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  • 【期刊】 瘦素的免疫调节作用及信号转导研究进展

    刊名:现代免疫学 作者:赵跃然 ; 李丽 ; 王春霞 关键词:瘦素 ; 瘦素受体 ; 免疫细胞 ; 细胞因子 ; 信号转导 机构:山东大学山东省立医院科研中心 ; 山东大学山东省立医院科研中心 ; 山东大学山东省立医院科研中心 ; 山东大学山东省立医院科研中心 年份:2007
    摘要:瘦素(leptin)是一种主要调节能量代谢的蛋白类激素。瘦素可以促进多种免疫细胞的增殖、活化及细胞因子合成,促使免疫反应向Th1方向漂移,促进NK细胞的细胞毒作用,促进炎症反应,因此,瘦素在免疫系统中发挥着重要的调节作用。瘦素受体(leptin receptor,LEP-R)与其配体结合后主要通过JAK-STAT3通路来向胞内转导活化信号,调节转录。文章就瘦素对免疫组织器官、免疫细胞的生物学作用及其信号转导通路的研究进展作如下综述。
  • 【期刊】 乙型肝炎病毒DNA含量与HBeAg、ALT相关分析及其临床意义

    刊名:医学检验与临床 作者:赵跃然 ; 朱运涛 ; 张艳红 关键词:肝炎病毒 ; 乙型 ; DNA ; HBeAg ; ALT ; FQ-PCR 机构:山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东省医学科学院基础医学研究所 ; 济宁医学院附属金乡医院 ; 济宁医学院附属金乡医院 ; 山东大学附属省立医院中心实验室 年份:2010
    摘要:目的 探讨乙型肝炎病毒HBV-DNA含量与血清标记物HBeAg、谷丙转氨酶(ALT)的相关性及其对肝病患者诊断、预后的意义.方法 采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测523例乙肝患者血清学标记物(HBV-M),其血清学模型包括以下四种组合,A组:HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)(大三阳);B组:HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)(小三阳);C组HBsAg(+)、HBcAb(+);D组:HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+);并选取65例HBsAg(-)、HBsAb(-)HBeAg(-)、HBeAb(-)、HBcAb(+)正常人(E组)作为对照.实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测血清中HBV-DNA含量,同时采用酶法测定血清ALT水平.结果 A组HBV-DNA阳性率为92.55%,明显高于B组78.97%(x2=189.60,P<0.001)和C组50.98%(x2=234.15,P<0.001),A、D、C三组ALT水平均高于对照组(P<0.001,P<0.001,P<0.001);Log HBV-DNA与HBeAg S/CO之间存在正相关性(r=0.418,P<0.001),而ALT与Log HBV-DNA及HBeAg S/CO之间均无相关性.结论 HBV-DNA含量与乙肝病毒e抗原具有显著相关性,HBV-M和HBV-DNA定量检测并联合ALT水平对于临床乙肝病毒感染、复制及临床治疗有重要意义.
  • 【期刊】 系统性红斑狼疮与人类白细胞抗原-Cw基因相关性的研究

    刊名:中华风湿病学杂志 作者:赵跃然 ; 孙红胜 ; 侯岩峰 ; 张源潮 ; 焦玉莲 ; 杨清锐 ; 孙广智 关键词:红斑狼疮,系统性 ; HLA抗原 ; 等位基因 机构:山东大学附属省立医院风湿免疫科 ; 山东大学附属省立医院风湿免疫科 ; 济南市第四人民医院骨外科 年份:2008
    摘要:目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)与人类白细胞抗原(HLA)-Cw等位基因的相关性.方法 应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)的方法对108例SLE患者和102名健康人HLA-Cw01-08等位基因进行检测,比较两组间各等位基因的基因表型频率分布差异.结果 SLE患者组中HLA-Cw07的基因表型频率高于对照组,差异有统计学意义.结论 HLA-Cw07可能是SLE的易感基因或易感连锁基因.
  • 【期刊】 人CCL21基因真核表达载体的构建及表达

    刊名:现代免疫学 作者:赵跃然 ; 侯丽 ; 焦玉莲 ; 马春燕 ; 崔彬 关键词:CCL21 ; 真核表达 ; COS-7细胞 ; 电穿孔 机构:山东大学山东省立医院科研中心山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东大学山东省立医院科研中心山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东大学山东省立医院科研中心山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东大学山东省立医院科研中心山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东大学山东省立医院科研中心山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东大学山东省立医院科研中心山东省医学科学院基础医学研究所 年份:2005
    摘要:为了构建可在哺乳动物细胞内高效表达人次级淋巴组织趋化性细胞因子(hCCL21)的真核表达质粒pVAX1-hCCL21,以便用于hCCL21基因治疗研究。以BamHI和XhoI双酶切重组克隆pSK-hCCL21,胶回收约540bp的hCCL21目的基因片段,以亚克隆法构建于真核表达载体pVAX1的相应酶切位点,转化后进行菌落PCR分析和BamHI、XhoI双酶切鉴定。阳性克隆提取质粒,体外电穿孔法转染COS-7细胞,Westernblot法检测转染细胞中hCCL21的瞬时表达,趋化小室法检测表达产物对淋巴细胞的免疫趋化作用。结果显示,菌落PCR和酶切鉴定证实,目的基因hCCL21正确插入到真核表达载体pVAX1中,转染COS-7细胞后,细胞培养上清及裂解产物中可检测到重组蛋白hCCL21的表达,并且表达产物对人外周血单个核细胞有明显的趋化活性。已成功构建了可在哺乳动物细胞内高效表达hCCL21基因的真核表达质粒pVAX1-hCCL21,为进一步研究hCCL21基因治疗肿瘤奠定了基础。
  • 【期刊】 结核分支杆菌Ag85B融合蛋白表达载体的构建及纯化

    刊名:山东大学学报(医学版) 作者:赵跃然 ; 游力 ; 许晓群 ; 冯进波 关键词:分支杆菌 ; 结核 ; 基因 ; Ag85B ; 重组融合蛋白质类 机构:山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东省立医院中心实验室 ; 山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东大学齐鲁医院心内科实验室 年份:2005
    摘要:目的:构建结核分支杆菌Ag85B基因在大肠杆菌的融合表达载体,制备MBP/Ag85B融合蛋白并将其纯化。方法:常规方法构建重组表达质粒pMAL-p2-Ag85B,内切酶EcoRⅠ/HindⅢ酶切鉴定;重组表达质粒pMAL-p2-Ag85B转化大肠杆菌,经0.3mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-Dthiogalactoside熏IPTG)诱导表达产生融合蛋白(MBP/Ag85B),Westernblot鉴定表达产物。pMAL纯化树脂(Amyloseresin)对MBP/Ag85B融合蛋白纯化。结果:重组质粒pMAL-p2-Ag85B经EcoRⅠ/HindⅢ酶切后,1%琼脂糖凝胶电泳证实Ag85B正向插入pMAL-p2载体,重组菌经IPTG诱导后,有约70kD蛋白表达,与预期的融合蛋白分子量相符,蛋白表达量约占细菌总蛋白量的40%;Westernblot显示,MBP/Ag85B融合蛋白与人抗结核IgG抗体呈特异性反应;经Amyloseresin纯化后,MBP/Ag85B融合蛋白的纯度可达95%以上。结论:成功构建结核分支杆菌Ag85B重组融合蛋白表达质粒并制备及纯化其融合蛋白,为进一步研究Ag85B生物学功能及其抗原表位分析奠定了物质基础。
  • 【期刊】 人HMGB1真核表达载体的构建及其在单核细胞的表达

    刊名:山东大学学报(医学版) 作者:赵跃然 ; 徐洁 ; 崔彬 ; 焦玉莲 ; 游力 ; 张捷 ; 刘晓雯 ; 曲芸芸 ; 朱敏 ; 孙新平 关键词:高迁移率族蛋白质类 ; 真核细胞 ; 单核细胞 机构:山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东大学附属省立医院中心实验室 年份:2009
    摘要:目的构建人高迁移率族蛋白1(HMGB1)表达载体,并探讨其免疫调节作用。方法从HMGB1克隆载体酶切分离HMGB1基因片段,插入增强型绿色荧光蛋白载体pCITE-EGFP,菌落PCR和酶谱分析鉴定重组载体。重组表达质粒转染人单核细胞系(U937),梯度G418筛选,荧光和Western blot检测HMGB1的表达。结果菌落PCR和酶谱分析显示目的基因被正确插入真核表达载体,获得重组质粒pCITE-EGFP-HMGB1,转染U937细胞随培养基中G418浓度的升高而增强,转染细胞中目的蛋白HMGB1表达量明显升高。结论成功构建重组载体pCITE-EGFP-HMGB1,并获得稳定表达人HMGB1的单核细胞系,为研究HMGB1对单核巨噬细胞的作用及其机制奠定基础。
  • 【期刊】 不明原因早期复发性自然流产患者蜕膜组织CD158受体的表达

    刊名:山东大学学报(医学版) 作者:赵跃然 ; 王珊 ; 陈子江 ; 许成岩 ; 宋辉 ; 傅艺冰 关键词:杀伤细胞免疫球蛋白样受体 ; 自然流产 ; CD158 ; 蜕膜 ; 表达 机构:山东大学附属省立医院妇产科 ; 山东大学附属省立医院妇产科 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属济南市中心医院心内科 ; 山东大学附属省立医院中心实验室 年份:2012
    摘要:目的探讨不明原因早期复发性自然流产(RSA)患者和正常对照组早孕子宫蜕膜组织中杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)CD158表达的特征。方法选择2009年1月至2010年6月就诊的RSA患者和同期计划生育门诊因计划外孕行人工流产术者各30例,并根据孕周分组,流式细胞术检测蜕膜组织细胞表面标记,比较RSA患者和对照者CD56、CD16、CD158a(KIR2DL1/S1)、CD158b(KIR2DL2/S2)表达的变化规律。结果①RSA患者CD56+细胞数显著少于对照者(P=0.007),CD56+/CD16-细胞较对照组降低(P<0.05);②RSA患者CD158a在CD56+/CD16-细胞表面的表达显著降低(P=0.026);③按孕周分组分析显示,孕7~10周患者CD56+/CD16-细胞表面表达CD158a较同期对照者显著降低(P=0.010);④正常早孕蜕膜组织CD158a、CD158b与CD56表达呈显著正相关(P<0.01)。结论早孕蜕膜组织CD56+/CD16-细胞减少可能为不明原因自然流产的发病机制之一。CD56+/CD16-细胞表面CD158a表达下降与不明原因自然流产有关,且其变化与早孕孕周相关。
  • 【期刊】 高迁移率族蛋白1及其受体在系统性红斑狼疮中的作用

    刊名:医学综述 作者:赵跃然 ; 李鸿昌 关键词:高迁移率族蛋白1 ; 警报素 ; Toll样受体 ; 高度聚糖化作用终产物受体 ; 系统性红斑狼疮 机构:山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东省医学科学院基础医学研究所 ; 山东大学附属省立医院中心实验室 年份:2012
    摘要:高迁移率族蛋白1(HMGB1)是存在于真核细胞的一种非组蛋白核蛋白,在胞外HMGB1可作为警报素在固有与适应性免疫反应中起"预警作用"。系统性红斑狼疮(SLE)是影响多个器官功能的典型的自身免疫病,SLE患者的血清HMGB1水平提高,并且狼疮患者的皮损组织中也检测到HMGB1的表达增加。现就HMGB1的基本特征、胞外的生物学活性及在SLE免疫病理机制中的作用予以综述。
  • 【期刊】 桥本甲状腺炎患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因型分析

    刊名:山东大学学报(医学版) 作者:赵跃然 ; 张海清 ; 赵家军 ; 高聆 ; 管庆波 ; 廖琳 ; 焦玉莲 关键词:杀伤细胞免疫球蛋白样受体 ; 基因 ; 桥本甲状腺炎 机构:山东大学附属省立医院内分泌科 ; 山东大学附属省立医院内分泌科 ; 山东大学附属省立医院中心实验室 年份:2009
    摘要:目的探讨杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因型在桥本甲状腺炎患者中的分布规律。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)的方法,分析100例桥本甲状腺炎(HT)患者和260例正常对照人群(正常对照组)的KIR基因型。结果桥本甲状腺炎患者中2种基因型3DL3,2DS2,2DL3,2DP1,2DL1,2DL4,3DL1,2DS4,3DL2和3DL3,2DL3,2DP1,2DL1,2DL4,3DL1,3DS1,2DS1,2DS4,3DL2频率高于正常对照组(P<0.05,P<0.01),1种基因型3DL3,2DL3,2DP1,2DL1,2DL4,3DL1,3DS1,2DL5,2DS5,2DS1,2DS4,3DL2低于正常对照组(P<0.05);HT患者组携带6个以上抑制性KIR基因的基因型总频率明显少于对照组(39%vs 56.2%,P<0.01)。结论KIR基因型在桥本甲状腺炎患者与正常人群分布的差异可能与桥本甲状腺炎的发病有关。
  • 【期刊】 疏肝解瘀汤联合拉米夫定治疗慢性乙型病毒性肝炎临床研究

    刊名:山东中医杂志 作者:赵跃然 ; 李锦超 关键词:疏肝解瘀汤 ; 拉米夫定 ; 慢性乙肝 ; HBV—DNA ; HBV-YMDD 机构:[1]山东大学附属省立医院 ; [1]山东大学附属省立医院 ; [2]莱芜市中医医院 年份:2018
    摘要:目的:探究疏肝解瘀汤联合核苷类药物拉米夫定对慢性乙肝病毒性肝炎患者肝功能、乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV.DNA)及耐药变异株HBV—YMDD的影响。方法:选取120例慢性乙型病毒性肝炎患者,随机分为观察组和对照组,每组60例,均给予基础支持治疗,对照组用拉米夫定治疗,观察组在此基础上加用疏肝解瘀汤治疗,观察比较两组治疗后6个月、12个月肝功能、HBV—DNA转阴率、HBV-YMDD变异率及其临床治疗效果。结果:观察组与对照组治疗6个月、12个月后相比肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)和HBV-yMDD变异率差异均有统计学意义(P〈0.05);HBV-DNA转阴率在治疗12月后差异有统计学意义(P〈0.05);观察组总有效率83.33%,明显高于对照组的65.00%,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:疏肝解瘀汤联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎能够有效地改善患者肝功能指标。提高HBV—DNA转阴率,降低HBV-YMDD耐药率。
  • 【期刊】 反复自然流产夫妇HLA-Cw等位基因多态性分析

    刊名:生殖与避孕 作者:赵跃然 ; 许成岩 ; 王珊 ; 石玉华 ; 陈子江 ; 焦玉莲 关键词:基因 ; HLA-Cw ; 反复自然流产 机构:山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院中心实验室 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 年份:2008
    摘要:目的:探讨免疫遗传因素在反复自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)发病中的作用。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)法,分析80对RSA患者夫妇和75对正常夫妇HLA-Cw等位基因的多态性。结果:病例组和对照组间Cw01-08各个等位基因阳性率均无统计学差异,但RSA组中夫妇双方均检测到Cw第Ⅱ组等位基因(Cw分子α重链上第80位为赖氨酸)者显著少于对照组,而RSA组中夫妇双方均未检测到Cw第Ⅱ组等位基因者显著多于对照因缺失可能与早期反复自然流产的发病有关。组,差异有统计学意义(P=0.013)。结论:RSA分子α重链上第80位为赖氨酸的HLA-Cw等位基
  • 【期刊】 小鼠孤雌胚胎干细胞直接向神经细胞诱导分化的实验研究

    刊名:山东大学学报(医学版) 作者:赵跃然 ; 韦多 ; 王彦 ; 高选 ; 沈芸 ; 徐凯 ; 赵力新 ; 陈子江 关键词:孤雌生殖 ; 胚胎干细胞 ; 诱导分化 ; 神经前体细胞 ; 神经元 机构:山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 ; 山东大学附属省立医院生殖医学中心 年份:2008
    摘要:目的探讨小鼠孤雌胚胎干细胞在体外不经过拟胚体(EB)阶段,直接诱导分化为神经细胞的可行性。方法采用阶段诱导的方法,首先由孤雌胚胎干细胞向神经前体细胞定向分化,通过巢蛋白(nestin)免疫荧光细胞化学染色对神经前体细胞进行鉴定。在此基础上,撤除丝裂原,加入5%胎牛血清,观察已分化的神经前体细胞能否进一步分化为神经细胞,并对分化出的细胞进行免疫荧光细胞化学鉴定。结果经选择培养基培养3 d后的孤雌干细胞绝大多数可诱导为神经前体细胞,nestin呈阳性。加入血清进一步诱导,可分化出β-Ⅲ-tubline阳性的神经细胞。结论小鼠孤雌胚胎干细胞在体外不经EB培养阶段,可直接诱导分化为神经细胞,并且前期可得到大量的神经前体细胞。
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