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  • 【期刊】 Roscovitine在衣霉素诱导足细胞损伤中的保护作用

    刊名:天津医药 作者:高翔 ; 张悦 ; 张爱金 ; 付芃 ; 李佳琳 ; 吴建 ; 刘巍 关键词:衣霉素 ; 足细胞 ; 凋亡 ; 细胞周期素依赖性蛋白激酶5 ; 内质网应激 ; Roscovitine 机构:河北医科大学病理学教研室 ; 河北医科大学病理学教研室 ; 河北医科大学第二医院血管外科 ; 河北医科大学诊断学教研室 年份:2016
    摘要:目的应用衣霉素诱导内质网应激(ERS),观察Roscovtine对ERS导致足细胞损伤的保护作用。方法体外培养永生化小鼠足细胞,取37℃分化成熟细胞随机分组:(1)正常对照组、DMSO组及衣霉素Tunicamycin(1.0μmol/L,TM)组,各实验组分别刺激3、6、12 h。(2)正常对照组、Tunicamycin(1.0μmol/L,TM)组及Tunicamycin+Rosco-vitine(20、40μmol/L,TM+ROS)组,各实验组分别刺激12 h。应用流式细胞术及TUNEL法检测足细胞凋亡情况;应用Western blot检测细胞周期素依赖性蛋白激酶5(Cdk5)及ERS标志蛋白GRP78、Caspase-12、CHOP的表达变化。结果 (1)与正常对照组和DMSO组相比,Tunicamycin刺激3、6及12 h后,TM组足细胞凋亡率及Cdk5、GRP78、Caspase-12和CHOP蛋白的表达水平均呈明显的时间依赖性增高(P<0.05);(2)加入Roscovitine干预后,与TM组相比,TM+ROS(20、40μmol/L)组足细胞凋亡率及GRP78、Caspase-12和CHOP蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05),其干预作用呈现明显的剂量依赖性。结论 Cdk5抑制剂Roscovitine能显著抑制衣霉素诱导的足细胞凋亡,从而发挥细胞保护作用。Roscovitine的足细胞保护作用可能有助于糖尿病肾病的治疗。
  • 【论文】 衣霉素增强TRAIL诱导结肠癌细胞凋亡的研究

    作者:郭晓庆 关键词:衣霉素 ; 结肠癌 ; TRAIL ; DR5 ; CHOP ; EGFR 机构:东北师范大学 ; 东北师范大学 年份:2017
    摘要:全世界每年约有500万人因为癌症而死亡,其中结肠癌是常见恶性肿瘤之一。西方人结肠癌发病率较高,而在过去几十年间里,包括我国在内多数国家和地区结肠癌发病率也呈现上升趋势。寻找能够特异性抑制结肠癌细胞增殖或促进其凋亡的药物及药物组合并揭示其作用机制是国内外研究的热点之一。该领域的研究成果具有重要的理论意义和应用价值。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL能够特异性杀伤肿瘤细胞而对正常细胞几乎无毒副作用,是一种良好的抗肿瘤希望药物,在临床应用上也已经取得了很好的效果。但是多种肿瘤细胞对TRAIL表现出抗药性,使得TRAIL在肿瘤治疗中的应用受到限制。因此,如何采用药物联合的方式来克服肿瘤细胞对TRAIL的抗药性显得十分重要。本文探究蛋白N糖基化抑制剂衣霉素在恢复肿瘤细胞对TRAIL敏感性中的作用及其作用机制。首先采用MTT法检测抑制N糖基化药物衣霉素与TRAIL协同抑制人结肠癌细胞HCT116和HT29增殖的作用。结果表明,衣霉素能显著增强TRAIL对结肠癌细胞增殖的抑制作用。采用western-blot检测发现衣霉素能诱导细胞膜表面TRAIL死亡受体DR5表达上调,且对另一死亡受体DR4有明显的去糖基化作用。进一步采用siRNA干扰肿瘤细胞DR5和DR4的表达,发现DR5 siRNA处理肿瘤细胞后衣霉素与TRAIL的协同作用显著降低,而DR4 siRNA处理细胞后,两者协同作用无显著变化。这表明DR5在衣霉素与TRAIL协同中起到重要作用。深入研究衣霉素上调DR5表达的机制发现内质网源性转录因子CHOP是上调DR5表达的上游调控因素。因为采用CHOP siRNA处理细胞后,可以显著抑制DR5上调。进一步研究发现采用JNK磷酸化抑制剂SP600125处理结肠癌细胞可以显著抑制由衣霉素诱导的CHOP上调进而抑制DR5的上调。以上结果表明在结肠癌细胞中衣霉素是通过激活JNK信号通路激活诱导CHOP表达上调,进而引起DR5表达上调。此外,我们还发现衣霉素可通过引发EGFR去糖基化进而引起EGFR通路中p-ERK、p-AKT下调来增强结肠癌细胞对TRAIL的敏感性。综上,我们的研究表明抑制蛋白N糖基化药物衣霉素可通过JNK-CHOP途径上调DR5表达以及EGFR去糖基化进而与TRAIL协同诱导结肠癌细胞的凋亡。
  • 【期刊】 前房注射衣霉素建立大白兔慢性青光眼模型

    刊名:眼科新进展 作者:魏红领 ; 刘韶瑞 ; 刘泗容 关键词:衣霉素 ; 青光眼模型 ; 前房注射 机构:中山医科大学第一附属医院眼科 ; 中山医科大学第一附属医院眼科 年份:2015
    摘要:目的本实验采用衣霉素(tunicamycin,Tm)前房注射,利用其对大白兔小梁细胞的过度应激致凋亡作用,旨在建立一种新型的高眼压模型。方法选择6~8周健康新西兰大白兔22只,通过前房注射衣霉素建立慢性青光眼模型,将大鼠行右眼前房注射4μg衣霉素(实验组),其左眼前房注射等量溶剂作为对照;术后3 d、5 d、1周、2周、3周、4周、5周、6周用TONO-PEN AVIA眼压计检测眼压,并观察眼部一般情况及术后并发症。分批处死大白兔,取材做石蜡切片并行HE染色观察视网膜各层结构改变。数据采用SPSS 14.0统计软件进行统计学处理。结果术前大白兔双眼眼压值差异无显著性(P>0.05),具有可比性。1次注射后,8只大白兔造模成功,成功率为36.36%(8/22);2周后,给予2次注射后,2次注射造模成功率为68.18%(15/22)。术后3d、5 d、1周、2周、3周、4周双眼眼压比较,右眼眼压明显高于左眼,差异均有统计学意义(均为P<0.01);术后5周、6周双眼眼压比较差异亦均有统计学意义(均为P<0.05),但左眼高于右眼。病理检查结果显示:高眼压者(实验组)神经节细胞-视网膜神经纤维层及视神经损害,并随时间延长而进一步加重,眼压不高的实验组及对照组眼球病理改变不明显。对照组和实验组的视网膜神经节细胞、内丛状层厚度分别为(74.38±7.27)μm和(58.41±8.29)μm(P<0.01);视网膜神经纤维层厚度分别为(92.59±10.21)μm和(74.62±11.65)μm(P<0.01)。结论前房注射衣霉素,能诱发大鼠眼压升高,但眼压升高幅度不等、维持时间长短不一、成功率较低,2次注射能显著提高造模成功率;大白兔高眼压模型出现了明显的眼球结构改变以及视网膜神经纤维层及视神经损害。
  • 【期刊】 不同浓度衣霉素对胃癌细胞侵袭力的影响

    刊名:医学理论与实践 作者:付政祺 关键词:衣霉素 ; 胃癌 ; 肿瘤侵袭 机构:江汉大学医学院病理学与病理生理学教研室 ; 江汉大学医学院病理学与病理生理学教研室 ; 江汉大学病理诊断所 年份:2014
    摘要:目的:探讨不同浓度衣霉素(Tunicamycin,TM)对胃癌细胞侵袭力的影响。方法:分别给予浓度为0.3μmol/L和3μmol/L的衣霉素处理胃癌SGC7901细胞24h,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果:Transwell侵袭实验显示,0.3μmol/L和3μmol/L衣霉素处理胃癌SGC7901细胞24h后,细胞的侵袭性均减弱。结论:衣霉素可降低胃癌细胞的侵袭力。
  • 【期刊】 衣霉素诱导牙髓细胞内质网应激模型的建立

    刊名:上海口腔医学 作者:李莉芬 ; 文扬 ; 江龙 ; 朱亚琴 关键词:衣霉素 ; 牙髓细胞 ; 内质网应激 机构:上海交通大学医学院附属第九人民医院、口腔医学院口腔综合科、国家口腔医学疾病临床研究中心、上海市口腔医学重点实验室、上海市口腔医学研究所 ; 上海交通大学医学院附属第九人民医院、口腔医学院口腔综合科、国家口腔医学疾病临床研究中心、上海市口腔医学重点实验室、上海市口腔医学研究所 年份:2018
    摘要:目的:用衣霉素诱导人牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs),构建人DPCs内质网应激模型,为进一步探讨内质网应激介导人DPCs相关疾病的分子机制提供实验基础。方法:改良组织块法体外培养人DPCs;MTT法检测不同浓度衣霉素对人DPCs活性的影响;PCR检测人DPCs内质网应激关键分子的表达。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:随着衣霉素浓度的增加,人DPCs存活率逐渐下降。衣霉素诱导后,人DPCs内质网应激关键分子剪切x盒结合蛋白1(splicing x-box binding protein-1,s XBP1)、活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、葡萄糖调节蛋白质78(glucose-regulated protein 78,GRP78)以及C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)m RNA表达水平升高。结论:衣霉素诱导人DPCs内质网应激发生,模型成功建立。
  • 【期刊】 衣霉素诱导牙髓细胞内质网应激模型的建立

    刊名:上海口腔医学 作者:李莉芬 ; 文扬 ; 江龙 ; 朱亚琴 关键词:衣霉素 ; 牙髓细胞 ; 内质网应激 机构:上海交通大学医学院附属第九人民医院 ; 上海交通大学医学院附属第九人民医院 ; 口腔医学院 ; 口腔综合科 ; 国家口腔医学疾病临床研究中心 ; 上海市口腔医学重点实验室 ; 上海市口腔医学研究所 年份:2018
    摘要:目的:用衣霉素诱导人牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs),构建人DPCs内质网应激模型,为进一步探讨内质网应激介导人DPCs相关疾病的分子机制提供实验基础.方法:改良组织块法体外培养人DPCs:MTT法检测不同浓度衣霉素对人DPCs活性的影响;PCR检测人DPCs内质网应激关键分子的表达.采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析.结果:随着衣霉素浓度的增加,人DPCs存活率逐渐下降.衣霉素诱导后,人DPCs内质网应激关键分子剪切x盒结合蛋白1 (splicing x-box binding protein-1,sXBP1)、活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、葡萄糖调节蛋白质78 (glucose-regulated protein 78,GRP78)以及C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP) mRNA表达水平升高.结论:衣霉素诱导人DPCs内质网应激发生,模型成功建立.
  • 【期刊】 SIRT1过表达可抑制衣霉素诱导软骨细胞内质网应激

    刊名:基础医学与临床 作者:谢静 ; 杜敏 ; 史栋梁 关键词:衣霉素 ; SIRT1 ; 内质网应激 ; 软骨细胞 机构:河南省中医院风湿骨病科 ; 河南省中医院风湿骨病科 年份:2016
    摘要:目的探究SIRT1对衣霉素诱导的软骨细胞内质网应激的影响。方法分离人正常软骨细胞和骨关节炎(OA)软骨细胞,观察细胞形态,免疫细胞化学染色检测Ⅱ型胶原表达,Western blot检测SIRT1表达。将培养的软骨细胞分为对照组(OA软骨细胞、正常软骨细胞)、正常软骨细胞组(衣霉素组、SIRT1过表达组和衣霉素+SIRT1过表达组)。24 h后,Western blot检测ERS相关蛋白(CHOP、p-e IF2α和ATF4等)、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax和caspase-3等)以及p-P38的表达。ELISA检测NF-κB活性。结果与人正常软骨细胞相比,OA软骨细胞增殖缓慢,Ⅱ型胶原和SIRT1表达均显著降低(P<0.05)。与正常软骨细胞对照组相比,OA对照组和0.5 mg/L衣霉素组CHOP、p-e IF2α、ATF4和p-P38表达上调,NF-κB活性增加,Bcl-2表达明显下调,Bax和caspase-3表达明显增加(P<0.05)。SIRT1过表达处理则显著逆转上述蛋白表达。结论 SIRT1过表达可抑制衣霉素诱导的软骨细胞内质网应激和细胞凋亡,并下调P38/NF-κB活化。
  • 【期刊】 玉米黄素对衣霉素诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

    刊名:食品科学 作者:魏俊 ; 赵范范 ; 刘馨君 ; 劳凤学 ; 黄汉昌 ; 商迎辉 关键词:衣霉素 ; 玉米黄素 ; 内质网应激 ; SH-SY5Y细胞 机构:北京市生物活性物质和功能食品重点实验室北京联合大学生物化学工程学院 ; 北京市生物活性物质和功能食品重点实验室北京联合大学生物化学工程学院 年份:2019
    摘要:研究玉米黄素对衣霉素诱导损伤的神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的保护作用。实验分为空白组、损伤组(模型组)、2、5、10μmol/L玉米黄素保护组。用衣霉素(tunicamycin,TM)建立SH-SY5Y细胞损伤模型,噻唑蓝测定细胞存活率,试剂盒法测定培养液中的乳酸脱氢酶(lactate?dehydrogenase,LDH)水平。结果显示:TM质量浓度在2μg/mL以上时,可显著降低SH-SY5Y细胞活性(P<0.01);与TM损伤组相比,2~10?μmol/L玉米黄素预处理可显著提高细胞存活率(P<0.05),降低LDH的释放率,先用TM处理30 min后再加2、5、10?μmol/L的玉米黄素处理24 h的玉米黄素后处理组结果相同。因此,TM通过诱导内质网应激可引起细胞损伤,玉米黄素能够减轻该损伤作用,并且在一定程度上可逆转TM引起的损伤。
  • 【期刊】 衣霉素诱导牙髓细胞内质网应激模型的建立

    刊名:上海口腔医学 作者:李莉芬;文扬;江龙;朱亚琴; 关键词:衣霉素;;牙髓细胞;;内质网应激 机构:上海交通大学医学院附属第九人民医院 ; 上海交通大学医学院附属第九人民医院 ; 口腔医学院口腔综合科国家口腔医学疾病临床研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所 年份:2018
    摘要:目的:用衣霉素诱导人牙髓细胞(dental pulp cells,DPCs),构建人DPCs内质网应激模型,为进一步探讨内质网应激介导人DPCs相关疾病的分子机制提供实验基础。方法:改良组织块法体外培养人DPCs;MTT法检测不同浓度衣霉素对人DPCs活性的影响;PCR检测人DPCs内质网应激关键分子的表达。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:随着衣霉素浓度的增加,人DPCs存活率逐渐下降。衣霉素诱导后,人DPCs内质网应激关键分子剪切x盒结合蛋白1(splicing x-box binding protein-1,s XBP1)、活化转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、葡萄糖调节蛋白质78(glucose-regulated protein 78,GRP78)以及C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)m RNA表达水平升高。结论:衣霉素诱导人DPCs内质网应激发生,模型成功建立。
  • 【期刊】 衣霉素对顺铂诱导人宫颈癌细胞凋亡的影响

    刊名:解放军医学杂志 作者:徐冶 ; 李质馨 ; 曹慧玲 ; 于洋 ; 刘师兵 ; 王晓军 关键词:衣霉素 ; 宫颈肿瘤 ; 顺铂 ; 内质网应激 ; 细胞凋亡 机构:吉林医药学院组织胚胎学教研室 ; 吉林医药学院组织胚胎学教研室 ; 吉林医药学院医学科研实验室 年份:2013
    摘要:目的探讨内质网应激在顺铂诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用。方法取人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象,实验分为衣霉素(5mg/L)组、顺铂(6mg/L)组、衣霉素(5mg/L)与顺铂(6mg/L)联合给药组、阴性对照组,处理12h后采用MTT法观察细胞生长情况,Hoechst荧光染色检测细胞核形态的变化,免疫印迹法检测凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-4活化情况,间接免疫荧光法检测蛋白质二硫键异构酶(PDI)、磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)的表达变化。结果 MTT法检测显示衣霉素组、顺铂组、联合给药组和阴性对照组的细胞增殖抑制率分别为2.65%±2.71%、19.60%±4.34%、44.69%±7.07%、0,除衣霉素组与对照组外其余各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。Hoechst染色显示,阴性对照组荧光较弱且均匀,顺铂组和联合给药组部分HeLa细胞核明显变小并呈现致密强荧光,部分细胞核呈碎块状,联合给药组核碎裂细胞比例(44.5%±5.1%)显著高于顺铂组(22.7%±3.9%,P<0.05)。免疫印迹法检测显示,顺铂组裂解Caspase-3、Caspase-4蛋白表达明显高于对照组和衣霉素组,但显著低于联合给药组(P<0.05)。间接免疫荧光法检测显示:顺铂组胞质内无PDI表达,荧光较弱;衣霉素组、顺铂组PDI蛋白均呈颗粒状,分布于核周,荧光较强;联合给药组大部分细胞内PDI呈现明显强荧光,荧光强度明显高于衣霉素组和顺铂组。阴性对照组和衣霉素组细胞核内未见γ-H2AX表达,而顺铂组与联合给药组均可见部分细胞核内出现明显绿色荧光,但两组无明显差异。结论衣霉素可增加内质网应激水平,促进顺铂诱导HeLa细胞发生凋亡。
  • 【期刊】 衣霉素诱导人成骨细胞内质网应激与骨发生特征

    刊名:上海医学 作者:张亚楼 ; 廖礼彬 ; 冯树梅 ; 李甜 ; 郝子怡 ; 张之璐 ; 潘娟 ; 陈亚茹 ; 钟近洁 机构:新疆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室 ; 新疆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室 年份:2015
    摘要:内质网是细胞内重要的细胞器,其功能损伤可以引起内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)。ERS是细胞内一种适应性机制,可以影响成骨细胞的功能和分化,持续或过强的ERS如果不能恢复则会诱导细胞凋亡,从而导致各种骨细胞相关性疾病发生。因此,ERS在骨生物学中的作用日益受到重视[1-3]。将成骨细胞的ERS与
  • 【期刊】 Exendin-4减轻衣霉素诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡

    刊名:福建医科大学学报 作者:吴莉 ; 王燕萍 ; 刘小莺 ; 林益川 ; 邱晨 ; 刘礼斌 关键词:衣霉素 ; 毒液类 ; 内皮 ; 血管 ; 脐静脉 ; 细胞凋亡 机构:福建医科大学协和临床医学院 ; 福建医科大学协和临床医学院 ; 福建省内分泌研究所 年份:2012
    摘要:目的探讨Exendin-4对衣霉素诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响。方法原代培养HUVECs,不同浓度衣霉素(0~20μg/mL)处理HUVECs 16~24h,或用衣霉素(10μg/mL)干预18h后加用不同浓度Exendin-4(5~150nmol/L)预处理24h,MTT比色法检测细胞存活率,Hoechst/PI双染色荧光显微镜观察细胞凋亡率。结果随着衣霉素作用浓度的增加和时间的延长,HUVECs的存活率逐渐下降,呈现一定的量效和时效关系;Hoechst/PI双染色荧光显微镜观察也证实衣霉素能够诱导HUVECs凋亡;加用不同浓度Exendin-4预处理,内皮细胞存活率较单独衣霉素处理组逐渐升高;Hoechst/PI双染色荧光显微镜观察结果显示,100nmol/L的Exendin-4预处理HUVECs后,细胞凋亡率较衣霉素单独处理组减少40%(P<0.01)。结论衣霉素能诱导HUVECs凋亡,而Exendin-4可减少衣霉素诱导的HUVECs凋亡。
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