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  • 【期刊】 PTEN基因干扰对牛脂肪细胞凋亡的影响

    刊名:中国畜牧杂志 作者:韩天苍 ; 柳海星 ; 耿春银 ; 戢爽 关键词:PTEN基因 ; 牛脂肪细胞 ; RNA干扰 ; 细胞凋亡 机构:延边大学农学院 ; 延边大学农学院 年份:2018
    摘要:实验旨在研究RNA干扰PTEN基因对牛脂肪细胞中p-Akt蛋白及凋亡蛋白Caspase-3表达的影响。将人工合成的靶向PTEN基因的3条干扰质粒Si-952组、Si-1331组、Si-1435组及阴性对照组(只加转染阴性对照质粒)和空白组(只加PBS缓冲液),在脂质体介导下转染牛脂肪细胞,用RT-qPCR方法检测并筛选干扰效率最高的1条Si RNA。Western blot法检测PTEN基因沉默后对p-Akt和Caspase-3表达的影响。结果表明:PTEN-Si-1331组干扰效率最高,转染48 h后抑制率可达85%;牛脂肪细胞转染Si-1331组Caspase-3蛋白表达水平极显著低于阴性对照组和空白组(P<0.01),而p-Akt蛋白表达水平显著高于阴性对照组和空白组(P<0.01)。上述结果表明,干扰PTEN基因能显著抑制Caspase-3的表达,提高p-Akt的表达,揭示低表达PTEN通过调控Akt信号通路抑制牛脂肪细胞凋亡。
  • 【期刊】 杨梅素联合围脂滴蛋白对脂肪细胞脂解的影响

    刊名:中国现代医学杂志 作者:张少华 ; 王君实 ; 董维鹏 ; 燕炯 关键词:脂肪细胞/肥胖症 ; 杨梅素 ; 围脂滴蛋白 ; 3T3-L1脂肪细胞 ; 脂解 机构:山西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室 ; 山西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室 年份:2018
    摘要:目的研究杨梅素(Myric)与围脂滴蛋白(PLIN1)联合作用对3T3-L1脂肪细胞脂解的影响。方法常规培养及诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,筛选出Myric最佳干预浓度和时间。Myric联合sh-RNA干扰载体对已诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞进行联合干预,实验共分为四组:联合干预组(Myric+sh-RNA)、转染组(sh-RNA)、杨梅素组(Myric)和空白组。采用油红O进行脂滴染色,观察脂滴形态;采用酶学方法检测细胞中三酰甘油(TG)和甘油含量,了解细胞脂解情况;采用Western blot检测脂肪细胞中PLIN1A、三酰甘油脂肪酶(ATGL)和激素敏感性脂肪酶(HSL)的表达量。结果以浓度为100μmol/L的Myric干预72 h时,细胞内TG含量最低,甘油含量最高,脂解效果最佳,与其他浓度和干预24 h比较,差异有统计学意义(P <0.05)。联合干预后,与Myric组和sh-RNA组比较,Myric+sh-RNA组细胞内TG含量下降,甘油含量升高,脂滴形态变小,数量减少,差异有统计学意义(P <0.05)。同时,Myric+sh-RNA组PLIN1A蛋白表达量降低,ATGL和HSL蛋白表达量升高,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 Myric联合PLIN1可以更有效降低PLIN1表达量,提高ATGL与HSL的表达量,从而提高脂解效率。
  • 【期刊】 促酰化蛋白对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响

    刊名:医学研究杂志 作者:刘婧 ; 胡秀芬 ; 卢慧玲 ; 温宇 关键词:脂肪细胞 ; 胰岛素抵抗 ; 促酰化蛋白 ; 糖脂代谢关键酶 机构:武汉市儿童医院 ; 武汉市儿童医院 ; 华中科技大学附属同济医院儿科 年份:2018
    摘要:目的观察胰岛素抵抗状态下3T3-L1成熟脂肪细胞促酰化蛋白(acylation stimulating protein,ASP)刺激下脂代谢关键酶(LPL、HSL、perilipin、DGAT)基因表达的影响,以及胰岛素经典信号通路(IRS-1、PI_3K)蛋白表达的影响。方法 3T3L-1脂肪细胞给予不同浓度(0、0.125、0.5、1.0mmol/L)油酸及棕榈酸孵育过夜。real-time PCR方法定量检测ASP刺激下脂肪细胞LPL、HSL、perilipin、DGAT基因表达水平。Western blot法检测ASP和INS刺激下脂肪细胞HSL、perilipin、IRS-1、PI_3K蛋白表达水平。结果 ASP促进脂代谢关键酶HSL、LPL、perilipin和DGAT的基因表达。其中0.5mmol/L油酸组增加5倍HSL、1.87倍LPL、6.87倍perilipin、2.5倍DGAT基因表达(P<0.01)。1.0mmol/L油酸组增加3.26倍HSL、2.98倍LPL、5.46倍perilipin、2倍DGAT基因表达(P<0.01)。0.5mmol/L棕榈酸组增加1.98倍HSL、4.63倍DGAT基因表达(P<0.05)。胰岛素和ASP刺激下显著增加脂肪酸孵育的成熟脂肪细胞HSL、perilipin、PI_3K蛋白的表达。胰岛素刺激状态下油酸组增加1.75倍HSL、1.27倍perilipin、2.59倍PI_3K蛋白的表达(P<0.01),棕榈酸组增加85%(P<0.05)HSL、96%(P<0.05)perilipin、3.66倍(P<0.01)PI_3K蛋白的表达。ASP刺激状态下油酸组增加76%(P<0.05)HSL、86%(P<0.05)perilipin蛋白的表达,棕榈酸组增加76%(P<0.05)perilipin、1.27倍(P<0.01)PI_3K蛋白表达。胰岛素及ASP刺激下脂肪细胞IRS-1蛋白表达差异无统计学意义。结论胰岛素和ASP可增加脂代谢关键酶HSL、perilipin蛋白及经典胰岛素信号通路PI_3K蛋白的表达。ASP可以从不同程度上增加糖脂代谢关键酶HSL、LPL、perilipin和DGAT基因的表达,通过增加这些酶的表达,提高酶的敏感度,参与调节脂肪细胞糖脂代谢。
  • 【期刊】 促酰化蛋白对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影晌

    刊名:医学研究杂志 作者:刘婧[2] ; 胡秀芬[1] ; 卢慧玲[1] ; 温宇[1] 关键词:脂肪细胞 ; 胰岛素抵抗 ; 促酰化蛋白 ; 糖脂代谢关键酶 机构:[1]华中科技大学附属同济医院儿科 ; [1]华中科技大学附属同济医院儿科 ; [2]武汉市儿童医院 年份:2018
    摘要:目的观察胰岛素抵抗状态下3T3-L1成熟脂肪细胞促酰化蛋白(aeylation stimulating protein,ASP)刺激下脂代谢关键酶(LPL、HSL、perilipin、DGAT)基因表达的影响,以及胰岛素经典信号通路(IRS-1、PI,K)蛋白表达的影响。方法3T3L-1脂肪细胞给予不同浓度(0、0.125、0.5、1.0mmol/L)油酸及棕榈酸孵育过夜。real-timePCR方法定量检测ASP刺激下脂肪细胞LPL、HSL、perilipin、DGAT基因表达水平。Westernblot法检测ASP和INS刺激下脂肪细胞HSL、perilipin、IRS-1、PI,K蛋白表达水平。结果ASP促进脂代谢关键酶HSL、LPL、perilipin和DGAT的基因表达。其中0.5mmol/L油酸组增加5倍HSL、1.87倍LPL、6.87倍perilipin、2.5倍DGAT基因表达(P〈0.01)。1.0mmol/L油酸组增加3.26倍HSL、2.98倍LPL、5.46倍perilipin、2倍DGAT基因表达(P〈0.01)。0.5mmol/L棕榈酸组增加1.98倍HSL、4.63倍DGAT基因表达(P〈0.05)。胰岛素和ASP刺激下显著增加脂肪酸孵育的成熟脂肪细胞HSL、perilipin、PI3K蛋白的表达。胰岛素刺激状态下油酸组增加1.75倍HSL、1.27倍perilipin、2.59倍PI,K蛋白的表达(P〈0.01),棕榈酸组增加85%(P〈0.05)HSL、96%(P〈0.05)perilipin、3.66倍(P〈0.01)PI3K蛋白的表达。ASP刺激状态下油酸组增加76%(P〈0.05)HSL、86%(P〈0.05)perilipin蛋白的表达,棕榈酸组增加76%(P〈0.05)perilipin、1.27倍(P〈0.01)PI,K蛋白表达。胰岛素及ASP刺激下脂肪细胞IRS-1蛋白表达差异无统计学意义。结论胰岛素和ASP可增加脂代谢关键酶HSL、perilipin蛋白及经典胰岛素信号通路PI3K蛋白的表达。ASP可以从不同程度上增加糖脂代谢关键酶HSL、LPL、perilipin和DGAT基因的表达,通过增加这些酶的表达,提高酶的敏感度,参与调节脂肪细胞糖脂代谢。
  • 【期刊】 miR-3077-5P对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化能力的影响

    刊名:遵义医学院学报 作者:杨晓红 ; 杨琨 ; 廖立 ; 金岩 关键词:成脂分化 ; miR-3077-5P ; 3T3-L1前脂肪细胞 机构:遵义医学院附属口腔医院口腔修复科 ; 遵义医学院附属口腔医院口腔修复科 ; 遵义医学院附属口腔医院牙周科 ; 第四军医大学口腔医院组织工程研究中心 年份:2018
    摘要:目的观察miR-3077-5P对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化能力的影响。方法通过细胞转染技术分别上调和下调3T3-L1前脂肪细胞中的miR-3077-5P表达,将其分为对照(control)组、模拟物(mimics)组及抑制物(inhibitor)组;将各组3T3-L1前脂肪细胞成脂诱导10 d,以逆转录聚合酶链式反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测其相关成脂基因PPAR-γ和LPL mRNA表达水平,用免疫蛋白印迹(Western Blot,WB)法检测其相关成脂基因PPAR-γ和FABP4蛋白水平;采用油红O染色观察脂滴形成情况并作定量分析。结果成脂诱导10 d,miR-3077-5P mimics组成脂基因PPAR-γ和LPL mRNA的表达水平及PPAR-γ和FABP4蛋白水平均升高,而miR-3077-5P inhibitor组则相反(P均<0. 05);成脂诱导10 d,miR-3077-5P mimics组脂滴形成最大,脂滴形成量存在升高现象,miR-3077-5P inhibitor组脂滴较小且形成量较少(P均<0. 05)。结论 miR-3077-5P对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程具有促进作用。
  • 【期刊】 绿原酸对3T3-L1前脂肪细胞分化的抑制作用

    刊名:中成药 作者:杨玉彬 ; 柯斌 ; 秦鉴 关键词:绿原酸 ; 3T3-L1前体脂肪细胞 ; 分化 机构:中山大学附属第一医院 ; 中山大学附属第一医院 ; 中山大学附属第七医院 年份:2018
    摘要:目的研究绿原酸对3T3-L1前脂肪细胞分化的抑制作用。方法第1天,细胞培养皿中加入不同质量浓度绿原酸(50、100、200μg/m L),以氯化锂为阳性对照。第9天,油红O染色观察细胞内脂质沉积情况,生化法检测细胞内甘油三酯(TG)水平,Western blot、RT-PCR法测定PPARγ2、a P2、LPL mRNA和蛋白表达,免疫荧光染色观察PPARγ2在细胞浆及细胞核中的表达,CCK-8法分析绿原酸对3T3-L1细胞的细胞毒作用。结果绿原酸无细胞毒作用。随着绿原酸质量浓度增加,脂质沉积逐渐减少,TG水平逐渐下降,细胞核中PPARγ2蓝色荧光逐渐变淡。与诱导分化组比较,绿原酸组(50、100、200μg/m L) PPARγ2、a P2、LPL mRNA和蛋白表达显著降低(P <0. 05),并呈量效关系。结论绿原酸可抑制3T3-L1前脂肪细胞分化,可能是该成分抑制脂肪生成、安全有效减肥的机制。
  • 【期刊】 丝瓜络多糖对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响

    刊名:中国病理生理杂志 作者:刘紫萍[1] 李菁[1] 朱伟杰[2] 关键词:丝瓜络 3T3-L1前脂肪细胞 细胞分化 机构:暨南大学医学院病理生理学系 ; 暨南大学医学院病理生理学系 年份:2016
    摘要:目的:分离提纯丝瓜络多糖,观察其对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,并探讨其作用机制。方法:采用热水浸提法和DEAE-cellulose柱层析法对丝瓜络多糖进行初步分离和提纯,并对分离组分进行红外光谱分析。运用油红O染色法,观察丝瓜络多糖对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,并通过RT-q PCR观察3T3-L1前脂肪细胞分化时CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorsγ,PPARγ)和CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)mRNA的表达情况。结果:经DEAE-cellulose柱层析法分离得到2个多糖组分,丝瓜络提取物Ⅰ(RLFⅠ)和丝瓜络提取物Ⅱ(RLFⅡ),红外光谱分析结果表明2个组分均为多糖类物质。RLFⅠ具有显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化及甘油三酯合成的作用(P〈0.05),RLFⅡ则无显著效应。与对照组相比,RLFⅠ处理组3T3-L1前脂肪细胞C/EBPβ、PPARγ和C/EBPα的mRNA表达水平明显降低(P〈0.05)。结论:丝瓜络多糖RLFⅠ具有显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的能力,其作用机制可能与下调脂肪细胞分化转录因子C/EBPβ、PPARγ和C/EBPα有关。
  • 【期刊】 obestatin对3T3-L1前脂肪细胞增殖和凋亡的研究

    刊名:菏泽医学专科学校学报 作者:霍兴华 ; 闫长虹 关键词:肥胖抑制素 ; 前脂肪细胞 ; 细胞增殖 ; 细胞凋亡 机构:菏泽医学专科学校 ; 菏泽医学专科学校 年份:2016
    摘要:目的探讨Obestatin对3T3-L1前脂肪细胞增殖和凋亡的影响。方法四甲基偶氮唑盐法检测Obestatin对3T3-L1前脂肪细胞增殖影响;AnnexinⅤ-FITC/PI流式细胞术分析obestain对3T3-L1前脂肪细胞凋亡率,应用方差分析和t检验。结果 obestatin抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,剂量依赖性,与对照组相比,P<0.05,有显著性差异。加入obestatin干预后前脂肪细胞凋亡率较对照组显著升高(P<0.05)。结论 Obestatin抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖并且促进其凋亡。
  • 【期刊】 丝瓜络多糖对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响

    刊名:《中国病理生理杂志》 作者:刘紫萍 ; 李菁 ; 朱伟杰 关键词:丝瓜络 ; 3T3-L1前脂肪细胞 ; 细胞分化 机构:暨南大学医学院病理生理学系 ; 暨南大学医学院病理生理学系 ; 暨南大学生命科学技术学院 年份:2016
    摘要:目的:分离提纯丝瓜络多糖,观察其对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,并探讨其作用机制。方法:采用热水浸提法和DEAE-cellulose柱层析法对丝瓜络多糖进行初步分离和提纯,并对分离组分进行红外光谱分析。运用油红O染色法,观察丝瓜络多糖对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,并通过RT-q PCR观察3T3-L1前脂肪细胞分化时CCAAT增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorsγ,PPARγ)和CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)mRNA的表达情况。结果:经DEAE-cellulose柱层析法分离得到2个多糖组分,丝瓜络提取物Ⅰ(RLFⅠ)和丝瓜络提取物Ⅱ(RLFⅡ),红外光谱分析结果表明2个组分均为多糖类物质。RLFⅠ具有显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化及甘油三酯合成的作用(P〈0.05),RLFⅡ则无显著效应。与对照组相比,RLFⅠ处理组3T3-L1前脂肪细胞C/EBPβ、PPARγ和C/EBPα的mRNA表达水平明显降低(P〈0.05)。结论:丝瓜络多糖RLFⅠ具有显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的能力,其作用机制可能与下调脂肪细胞分化转录因子C/EBPβ、PPARγ和C/EBPα有关。
  • 【期刊】 GLUT4和脂联素在3T3-L1脂肪细胞中共享囊泡转运机制

    刊名:医学研究杂志 作者:崔菊 ; 庞静 ; 宫环 ; 蔡剑平 ; 张铁梅 关键词:葡萄糖转运蛋白 ; 脂联素 ; 细胞囊泡 ; 3T3-L1细胞 ; 3T3-L1 adipocytes 机构:北京医院、国家老年医学中心、国家卫生和计划生育委员会老年医学重点实验室 ; 北京医院、国家老年医学中心、国家卫生和计划生育委员会老年医学重点实验室 年份:2017
    摘要:目的 观察葡萄糖转运蛋白GLUT4和脂联素在3T3-L1细胞中的亚细胞分布.方法 诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,比较细胞分化前后GLUT4和脂联素的表达情况;通过蔗糖密度梯度离心比较GLUT4囊泡和脂联素囊泡的密度;采用结构照明超高分辨率显微镜(3D-SIM)观察GLUT4和脂联素在3T3-L1脂肪细胞内的分布情况.结果 3T3-L1前脂肪细胞呈梭形,胞质内无脂滴,细胞分化成熟后呈圆形,胞质内含有大量脂滴;GLUT4和脂联素在3T3-L1前脂肪细胞中不表达,在分化成熟的脂肪细胞中高表达;GLUT4囊泡和脂联素囊泡具有相似的密度;GLUT4和脂联素在细胞中共定位.结论 GLUT4和脂联素在3T3-L1脂肪细胞中分布于相似的细胞囊泡结构,共享转运机制.
  • 【期刊】 葛根素对延黄牛原代脂肪细胞分化的影响

    刊名:吉林农业大学学报 作者:云巾宴 ; 于永生 ; 曹阳 ; 张立春 ; 金海国 ; 金鑫 关键词:脂肪细胞 ; 葛根素 ; 延黄牛 ; 成脂分化 机构:延边大学农学院 ; 延边大学农学院 ; 吉林省农业科学院畜牧科学分院 年份:2018
    摘要:为探究葛根素对牛前体脂肪细胞分化的调控作用,在脂肪形成过程中将葛根素加入到培养基中,观察其对成脂分化的影响。分别采用油红O染色法及甘油三酯酶法检测脂肪细胞分化过程中的脂滴积聚及细胞内的甘油三酯含量;采用qRT-PCR和Western blot技术检测成脂分化过程中脂肪形成相关转录因子CCAAT-增强子结合蛋白α(C/EBPα)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的mRNA和蛋白的表达水平。结果表明:低浓度的葛根素能促进脂肪细胞的分化,增加细胞内的甘油三酯含量,促进成脂标志基因的mRNA及蛋白的表达。葛根素的添加可促进脂肪分化,增加脂肪沉积,这为进一步研究延黄牛脂肪沉积作用机制以及改善牛肉品质奠定基础。
  • 【期刊】 槲皮素对肉鸡脂肪细胞脂质代谢作用

    刊名:东北农业大学学报 作者:李垚 ; 赵伟 ; 欧阳文文 ; 王明昊 ; 金芳 关键词:脂肪细胞 ; 槲皮素 ; 过氧化物酶体增殖激活受体γ ; 脂质代谢 机构:东北农业大学动物营养研究所 ; 东北农业大学动物营养研究所 年份:2013
    摘要:文章以肉鸡脂肪细胞为模型,探讨槲皮素对过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARγ)调节脂质代谢作用。试验分对照组(5%培养液)、DMSO对照组(5%培养液+DMSO)、试验组1(5%培养液+10 mg.L-1槲皮素)、试验组2(5%培养液+20 mg.L-1槲皮素)、试验组3(5%培养液+40 mg.L-1槲皮素)。采用ELISA法检测脂肪细胞加槲皮素培养24、48、72 h后PPARγ、脂肪酸合成酶(FAS)、脂蛋白酯酶(LPL)、脂肪酸转运蛋白1(FATP1)、瘦素(leptin)蛋白含量,利用荧光定量PCR检测PPARγ、FAS、FATP1和LPL mRNA表达,利用酶法检测脂肪细胞甘油三酯(TG)含量。结果表明,与对照组相比,24 h,试验组3 PPARγmRNA表达显著降低(P<0.05);试验组1、2和3FATP1 mRNA表达均显著降低(P<0.05);试验组3 FAS mRNA表达显著降低(P<0.05),而试验组1和2有降低趋势(P=0.052),而试验组3 FAS蛋白含量显著降低(P<0.05);试验组2和3 TG含量均显著降低(P<0.05);试验组3leptin含量显著提高(P<0.05)。48 h,试验组3 PPARγmRNA表达显著降低(P<0.05),而试验组1和2有下降趋势(P=0.053),试验组1、2和3 PPARγ蛋白含量均显著降低(P<0.05);试验组1、2和3 LPL mRNA均显著降低(P<0.05);试验组1、2和3 FAS mRNA表达有下降趋势(P=0.05),而试验组2、3FAS蛋白含量均显著降低(P<0.05);试验组1、2和3 FATP1 mRNA表达和蛋白含量均显著降低(P<0.05);试验组1、2和3TG含量均显著降低(P<0.05);试验组1、2和3 leptin含量均显著提高(P<0.05)。72 h,试验组1、2和3 PPARγmRNA表达和蛋白含量均显著降低(P<0.05);试验组2 LPL mRNA显著降低(P<0.05);试验组3 FATP1 mRNA表达显著降低(P<0.05),而试验组1和2有下降趋势(P=0.057),试验组1、2和3 FATP1蛋白含量均显著降低(P<0.05);试验组1、2和3 FASmRNA表达均显著降低(P<0.05),而试验组3FAS蛋白含量显著降低(P<0.05);试验组1、2和3TG含量均显著降低(P<0.05);试验组1、2和3 leptin含量均显著提高(P<0.05)。综上所述,槲皮素可以抑制脂肪水解、跨膜转运和脂肪胞内沉积,从而抑制脂肪细胞脂肪合成代谢,但作用效果未见槲皮素浓度和时间依赖性。即槲皮素可抑制鸡脂肪细胞PPARγ调节脂肪合成代谢,进而减少肉鸡脂肪沉积。