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  • 【专利】 转基因小鼠

    摘要:本发明提供了转基因非人动物,特别是编码参与Aβ肽相关疾病的Aβ肽蛋白的转基因小鼠。本发明另外提供了包含编码Aβ肽的转基因的细胞和细胞系。本发明进一步提供了评估影响Aβ肽的物质的方法和组合物,用于治疗肽相关疾病的组合物中。
  • 【期刊】 转基因小鼠

    刊名:生物工程进展 作者:吴鹤龄 机构:北京大学生物系 ; 北京大学生物系 年份:1992
    摘要: 转基因动物是动物基因工程在医学和农业生物学研究中突出的成果。转基因动物在近十年中已取得很多成果,并为研究分子遗传学、发育生物学、医学遗传学提供了许多宝贵的资料,为研究肿瘤病因学及家畜育种开拓了新的途径。 细胞分化是细胞中各种基因相互作用,并选择表达的结果,人们长期以来利用细胞表达
  • 【期刊】 SND1转基因小鼠的构建

    刊名:中国生物工程杂志 作者:左志宇 ; 辛灵彪 ; 杨洁 ; 王鑫廷 关键词:转基因小鼠 ; SND1 ; 载体构建 机构:天津医科大学基础医学院免疫学系 ; 天津医科大学基础医学院免疫学系 ; 天津医科大学基础医学院医学分子生物学系 年份:2016
    摘要:目的:构建SND1过表达的转基因小鼠模型。方法:利用对小鼠SND1基因转录本构建SND1过表达载体p Insulator-CAG-3×FLAG-SND1,利用受精卵原核注射技术,将外源线性p Insulator-CAG-3×FLAG-SND1转基因载体注射到受精卵细胞核内,将存活受精卵进行胚胎移植制备SND1转基因小鼠,用PCR、RT-PCR技术鉴定转基因小鼠是否构建成功。结果:成功构建过表达SND1基因的转基因小鼠模型,为进一步研究SND1基因在动物体内的生物学功能奠定基础。
  • 【期刊】 Runx1转基因小鼠构建

    刊名:生物医学工程学杂志 作者:汤小菊 ; 李君丽 ; 刘小菁 ; 雷弋 ; 苏巧俐 ; 吴庆波 ; 罗凤鸣 关键词:转基因小鼠 ; 载体构建 ; Runx1 机构:四川大学华西医院再生医学研究中心心血管疾病研究室 ; 四川大学华西医院再生医学研究中心心血管疾病研究室 ; 四川大学华西医院全科医学科 年份:2013
    摘要:本研究目的在于构建Runx1转基因小鼠模型。利用含小鼠Runx1cDNA的ptetO7-Runx1-AscⅡ-IRES-EGFP表达载体,应用基因重组技术和显微注射技术,将纯化的线性化表达质粒ptetO7-Runx1-AscⅡ-IRES-EGFP注射进受精卵的原核内,将存活受精卵或存活胚胎移植制备Runx1转基因小鼠,用PCR技术和Southern blot实验方法鉴定转基因小鼠是否构建成功。实验结果表明本方法可成功构建携带Runx1基因的转基因小鼠模型,为进一步研究Runx1基因的生物学功能奠定了基础。
  • 【期刊】 Afp-cre-lacZ转基因小鼠的构建

    刊名:实验动物与比较医学 作者:顾晓雯[1] ; 孙瑞林[2] ; 费俭[1] 关键词:甲胎蛋白(Afp) 转基因 小鼠模型细胞示踪 机构:同济大学生命科学与技术学院 ; 同济大学生命科学与技术学院 年份:2017
    摘要:目的研究甲胎蛋白(Afp)阳性细胞的增殖分化在组织生长修复,肿瘤发生过程中的作用,建立Afp.CreERT转基因小鼠细胞示踪系统。方法采用DNA雄原核显微注射方法获得Afp—CreERT转基因小鼠,筛选出合适的品系后,使之与Rosa26-lacZ工具小鼠杂交,获得Cre/acZ双阳性的Afp—cre—lacZ转基因小鼠。结果显微注射后,共出生小鼠56只,经PCR鉴定Cre阳性小鼠共4只,阳性小鼠传代后各为一系。筛选内源性Alp表达与Cre表达相对符合的品系作为Afp.CreERT转基因小鼠品系建系。Afp.CreERT转基因小鼠与Rosa26-lacZ工具小鼠杂交,经PCR鉴定后获得CreflacZ双阳性的Afp—cre—lacZ转基因小鼠。经实时PCR,X—gal染色,免疫荧光染色鉴定后得到Afp—cre—lacZ转基因小鼠细胞示踪系统,同时证实该系统能够正确示踪Afp表达阳性的细胞,同时也能够应用于肝损伤小鼠模型中。结论成功构建了Afp-cre-lacZ转基因小鼠细胞示踪系统,为研究这类细胞的谱系发生提供了工具。
  • 【期刊】 Vill转基因小鼠的制备

    刊名:实验动物科学 作者:殷黎静 ; 杨伟伟 ; 殷筱舒 ; 顾小丽 ; 张艳丽 ; 李高天 ; 郑经纬 ; 吴宝金 关键词:转基因小鼠 ; Vill基因 ; pEF6/V5His-Vill ; 显微注射 机构:杭州师范大学实验动物科学实验室 ; 杭州师范大学实验动物科学实验室 ; 江苏大学实验动物中心 ; 山东省青岛第十七中学 年份:2014
    摘要:目的通过制备Vill转基因小鼠研究该基因的功能。方法与结果首先由RT-PCR方法获得全长约2 605 bp的Vill基因;经T载体克隆测序验证后,以克隆载体pMD19-T-Vill为模板,设计引物并引入酶切位点,将PCR扩增产物与pEF6/V5-His-LacZ同时进行酶切、连接,构建表达载体pEF6/V5His-Vill;经真核表达验证后,酶切获得含Vill基因的显微注射DNA构件;显微注射390枚受精卵后,在出生存活的77只仔鼠中获得转基因阳性G0代小鼠19只,其中16只能够稳定遗传并建系,转基因阳性小鼠外观未有明显改变。结论 Vill转基因小鼠为该基因的功能研究准备了实验材料。
  • 【期刊】 Plcd1转基因小鼠的制备

    刊名:杭州师范大学学报(自然科学版) 作者:杨伟伟 ; 殷筱舒 ; 殷黎静 ; 张艳丽 ; 李高天 ; 刘桂杰 ; 俞利平 ; 顾美儿 ; 吴宝金 关键词:转基因小鼠 ; Plcd1 ; pEF6/V5-His-Plcd1 ; 显微注射 机构:杭州师范大学实验动物中心 ; 杭州师范大学实验动物中心 ; 山东省青岛第十七中学 ; 江苏大学实验动物中心 年份:2013
    摘要:通过制备Plcd1转基因小鼠研究Plcd1基因功能.首先逆转录PCR获得约2.2kb的Plcd1基因全长,T载体克隆后测序验证;以pMD19-T-Plcd1为模板,通过设计引物及PCR扩增引入酶切位点,与pEF6/V5-His同时进行酶切、连接,构建pEF6/V5-His-Plcd1表达载体;经真核表达验证后,酶切获得目标片段,显微注射681枚受精卵,在82只仔鼠中获得转基因阳性首建鼠15只,其中13只稳定遗传并建系.PLCD1-HIS融合蛋白在睾丸组织中表达,在皮肤组织中无表达.Plcd1转基因小鼠为Plcd1功能研究奠定了基础.
  • 【期刊】 Avp -iCre 转基因小鼠的鉴定

    刊名:湖北师范学院学报:自然科学版 作者:李娟 李晓东 关键词:近日节律 Cre 转基因小鼠 机构:武汉大学生命科学学院 ; 武汉大学生命科学学院 年份:2015
    摘要:将Avp-iCre转基因首建小鼠传到C57BL/6背景。通过与纯合ROSA26 Cre报告小鼠交配来检测iCre(improved Cre,改进的Cre重组酶)的表达,在子代中研究β-gal(beta-galactosidase,β-半乳糖苷酶)与AVP( arginine vasopressin,精氨酸血管加压素)的共定位关系。利用ClockLab软件记录分析Avp-iCre小鼠跑轮运行行为节律的完整性。实验结果显示β-gal和AVP在SCN( suprachiasmatic nucleus,视交叉上核)的表达存在明显共定位;Avp-iCre小鼠具备正常行为节律,其周期为23.65±0.14 h(Mean ±SD),表明该Avp-iCre转基因小鼠可用于近日节律研究。
  • 【期刊】 Avp -iCre 转基因小鼠的鉴定

    刊名:湖北师范学院学报:自然科学版 作者:李娟 李晓东 关键词:近日节律 Cre 转基因小鼠 机构:武汉大学生命科学学院 ; 武汉大学生命科学学院 年份:2015
    摘要:将Avp-iCre转基因首建小鼠传到C57BL/6背景。通过与纯合ROSA26 Cre报告小鼠交配来检测iCre(improved Cre,改进的Cre重组酶)的表达,在子代中研究β-gal(beta-galactosidase,β-半乳糖苷酶)与AVP( arginine vasopressin,精氨酸血管加压素)的共定位关系。利用ClockLab软件记录分析Avp-iCre小鼠跑轮运行行为节律的完整性。实验结果显示β-gal和AVP在SCN( suprachiasmatic nucleus,视交叉上核)的表达存在明显共定位;Avp-iCre小鼠具备正常行为节律,其周期为23.65±0.14 h(Mean ±SD),表明该Avp-iCre转基因小鼠可用于近日节律研究。
  • 【期刊】 RFP转基因小鼠模型的建立

    刊名:黑龙江畜牧兽医 作者:张景锋[1,2] ; 霍永 ; 卫恒习 ; 李莉 ; 高凤磊 ; 张守全 关键词:红色荧光蛋白(RFP) ; 载体 ; 构建 ; 原核注射 ; 转基因 ; 小鼠模型 机构:华南农业大学动物科学学院广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室 ; 华南农业大学动物科学学院广东省农业动物基因组学与分子育种重点实验室 ; 河南牧业经济学院动物科技学院 年份:2017
    摘要:为了建立组织广泛表达红色荧光蛋白(redfluorescenceprotein,RFP)的转基因小鼠,为肿瘤和干细胞等研究提供动物模型,试验从pdsred—express2-n1载体上酶切后获得线性化的CMV—Dsred基因片段,将CMV—Dsred基因注入ICR小鼠受精卵雄原核内,获得的仔鼠利用活体荧光蛋白观察系统、PCR和Southern—blot的方法进行分子水平的检测,同时用后代小鼠的组织制作冰冻切片在荧光显微镜下观察。结果表明:荧光蛋白活体成像系统检测到组织广泛表达红色荧光蛋白的小鼠,阳性小鼠基因组中均检测到Dsred基因的整合,在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肠道、子宫、肌肉、脂肪和皮肤等组织器官中均检测到红色荧光蛋白。说明成功获得了组织广泛表达红色荧光蛋白转基因小鼠模型。
  • 【期刊】 FoxO1突变体转基因小鼠的建立

    刊名:中国畜牧兽医 作者:周国丽 ; 李浩 ; 路万平 ; 徐良 ; 杨冉 ; 杨国庆 关键词:转基因小鼠 ; FoxO1ΔDBD ; 基因型鉴定 ; 瘦素 ; 体重 机构:河南农业大学生命科学学院动物基因工程实验室 ; 河南农业大学生命科学学院动物基因工程实验室 年份:2018
    摘要:为探究FoxO1对瘦素信号传导的调节机制,本研究构建了重组质粒pEF1α-myc-FoxO1ΔDBD,并将其转染于293Rb细胞,应用Western blotting检测突变体FoxO1ΔDBD的表达;然后采用DNA原核显微注射的方法制备含有突变体FoxO1ΔDBD的转基因小鼠模型,以鼠尾基因组DNA为模板,PCR扩增鉴定基因型;采用实时荧光定量PCR和免疫共沉淀方法检测FoxO1ΔDBD在转录水平和翻译水平的表达,并对FoxO1ΔDBD转基因鼠进行表型分析。结果显示,试验成功构建了重组质粒pEF1α-myc-FoxO1ΔDBD,并在293Rb细胞中检测到了突变体FoxO1ΔDBD的表达,继而获得了10只首建鼠,建立了10个繁育系。试验建立了高G-C含量PCR扩增产物的基因型鉴定方法,并成功地应用于转基因小鼠中。实时荧光定量PCR和免疫共沉淀结果显示,在转录水平和翻译水平上成功地检测出FoxO1ΔDBD的表达,表型分析结果显示,转基因小鼠体重显著低于野生型小鼠(P〈0.05),提示瘦素的作用增强。综上所述,本试验成功构建了FoxO1ΔDBD转基因小鼠,为探究FoxO1对瘦素信号传导的调节机制提供研究模型。
  • 【期刊】 Fat-1转基因小鼠的研究进展

    刊名:药学研究 作者:高翔 ; 李文德 关键词:Fat-1转基因小鼠 ; n-6/n-3多不饱和脂肪酸 ; 研究进展 机构:广东天然药物研究与开发重点实验室 ; 广东天然药物研究与开发重点实验室 ; 广东医学院 年份:2014
    摘要:多不饱和脂肪酸(PUFAs)为人体必需脂肪酸,与人体健康密切相关,其中主要分为n-6和n-3两大类,在哺乳动物中n-6和n-3不能自身合成,只能通过饮食获取。人体内n-6/n-3 PUFAs比例均衡,是人类保持健康的一个重要组成部分。为了研究n-6/n-3 PUFAs的比例在疾病中的预防作用,研究者培育了可自身将体内n-6转化为n-3的fat-1转基因小鼠,解决了以往研究PUFAs只能通过对动物喂养富含n-3和n-6饲料的不便。因而,fat-1小鼠可以作为一种理想的动物模型去研究在不改变饮食结构的状态下,体内的n-6/n-3 PUFAs比例的生物学作用。本文将对fat-1转基因小鼠的研究现状进行综述。
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