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  • 【期刊】 狨猴B2m基因沉默位点在细胞水平的验证

    刊名:中国比较医学杂志 作者:邓怡晨 ; 张晨 ; 向志光 ; 滕永康 ; 刘云波 关键词:基因沉默 ; 狨猴 ; β2-微球蛋白 ; 短发夹RNA 机构:中国医学科学院医学实验动物研究所 ; 中国医学科学院医学实验动物研究所 ; 北京大学生命科学学院 ; 生物膜及膜生物工程国家重点实验室 ; 北京大学麦戈文脑研究所 年份:2017
    摘要:目的 在细胞水平筛选狨猴B2m基因的有效沉默靶点,并进行验证.方法 查询人源B2m验证过的有效siRNA靶位点序列,与狨猴B2m基因序列进行同源性比较,选择匹配靶点合成shRNA序列.将体外合成的2条干扰序列分别与慢病毒载体 FUGW-TDT连接,构建FUGW-TDT-shb2m干扰表达质粒,在聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)介导下转染293T细胞,转染后48h,用实时荧光定量法检测转染细胞中B2m基因mRNA的水平.结果 筛选出2个与狨猴完全同源的B2m沉默靶位点,分别位于B2m mRNA 的290~310 bp,665~685 bp;B2m两个靶点在转录水平的沉默效率分别为(46.54±7.91)%(P < 0.05)和(83.22±4.37)%(P < 0.0001),差异有显著性.结论 成功构建成FUGW-TDT-shb2m重组质粒;在细胞水平筛选得到2个有效的B2m基因沉默靶点;为后续有关介导狨猴B2m基因沉默的研究奠定了基础.
  • 【期刊】 红细胞分布宽度和白细胞水平与冠心病的关系

    刊名:中华老年医学杂志 作者:孙洁静[1] 刘德平[2] 李华[1] 李辉[2] 张妮[2] 关键词:冠心病 红细胞聚集 白细胞 机构:首都医科大学附属北京同仁医院心血管中心 ; 首都医科大学附属北京同仁医院心血管中心 年份:2015
    摘要:目的 观察红细胞分布宽度和白细胞水平与冠心病及冠状动脉病变的关系. 方法 选择行冠状动脉造影术患者590例,根据冠状动脉造影术结果分为冠心病组383例和对照组207例,并按冠状动脉病变支数将冠心病组分为不同的亚组,计算冠状动脉病变Gensini评分,比较各组间红细胞分布宽度和白细胞水平的差异,以及分析其与冠状动脉病变程度的相关性. 结果 冠心病组红细胞分布宽度和白细胞水平分别为(13.06±0.57)%、(6.33±1.56)×10^9/L,明显高于对照组(12.63±0.49)%、(5.86±1.29)×10^9/L(t=9.771、3.728,均P=0.000),并随着冠状动脉病变支数的增加而升高(F=51.454、7.544,均P=0.000),且与冠状动脉Gensini评分呈正相关(r=0.414、0.111,P=0.000、0.030);红细胞分布宽度与白细胞水平呈正相关(r=0.108,P=0.009).红细胞分布宽度对冠心病的预测价值进行受试者工作特征曲线(ROC)分析结果显示,红细胞分布宽度的界值为12.75%,ROC曲线下面积为0.723(95% CI:0.680~0.765),诊断的敏感度为67.6%,特异度为65.2%. 结论 红细胞分布宽度和白细胞水平在冠心病患者中明显升高,且与冠状动脉严重程度呈正相关,是冠心病的独立预测因子.
  • 【期刊】 红细胞分布宽度和白细胞水平与冠心病的关系

    刊名:中华老年医学杂志 作者:孙洁静[1] 刘德平[2] 李华[1] 李辉[2] 张妮[2] 关键词:冠心病 红细胞聚集 白细胞 机构:首都医科大学附属北京同仁医院心血管中心 ; 首都医科大学附属北京同仁医院心血管中心 年份:2015
    摘要:目的 观察红细胞分布宽度和白细胞水平与冠心病及冠状动脉病变的关系. 方法 选择行冠状动脉造影术患者590例,根据冠状动脉造影术结果分为冠心病组383例和对照组207例,并按冠状动脉病变支数将冠心病组分为不同的亚组,计算冠状动脉病变Gensini评分,比较各组间红细胞分布宽度和白细胞水平的差异,以及分析其与冠状动脉病变程度的相关性. 结果 冠心病组红细胞分布宽度和白细胞水平分别为(13.06±0.57)%、(6.33±1.56)×10^9/L,明显高于对照组(12.63±0.49)%、(5.86±1.29)×10^9/L(t=9.771、3.728,均P=0.000),并随着冠状动脉病变支数的增加而升高(F=51.454、7.544,均P=0.000),且与冠状动脉Gensini评分呈正相关(r=0.414、0.111,P=0.000、0.030);红细胞分布宽度与白细胞水平呈正相关(r=0.108,P=0.009).红细胞分布宽度对冠心病的预测价值进行受试者工作特征曲线(ROC)分析结果显示,红细胞分布宽度的界值为12.75%,ROC曲线下面积为0.723(95% CI:0.680~0.765),诊断的敏感度为67.6%,特异度为65.2%. 结论 红细胞分布宽度和白细胞水平在冠心病患者中明显升高,且与冠状动脉严重程度呈正相关,是冠心病的独立预测因子.
  • 【期刊】 细胞水平原钙黏蛋白基因簇的转录分析

    刊名:江苏农业科学 作者:陈志锋 ; 彭莱 ; 吴强 关键词:原钙黏蛋白基因簇 ; 表达模式 ; 单细胞 ; RT-PCR ; 单细胞表面分子多样性 机构:上海交通大学生命科学技术学院 ; 上海交通大学生命科学技术学院 年份:2017
    摘要:原钙黏蛋白(protocadherin,Pcdh)基因簇由紧密相连的3个基因簇(Pcdhα、Pcdhβ和Pcdhγ)组成,其中α、β基因簇包含可变区外显子(C型和非C型)和恒定区外显子。这种独特的基因排列方式使Pcdh基因簇具有产生单细胞分子多样性的潜能。目前,在单细胞水平有关Pcdh基因簇转录表达的研究较少。为了探索单细胞Pcdh基因簇的转录表达模式,利用显微操作系统并结合RT-PCR方法,在单细胞水平分析了小鼠大脑皮层和人类神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH的Pcdhα和Pcdhβ基因簇表达模式。研究发现Pcdhα和Pcdhγ的C型和非C型亚型均是随机表达,每个单细胞表达不同组合的若干个Pcdh基因簇亚型。本研究表明,在小鼠大脑皮层及人类神经母细胞瘤的单个细胞中,Pcdh基因簇的转录表达都能够产生单细胞表面分子多样性。这为进一步揭示神经元中Pcdh基因簇表达调控的分子机理及其在大脑神经回路中的功能奠定理论基础。
  • 【期刊】 细胞水平评价沙棘粕醇提物的抗衰老功效

    刊名:食品科学 作者:张佳婵 ; 史豆豆 ; 王昌涛 ; 李萌 ; 赵丹 ; 王成涛 ; 孙宝国 关键词:沙棘粕 ; 粗提物 ; 乙酸乙酯层 ; 萃余水层 ; 抗衰老 机构:北京工商大学理学院植物资源研究开发北京市重点实验室 ; 北京工商大学理学院植物资源研究开发北京市重点实验室 ; 北京工商大学北京食品营养与人类健康高精尖创新中心 ; 北京工商大学食品学院食品添加剂与配料北京高校工程研究中心 年份:2017
    摘要:本实验以沙棘粕为研究对象,提取得到沙棘粕醇提物(sea buckthorn seed extracts,SBSE),对SBSE进行极性部位划分,得到乙酸乙酯层和萃余水层;对划分部分及SBSE(下称"粗提物")进行活性成分分析、化学水平自由基清除能力测定以及细胞水平过氧化氢酶活力、活性氧含量、基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)含量和Ⅰ型胶原含量分析。结果表明,粗提物、乙酸乙酯层和萃余水层主要活性成分均为黄酮类、原花青素类和总酚,三者均具有较为显著的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力,乙酸乙酯层和萃余水层对羟自由基(·OH)的清除能力显著,粗提物未表现出对·OH的清除效果;3种样品在0.05~5.00 mg/mL范围内,对人皮肤成纤维细胞均未表现出强烈的细胞毒性,细胞活力均在80%以上;3种样品刺激细胞后,其过氧化氢酶活力显著升高,除0.5 mg/mL萃余水层外,其余样品作用后细胞中活性氧水平高度显著降低(P<0.001),其中,粗提物比乙酸乙酯层和萃余水层具有更为优越的促进过氧化氢酶活性和抑制活性氧产生的能力;并且,3种样品特别是粗提物可以显著降低人皮肤成纤维细胞中MMP-1的含量(P<0.05),其细胞中Ⅰ型胶原含量也最高。由结果可知,SBSE具有潜在的抗衰老功效。
  • 【期刊】 放射治疗对NSCLC患者外周血Treg细胞水平的影响

    刊名:中国辐射卫生 作者:陈英 ; 张芬 ; 孙义玲 ; 时勇 ; 张敏 ; 王洪建 关键词:放射治疗 ; NSCLC ; CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞 机构:滕州市中心人民医院 ; 滕州市中心人民医院 年份:2018
    摘要:目的研究放射治疗对NSCLC患者外周血Treg细胞水平的影响。方法分析50例NSCLC患者放射治疗前后外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg/CD4~+比值的变化,及其与临床特征的关系。结果 NSCLC患者放射治疗后CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞占CD4~+T细胞的比例显著降低,与肿瘤直径、肿瘤分期及分化程度有关。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞水平在NSCLC放射治疗过程中变化显著,可能成为NSCLC预后的重要预测指标。
  • 【期刊】 金钗石斛复方在细胞水平的美容功效研究

    刊名:日用化学工业 作者:冯冰 ; 吴越 ; 赵亚 ; 方程 ; 祝乐 关键词:金钗石斛复方提取液 ; 抗衰老 ; 美白 ; 保湿 机构:上海家化联合股份有限公司 ; 上海家化联合股份有限公司 年份:2014
    摘要:通过水提取法得到金钗石斛复方提取液,生药质量浓度为0.5 g·mL-1。采用XTT比色法检测金钗石斛复方提取液对表皮角质细胞的线粒体活性、观察细胞增殖并检测其对ATP含量的影响;利用多巴染色等方法,检测金钗石斛复方提取液对黑素细胞酪氨酸酶活性的抑制和黑素生成的影响;利用免疫荧光法检测金钗石斛复方提取液对角质细胞保湿相关蛋白表达的影响。实验结果表明,金钗石斛复方提取液在终质量浓度为2.5 g·L-1时,较对照组可以显著提升表皮细胞的线粒体活性和ATP含量,能够明显促进细胞的增殖。金钗石斛复方提取液在不影响共培养细胞状态的前提下,较对照组可以明显降低黑素细胞的黑色素含量并抑制酪氨酸酶活性。同时金钗石斛复方还可以促进角质细胞水通道蛋白AQP3、紧密连接蛋白ZO-1及Claudin-1的表达。
  • 【期刊】 恒河猴p53基因沉默靶点在细胞水平的验证

    刊名:中国比较医学杂志 作者:苏静芬 ; 张晨 ; 李雨函 ; 刘先菊 ; 佟巍 ; 向志光 ; 石亮 ; 石桂英 ; 刘云波 关键词:基因沉默 ; p53基因 ; 恒河猴 机构:中国医学科学院医学实验动物研究所 ; 中国医学科学院医学实验动物研究所 ; 北京大学生命科学学院 年份:2014
    摘要:目的为建立恒河猴p53基因沉默模型,首先在细胞水平筛选和测定恒河猴p53基因有效沉默靶点。方法测定非洲绿猴肾来源成纤维细胞COS-7中p53基因的表达水平;对恒河猴p53基因做生物信息学分析,优选靶序列设计shRNA,克隆入慢病毒载体FUGW-TDT,转染COS-7细胞,以real-time PCR检测p53 mRNA抑制水平,以Western blot检测p53蛋白水平表达变化。结果在COS-7细胞检测到p53基因的表达;生物信息学筛选到3个靶片段,分别位于p53 mRNA的238~258 bp,681~701 bp,169~189bp,均在开放阅读框内;p53三个靶位点的沉默效率在mRNA水平分别为(87.17±4.03)%,(72.62±4.11)%,(76.22±0.98)%;在蛋白水平的沉默效率分别为(84.44±2.18)%,(71.04±1.18)%,(74.17±0.95)%。结论在细胞水平筛选得到3个有效的p53基因沉默靶点,可用于后续的恒河猴基因沉默研究。
  • 【期刊】 牛肝菌提取液在细胞水平的抗衰老功效研究

    刊名:日用化学工业 作者:冯冰 ; 马来记 关键词:化妆品添加剂 ; 牛肝菌提取液 ; 抗衰老 ; 抗氧化 机构:上海家化联合股份有限公司 ; 上海家化联合股份有限公司 年份:2015
    摘要:通过水提取法分离提取得到牛肝菌提取液,生药质量浓度为60 g/L。采用XTT比色法检测牛肝菌提取液对表皮角质细胞的线粒体活性、观察细胞增殖并检测其对细胞DNA含量的影响;利用DCFH-DA等方法检测牛肝菌提取液对人皮肤成纤维细胞内活性氧(ROS)及抗氧化元件(ARE)的影响;利用免疫荧光法检测牛肝菌提取液对成纤维细胞Ⅰ型前胶原蛋白表达的影响。结果表明:牛肝菌提取液在终质量浓度为1.5 g/L时,较对照组可以显著提升角质细胞的线粒体活性及DNA的含量,能够明显促进细胞的增殖;牛肝菌提取液可以明显减少细胞内ROS的含量、提高细胞内ARE激活水平;同时牛肝菌提取液还可以促进Ⅰ型前胶原蛋白的表达。
  • 【期刊】 口服氯氮平精神分裂症患者的白细胞水平监测

    刊名:中国现代药物应用 作者:宋华 关键词:氯氮平 ; 白细胞 ; 精神分裂症 机构:连云港市康复医院检验科 ; 连云港市康复医院检验科 年份:2016
    摘要:目的 监测口服氯氮平精神分裂症患者白细胞(WBC)数量的变化,根据白细胞数量的消长变化情况指导临床用药.方法 对30例长期服用氯氮平的精神病分裂症患者用药前后,各不同阶段进行血常规检测,对比白细胞变化情况.结果 用药前精神分裂症患者的白细胞水平均在正常范围.但随着用药时间的推移,白细胞数量逐级下降,与治疗前的(8.42±1.30)×109/L比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 氯氮平不仅能改善精神分裂症的症状,还能干扰患者机体的正常生理调节,造成免疫力下降,出现并发症.通过监测白细胞的变化,对于临床上尽早避免患者并发症出现具有一定的治疗意义.
  • 【期刊】 美白化妆品细胞水平功效评价方法的研究进展

    刊名:香料香精化妆品 作者:郭松鹤[1,2] ; 高合意[1] ; 曾飒[1] ; 张革[2] 关键词:化妆品 美白 细胞模型 功效评价 机构:广州栋方生物科技股份有限公司 ; 广州栋方生物科技股份有限公司 ; 中山大学药学院 年份:2016
    摘要:综述了在体外细胞水平上进行化妆品美白功效评价的方法,主要是在培养的黑素细胞及表皮黑素单元等模型上对化妆品美白有效成分进行细胞学观察及关键指标分子生物学检测。这些技术对于皮肤美白类等产品的研发和功效评价具有广泛的应用价值。
  • 【期刊】 非感染性泌尿系疾病患者尿白细胞水平的变化

    刊名:检验医学 作者:钟传华 ; 田源 ; 毕星星 ; 汪柏林 关键词:泌尿系疾病 ; 尿常规 ; 白细胞计数 机构:贵州医科大学附属医院泌尿外科 ; 贵州医科大学附属医院泌尿外科 年份:2016
    摘要:目的:观察泌尿外科非感染性泌尿系疾病患者尿白细胞(WBC)水平,探讨该类患者行尿常规WBC计数的临床价值。方法收集127例非感染性泌尿系疾病(如尿石症、泌尿系肿瘤、前列腺增生症等)患者及57例合并有泌尿系疾病尿路感染患者清晨中段尿液,利用AVE-766全自动尿液有形成分分析仪对其尿WBC进行检测。以同期体检的127名无任何泌尿生殖系疾病的健康成人清晨中段尿WBC计数为正常对照组,对各组资料进行统计学分析。结果非感染性泌尿系疾病组及泌尿系疾病合并尿路感染组尿常规WBC计数均显著高于对照组(P<0.01),合并尿路感染组尿常规WBC计数显著高于非感染性泌尿系疾病组(P<0.01)。结论除尿路感染外,非感染性泌尿系疾病也可致尿常规WBC计数增高。单纯尿中WBC升高对于非感染性泌尿系疾病患者是否合并尿路感染判断作用有限。