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  • 【期刊】 漆姑草醇提物对HL-60细胞诱导分化作用

    刊名:中国公共卫生 作者:伏琼 ; 唐文娟 ; 程勇 ; 沈祥春 ; 梁冰 关键词:诱导分化 ; 漆姑草 机构:贵州医科大学药理学教研室 ; 贵州医科大学药理学教研室 ; 贵州医科大学药理学教研室 ; 环境污染与疾病监控省部共建教育部重点实验室 年份:2017
    摘要:目的 探讨漆姑草醇提物(HSJ)对人早幼粒白血病细胞(HL-60)的诱导分化作用.方法 实验设漆姑草250.0、125.0、62.5 μg/mL组、阳性对照组(吡柔比星100μg/nL)、对照组;噻唑蓝(MTT)法检测HL-60细胞增殖抑制率;瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞形态;硝基四氮唑蓝(NBT)还原实验法测定细胞分化能力;流式细胞术检测分化相关抗原CD11b、CD14阳性细胞的表达;Western blot法检测c-myc蛋白表达.结果 与对照组比较,漆姑草组HL-60细胞核浆比例减小,核仁变为肾形或蚕豆形,出现明显的细胞分化形态,细胞增殖受到不同程度抑制;对照组HL-60细胞NBT还原率为(0.83±0.29)%,CD11b和CD14阳性细胞表达率分别为(41.13±0.42)%、(53.30±7.23)%,c-myc蛋白表达量为(0.71±0.02);漆姑草250.0、125.0、62.5 μg/mL组HL-60细胞NBT还原率[分别为(16.67±1.76)%、(10.83±1.26)%、(6.00±0.87)%]升高,CD11b和CD14阳性细胞表达率[分别为(66.77±4.27)%、(52.27±0.95)%、(46.27±0.38)%和(96.63±0.23)%、(85.25±3.80)%、(63.84±0.78)%]增加,c-myc蛋白表达量[分别为(0.38±0.01)、(0.45±0.01)、(0.58±0.02)]降低,差异均有统计学意义(均P <0.05).结论 漆姑草醇提物可诱导HL-60细胞向成熟粒细胞、单核细胞方向分化.
  • 【期刊】 犬BMSCs干细胞的分离培养及成骨诱导分化

    刊名:农业生物技术学报 作者:赵晓娥 ; 魏强 ; 李伟 ; 何成军 ; 张通明 ; 马保华 关键词: ; 骨髓间充质干细胞(BMSCs) ; 体外培养 ; 成骨诱导分化 ; 细胞鉴定 年份:2016
    摘要:为了体外分离犬(Canis lupus)骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymai stem cells,BMSCs),并对其进行成骨诱导分化及鉴定,本研究用全骨髓贴壁法分离培养犬BMSCs,待细胞克隆成片后传代。在传代过程中,取不同代数的细胞进行生长曲线测定;取传至第2代(p2)细胞,对诱导前的细胞和成骨诱导分化10和21 d的细胞采用q RT-PCR鉴定性别决定基因相关转录因子2(SRY-related high-monility-group(HMG)-box protein-2,SOX2)、干细胞特异基因POU5f1转录因子4(octamer-binding transcription factor-4,OCT4)和NANOG 3个多能性干细胞标志基因及成骨细胞特异基因骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和骨粘连蛋白(osteonectin,ONN)基因的表达;成骨诱导分化的细胞进行成骨细胞特异性指标碱性磷酸酯酶(alkaline phosphatase,ALP)、茜素红染色鉴定。结果表明,p5和p10细胞的生长曲线基本保持一致,而p20细胞的生长速度明显低于p5和p10。犬BMSCs表达OCT4和SOX2,但不表达NANOG;成骨细胞诱导10 d仍低水平表达OCT4和SOX2,但成骨细胞诱导21 d,不再表达OCT4和SOX2。随着诱导时间的延长,成骨细胞特异OCN和ONN基因的表达量增加。进行成骨诱导7 d后,ALP活性明显上升;成骨诱导10 d,未形成钙化结节;成骨诱导21 d,形成钙化结节,钙化结节被茜素红染成红色,随着诱导时间的延长,形成的钙化结节明显增多。证明犬BMSCs被成功地诱导为成熟的成骨细胞,可作为种子细胞用于兽医临床上犬的重症骨折、骨营养不良性关节病等疾病的治疗提供基础资料,为宠物犬临床疑难疾病的治疗开辟一条新途径。
  • 【期刊】 丹柴合剂对树突状细胞的诱导分化作用

    刊名:天津医药 作者:李颖曦 ; 陈丹 ; 王小东 ; 景亚青 ; 李克秋 ; 李光 关键词:树突细胞 ; 免疫耐受 ; 吲哚胺-吡咯2,3-双加氧酶 ; 调节性树突状细胞 ; 免疫调节 机构:天津医科大学基础医学院生物学教研室 ; 天津医科大学基础医学院生物学教研室 ; 天津医科大学药理学教研室 年份:2016
    摘要:目的研究中药复方制剂丹柴合剂对树突状细胞(DCs)的诱导分化作用,并探讨其机制。方法制备丹柴合剂的大鼠含药血清。分离人外周血单个核细胞,经磁珠筛选出CD14+单核细胞,培养5~7 d获得未成熟树突状细胞(im DCs),分为空白血清组与含药血清组,空白血清组分别加入含或不含脂多糖(LPS)的大鼠空白血清,含药血清组分别加入含或不含LPS的大鼠含药血清。用流式细胞术检测DCs表面分子CD86、CD11b和人白细胞抗原(HLA)-DR的表达;用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测DCs分泌白细胞介素(IL)-10的水平;用流式细胞术检测DCs对T细胞增殖能力的影响;用实时定量PCR检测吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)基因的表达。结果经丹柴合剂作用后,DCs高表达CD11b,低表达CD86与HLA-DR,IL-10分泌增加。且该制剂通过促进DCs表达IDO进而抑制DCs介导的T细胞增殖能力。结论丹柴合剂可诱导DCs分化为调节性树突状细胞(DCregs)并发挥免疫调节作用。
  • 【期刊】 兔骨骼肌卫星细胞成肌诱导分化及鉴定

    刊名:黑龙江畜牧兽医 作者:代阳 ; 王轶敏 ; 刘新峰 ; 周朋洋 ; 郭宏 ; 丁向彬 关键词:诱导分化 ; ; 骨骼肌卫星细胞 ; 肌管 ; 鉴定 机构:天津农学院动物科学与动物医学学院 ; 天津农学院动物科学与动物医学学院 年份:2014
    摘要:为了研究兔骨骼肌卫星细胞体外分离培养及成肌诱导分化效果,试验采用1日龄幼兔腿部肌肉组织,利用胶原酶联合胰酶消化法分离肌卫星细胞,采用差速贴壁法对原代细胞进行纯化,对纯化后的兔骨骼肌卫星细胞进行低血清诱导分化,于培养皿中培养至形成成熟肌管,观察肌管形成状态,分别采用RT-PCR及免疫荧光染色方法对成肌分化标志性基因肌细胞生成素(Myo G)和肌球蛋白重链(MHC)进行检测。结果表明:新分离出的兔骨骼肌卫星细胞呈梭形,折光性强,2%马血清分化培养液培养3 d后开始出现大量肌管,状态良好,大部分肌管出现收缩跳动现象。RT-PCR检测结果显示,Myo G基因在肌管中表达量较高,在未分化的兔骨骼肌卫星细胞内未表达。免疫荧光染色结果显示,MHC基因在成熟肌管内呈阳性表达。
  • 【期刊】 人胶质瘤U251细胞定向诱导分化为脂肪细胞

    刊名:江苏大学学报:医学版 作者:王景文[1,2] ; 杨勇[2] ; 张志坚[1] ; 陈波[2] ; 苏春香[2] ; 胡昌龙[2] ; 蔡慧敏[1] ; 李巧玉[2] 关键词:胶质瘤细胞 干细胞特性 脂肪细胞 诱导分化 机构:江苏大学医学院 ; 江苏大学医学院 ; 江苏大学附属人民医院神经外科 年份:2016
    摘要:目的:探讨人胶质瘤U251细胞的干细胞特性及定向诱导分化为脂肪细胞的潜能。方法:采用免疫荧光染色检测U251细胞中干细胞标志物巢蛋白,人类婆罗双树样基因4(sal-like4,SALL4),神经细胞黏附分子(neuralcelladhesionmolecule,NCAM),胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达。采用成脂培养基诱导U251细胞,以CCK-8实验描记细胞生长曲线;油红-O染色及免疫印迹法检测脂肪细胞标志蛋白的表达。结果:胶质瘤细胞U251中巢蛋白,SALIA,NCAM,GFAP呈阳性表达;成脂诱导培养基定向诱导后,U-251细胞内大量橙红色脂滴形成;脂肪酸合酶、过氧化物酶体增殖物受体γ(PPARγ)、CCAAT增强子蛋白-β(CEBP-β)、脂联素表达增高。结论:人胶质瘤U251细胞具备干细胞表型,可定向诱导分化为脂肪细胞。
  • 【期刊】 墨兰种子无菌萌发及根状茎诱导分化研究

    刊名:中国园艺文摘 作者:张小娟 ; 陈秀萍 ; 李云霞 ; 吴沙沙 ; 翟俊文 关键词:墨兰 ; 种子萌发 ; 种子活力 ; 根状茎 ; 诱导 机构:福建农林大学 ; 福建农林大学 ; 园林学院 ; 海峡兰花保育研究中心 年份:2017
    摘要:以墨兰(Cymbidium sinense Wild.)种子为试验材料,利用TTC法测定墨兰种子生活力,并对墨兰种子无菌萌发及根状茎诱导分化进行研究.结果表明:墨兰种子是高活力种子,种子生活力为96.32%,饱满率为98.42%;在1/4 MS+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基中种子萌发率高,高达95.92%;在MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA培养基中根状茎诱导率最高,达86.67%.
  • 【期刊】 人牙槽骨骨髓间充质干细胞成骨诱导分化

    刊名:全科口腔医学电子杂志 作者:王熙 ; 李健 关键词:人牙槽骨骨髓间充质干细胞 ; 成骨分化 机构:华北理工大学口腔医学院 ; 华北理工大学口腔医学院 ; 承德护理职业学院口腔教研室 ; 唐山市人民医院口腔科 年份:2016
    摘要:干细胞是一类具有自我更新与增殖分化能力的细胞,根据来源不同可以分为胚胎干细胞、造血干细胞、神经干细胞、间充质干细胞、上皮干细胞等。干细胞在理论上可以无限增殖分裂,而且特定的条件下可以定向分化。人牙槽骨骨髓干细胞是较为容易取得的骨髓干细胞,拔牙或种植牙时即可取得骨屑,进行体外培养,尤其是定向成骨分化方面的研究,取得了显著的成果。本文就人牙槽骨骨髓间充质干细胞成骨分化进展进行综述。
  • 【期刊】 白杨素对人肝癌HepG2细胞的诱导分化作用

    刊名:中国生化药物杂志 作者:文红波 ; 曹运长 ; 虞佳 ; 王五洲 关键词:白杨素 ; HepG2细胞 ; 细胞分化 ; 黄酮类化合物 机构:南华大学药学与生物科学学院 ; 南华大学药学与生物科学学院 年份:2014
    摘要:目的探讨白杨素对人肝癌HepG2细胞的诱导分化和凋亡作用。方法体外培养人肝癌HepG2细胞,用白杨素干预细胞,实验分组为:空白对照组,溶媒组,全反式维甲酸阳性对照组,白杨素组。台盼蓝计数法和MTT法检测药物对细胞增殖活力的影响;瑞氏-姬姆萨和考马斯亮蓝染色观察细胞核质比和微管微丝排列的变化;放射免疫法检测细胞甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)的分泌量;酶促反应试剂盒检测细胞中γ-谷胺酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)和碱性磷酸酶(alkaline phosephatase,ALP)的活性;Diamondstone分光光度法测定细胞中酪氨酸α-酮戊二酸转氨酶(tyrosine-α-ketoglutaric acid transaminase,TAT)的合成情况。结果 1~100μmol/L白杨素和全反式维甲酸处理HepG2细胞48h后,能显著抑制肝癌细胞的增殖(P<0.05,P<0.01),2种药物对细胞增殖的抑制效价相当并存在量效关系。10μmol/L药物作用48h,细胞的形态和微管微丝排列由肿瘤细胞向成熟细胞分化;药物处理24~96h后,细胞AFP的分泌量和γ-GT的活性明显降低,ALP和TAT的活性则显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论白杨素具有抑制人肝癌HepG2细胞增殖并诱导其向正常细胞分化的作用。
  • 【期刊】 巴什拜羊骨骼肌卫星细胞分离培养及诱导分化

    刊名:基因组学与应用生物学 作者:张伟 ; 王世银 ; 邓双义 ; 杨力伟 ; 刘晓娜 ; 石国庆 关键词:诱导分化 ; 巴什拜羊 ; 骨骼肌 ; 卫星细胞 ; 增殖能力 机构:新疆农业职业技术学院 ; 新疆农业职业技术学院 ; 新疆农垦科学院畜牧兽医研究所省部共建绵羊遗传改良与健康养殖重点实验室 年份:2019
    摘要:为了获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,本研究采集出生1日龄巴什拜羔羊后肢骨骼肌组织,采用两步酶消化法结合差速贴壁法分离纯化巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,并对分离获得的骨骼肌卫星细胞进行了鉴定、传代培养及诱导分化等研究。结果表明,本研究采用的分离纯化方法可以高效获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,RT-PCR检测结果表明骨骼肌卫星细胞标志性基因pax7、Myf5、MyoD、desmin和c-Met均呈阳性表达。获得的骨骼肌卫星细胞具有较强的增殖能力,连续传代12代,细胞的形态仍保持正常,且细胞的克隆形成率仍保持在50%以上,但是当细胞传代至第18代时,逐渐表现出较为明显的衰退。细胞的生长符合典型的"S"型生长曲线,且第2代和第8代细胞的生长曲线没有明显的差异,至第14代时细胞的增殖速度逐渐降低。采用低浓度马血清培养体系,可成功诱导巴什拜羊骨骼肌卫星细胞向肌管方向分化,诱导培养至第5天时,骨骼肌卫星细胞分化标志基因MyHC呈阳性表达。由此得出结论,本研究采用的骨骼肌卫星细胞分离纯化体系高效、可靠,可以满足较高纯度巴什拜羊骨骼肌卫星细胞的分离培养。
  • 【期刊】 甘露聚糖结合凝集素对Th17细胞诱导分化的影响

    刊名:中华微生物学和免疫学杂志 作者:陈晨 ; 张卫斌 ; 王艳 ; 杨琳 ; 马俊维 ; 王帅 ; 王凡平 ; 王明永 关键词:诱导分化 ; 甘露聚糖结合凝集素(MBL) 机构:新乡医学院医学检验学院 ; 新乡医学院医学检验学院 ; 河南省临床医学研究生创新实践基地 ; 新乡雅仕杰医学检验所 ; 商丘医学高等专科学校 ; 新乡医学院医学检验学院 ; 新乡第一人民医院妇产科 ; 新乡医学院第三附属医学妇产科 ; 新乡医学院基础医学院人体寄生虫学教研室 ; 新乡医学院医学检验学院 ; 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心 年份:2017
    摘要:目的 研究甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)对辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)诱导分化的影响.方法 通过MACS分选器从人新鲜脐带血液中分选获得CD4+T细胞,对照组用anti-CD3 McAb和anti-CD28 McAb活化CD4+T细胞并加入适当浓度的IL-6和TGF-β1作为诱导剂,在对照组的基础上加入不同浓度的MBL作为实验组,细胞培养72 h后,利用流式细胞术(FACS)检测各组中Th17细胞比例变化情况;Q-PCR分别检测未加MBL对照组和不同浓度MBL实验组Th17细胞核转录因子维甲酸孤儿受体-γt(retinoid-related orphan receptor-γ-t,RORγt)mRNA表达水平;ELISA检测各组细胞上清液中IL-17A的含量;FACS检测Th17细胞在MBL-/-小鼠和WT小鼠中的变化.结果 FACS分析表明,经体外72 h培养,与对照组相比,MBL能够显著降低Th17细胞的比例;Q-PCR结果显示,MBL能够显著降低RORγt mRNA的表达;ELISA结果显示,MBL能够显著降低IL-17A的表达水平;动物实验结果表明,与WT小鼠相比,MBL-/-小鼠CD4+RORγt+Th17细胞比例显著上升.结论 MBL能够抑制CD4+T细胞向Th17细胞诱导分化.
  • 【期刊】 笃斯越橘愈伤组织诱导分化及试管苗生根研究

    刊名:江苏农业科学 作者:王振武 ; 代志国 ; 彭醒醒 ; 王雪娇 ; 闫超 关键词:诱导分化 ; 笃斯越橘 ; 愈伤组织 ; 生根 机构:东北农业大学 ; 东北农业大学 年份:2015
    摘要:以笃斯越橘(Vaccinium ulignosum L.)优系SL-1试管苗为试验材料,研究不同浓度NAA、6-BA对笃斯越橘优系SL-1叶片、茎段的出愈率、出愈量、再生率、平均出芽苗数的影响以及培养基中添加IBA、浸蘸IBA溶液2种方法对笃斯越橘优系SL-1生根的影响。结果表明:当NAA为0.8 mg/L、6-BA为4 mg/L时,笃斯越橘优系SL-1叶片出愈率最高,达100%,出愈量最多;当NAA为0.2 mg/L、6-BA为4 mg/L时,笃斯越橘优系SL-1叶片愈伤再生分化效果最好,分化率达66.7%,平均再生分化苗数可达5.765株。当IBA浓度为300 mg/L浸蘸时,笃斯越橘试管苗生根率最高,平均生根条数最多,生根效果最佳。
  • 【期刊】 不同培养方法对体外诱导分化Th17细胞的影响

    刊名:南京医科大学学报(自然科学版) 作者:张新 ; 费先艳 ; 于成功 关键词:Th17细胞 ; Naive T细胞 ; 体外诱导 ; 细胞因子类 机构:南京大学医学院附属鼓楼医院消化科 ; 南京大学医学院附属鼓楼医院消化科 年份:2016
    摘要:目的 :Th17细胞缺乏特异性表面标记,难以分离纯化活细胞,通过调整细胞因子浓度和不同培养方法 ,以获得高纯度Th17细胞亚群。方法:选用C57BL/6J小鼠脾脏获得单个核细胞,磁珠分选获得CD4+、CD44-Naive T细胞。建立不同Th17诱导培养体系,通过流式细胞术检测获得Th17细胞的比例,荧光定量PCR方法检测ROR-γt、IL-17 m RNA表达水平,ELISA方法检测细胞培养上清中IL-17浓度,以寻找最佳培养条件。结果:TGF-β+IL-6+IL-23可诱导Th17细胞,但比例较低;加入TNF-α、IL-1β、anti-IFN-γ、anti-IL-2可进一步提高Th17比例,但后期培养呈衰减趋势;使用U型96孔板培养Th17细胞明显优于24孔板培养,细胞分化呈稳定上升趋势,培养第9天Th17细胞可达(91.85±1.05)%。IL-17、ROR-γt m RNA与Naive T细胞相比明显上调(P<0.001),IFN-γ、IL-4、Foxp3 m RNA表达量低(P<0.001),细胞培养上清液中IL-17浓度明显升高(P<0.001)。结论:调整细胞因子诱导方案、缩小培养面积可不同程度提高Th17细胞诱导比率,且培养面积的影响作用更为显著。
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