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  • 【期刊】 色氨酸对断奶仔猪氨基酸转运载体的影响

    刊名:现代食品科技 作者:江敏 ; 阮征 ; 米书梅 ; 李小兰 ; 熊霞 ; 李铁军 ; 周艳 ; 印遇龙 关键词:转运载体 ; 色氨酸 ; 氨基酸 ; 断奶仔猪 机构:南昌大学食品学院 ; 南昌大学食品学院 ; 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室 ; 中国科学院亚热带农业生态研究所 年份:2016
    摘要:色氨酸(tryptophan,Trp)是一种特殊的氨基酸,它参与调节蛋白质的合成,同时在调节食欲与维持等方面都有很重要的作用。本文通过测定断奶仔猪的生长性能、血清中生化指标和游离氨基酸含量、肝脏色氨酸2,3-加双氧酶(tryptophan 2,3-dioxygenase,TDO)和肠道吲哚胺2,3-加双氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)含量及Trp相关氨基酸转运载体基因表达,来探讨Trp对断奶仔猪氨基酸转运载体的影响。结果发现,添加0.2%Trp可显著增加日增重与日采食量,显著增加血液中色氨酸与亮氨酸的含量,显著降低缬氨酸与异亮氨酸的含量。0.1%Trp可显著增强肝脏TDO含量,0.2%Trp显著增加空肠IDO含量。添加0.2%Trp显著增加空肠基因ATB0,+、4F2hc、B0AT1和ASCT2表达(P<0.05)。综上,Trp能够促进相关氨基酸转运载体的表达,最终促进氨基酸的转运吸收。说明Trp可以通过上调氨基酸转运载体表达来调控机体健康。
  • 【期刊】 氨基酸转运载体LAT1对小鼠胎盘早期建立的影响

    刊名:中国实验动物学报 作者:马婧 ; 谭毅 ; 谭冬梅 ; 卢俊杰 ; 梁浩 ; 罗文萍 关键词:小鼠 ; 胎盘 ; L型氨基酸转运载体1 ; 绒毛膜锥 机构:重庆医科大学实验动物中心 ; 重庆医科大学实验动物中心 ; 重庆医科大学附属口腔医院 年份:2015
    摘要:目的观察L型氨基酸转运载体1(L-type amino acid transporter 1,LAT1)在妊娠小鼠第8天(D8)子宫中的表达,探讨LAT1在早期胎盘形成过程中的作用。方法 120只6~8周龄SPF级KM雌鼠作为研究对象,免疫组织化学检测LAT1在妊娠小鼠D8子宫中的表达情况,原代分离D8.5的绒毛膜锥(EPCs),检测LAT1特异抑制剂2-氨基双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸(2-aminobicyclo-(2,2,1)-heptane-2-carboxylic acid,BCH)以及LAT1的作用底物亮氨酸(L-leucine)对EPCs黏附及外延生长能力的影响。结果 LAT1高表达于D8子宫蜕膜区,在EPCs中亦呈现阳性表达。LAT1的特异性抑制剂BCH显著性抑制EPCs的外延生长,而亮氨酸对EPCs的外延生长抑制作用差异无显著性。结论 LAT1表达于小鼠早期胎盘形成期的子宫中,从而推测LAT1可能促进滋养层对母体蜕膜组织的侵袭,进而参与胎盘早期的建立。
  • 【期刊】 谷氨酰胺转运载体ASCT2在肿瘤中的研究进展

    刊名:肿瘤防治研究 作者:王雅乐 ; 黄承浩 关键词:谷氨酰胺转运载体 ; ASCT2 ; 肿瘤 年份:2019
    摘要:肿瘤细胞具有独特的代谢需求,其代谢过程需要消耗大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺与肿瘤细胞的增殖密切相关,它可以调节细胞的存活、代谢、信号转导、自噬等。丙氨酸-丝氨酸-半胱氨酸转运载体2(alanine-serine-cysteine transporter 2, ASCT2)是Na~+依赖性的,主要通过跨膜转运谷氨酰胺及一些大分子中性氨基酸。ASCT2在许多肿瘤细胞中都是过度表达的,且ASCT2的高表达与肿瘤患者的不良预后呈正相关。目前国外已将谷氨酰胺的代谢和转运载体作为治疗靶标,进行抗肿瘤新药的研发,但国内对谷氨酰胺转运载体的相关研究报道较少,故本文就ASCT2的结构、表达及在肿瘤中的作用等作一综述。
  • 【期刊】 小肽转运载体在分子靶向显像研究中的应用

    刊名:中国医学影像学杂志 作者:丁志超 关键词:分子影像学 ; 肽类 ; 分子探针 ; 体层摄影术,光学 ; 磁共振成像 ; 综述 ; @@ 机构:海南医学院临床学院 ; 海南医学院临床学院 年份:2017
    摘要:@@
  • 【期刊】 鳜小肽转运载体PepT1基因分子特征及其表达研究

    刊名:水生生物学报 作者:刘知行 ; 张健东 ; 刘小燕 ; 李虹辉 ; 王开卓 ; 陈琳 ; 褚武英 ; 张建社 关键词:鳜鱼 ; 小肽转运载体 ; 克隆 ; 表达分析 机构:湖南农业大学动物科技学院 ; 湖南农业大学动物科技学院 ; 长沙大学生物工程与环境科学系 ; 广东海洋大学水产学院 年份:2014
    摘要:小肽转运载体(PepT1)是低亲和力、高容量的肽转运载体,在小肽的吸收过程中发挥着重要的作用。研究采用同源克隆和RACE技术克隆了鳜鱼(Siniperca chuatsi)PepT1基因全长cDNA序列,其cDNA序列全长为2480 bp,包含43 bp的5′UTR序列,232 bp的3′UTR序列,以及2205 bp开放阅读框,编码735个氨基酸。氨基酸序列同源性分析结果显示,鳜鱼与石斑鱼(Epinephelus aeneus)、鲈鱼(Dicentrarchus labrax)PepT1间同源性均为89%,与其他非鱼类物种的同源性则在46%—56%。经预测,鳜鱼PepT1编码蛋白的分子量为64.8 kD,等电点为8.97,该蛋白具有与哺乳动物同源蛋白相似的12个螺旋跨膜结构,并且在跨膜区9和10之间有一个大的外环;跨膜区氨基酸高度保守,并存在有5个膜外N-糖基化位点和3个膜内含蛋白激酶C基序的相同区域。实时荧光定量表达分析表明,鳜鱼PepT1基因在前肠和中肠中表达量显著高于后肠(P<0.05),这说明前、中肠是鳜鱼肠道吸收小肽的主要部位;在胚后不同发育阶段鳜鱼前肠均能检测到PepT1基因的表达,并且在10 g个体中表达量最高,之后随着体重的增加其表达量维持在一个稳定水平。本研究结果首次报道了鳜鱼PepT1基因全序列及其分子表达特征,为鱼类营养及生理学的研究提供有价值的参考资料。
  • 【期刊】 草鱼小肽转运载体PepTl基因的克隆与表达特征

    刊名:中国水产科学 作者:冯军厂 ; 刘臻 ; 鲁双庆 ; 聂国兴 ; 周玲 ; 孙浪 关键词:草鱼 ; PepTl cDNA ; 分子特征 ; mRNA表达丰度 机构:长沙学院生物技术与营养研究所 ; 长沙学院生物技术与营养研究所 ; 长沙学院生物工程与环境科学系 ; 河南师范大学生命科学学院 年份:2013
    摘要:采用同源克隆和RACE技术克隆草鱼(Ctenopharyngodon idellus)PepTl基因的全长eDNA序列。该cDNA全长为2762bp,包含141bp的5'UTR序列,479bp的3'UTR序列,2142bp开放阅读框,编码713个氨基酸;草鱼与鲫(Carassius auratus)、斑马鱼(Danio rerio)的核苷酸同源性分别为77.6%和74.0%,氨基酸同源性分别为78.0%和76.7%;与其他物种的核苷酸同源性为53.9%~59.1%,而氨基酸的同源性为57.2%~61.8%。经预测,其编码蛋白的分子量为79.29kD,等电点为5.87,该蛋白具有与哺乳动物十分相似的11个螺旋跨膜结构,跨膜区氨基酸高度保守;系统进化分析表明,草鱼PepT/基因与鲫鱼和斑马鱼的亲缘关系最近;利用Real—timePCR技术检测了该基因的时空表达,结果显示,PepTl在草鱼前肠组织表达量最高,其次是肌肉组织;草鱼出膜7d后PepTlmRNA表达量相对稳定;昼夜节律研究发现,肠道PepTl基因夜间的表达量较白天高。本研究旨在为小肽转运载体PepTl介导肠道转运小肽调控草鱼对饲料蛋白消化吸收的分子机理提供理论基础。
  • 【期刊】 蛋鸡小肠肽转运载体PepT1表达差异性的评定

    刊名:中国家禽 作者:梁陈冲 ; 王书山 ; 陈宝江 ; 孙展英 关键词:蛋鸡 ; 小肽转运载体 ; PepT1 mRNA表达 机构:河北农业大学动物科技学院 ; 河北农业大学动物科技学院 ; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 ; 邢台市园林局 年份:2012
    摘要:本试验旨在研究蛋鸡十二指肠、空肠、回肠小肽转运载体mRNA表达的差异性。选用相同背景的健康成年蛋鸡10只,从十二指肠、空肠、回肠组织提取RNA样品,采用相对定量RT-PCR,对蛋鸡小肠各段肽转运载体mRNA表达的差异性进行评定。结果表明,蛋鸡空肠PepT1 mRNA的表达水平显著高于十二指肠(P<0.05),与回肠比差异不显著(P>0.05),十二指肠PepT1 mRNA的表达水平与回肠之间无显著差异(P>0.05)。
  • 【会议】 大菱鲆小肽转运载体PepT1的克隆与组织表达

    作者:谈枫 ; 郑珂珂 ; 梁萌青 关键词:大菱鲆 ; 小肽转运载体 ; 基因克隆 ; 表达 机构:中国水产科学研究院黄海水产研究所 ; 中国水产科学研究院黄海水产研究所 年份:2013
    摘要:克隆了大菱鲆小肽转运载体peptide transporterⅠ(PepT1)基因全长cDNA,并进行了序列分析。大菱鲆PepT1全长2629bp,5’端非编码区长度为69bp,3’端非编码区为,预测编码860个氨基酸。同源性对比发现大菱鲆PepT1与大西洋鲑(Salmo Salar)PepT1 cDNA全序列(AB455540)相似性为75%,与斑马鱼(Danio rerio)小肽转运蛋白cDNA全序列(BC054899)相似性为76%,与鲤(Cyprinus carpio)小肽转运蛋白cDNA片段(EU328390)相似性为84%。利用TMHMM 2.0程序对大菱鲆小肽转运载体PepT1进行跨膜结构预测,结果显示该氨基酸序列含5个跨膜区。采用实时荧光定量PCR检测PepT1在大菱鲆幽门盲囊、前肠、中肠、后肠、脾和肾脏等组织器官的表达和分布,结果显示PepT1在前肠和中肠高水平表达,在幽门盲囊、后肠、肝脏、脾、肌肉等组织低水平表达。
  • 【期刊】 穿膜肽介导的新型基因转运载体的功能研究

    刊名:生物技术通讯 作者:张宏达 ; 绳纪坡 ; 于芳 ; 黄君健 ; 胡宝成 关键词:穿膜肽 ; LacI前头肽突变体 ; 二聚体 ; DNA转运 机构:军事医学科学院生物工程研究所 ; 军事医学科学院生物工程研究所 年份:2013
    摘要:目的:借助穿膜肽TAT高效跨膜的特性和LacI前头肽突变体(LacI HPM)高亲和力结合DNA的特性,建立一种安全高效、无基因插入片段大小限制的基因转导系统。方法:在TAT-LacI HPM片段C端和N端分别添加GST标签,构建pET-28a(+)-TAT-LacI HPM-GST和pGEX-GST-TAT-LacI HPM重组表达载体,可溶性表达TAT-LacI HPM-GST及GST-TAT-LacI HPM融合蛋白并纯化,获得TAT-LacI HPM二聚体,免疫荧光检测TAT-LacI HPM融合蛋白穿过HeLa细胞膜的情况,观察EGFP的表达,用免疫印迹检测TAT-LacI HPM融合蛋白介导质粒DNA进入细胞的能力。结果:表达、纯化并获得二聚体融合蛋白,体内实验表明其具有跨膜能力,能介导带有LacI结合序列的DNA质粒进入细胞,并在转染细胞里检测到了目的蛋白。结论:初步证实TAT-LacI HPM融合蛋白作为一种新型通用性非病毒DNA转运载体的可行性,为评价这种新型DNA疫苗载体在提高免疫效果方面的可行性奠定了前期实验基础。
  • 【论文】 牦牛小肽转运载体PepT1的克隆及表达调控研究

    作者:石福于 关键词:牦牛 ; 本地黄牛 ; PepT1 ; 克隆及表达 ; 日粮氮水平 ; 小肽 机构:兰州大学 ; 兰州大学 年份:2017
    摘要:牦牛是青藏高原生态系统的特有畜种,其体貌特征、生理特点、牧食习性均有别于其它低海拔牛种。近年来研究发现,牦牛具有区别于其它低海拔牛种的适应高寒营养胁迫的独特氮循环代谢机制,其中应包括小肽吸收机制。小肽作为蛋白降解和参与合成蛋白的含氮营养物质,其在胃肠道的转运吸收主要通过PepT1的跨膜转运完成。目前围绕低海拔动物鸡、猪、绵羊、黄牛PepT1分子基础及调控机理已有相关报道,但针对高原反刍动物小肽转运载体PepT1的相关研究尚属空白。因此,本论文通过对牦牛PepT1基因的克隆、组织表达分布特征,以及活性调控的研究,旨在初步揭示牦牛吸收转运小肽的分子基础及调控机理。相关研究的深入开展,不仅可以丰富高原反刍动物蛋白质营养理论及研究手段,进而完善牦牛补饲策略,减少因日粮养分供给不平衡而造成的环境污染,具有长远的生态效益。研究内容包括:1)牦牛小肽转运载体PepT1的克隆及生物学分析;2)牦牛PepT1组织表达分布特性及比较研究牦牛与本地黄牛PepT1mRNA表达对日粮氮水平的响应;3)比较研究牦牛与本地黄牛PepT1mRNA表达在CHO-k1细胞中对底物小肽的响应特征。主要研究结果如下:1)通过RT-PCR和RACE末端快速扩增法克隆得到:牦牛小肽转运载体PepT1(yPepT1;Genbank:KT725253)全长包含2805bp,编码707个氨基酸,其中含有5个N-糖基化位点、2个PKA位点、3个PKC位点;预测该序列存在12个跨膜区,等电点(pI)为7.1,蛋白分子量为78.4kDa;无信号肽,为非分泌性蛋白。牦牛PepT1序列中Val(9.1%)含量最高,最低的为Trp(1.3%);非极性(疏水)AA占47.81%,极性(亲水性)AA占52.19%,为亲水性氨基酸;二级结构预测yPepT1编码的AA含有α螺旋、β折叠和无规则卷曲。系统进化分析亦发现牦牛与黄牛亲缘关系最近;同源性比对yPepT1与黄牛、绵羊、野猪、藏猪、人类、小鼠和家兔PepT1的同源性分别为:99%、95%、86%、85%、83%、81%和79%,其中yPepT1与黄牛PepT1的AA序列在第258、515、536、544个AA处存在差异。2)放牧牦牛PepT1mRNA在胃肠道各组织、肾脏和乳腺组织中均有表达,其中,空肠表达量最高,且显著高于其他组织(P<0.001),回肠和十二指肠次之,网胃和乳腺相对较低;其他组织相对表达量由高到低依次为瘤胃、瓣胃、结肠、皱胃、盲肠、肝脏及肾脏,其中皱胃、盲肠、肝脏及肾脏表达水平极低。3)牦牛和本地黄牛饲养和屠宰对比试验结果表明:PepT1mRNA在各组织中的表达量受基因型,日粮氮水平及二者交互影响。牦牛与本地黄牛PepT1mRNA相对表达量在瘤胃、瓣胃、十二指肠、空肠、回肠和肝脏组织存在基因型差异(P<0.05);在瘤胃、网胃、十二指肠、回肠组织中存在氮水平差异(P<0.05);随着日粮氮水平的增加,两基因型牛PepT1mRNA在瘤胃、瓣胃和回肠组织中线性增加(P<0.05),而在十二指肠和肝脏组织中呈线性下降(P<0.05)。在低氮(10.32g N/kg DM)水平下,本地黄牛PepT1mRNA相对表达量在瓣胃、十二指肠、回肠和肝脏显著高于牦牛,而在空肠,牦牛显著高于本地黄牛(P<0.05);在中低氮水平(19.49gN/kg DM)条件下,本地黄牛PepT1mRNA相对表达量在瘤胃、网胃、瓣胃、空肠和肝脏显著高于牦牛,而在回肠牦牛显著高于本地黄牛(P<0.05);在中高氮(28.50g N/kg DM)水平条件下,本地黄牛PepT1mRNA相对表达量在瘤胃、瓣胃、十二指肠、回肠和肝脏显著高于牦牛,而在网胃牦牛显著高于本地黄牛(P<0.05);在高氮水平条件下(37.6g N/kg DM),本地黄牛PepT1mRNA相对表达量在十二指肠和回肠显著高于牦牛,而在空肠牦牛显著高于本地黄牛(P<0.05)。这表明牦牛存在有别于黄牛的小肽吸收转运机制,且牦牛更能适应营养胁迫条件以适应其极端的生存环境。4)借助分子生物学方法成功构建牦牛和本地黄牛真核质粒表达载体pcDNA3.1-yPepT1和pcDNA3.1-bPepT1,并建立pcDNA3.1-yPepT1和pcDNA3.1-bPepT1质粒表达载体转染中国仓鼠卵母细胞(CHO-k1)的外源表达模型。通过yPepT1和bPepT1在CHO-k1细胞中瞬时表达,检测重组蛋白yPepT1和bPepT1对底物小肽的响应。结果表明:PepT1mRNA相对表达量存在基因型、小肽处理及两者交互的影响。添加小肽组PepT1mRNA相对表达量较对照组均有不同程度的增加,其中,牦牛PepT1mRNA相对表达量在Met-Lys、Lys-Met、Let-Lys、Thr-Ser-Lys、Lys-Try-Lys、Met-Gly-Met-Met组显著高于CKy组(P<0.05),而Met-Met、Leu-Ser-Phe、Lys-Thr-Ser与CKy组无显著差异(P>0.05);本地黄牛PepT1mRNA相对表达量在Met-Met、Met-Lys、Lys-Met、Lys-Lys、Leu-Ser-Phe、Lys-Thr-Ser、Thr-Ser-Lys组显著高于CKb组(P<0.05),而在Lys-Try-Lys和Met-Gly-Met-Met组与CKb组无显著差异(P>0.05)。此外,二肽处理组中,Met-Lys和Lys-Lys组PepT1mRNA相对表达量本地黄牛显著高于牦牛(P<0.05);三肽处理组中,Leu-Ser-Phe和Lys-Thr-Ser组PepT1mRNA相对表达量本地黄牛显著高于牦牛(P<0.05),而Lys-Lys组牦牛显著高于本地黄牛(P<0.05)。综上,牦牛与本地黄牛PepT1分子序列的差异、日粮氮调控的差异和底物调控的差异,表明牦牛具有有别于黄牛小肽吸收转运基础,这种差异性有利于其适应青藏高原生态环境。
  • 【期刊】 硬骨鱼类Na/Pi-H型转运载体蛋白家族研究与应用现状

    刊名:饲料工业 作者:徐中玉 ; 范兆廷 ; 陈伟兴 ; 田壮 ; 段可馨 关键词:硬骨鱼类 ; 蛋白家族 ; 应用 ; 载体 ; 转运 ; H型 ; Na ; 养殖过程 机构:东北农业大学动物科学技术学院水产养殖系 ; 东北农业大学动物科学技术学院水产养殖系 年份:2013
    摘要:近年来,水产养殖过程中磷的过量投入已经对水体造成了一定程度的污染。近期研究表明,鱼类能够吸收和保留日粮中磷的40%,剩下的60%污染了环境。
  • 【期刊】 肠道中赖氨酸转运载体的研究进展

    刊名:中国畜牧杂志 作者:姜廷波 ; 王莹 ; 赵艳飞 ; 孙泽威 ; 仲庆振 关键词:转运载体 ; 肠道 ; 赖氨酸 机构:吉林农业大学动物科技学院 ; 吉林农业大学动物科技学院 年份:2017
    摘要:赖氨酸作为玉米 豆粕型日粮的第一限制性氨基酸,是影响动物生长、发育至关重要的氨基酸.由于赖氨酸本身不能自由进出肠黏膜的特点,其吸收需要借助肠道细胞膜上的赖氨酸转运载体来实现,即赖氨酸转运载体的活性直接影响机体对赖氨酸的吸收.因此,本文从赖氨酸转运载体的分类、功能及其表达等几个方面进行了简要的综述.
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