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  • 【期刊】 尼罗罗非鱼IgT重链的蛋白表达及表达分析

    刊名:华南师范大学学报(自然科学版) 作者:曹琦琦 ; 王玉红 ; 仲小芳 ; 陈常仪 ; 王安利 关键词:尼罗罗非鱼 ; 无乳链球菌 ; IgT ; 免疫组化 ; 粘膜免疫 机构:华南师范大学生命科学学院∥生态与环境科学广东普通高校重点实验室∥广东省水产健康安全养殖重点实验室 ; 华南师范大学生命科学学院∥生态与环境科学广东普通高校重点实验室∥广东省水产健康安全养殖重点实验室 年份:2018
    摘要:IgT(Immunoglobulin T)作为新型免疫球蛋白在粘膜免疫中具有重要作用.文中根据尼罗罗非鱼IgT基因序列构建原核表达载体获得IgT重组蛋白,相对分子量约75 k Da,并制备出效价较高的小鼠抗罗非鱼IgT的多克隆抗体.荧光定量PCR检测证明:健康尼罗罗非鱼中IgT在多种组织中都有表达,其中脾脏、皮肤、肠和鳃中表达量相对较高.无乳链球菌感染后,皮肤和头肾中IgT mRNA的相对表达量分别在12 h和4 d显著上调.免疫组化结果显示:IgT蛋白在头肾和皮肤中均有少量分布,在无乳链球菌刺激后,在皮肤中出现大量分布.以上结果表明:IgT在尼罗罗非鱼皮肤粘膜免疫中具有重要作用.
  • 【期刊】 灰毡毛忍冬LmPAL1基因的克隆及表达分析

    刊名:中草药 作者:陈勋 ; 刘畅宇 ; 陈娅 ; 龙雨青 ; 童巧珍 ; 刘湘丹 ; 周日宝 关键词:表达分析 ; 灰毡毛忍冬 ; 苯丙氨酸解氨酶(PAL) ; 基因克隆 ; 生物信息学 机构:湖南中医药大学药学院 ; 湖南中医药大学药学院 ; 湖南省中药饮片标准化及功能工程技术研究中心 年份:2019
    摘要:目的克隆灰毡毛忍冬苯丙氨酸解氨酶(LmPAL1)基因全长序列,并进行生物信息学和表达模式分析。方法提取灰毡毛忍冬花总RNA,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和RACE技术克隆LmPAL1基因的全长cDNA序列;运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶和不同花期花中该基因的相对表达量。结果克隆的LmPAL1基因开放阅读框(ORF)长度为2 145 bp,编码714个氨基酸,生物信息学分析预测为亲水性蛋白,定位于叶绿体中,包含PAL shielding结构域(527~641 aa),并且含有PAL/HAL活性中心序列GTITASGDLVPLSYIAG(196~212aa),与其他LmPAL1具有较高的相似度;LmPAL1基因q RT-PCR结果显示,7个花期材料以金黄色开花期相对表达量较高;与茎、叶比,白色花蕾期花的相对表达量最高,叶的最低。结论成功克隆了LmPAL1基因,为进一步研究该基因的功能以及遗传改良灰毡毛忍冬品质奠定基础,同时为探究灰毡毛忍冬绿原酸生物合成和调节机制提供了依据。
  • 【期刊】 两种食用菌漆酶基因克隆及表达分析

    刊名:基因组学与应用生物学 作者:艾柳英 ; 柯萍萍 ; 赖春芬 ; 张杰 ; 陈文星 ; 单书凯 ; 刘佳丝 ; 胡开辉 ; 孙淑静 关键词:表达分析 ; 营养条件 ; 杏鲍菇 ; 松杉灵芝 ; 漆酶基因 机构:福建农林大学生命科学学院 ; 福建农林大学生命科学学院 年份:2017
    摘要:漆酶在食用菌生长过程中具有降解木质素、影响子实体形成等重要生理功能,而营养条件会显著影响酶的形成。本研究克隆了杏鲍菇和松杉灵芝部分漆酶基因,比较分析了不同营养条件对漆酶基因表达量及胞外酶活的影响。结果表明,两种食用菌漆酶基因序列差异较大,蛋白同源性低;杏鲍菇在高N低C、高无机盐、完全培养基中胞外漆酶酶活较高,而在转录水平基因表达量高低分别为低N、完全、高N低C培养基;加入有机碳如蔗渣在促进松杉灵芝漆酶基因的转录同时可提高胞外酶活,同时Cu2+可诱导漆酶的分泌,但无诱导漆酶转录作用。C、N比例的调整对2种食用菌漆酶基因的表达与胞外酶活影响具有明显差异,高氮源可促进菌株漆酶的分泌。该结果为进一步探讨漆酶基因调控机制及其生物学功能提供理论基础,同时为改变营养条件提高食用菌胞外漆酶酶活,加强食用菌胞外漆酶的应用提供理论依据。
  • 【期刊】 柠条锦鸡儿CkLEA4-1基因的克隆及表达分析

    刊名:华北农学报 作者:滑璐玢 ; 于秀敏 ; 杨杞 ; 王瑞刚 ; 宝力德 关键词:表达分析 ; 柠条锦鸡儿 ; 基因克隆 机构:内蒙古农业大学 ; 内蒙古农业大学 ; 生命科学学院 年份:2017
    摘要:为研究胚胎发育晚期蛋白(LEA)在柠条中的生物学功能,从已构建的柠条锦鸡儿干旱胁迫抑制削减杂交文库中筛选到一条LEA蛋白编码基因,并采用RT-PCR法进行克隆.所得LEA基因的开放阅读框(ORF)长1 119 bp,编码373个氨基酸的蛋白质,命名为CkLEA4-1.结合序列比对与系统进化分析结果,推断CkLEA4-1属于5族LEA蛋白.利用实时荧光定量PCR技术对CkLEA4-1在干旱、高盐等逆境胁迫条件下的表达情况进行初步研究,结果表明,CkLEA4-1受到不同程度的诱导,推测该基因可能与柠条锦鸡儿响应逆境胁迫有关.研究还成功构建了CkLEA4-1的过表达载体pCanG-CkLEA4-1,得到转基因纯合体株系,为进一步研究柠条锦鸡儿CkLEA4-1基因的功能提供了材料.
  • 【期刊】 滨麦LmNHX2基因及响应盐分胁迫的表达分析

    刊名:鲁东大学学报(自然科学版) 作者:李中虎 ; 李岚 ; 武海蒙 ; 朱路英 ; 柏新富 关键词:表达分析 ; 滨麦 ; 液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白2 ; 生物信息学分析 机构:鲁东大学生命科学学院 ; 鲁东大学生命科学学院 ; 鲁东大学农学院 年份:2018
    摘要:液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白(Na+/H+antiporter,NHX)基因是植物细胞中一类重要的耐盐基因.本研究在转录组测序的基础上,得到了滨麦液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白2基因(LmNHX2)的cDNA序列,通过生物学软件对该基因编码的蛋白进行分析和预测,并对其响应盐胁迫的表达模式进行了分析.结果显示,LmNHX2的cDNA序列包含1617 bp的开放阅读框,编码538个氨基酸.该基因编码的多肽链疏水性氨基酸占多数,具有典型的跨膜蛋白的结构特点.氨基酸序列比对结果表明,LmNHX2蛋白与小麦TaNHX2,长穗偃麦草TeNHX2及大麦HvNHX1的氨基酸序列高度相似,四者在进化关系上居于同一分支.荧光定量PCR结果显示,LmNHX2的表达受到盐分胁迫的诱导.
  • 【期刊】 麻疯树雌雄花中MADS-BOX基因的表达分析

    刊名:广西植物 作者:廖望 ; 闫晓雪 ; 吴军 ; 陈放 关键词:麻疯树 ; MADS?BOX基因 ; 性别分化 ; 花发育 ; 实时荧光定量PCR 机构:四川大学 ; 四川大学 ; 生命科学学院 年份:2018
    摘要:麻疯树(Jatropha curcas)种子含油率高,种子中的油类物质可作为生物柴油被开发和利用,是极具潜力的生物质能源树种之一.麻疯树雌雄异花,在自然条件下雄花数量通常远远大于雌花,这大大限制了种子和油的产量,因此开展麻疯树性别分化与花发育分子机理的研究具有重要意义.该研究选取10个麻疯树的MADS?BOX基因(JcAGL1,JcAGL6,JcAGL9,JcAGL11,JcAGL15,JcAGL61-3,JcAGL62-1,JcAGL62-6,JcA-GL62-7,JcAGL80-2),提取麻疯树早期发育各个阶段的雌雄花总RNA,并反转录成cDNA,采用实时荧光定量方法,探索早期发育不同阶段的麻疯树雌雄花目的基因的表达情况.结果表明:目的基因在发育起始的雌雄花中的表达具有差异,比如JcAGL6和JcAGL15在雄花中表达量要高于雌花,而JcAGL1,JcAGL9和JcAGL11在雌花中的表达量要高于雄花,这说明花原基中目的基因表达会直接或间接决定性别分化的方向;在之后的发育过程中,目的基因的表达情况在雌雄花中有所不同:随着花的发育,目的基因在雌雄花中的表达量变化存在差别,这反应出麻疯树雌雄花发育中目的基因表达模式上的差异;另外,也能看出在此过程中各个目的基因又发挥着不同的功能.该研究结果为进一步探究麻疯树雌雄花发育相关基因的表达提供了理论依据,为了解麻疯树性别分化和花发育的分子机理奠定了基础.
  • 【期刊】 麻疯树雌雄花中MADS-BOX基因的表达分析

    刊名:广西植物 作者:廖望 ; 闫晓雪 ; 吴军 ; 陈放 关键词:麻疯树 ; MADS-BOX基因 ; 性别分化 ; 花发育 ; 实时荧光定量PCR 机构:四川大学生命科学学院 ; 四川大学生命科学学院 年份:2018
    摘要:麻疯树(Jatropha curcas)种子含油率高,种子中的油类物质可作为生物柴油被开发和利用,是极具潜力的生物质能源树种之一。麻疯树雌雄异花,在自然条件下雄花数量通常远远大于雌花,这大大限制了种子和油的产量,因此开展麻疯树性别分化与花发育分子机理的研究具有重要意义。该研究选取10个麻疯树的MADS-BOX基因(JcAGL1,JcAGL6,JcAGL9,JcAGL11,JcAGL15,JcAGL61-3,JcAGL62-1,JcAGL62-6,JcAGL62-7,JcAGL80-2),提取麻疯树早期发育各个阶段的雌雄花总RNA,并反转录成cDNA,采用实时荧光定量方法,探索早期发育不同阶段的麻疯树雌雄花目的基因的表达情况。结果表明:目的基因在发育起始的雌雄花中的表达具有差异,比如JcAGL6和JcAGL15在雄花中表达量要高于雌花,而JcAGL1,JcAGL9和JcAGL11在雌花中的表达量要高于雄花,这说明花原基中目的基因表达会直接或间接决定性别分化的方向;在之后的发育过程中,目的基因的表达情况在雌雄花中有所不同:随着花的发育,目的基因在雌雄花中的表达量变化存在差别,这反应出麻疯树雌雄花发育中目的基因表达模式上的差异;另外,也能看出在此过程中各个目的基因又发挥着不同的功能。该研究结果为进一步探究麻疯树雌雄花发育相关基因的表达提供了理论依据,为了解麻疯树性别分化和花发育的分子机理奠定了基础。
  • 【期刊】 子宫内膜癌错配修复蛋白表达分析

    刊名:中国肿瘤临床与康复 作者:时俊宇;陈继明;高红艳;王清;陈友国; 关键词:子宫内膜肿瘤;;Lynch综合征;;错配修复蛋白 机构:江苏省苏州大学附属第三医院妇产科 ; 江苏省苏州大学附属第三医院妇产科 ; 重庆医科大学附属第二医院妇产科 ; 江苏省苏州大学附属第一医院妇产科 年份:2018
    摘要:目的探讨检测错配修复蛋白(MMR)对初步筛查有遗传倾向内膜癌Lynch综合征患者及对其家系成员患者肿瘤的预防意义。方法选取2011年3月至2016年9月间苏州大学附属第三医院收治的100例子宫内膜癌患者,采用免疫组织化学方法检测子宫内膜癌患者子宫内膜癌组织中MMR(包括MLH1,MLH2,PMS2和MLH6)表达缺失情况,并分析其与患者发病年龄、病理类型、分化级别、肌层浸润程度、淋巴结是否转移及临床分期之间的关系。结果 MMR蛋白表达缺失率为22.0%,年龄≤50岁组、高级别病理分化组、>1/2肌层组和有淋巴转移组的MMR表达缺失率高于年龄>50岁组、低级别病理分化组、≤1/2肌层组和无淋巴转移组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。不同临床分期各组的MMR表达缺失率比较,差异无统计意义(P>0.05)。结论年龄≤50岁、高级别分化、>1/2肌层浸润及存在淋巴转移的子宫内膜腺癌患者,MMR蛋白的表达缺失率高,其检测可用于临床初步筛查子宫内膜癌Lynch综合征患者及对其家系成员肿瘤的早预防。
  • 【期刊】 子宫内膜癌错配修复蛋白表达分析

    刊名:中国肿瘤临床与康复 作者:时俊宇[1] ; 陈继明[2] ; 高红艳[1] ; 王清[1] ; 陈友国[3] 关键词:子宫内膜肿瘤 ; LYNCH综合征 ; 错配修复蛋白 机构:[1]江苏省苏州大学附属第三医院妇产科 ; [1]江苏省苏州大学附属第三医院妇产科 ; [2]重庆医科大学附属第二医院妇产科 ; [3]江苏省苏州大学附属第一医院妇产科 年份:2018
    摘要:目的探讨检测错配修复蛋白(MMR)对初步筛查有遗传倾向内膜癌Lynch综合征患者及对其家系成员患者肿瘤的预防意义。方法选取2011年3月至2016年9月间苏州大学附属第三医院收治的100例子宫内膜癌患者,采用免疫组织化学方法检测子宫内膜癌患者子宫内膜癌组织中MMR(包括MLH1,MLH2,PMS2和MLH6)表达缺失情况,并分析其与患者发病年龄、病理类型、分化级别、肌层浸润程度、淋巴结是否转移及临床分期之间的关系。结果 MMR蛋白表达缺失率为22.0%,年龄≤50岁组、高级别病理分化组、〉1/2肌层组和有淋巴转移组的MMR表达缺失率高于年龄〉50岁组、低级别病理分化组、≤1/2肌层组和无淋巴转移组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。不同临床分期各组的MMR表达缺失率比较,差异无统计意义(P〉0.05)。结论年龄≤50岁、高级别分化、〉1/2肌层浸润及存在淋巴转移的子宫内膜腺癌患者,MMR蛋白的表达缺失率高,其检测可用于临床初步筛查子宫内膜癌Lynch综合征患者及对其家系成员肿瘤的早预防。
  • 【期刊】 滨麦LmNHX2基因及响应盐分胁迫的表达分析

    刊名:鲁东大学学报:自然科学版 作者:李中虎[1] ; 李岚[2] ; 武海蒙[2] ; 朱路英[2] ; 柏新富[1] 关键词:表达分析 ; 滨麦 ; 液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白2 ; 生物信息学分析 机构:[1]鲁东大学生命科学学院 ; [1]鲁东大学生命科学学院 ; [2]鲁东大学农学院 年份:2018
    摘要:液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白(Na~+/H~+antiporter,NHX)基因是植物细胞中一类重要的耐盐基因.本研究在转录组测序的基础上,得到了滨麦液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白2基因(LmNHX2)的cDNA序列,通过生物学软件对该基因编码的蛋白进行分析和预测,并对其响应盐胁迫的表达模式进行了分析.结果显示,LmNHX2的cDNA序列包含1617bp的开放阅读框,编码538个氨基酸.该基因编码的多肽链疏水性氨基酸占多数,具有典型的跨膜蛋白的结构特点.氨基酸序列比对结果表明,LmNHX2蛋白与小麦TaNHX2,长穗偃麦草Te NHX2及大麦Hv NHX1的氨基酸序列高度相似,四者在进化关系上居于同一分支.荧光定量PCR结果显示,LmNHX2的表达受到盐分胁迫的诱导.
  • 【期刊】 黑麦热激蛋白ScHsp90-1基因的克隆及表达分析

    刊名:山东农业科学 作者:王利彬 ; 董爽爽 ; 王灿国 ; 程敦公 ; 李豪圣 ; 刘爱峰 ; 宋健民 ; 刘建军 ; 刘成 ; 张玉梅 ; 穆平 ; 赵振东 ; 曹新有 关键词:表达分析 ; 黑麦 ; 热激蛋白Hsp90 ; 克隆 机构:[1]青岛农业大学农学院 ; [1]青岛农业大学农学院 年份:2018
    摘要:本研究从黑麦中克隆了一个热激蛋白Hsp90基因,暂命名为ScHsp90-1,并对其序列进行分析。结果显示,该基因cDNA序列全长2 103 bp,共计编码700个氨基酸,蛋白质分子量约80.47 k D。序列同源性分析表明,ScHsp90-1与小麦、玉米、水稻等物种的热激蛋白同源性较高;进化树分析表明ScHsp90-1与小麦的Ta Hsp90亲缘关系最近。利用实时荧光定量PCR技术对其表达特性分析表明,ScHsp90-1对高温、低温、高盐、干旱等非生物胁迫均有响应,其可能是黑麦的一个胁迫相关基因。
  • 【期刊】 鸭梨幼果石细胞分化期Pb4CL基因表达分析

    刊名:湖北农业科学 作者:赵书岗 ; 文菁 ; 赵悦平 关键词:表达分析 ; 鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd. ‘Yali") ; 4-香豆酸:辅酶A连接酶 ; 基因克隆 ; 4CL 机构:河北农业大学,生命科学学院,河北 ; 河北农业大学,生命科学学院,河北 ; 河北农业大学,山区研究所,河北 ; 河北农业大学,现代科技学院,河北 年份:2016
    摘要:为揭示梨果实石细胞分化的机理,调控石细胞形成和含量,克隆了鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.‘Yali")4-香豆酸:辅酶A连接酶基因Pb4CL片段(GenBank登录号:KF177692),该片段长467 bp,经同源性比对,该片段与沙梨、欧洲花楸和枇杷等物种4CL基因高度同源,编码155个氨基酸残基,存在4CL蛋白质高度保守区域,具有腺苷酸合成class I超级结构域。建立了梨Pb 4CL基因的荧光实时定量表达检测体系,在石细胞分化期Pb4CL基因相对表达量逐渐升高,后呈下降趋势。
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