转运功能;对差异表达基因进行信号通路富集性分析显示,大多数差异表达基因分布在ABC转运蛋白与双组分系统代谢途径中;采用ARDB对差异表达基因进行耐药基因分析,显示其中的耐药基因主要为氨基糖苷转移酶类和外排系统两类。本研究结果表明,禽源Pm对Str的耐药机制可能与细胞膜上多药外排泵的过量表达和氨基糖苷转移酶类灭活抗菌药物有关。同时,也为进一步研究禽源Pm对Str的耐药机制奠定了基础。
  • 【期刊】 禽巴氏杆菌环丙沙星耐药株转录组测序与分析

    刊名:中国预防兽医学报 作者:邵华斌 ; 孔令严 ; 罗青平 ; 卢琴 ; 李槿年 关键词:禽源多杀性巴氏杆菌 ; 转录组测序 ; GO功能分析 ; KEGG功能分析 ; 耐药机制 机构:安徽农业大学动物科技学院 ; 安徽农业大学动物科技学院 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 年份:2017
    摘要:为鉴定禽源多杀性巴氏杆菌(Avian Pasteurella multocida,Pm)敏感株与环丙沙星(Cip)耐药株的差异表达基因,本研究采用高通量转录组测序的RNA-seq技术对敏感株与Cip耐药株进行检测,参考Pm70株基因组(NC_002663.1)进行拼接与质量评估,测序数据处理后获得表达差异基因,利用GO和KEGG数据库对表达差异基因进行注释与富集性分析,并利用荧光定量PCR对转录组测序中的差异表达基因进行验证。结果显示,所有样品测序数据参考Pm70全基因组匹配率均达到95.87%以上,对基因差异表达进行分析后鉴定得到19个差异表达基因,其中15个上调,4个下调。通过GO功能富集分析显示差异表达基因主要为转运运输功能,并对差异表达基因进行信号通路富集性分析,结果表明最具代表性的信号通路为"ABC转运蛋白"(ko02010)。推测禽源Pm中的ABC转运蛋白超家族可能在Cip耐药机制中具有重要作用。
  • 【期刊】 鸭坦布苏病毒E蛋白原核表达及反应原性分析

    刊名:中国家禽 作者:邵华斌 ; 卢琴 ; 王红琳 ; 罗青平 ; 张腾飞 ; 汪宏才 ; 罗玲 ; 温国元 ; 张蓉蓉 关键词:鸭坦布苏病毒 ; E蛋白 ; 原核表达 ; 反应原性 机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室 ; 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 年份:2018
    摘要:参照Gen Bank已发表的鸭坦布苏病毒序列,采用生物信息学分析并利用PCR方法从鸭坦布苏病毒湖北分离株(JL2011株)扩增出E基因全长片段(E1)及E基因截短片段(E2),将含有双酶切位点的目的片段连接p ET-28a(+)载体,成功构建出重组表达质粒p ET28a-E1和p ET28a-E2。将p ET28a-E转化BL21(DE3)后,经IPTG诱导可表达出约54.3 ku和44.8 ku的蛋白,但E2的表达量明显高于E1,故将筛选的E2包涵体进行纯化后,用坦布苏病毒阳性血清进行Western blot分析表明纯化后的重组蛋白具有良好的反应原性。研究为进一步阐明鸭坦布苏病毒E蛋白的功能及建立快速灵敏的鸭坦布苏病毒检测方法奠定基础。
  • 【期刊】 鸭疫里默氏杆菌病病原分离鉴定与血清抗体检测

    刊名:中国家禽 作者:邵华斌 ; 罗玲 ; 罗青平 ; 王红琳 ; 卢琴 ; 汪宏才 ; 温国元 ; 张腾飞 ; 张蓉蓉 关键词:鸭疫里默氏杆菌 ; 分离 ; 抗体检测 机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 年份:2019
    摘要:湖北某鸭场10日龄雏鸭发生疑似鸭疫里默氏杆菌病,观察其临床具有神经症状,剖检具有心包炎、肝周炎和气囊炎等典型病变。无菌采集发病鸭脑组织进行细菌分离,并取血清进行抗体检测。分离菌经过菌落形态、染色形态、PCR以及血清学鉴定为Ⅰ型鸭疫里默氏杆菌,血清OmpA-ELISA抗体反应呈阳性。15种抗生素的药敏试验结果显示分离菌对萘啶酸等喹诺酮类药物耐药,对头孢曲松等头孢类药物高度敏感,结果为鸭疫里默氏杆菌病防控提供依据。
  • 【期刊】 禽巴氏杆菌四环素耐药株转录组测序与分析

    刊名:中国动物传染病学报 作者:邵华斌 ; 孔令严 ; 汪最 ; 张腾飞 ; 卢琴 ; 罗青平 关键词:禽源多杀性巴氏杆菌 ; 转录组测序 ; GO功能分析 ; KEGG功能分析 ; ARDB注释 机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室 年份:2019
    摘要:为鉴定禽源多杀性巴氏杆菌(avian Pasteurella multocida,Pm)四环素(Tetracycline,Tet)敏感株与耐药株(MIC=32μg/mL)在转录组水平上的差异,本研究采用RNA-seq技术对Tet敏感株与耐药株进行双向测序,通过GO、KEGG和ARDB数据库对表达差异基因进行注释和富集性分析。结果显示,共筛选出442个差异表达基因,其中包括103个上调基因和339个下调基因。通过GO功能富集分析显示差异表达基因多数富集于核糖体结构成分、rRNA结合、跨膜运输和离子转运等生物过程;对差异表达基因进行信号通路富集性分析,大多数差异表达基因分布在ABC转运蛋白与核糖体代谢途径中;对差异表达基因进行耐药基因注释(ARDB),发现其中的耐药基因主要为核糖体保护蛋白和外排系统两类。本研究表明禽源Pm对四环素耐药的耐药机制可能与细胞膜上ABC转运蛋白的过量表达以及核糖体保护蛋白有关。
  • 【期刊】 禽巴氏杆菌链霉素耐药株转录组测序与分析

    刊名:中国预防兽医学报 作者:邵华斌 ; 汪最 ; 孔令严 ; 卢琴 ; 罗青平 关键词:禽源多杀性巴氏杆菌 ; 转录组测序 ; GO功能分析 ; KEGG功能分析 ; ARDB分析 机构:[1]湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; [1]湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; [2]长江大学动物科学学院 ; [3]农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室 年份:2018
    摘要:为鉴定禽源多杀性巴氏杆菌(Pm)链霉素(Str)敏感株与耐药株(MIC=1024μg/mL)在转录组水平上的差异,本研究采用RNA-seq技术对Str敏感株与耐药株进行双向测序,筛选得到差异表达基因,通过GO、KEGG和ARDB数据库对差异表达基因进行分组和富集性分析,并利用荧光定量PCR对筛选出的差异表达基因进行验证。结果显示,共筛选获得625个差异表达基因,其中包括581个上调基因和44个下调基因。通过GO功能富集分析显示差异表达基因多数发挥细胞膜转运功能;对差异表达基因进行信号通路富集性分析显示,大多数差异表达基因分布在ABC转运蛋白与双组分系统代谢途径中;采用ARDB对差异表达基因进行耐药基因分析,显示其中的耐药基因主要为氨基糖苷转移酶类和外排系统两类。本研究结果表明,禽源Pm对Str的耐药机制可能与细胞膜上多药外排泵的过量表达和氨基糖苷转移酶类灭活抗菌药物有关。同时,也为进一步研究禽源Pm对Str的耐药机制奠定了基础。
  • 【期刊】 禽优势血清型大肠杆菌部分相关毒力基因的检测

    刊名:中国家禽 作者:邵华斌 ; 卢琴 ; 罗青平 ; 张腾飞 ; 汪宏才 ; 罗玲 ; 王红琳 ; 温国元 ; 张蓉蓉 关键词:禽大肠杆菌 ; 优势血清型 ; 毒力基因 机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 年份:2016
    摘要:为研究禽大肠杆菌的致病性及相关生物特性,试验对湖北省各地方养殖场送检的病料,通过分离培养及生化鉴定,分离得到232株禽大肠杆菌。18个O因子血清鉴定结果显示,优势血清型为O_(20)(19)、O_(78)(27),这两种血清型菌株合计46株,占血清型定型菌株的25.99%(未定型菌株为55株)。对优势血清型禽大肠杆菌菌株进行毒力基因检测,结果表明fimH、iroD、iucD、estA和ibeA基因携带率分别为87.88%、57.58%、48.49%、36.37%、0%。研究结果为湖北地区大肠杆菌防控和疫苗的研制提供数据支撑,并为阐明大肠杆菌的致病机理奠定基础。
  • 【期刊】 47株空肠弯曲菌湖北禽源株的多位点序列分型

    刊名:微生物学报 作者:邵华斌 ; 董俊 ; 韩梅 ; 周康 ; 罗青平 ; 张腾飞 关键词:空肠弯曲菌 ; 多位点序列分型 机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 ; 长江大学动物科学学院 年份:2016
    摘要:【目的】为了解湖北地区家禽空肠弯曲菌的流行状况及其分子特征,应用多位点序列分型方法对2013–2014年的47株禽源空肠弯曲菌湖北分离株进行分子分型研究。【方法】以空肠弯曲菌的7个管家基因aspA、glnA、gltA、glyA、pgm、tkt和uncA为目的基因,提取样本基因组后PCR扩增,测序和分析。将测序结果上传数据库进行比对,制作成多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)遗传进化树。【结果】分离株共有38个ST型,10个克隆群,其中最多的克隆群为ST-353CC和ST-464CC,发现2个新的等位基因编号和25个新的ST型。遗传进化树显示,不同家禽宿主中空肠弯曲菌序列型存在一定的差异,不同地区和来源的空肠弯曲菌呈现出遗传多样性。【结论】本研究对湖北分离的47株禽源空肠弯曲菌进行了MLST分析,其结果显示菌株多样性较为丰富,将为我国家禽空肠弯曲菌的流行病学调查提供科学的数据。
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