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  • 【期刊】 骨桥蛋白可促进骨关节炎软骨细胞增殖

    刊名:中国组织工程研究 作者:姜未 ; 林博文 ; 张轩 ; 王华 ; 高曙光 ; 张方杰 关键词:软骨细胞 ; 组织构建 ; 骨桥蛋白 ; 骨关节炎 ; 细胞增殖 ; 慢病毒转染 机构:深圳市人民医院骨关节科 ; 深圳市人民医院骨关节科 ; 暨南大学第二临床医学院 ; 广东省深圳市 ; 中南大学湘雅医院骨科 ; 湖南省长沙市 年份:2017
    摘要:背景:骨桥蛋白是一种细胞外多功能基质糖蛋白,已被证实参与调控骨关节炎软骨细胞外基质成分的合成分解代谢,但对于骨关节炎软骨细胞本身增殖能力的影响,报道较少.目的:观察骨桥蛋白对人膝骨关节炎软骨细胞增殖能力的影响.方法:所有软骨标本均取自湘雅医院于2012年1至6月因骨关节炎行膝关节置换患者,分离培养骨关节炎软骨细胞,分别予以骨桥蛋白干预、骨桥蛋白shRNA慢病毒转染、空白对照及Con-shRNA转染等处理,利用MTT及BrdU法检测细胞的增殖能力变化.结果与结论:①骨桥蛋白shRNA慢病毒对骨关节炎软骨细胞转染率为80%;②与对照组相比,骨桥蛋白干预可明显上调骨关节炎软骨细胞吸光度值(P<0.05),而骨桥蛋白shRNA慢病毒干扰组吸光度值则显著下降(P<0.05);③骨桥蛋白shRNA转染后,骨桥蛋白的表达水平显著下降(P<0.05);④结果表明骨桥蛋白可促进骨关节炎软骨细胞增殖,有望成为治疗骨关节炎的新靶点.
  • 【期刊】 骨性关节炎软骨细胞凋亡的研究进展

    刊名:中国社区医师 作者:郭鹏 ; 范建楠 ; 单霖 ; 闫飞 关键词:骨性关节炎 ; 软骨细胞凋亡 ; 影响进展 机构:贵州医科大学 ; 贵州医科大学 年份:2019
    摘要:骨性关节炎(OA)作为临床常见关节退行性疾病中的一种,近年来,临床有相关研究结果明确证实,OA的发病机制主要是患者软骨细胞凋亡程度过高,但还没有相关报道指出此类现象的主要发生机制,多是以患者体内外各种凋亡诱导因子凋亡途径受多条信号转导通路刺激影响被激活,进而汇集成为Caspase级联放大反应一条通路作主要解释,为患者今后病症防治提供支持。综合上述观点,本文大致阐述OA软骨细胞凋亡临床特点、诱因、凋亡途径等多种情况,详情如下。
  • 【期刊】 丹参酮ⅡA对软骨细胞去分化影响的研究

    刊名:中国骨与关节损伤杂志 作者:张煜珅 ; 张普华 ; 刘鑫成 ; 成西侠 ; 范宏斌 关键词:软骨细胞 ; 去分化 ; 丹参酮ⅡA ; 组织工程 机构:第四军医大学第一附属医院全军骨科研究所 ; 第四军医大学第一附属医院全军骨科研究所 ; 西昌市人民医院外一科 年份:2017
    摘要:目的 研究丹参酮ⅡA在大鼠膝软骨细胞体外培养中对软骨细胞去分化的影响.方法 采用Ⅱ型胶原酶消化法获取2周龄SD大鼠膝关节原代软骨细胞,体外培养传代至P4进行实验.对照组用含10%小牛血清高糖DMEM培养(基础培养液).实验组有3个浓度:100 μg/ml组用基础培养液+100 μg/ml丹参酮ⅡA培养,200 μg/ml组用基础培养液+200 μg/ml丹参酮ⅡA培养,400 μg/ml组用基础培养液+400 μg/ml丹参酮ⅡA培养.培养72 h后,采用CCK-8法检测各组细胞增值情况,光学显微镜观察软骨细胞形态,阿利新蓝染色观察糖胺聚糖(GAG)含量,实时荧光定量PCR检测Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅹ型胶原表达情况.结果 400 μg/ml组肉眼可见的细胞密度低于其他各组,且阿利新蓝染色最浅.培养24 h、48 h、72 h,100 μg/ml组、200 μg/ml组的OD值均大于对照组,而400 μg/ml组OD值均小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).实验组的Ⅰ型、Ⅹ型胶原mRNA含量明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).400 μg/ml组Ⅱ型胶原mRNA含量低于对照组,100μg/ml组、200 μg/ml组Ⅱ型胶原mRNA含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);但100 μg/ml组、200 μg/ml组差异无统计学意义(P>0.05).结论 不同浓度的丹参酮ⅡA对去分化软骨细胞作用有所区别,100 μg/ml、200 μg/ml时促进软骨细胞增殖,抑制去分化进程;400 μg/ml时抑制软骨生长活性,细胞基质分泌减少.
  • 【期刊】 大鼠膝关节软骨细胞的分离培养与鉴定

    刊名:山东医学高等专科学校学报 作者:黄玉香 ; 张建军 ; 郭志英 ; 谭何新 ; 刁勇 关键词:软骨细胞 ; 大鼠膝关节 ; 细胞分离 ; 细胞培养 机构:泉州医学高等专科学校药学院 ; 泉州医学高等专科学校药学院 ; 华侨大学生物医学学院 ; 中国人民解放军第二军医大学药学院 年份:2017
    摘要:目的对大鼠膝关节软骨细胞进行分离和培养,观察大鼠软骨细胞的形态学变化。方法通过酶消化法获得大鼠膝关节软骨细胞并进行传代培养;利用倒置相差显微镜观察各代软骨细胞形态变化;采用CCK-8法检测软骨细胞增殖能力,利用紫外分光光度法获得OD值评价软骨细胞生长趋势;采用细胞免疫荧光法检测Ⅱ型胶原表达情况,在荧光倒置相差显微镜下对软骨细胞进行鉴定。结果在酶消化下可获得高纯度软骨细胞,原代细胞多数呈多角形,细胞形态随传代次数增加有变梭形趋势,细胞活力在第三代之后明显减弱,细胞免疫荧光检测显示胶原Ⅱ高表达。结论成功获得大鼠膝关节软骨细胞并进行形态学的观察比较,P3代前的软骨细胞相对稳定,进行软骨细胞相关研究采用P0至P3代软骨细胞为宜。
  • 【期刊】 T-2毒素对软骨细胞增殖及细胞周期的影响

    刊名:中华地方病学杂志 作者:闫盼[1] ; 付晓艳[2] ; 王红格[1] ; 姜宇婷[1] ; 邵汉文[1] ; 卜野[1] ; 荣胜忠[1] ; 邹宁[2] ; 高彦辉[1] ; 孙殿军[1] 关键词:软骨细胞 ; T-2毒素 ; 细胞增殖 ; 细胞周期 机构:[1]哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心地氟病防治研究所国家卫生计生委病因流行病学重点实验室黑龙江省普通高校病因流行病学重点实验室 ; [1]哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心地氟病防治研究所国家卫生计生委病因流行病学重点实验室黑龙江省普通高校病因流行病学重点实验室 ; [2]哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心实验室 年份:2018
    摘要:目的研究T-2毒素对大鼠软骨细胞增殖和细胞周期的影响,为T-2毒素致软骨细胞损伤的分子机制研究提供新思路。方法提取新生Wistar大鼠的原代软骨细胞,通过甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色进行细胞鉴定。采用细胞增殖/毒性检测试剂盒(CCK-8)检测不同剂量的T-2毒素[0(对照),1、5、10、20、50、100μg/L]染毒24h对软骨细胞增殖的影响,根据细胞存活率选择对照,1、5、10μg/L(低、中、高剂量)T-2毒素用于后续实验。采用流式细胞术检测细胞周期变化;实时荧光定量PCR法和免疫印迹法分别检测T-2毒素对软骨细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)mRNA和蛋白表达水平的影响。结果随T-2毒素染毒剂量增加(对照,1、5、10、20、50、100μg/L),软骨细胞存活率降低[(100.00±0.00)%、(93.12±1.66)%、(77.12±1.11)%、(59.44±4.09)%、(46.64±3.86)%、(38.15±3.37)%、(33.79±0.99)%],组间比较差异有统计学意义(F=139.21,P〈0.05)。1、5、10μg/L T-2毒素组静止期/DNA合成前期(G0/G1期)细胞[(22.03±O.42)%、(30.54±2.61)%、(36.01±1.51)%]均明显高于对照组[(13.79±1.65)%,P均〈0.05];DNA合成期(S期)细胞[(60.27±3.53)%、(53.88±4.38)%、(49.55±2.49)%]均明显低于对照组[(76.72±4.24)%,P均〈0.05]。对照组,1、5、10μg/L T-2毒素组PCNA、Cyclin D1 mRNA水平组问比较差异有统计学意义(F=46.80、17.97,P均〈0.05),其中5、10μg/L T-2毒素组(0.77±0.13、0.79±0.08,0.60±0.07、0.56±0.05)均明显低于对照组(0.99±0.02、1.01±0.01,P均〈0.05)。5、10μg/L T-2毒素组PCNA蛋白水平(0.69±0.03、0.49±0.03)均低于对照组(O.92±0.05,P均〈0.05);1、5、10�
  • 【期刊】 miR-34a靶向MMP-13调控大鼠软骨细胞凋亡的机制

    刊名:《暨南大学学报:自然科学与医学版》 作者:刘宁 ; 谭文成 ; 夏吉生 ; 黄馨霈 ; 潘京华 ; 顾容赫 ; 查振刚 关键词:软骨细胞 ; miR-34a ; 凋亡 ; 基质金属蛋白酶13 ; 靶点基因 机构:暨南大学附属第一医院骨关节外科 ; 暨南大学附属第一医院骨关节外科 ; 澳门仁伯爵综合医院骨科 ; 澳朗仁和医疗中心 ; 广东阳江市人民医院骨科 年份:2016
    摘要:目的:探讨调控miR-34a的表达对大鼠软骨细胞凋亡的影响.方法:大鼠关节软骨原代细胞培养,慢病毒转染miR-34a、miR-34ainhibitor分别使大鼠关节软骨细胞miR-34a过表达和抑制表达,另设无关序列对照组,An-nexinV/PI双染流式细胞术分析对比各组大鼠软骨细胞凋亡率,通过生物信息学方法预测miR-34a调控软骨细胞凋亡潜在基因靶点,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(realtime-PCR)检测各组软骨细胞miR-34a的表达,检测软骨凋亡相关因子MMP-13、Col2a1的mRNA转录水平;免疫印迹法检测各组的MMP-13、Col2a1、caspase-3的蛋白表达水平.结果:miR-34a过表达后大鼠软骨细胞凋亡增多,抑制miR-34a表达后大鼠软骨细胞凋亡减少,同时miR-34a过表达后caspase-3的表达增高(P〈0.05),miR-34a过表达后Col2a1在mRNA和蛋白水平表达下降,而MMP-13的表达增加(P〈0.05).沉默miR-34a的表达后Col2a1在mRNA和蛋白水平表达增加,而MMP-13的表达下降.MMP-13是miR-34a调控大鼠软骨细胞凋亡的潜在靶点.结论:miR-34a的表达调控大鼠软骨细胞凋亡,MMP-13是miR-34a其机制中的潜在靶点.
  • 【期刊】 X线与CT对成软骨细胞瘤的诊断价值

    刊名:医疗装备 作者:王云涛; 关键词:X线;;CT;;成软骨细胞瘤;;影像学表现 机构:天津市宝坻区人民医院 ; 天津市宝坻区人民医院 年份:2017
    摘要:目的比较X线和CT诊断检查方法对成软骨细胞瘤的诊断价值。方法选取2016年1—12月收治的经手术病理检查结果确诊的成软骨细胞瘤患者50例,分别行X线和CT诊断检查,比较两种方法的影像学表现。以手术病理检查结果金标准,比较两种方法的检出率。结果影像学分析:X线诊断影像能够清晰地展示出病灶的形态,而CT诊断则表现为病灶边缘清晰,肿瘤内部存在不同形态的钙化灶。CT诊断检出率高于X线诊断结果,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 X线和CT诊断各有特色,但是CT诊断的临床价值更加显著,其诊断检出率较高,两种诊断方法联合应用效果会更佳。
  • 【期刊】 二氮嗪对软骨细胞氧化损伤的影响

    刊名:中医正骨 作者:彭磊 ; 程少文 ; 沈跃 ; 应晓洲 ; 赵志蓉 ; 安涛 ; 周英勇 ; 程晓杰 ; 陈庆玉 ; 吕传柱 关键词:软骨细胞 ; 二氮嗪 ; 活性氧 ; 凋亡 机构:海南医学院附属医院 ; 海南医学院附属医院 ; 温州医科大学 ; 海南医学院 年份:2014
    摘要:目的:探讨二氮嗪对双氧水诱导的软骨细胞氧化损伤的影响。方法:取SD乳鼠膝关节软骨细胞进行原代培养,将对数生长期的软骨细胞分成5组,分别为阴性对照组(A组),双氧水组(B组),H2O2+0.1μmol·L-1二氮嗪组(C组),H2O2+1.0μmol·L-1二氮嗪组(D组),H2O2+10μmol·L-1二氮嗪组(E组);A组细胞不做特殊处理,B组用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4 h,C、D、E、F组预先分别用0.1μmol·L-1DZ,1.0μmol·L-1DZ,10μmol·L-1DZ,100μmol·L-1在37℃的恒温箱孵育30分钟,PBS洗涤细胞,再用0.3 mmol·L-1双氧水在37℃恒温箱内孵育4小时。分别检测ABCDE各组细胞的细胞活性,ROS的量,细胞凋亡情况。结果:①MTT法检测各组细胞活性,细胞活性率从大至小依次为D组>C组>E组>F组>B组;②用活性氧探针DCFH-DA检测各组细胞中的ROS的量,ROS产量从多至少依次为B组>E组>D组>C组>A组;③流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,各组细胞凋亡率由大至小依次为B组>E组>D组>C组。④Western bolt检测各组软骨细胞中HIF-1α蛋白的表达,各组软骨细胞中HIF-1α蛋白表达量依次为C组>D组>E组>A组>B组。结论:二氮嗪可降低双氧水诱导的软骨细胞的凋亡率,同时也降低双氧水诱导的软骨细胞ROS的产生,并诱导软骨细胞产生HIF-1α蛋白,可能存在二氮嗪诱导HIF-1α的表达,引起下游相关基因的转录,总体提高软骨细胞对氧化损伤的耐受力,阻碍自由基诱导的软骨细胞的凋亡。
  • 【期刊】 环丙沙星对犬软骨细胞增殖的影响

    刊名:中国畜牧兽医文摘 作者:陈旭明 ; 谢鹏飞 ; 史秋盛 关键词:软骨细胞 ; 环丙沙星 ; 机构:江苏省溧阳市竹箦镇畜牧兽医站 ; 江苏省溧阳市竹箦镇畜牧兽医站 年份:2014
    摘要:目的:研究环丙沙星对体外培养的犬软骨细胞的作用,探讨喹诺酮类药物对软骨细胞的毒性作用机制。方法:采用犬软骨细胞体外培养技术,将犬软骨细胞在各含不同药物浓度的培养基中培养一定时间后,以MTT法测定环丙沙星对细胞增殖的影响。结果:环丙沙星在0.05、0.10、0.15g/L浓度时对体外培养的犬软骨细胞具有抑制增殖的作用,抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性。结论:环丙沙星可抑制犬软骨细胞增殖。
  • 【期刊】 大鼠髁突软骨细胞培养及生物学特性研究

    刊名:中华实用诊断与治疗杂志 作者:陈秋秋 ; 肖朋 ; 刘海霞 ; 张永富 关键词:软骨细胞 ; 颞下颌关节 ; 生物学特性 ; 大鼠 机构:新疆医科大学第二附属医院口腔科 ; 新疆医科大学第二附属医院口腔科 ; 新疆医科大学第一附属医院口腔科 年份:2017
    摘要:目的 探讨大鼠颞下颌关节髁突软骨细胞的培养方法,观察细胞的生物学特性.方法 分离3只Wistar大鼠髁突软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化法联合组织块法获取髁突软骨干细胞,采用MTT法检测细胞生长曲线,采用甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学法和Ⅱ型胶原免疫荧光法鉴定细胞来源.结果 Ⅱ型胶原酶消化法联合组织块法消化髁突软骨组织18~20 h可获得最大量细胞;体外培养软骨细胞主要呈多角形,第1~4代细胞具有稳定生物学特性,5代及5代以后逐渐出现老化细胞;MTT检测结果显示第3代细胞可最快达指数生长期;髁突软骨细胞经甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及免疫荧光染色鉴定,结果均为阳性表达,细胞来源于软骨.结论 Ⅱ型胶原酶消化法联合组织块法可作为髁突软骨细胞获取方法;4代以内细胞具有稳定的生物学特性,可用于其他实验.
  • 【期刊】 雌激素与尼古丁对软骨细胞基质代谢影响

    刊名:上海交通大学学报(农业科学版) 作者:彭笑芸 ; 乔之光 ; 王朝霞 关键词:软骨细胞 ; 骨关节炎 ; 雌激素 ; 尼古丁 机构:上海交通大学生命技术学院 ; 上海交通大学生命技术学院 ; 上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科上海市骨科内植物重点实验室 ; 上海交通大学实验动物中心 年份:2019
    摘要:雌激素和尼古丁是2种对骨关节炎发病有影响的重要因素,但其影响的具体分子机制仍然存在争议。本研究旨在探讨这2种因素单独和叠加对软骨细胞代谢的影响,从而为骨关节炎的发病机制研究提供一定的参考。鼠胚胎瘤来源的软骨前体细胞系ATDC5在进行铁硒传递蛋白ITS定向诱导能够分化为软骨细胞。研究中对诱导后获得的软骨细胞用雌激素及尼古丁进行了处理。处理后细胞胞外基质蛋白聚糖和二型胶原表达水平分别用甲苯胺蓝染色和免疫组化进行检测,蛋白表达水平和mRNA水平分别进行了Western blot和Real-time PCR验证。研究结果显示尼古丁会造成软骨细胞2种胞外基质分泌的降低,并且促进分解酶MMP13的表达,抑制合成相关蛋白BMP-7的表达。而雌激素能够通过抑制分解酶MMP13和促进基质合成相关蛋白BMP-7的表达来挽回尼古丁对软骨细胞胞外基质的破坏作用。但在mRNA水平,与仅用尼古丁处理相比,雌激素会同时促进mmp13和bmp-7的表达,推测是因为雌激素增强了细胞的代谢效率。这些结果表明,雌激素对受到尼古丁影响的软骨细胞具有保护作用,这可能是骨关节炎初期防治的一个潜在治疗方案。
  • 【期刊】 Sirt6促进自噬抑制软骨细胞衰老的体外研究

    刊名:温州医科大学学报 作者:张辉 ; 孙嘉利 ; 陈泽新 ; 武垚森 ; 林焱 关键词:软骨细胞 ; 骨关节炎 ; 细胞衰老 ; Sirt6 ; 自噬 机构:温州医科大学附属第二医院育英儿童医院骨科 ; 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院骨科 ; 温州医科大学第二临床医学院 年份:2018
    摘要:目的:明确Sirt6对软骨细胞衰老的影响,探讨自噬在Sirt6抑制软骨细胞衰老中的作用。方法:体外培养SD大鼠膝关节软骨细胞,通过连续传代致软骨细胞衰老,β-半乳糖苷酶(β-gal)染色检测细胞衰老,Western blot检测Sirt6的蛋白表达变化。原代软骨细胞中借助慢病毒敲低Sirt6或过表达Sirt6,比较各组的最大传代次数及细胞衰老情况,通过q PCR比较二型胶原(Collagen-Ⅱ)、蛋白聚糖(Aggrecan)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及ADAMT-5的m RNA表达来探讨Sirt6对软骨细胞功能的影响。在软骨细胞中过表达Sirt6后通过免疫荧光染色观察细胞中自噬泡的变化,Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比例来探讨Sirt6对软骨细胞自噬的影响。在过表达Sirt6的同时通过使用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)来验证细胞自噬在Sirt6抑制软骨细胞衰老和功能退变中的作用。结果:连续体外培养软骨细胞,随着细胞传代次数的增加,Sirt6基因的表达量逐渐降低,原代软骨细胞中敲低Sirt6后,软骨细胞提前衰老,P16蛋白的表达量明显升高;软骨细胞中过表达Sirt6可以明显延缓细胞衰老;Sirt6可以促进软骨细胞自噬的发生;使用自噬抑制剂后可以明显抑制Sirt6对软骨细胞的保护作用。结论:提高Sirt6的表达水平可以延缓软骨细胞衰老及退变,且这种作用与Sirt6促进软骨细胞自噬相关。
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