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  • 【期刊】 HNP1对牛支持细胞中细胞周期因子的影响

    刊名:黑龙江畜牧兽医 作者:王晨 ; 王皓 ; 于娜 ; 王雪 ; 张晗 ; 许钟峯 ; 张贵学 关键词:犊牛 ; 支持细胞 ; HNP1 ; P53 ; CDC25A 机构:东北农业大学动物科学技术学院 ; 东北农业大学动物科学技术学院 年份:2018
    摘要:为了探讨异源蛋白侵入支持细胞细胞反应,试验采用体外模拟血睾-屏障和支持细胞受损的方法,即用载体pEGFP-N3和pEGFP-N3-HNP1转染牛睾丸支持细胞,通过细胞内产生的异源蛋白,检测支持细胞的反应以及周期蛋白因子(P53、CDC25A)的表达变化。结果表明:转染48 h和96h后HNP1可下调支持细胞P53、CDC25A基因的表达。说明异源蛋白作用于支持细胞,可抑制或降低周期蛋白P53、CDC25A的表达,导致细胞分裂停止或降低。
  • 【期刊】 决银方对HaCaT细胞增殖及细胞周期的影响

    刊名:中国皮肤性病学杂志 作者:缪晓 ; 张永岭 ; 蒋含嫣 ; 李苏 ; 徐蓉 ; 何慧琼 ; 李福伦 ; 李斌 ; 陈洁 关键词:细胞周期 ; 决银方 ; HaCaT细胞 ; 细胞增殖 机构:上海市中医药大学附属岳阳中西医结合医院皮肤科 ; 上海市中医药大学附属岳阳中西医结合医院皮肤科 ; 宁波市江东区中医院 年份:2016
    摘要:目的观察决银方对HaCaT细胞增殖及细胞周期的影响。方法用CCK-8法检测1%,2%,5%和10%浓度决银方作用HaCaT细胞后细胞增殖的变化,以相同体积的DMEM作为空白对照;用流式细胞仪检测1%,2%,5%和10%浓度决银方作用HaCaT细胞后细胞周期的变化,以相同体积的DMEM作为空白对照。结果 CCK-8法检测显示5%浓度的决银方作用HaCaT细胞24h,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05);流式细胞仪检测显示,5%浓度的决银方作用于HaCaT细胞24h,G_1期细胞比例明显减少(P<0.05)。结论 5%浓度的决银方对HaCaT细胞增殖有明显抑制作用,其主要作用在细胞周期的G_1期。
  • 【期刊】 T-2毒素对软骨细胞增殖及细胞周期的影响

    刊名:中华地方病学杂志 作者:闫盼[1] ; 付晓艳[2] ; 王红格[1] ; 姜宇婷[1] ; 邵汉文[1] ; 卜野[1] ; 荣胜忠[1] ; 邹宁[2] ; 高彦辉[1] ; 孙殿军[1] 关键词:细胞周期 ; T-2毒素 ; 软骨细胞 ; 细胞增殖 机构:[1]哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心地氟病防治研究所国家卫生计生委病因流行病学重点实验室黑龙江省普通高校病因流行病学重点实验室 ; [1]哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心地氟病防治研究所国家卫生计生委病因流行病学重点实验室黑龙江省普通高校病因流行病学重点实验室 ; [2]哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心实验室 年份:2018
    摘要:目的研究T-2毒素对大鼠软骨细胞增殖和细胞周期的影响,为T-2毒素致软骨细胞损伤的分子机制研究提供新思路。方法提取新生Wistar大鼠的原代软骨细胞,通过甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色进行细胞鉴定。采用细胞增殖/毒性检测试剂盒(CCK-8)检测不同剂量的T-2毒素[0(对照),1、5、10、20、50、100μg/L]染毒24h对软骨细胞增殖的影响,根据细胞存活率选择对照,1、5、10μg/L(低、中、高剂量)T-2毒素用于后续实验。采用流式细胞术检测细胞周期变化;实时荧光定量PCR法和免疫印迹法分别检测T-2毒素对软骨细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)mRNA和蛋白表达水平的影响。结果随T-2毒素染毒剂量增加(对照,1、5、10、20、50、100μg/L),软骨细胞存活率降低[(100.00±0.00)%、(93.12±1.66)%、(77.12±1.11)%、(59.44±4.09)%、(46.64±3.86)%、(38.15±3.37)%、(33.79±0.99)%],组间比较差异有统计学意义(F=139.21,P〈0.05)。1、5、10μg/L T-2毒素组静止期/DNA合成前期(G0/G1期)细胞[(22.03±O.42)%、(30.54±2.61)%、(36.01±1.51)%]均明显高于对照组[(13.79±1.65)%,P均〈0.05];DNA合成期(S期)细胞[(60.27±3.53)%、(53.88±4.38)%、(49.55±2.49)%]均明显低于对照组[(76.72±4.24)%,P均〈0.05]。对照组,1、5、10μg/L T-2毒素组PCNA、Cyclin D1 mRNA水平组问比较差异有统计学意义(F=46.80、17.97,P均〈0.05),其中5、10μg/L T-2毒素组(0.77±0.13、0.79±0.08,0.60±0.07、0.56±0.05)均明显低于对照组(0.99±0.02、1.01±0.01,P均〈0.05)。5、10μg/L T-2毒素组PCNA蛋白水平(0.69±0.03、0.49±0.03)均低于对照组(O.92±0.05,P均〈0.05);1、5、10�
  • 【期刊】 自噬在ZEA对睾丸支持细胞细胞周期影响中的作用

    刊名:中国兽医学报 作者:王冰洁 ; 郑王龙 ; 司梦雪 ; 刘青 ; 邹辉 ; 顾建红 ; 袁燕 ; 刘学忠 ; 刘宗平 ; 卞建春 关键词:细胞周期 ; 玉米赤霉烯酮 ; 睾丸支持细胞 ; 自噬 机构:扬州大学兽医学院 ; 扬州大学兽医学院 ; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 ; 扬州大学兽医学院 ; 扬州大学兽医学院 ; 焦作出入境检验检疫局 年份:2017
    摘要:为探讨玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)雄性生殖毒性的机理,本试验展开了ZEA对睾丸支持细胞细胞周期的影响以及自噬在ZEA对睾丸支持细胞细胞周期影响中的作用研究.试验以原代睾丸支持细胞为材料,分别以浓度为0(对照组),0.1,1,10,20,30 μmol/L ZEA进行染毒,24 h后利用CCK-8法、流式细胞术、免疫荧光技术和Western blot等进行ZEA对睾丸支持细胞的活率、细胞周期分布、LC3聚点、自噬及细胞周期相关蛋白等影响的检测.流式细胞术检测结果显示:与对照组比较,当ZEA浓度高于10 μmol/L时,G0/G1期比例显著下降(P<0.05),G2/M期的比例极显著升高(P<0.01);与20 μmol/L ZEA组相比,自噬抑制剂(CQ)+20 μmol/L ZEA组细胞周期的G2/M期的比例显著降低(P<0.05),自噬促进剂(RAP)+ 20 μmol/L ZEA组细胞周期的G2/M期的比例显著升高(P<0.05).免疫荧光检测结果显示,当ZEA浓度高于10 μmol/L时,产生LC3荧光信号的细胞数目较对照组呈极显著性升高(P<0.01).Western blot检测结果显示:与对照组比较,当ZEA浓度高于10 μmol/L时,LC3蛋白的表达量呈极显著性升高(P<0.01),CDK4、CyclinD1等细胞周期蛋白的表达显著降低(P<0.05);与20μmol/L ZEA组相比,CQ+20 μmol/L ZEA组CyclinD1、CDK4等蛋白的表达量上升(P<0.05),RAP+ 20 μmol/LZEA组Cy-clinD1、CDK4等的表达量下降(P<0.05).结果表明:ZEA能诱导睾丸支持细胞发生自噬,并使睾丸支持细胞发生G2/M期阻滞,且存在剂量依赖性;促进自噬可导致细胞周期阻滞在G2/M期,造成M期延长,而自噬的缺陷可以部分逆转ZEA诱导睾丸支持细胞周期G2/M期的阻滞.在一定浓度范围内,ZEA能显著抑制睾丸支持细胞的增殖,细胞自噬在这一过程中起促进作用.
  • 【期刊】 Yes相关蛋白1调控U87MG胶质瘤细胞株的细胞周期

    刊名:中华实验外科杂志 作者:宫崧峰 ; 王新军 ; 王晓彬 ; 文燕 ; 丁建军 ; 蒋太鹏 ; 李维平 ; 高永中 关键词:细胞周期 ; 小干扰RNA ; 胶质瘤 机构:深圳市第二人民医院)神经外科 ; 深圳市第二人民医院)神经外科 ; 深圳市龙岗区人民医院神经外科 ; 深圳市第二人民医院)耳鼻喉科 ; 深圳市龙岗区人民医院口腔科 年份:2017
    摘要:目的 观察Hippo信号通路下游关键因子Yes相关蛋白1(YAP1)对胶质瘤细胞株U87MG细胞增殖周期的影响.方法 使用YAP1特异性小干扰RNA(siRNA)敲低U87MG胶质瘤细胞株YAP的表达,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)鉴定U87MG胶质瘤细胞中YAP1是否已被敲低;采用RT-qPCR方法分别检测干扰24、48 h后YAP1、细胞核增殖抗原(Ki-67)、c-Myc、血管内皮生长因子(VEGF)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、Cyclin E和p73 mRNA的表达变化.结果 3对siRNA寡核苷酸序列对YAP1都有干扰,第1对siRNA寡核苷酸序列对YAP1有较好的干扰效果,干扰效率可达90%以上,P=0.044;以1.0为参照,结果显示,YAP1 (0.213),Ki-67 (0.365),c-Myc (0.618),VEGF(0.534),Cyclin D1 (0.540),Cyclin E (0.494),p73(0.314)在24h出现不同程度下降,在48 h基因的转录水平明显提高;同时可以发现,随着YAP1 (0.810)干扰的恢复,Ki-67(1.051),c-Myc(1.498),VEGF(1.057),Cyclin D1(1.598),Cyelin E(0.897),p73(1.110)的活性明显增高,P =0.007.结论 YAP1调控胶质瘤细胞株U87MG细胞增殖周期,干扰YAP1蛋白后,能阻止细胞增殖于细胞任一周期.
  • 【期刊】 牙龈卟啉单胞菌感染MG63细胞对细胞周期的影响

    刊名:口腔医学研究 作者:潘春玲 ; 赵海礁 ; 谭丽思 ; 潘亚萍 ; 钟鸣 关键词:细胞周期 ; 牙周炎 ; 牙龈卟啉单胞菌 机构:中国医科大学口腔医学院牙周科、辽宁省口腔医学研究所牙周病研究室、辽宁省口腔疾病转化医学研究所 ; 中国医科大学口腔医学院牙周科、辽宁省口腔医学研究所牙周病研究室、辽宁省口腔疾病转化医学研究所 ; 中国医科大学口腔医学院中心实验室 年份:2015
    摘要:目的:通过体外建立牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)感染MG63细胞模型,探讨P.gingivalis ATCC 33277菌株感染MG63细胞对细胞周期的影响及发生机制。方法:P.gingivalis ATCC 33277菌株感染MG63细胞,MTT法检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞周期的分布,实时定量PCR和蛋白印记方法检测Cyclin D、Cyclin E的表达。结果:MOI为100∶1,P.gingivalis ATCC 33277菌株感染MG63细胞,能够抑制细胞增殖,同时导致细胞在G1期发生停滞,Cyclin D、Cyclin E基因和蛋白在24h、48h均有明显下降,与对照组相比有统计学差异。结论:牙龈卟啉单胞菌感染MG63细胞Cyclin D、Cyclin E基因和蛋白表达下调,抑制细胞的增殖,导致细胞停滞在G1期。
  • 【期刊】 半枝莲阻滞人结肠癌细胞周期的机制

    刊名:福建中医药 作者:张铃 ; 方翌 ; 蔡巧燕 ; 林珊 ; 魏丽慧 ; 彭军 关键词:细胞周期 ; 半枝莲氯仿极性部位提取物 ; 结肠癌 机构:福建中医药大学中西医结合研究院 ; 福建中医药大学中西医结合研究院 年份:2017
    摘要:目的研究半枝莲氯仿极性部位提取物(ECSB)阻滞人结肠癌细胞周期的机制。方法用ECSB干预结肠癌细胞株HCT-8、SW620,检测其细胞周期相关基因的表达。结果 ECSB干预SW620细胞后,其p16表达上升,PCNA表达下降;ECSB干预HCT-8细胞后,Cyclin D1、CDK2、CDK4表达下降。结论ECSB通过调控细胞周期相关基因的表达,抑制人结肠癌细胞的增殖。
  • 【期刊】 HO-1对肝癌细胞细胞周期调控因子P16和P53的影响

    刊名:临床医药文献杂志(电子版) 作者:高涵[1] 周涛[2] 张春晶[1] 李淑艳[1] 王丽萍[1] 刘哲丞[1] 关键词:血红素加氧酶-1 肝癌 细胞周期调控因子 机构:齐齐哈尔医学院生物化学与分子生物学教研室 ; 齐齐哈尔医学院生物化学与分子生物学教研室 年份:2015
    摘要:目的观察HO-1对人肝癌细胞HePG2细胞周期调控因子的影响。方法构建含有野生型和突变型HO-1基因的重组载体,建立稳定表达的HePG2肝癌细胞系。在HO-1表达改变的稳转细胞系中,利用半定量RT-PCR、Western印迹检测转染细胞系中P16和P53的表达水平。结果实现了野生型和突变型HO-1在HePG2细胞中的过表达;野生型和突变型HO-1过表达均能诱导P16和P53的表达。结论 HO-1过表达诱导了抑癌基因P16和P53的表达。
  • 【期刊】 HO-1对肝癌细胞细胞周期调控因子P16和P53的影响

    刊名:《临床医药文献杂志(电子版)》 作者:高涵 ; 周涛 ; 张春晶 ; 李淑艳 ; 王丽萍 ; 刘哲丞 关键词:血红素加氧酶-1 ; 肝癌 ; 细胞周期调控因子 机构:齐齐哈尔医学院生物化学与分子生物学教研室 ; 齐齐哈尔医学院生物化学与分子生物学教研室 ; 齐齐哈尔医学院第一附属医院普通外科 年份:2015
    摘要:目的观察HO-1对人肝癌细胞HePG2细胞周期调控因子的影响。方法构建含有野生型和突变型HO-1基因的重组载体,建立稳定表达的HePG2肝癌细胞系。在HO-1表达改变的稳转细胞系中,利用半定量RT-PCR、Western印迹检测转染细胞系中P16和P53的表达水平。结果实现了野生型和突变型HO-1在HePG2细胞中的过表达;野生型和突变型HO-1过表达均能诱导P16和P53的表达。结论 HO-1过表达诱导了抑癌基因P16和P53的表达。
  • 【期刊】 HO-1对肝癌细胞细胞周期调控因子P16和P53的影响

    刊名:临床医药文献杂志(电子版) 作者:高涵[1] 周涛[2] 张春晶[1] 李淑艳[1] 王丽萍[1] 刘哲丞[1] 关键词:血红素加氧酶-1 肝癌 细胞周期调控因子 机构:齐齐哈尔医学院生物化学与分子生物学教研室 ; 齐齐哈尔医学院生物化学与分子生物学教研室 年份:2015
    摘要:目的观察HO-1对人肝癌细胞HePG2细胞周期调控因子的影响。方法构建含有野生型和突变型HO-1基因的重组载体,建立稳定表达的HePG2肝癌细胞系。在HO-1表达改变的稳转细胞系中,利用半定量RT-PCR、Western印迹检测转染细胞系中P16和P53的表达水平。结果实现了野生型和突变型HO-1在HePG2细胞中的过表达;野生型和突变型HO-1过表达均能诱导P16和P53的表达。结论 HO-1过表达诱导了抑癌基因P16和P53的表达。
  • 【期刊】 微小RNA-200c对膀胱癌T24细胞增殖和细胞周期的影响

    刊名:中华实验外科杂志 作者:杨成迪 ; 李鹏 ; 杨潇 ; 程义东 ; 李鹏超 ; 吕强 ; 张炜 关键词:细胞周期 ; 膀胱癌 ; 微小RNA-200c ; 增殖 机构:南京医科大学第一附属医院泌尿外科 ; 南京医科大学第一附属医院泌尿外科 年份:2017
    摘要:目的 观察微小RNA-200c(miR-200c)对膀胱癌细胞T24增殖和细胞周期的影响并探讨其机制.方法 运用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测膀胱癌5个细胞株中miR-200c的表达水平.借助细胞转染技术,将miR-200c模拟物(mimics)及无义对照序列转染处于对数生长期的膀胱癌T24细胞,分别构建miR-200c过表达(MU组)及阴性对照组(NC组),并通过Real-time PCR技术进行验证转染效率.用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测两组细胞转染24、48及72 h的细胞增殖率,流式细胞术观察细胞周期分布变化,Western blot法检测细胞周期相关蛋白表达水平的变化.结果 (1) miR-200c在膀胱癌细胞株EJ(13.204 ±0.946)、T24(18.259 ±0.776)、253J(8.333±0.543)、5637(6.594±0.326)、RT4(11.348 ±0.513)中表达量均显著高于正常尿路上皮细胞SV-Huc(1.053±0.078),差异有统计学意义(P=0.000).(2)MU组在转染miR-200c mimics 48、72 h后吸光度值(1.485±0.131、2.396±0.110)均显著高于NC组(1.158±0.182、1.893±0.216),差异有统计学意义(P =0.050、0.023).(3)与NC组比较,MU组细胞周期分布G1期比例下降[(54.65 ±0.60)%比(64.51±0.63)%,P=0.004],S期比例上升[(31.43±0.77)%比(27.99±0.53)%,P=0.034],G1/S比值下降(1.74±0.06比2.31±0.07,P=0.013).(4)转染miR-200c后细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)2(1.44±0.10比0.86±0.15,P=0.005)、CDK4(3.05 ±0.17比1.24±0.07,P=0.001)、E2F3(1.81±0.22比1.18±0.20,P=0.021)表达水平均升高.结论 miR-200c通过调控细胞周期相关蛋白促使膀胱癌T24细胞周期由G1向S期转变,从而促进膀胱癌细胞增殖.
  • 【期刊】 微小RNA-1908对肺癌细胞A549细胞周期和靶基因的调控

    刊名:环境与职业医学 作者:洪伟伟 ; 马书梅 ; 彭慧 ; 隋静 ; 张艳秋 ; 李成云 ; 梁戈玉 关键词:微小RNA-1908 A549细胞 生物学功能 基因调控 蛋白磷酸酶5 机构:东南大学公共卫生学院 ; 东南大学公共卫生学院 ; 环境医学工程教育部重点实验室 年份:2017
    摘要:[目的]探讨微小RNA(micro RNA,miRNA/miR)1908对肺癌细胞A549的细胞周期及靶基因的调控作用。[方法]通过慢病毒转染方法,上调A549细胞中miR-1908的表达水平,运用噻唑蓝法和流式细胞技术检测miR-1908对A549细胞增殖、周期和凋亡的影响。应用DIANA-TOOLs及KEGG数据库对miR-1908进行生物信息学分析,探讨其可能参与的信号通路和潜在靶基因。应用RT-q PCR和Western blot技术检测miR-1908对预测靶基因mR NA和蛋白表达水平的调控。[结果]与阴性对照组相比,转染组上调miR-1908表达可引起A549细胞G2期阻滞,S期减少(P〈0.05),对细胞增殖和凋亡无明显影响(P〉0.05)。miR-1908主要参与MAPK信号通路的调控,蛋白磷酸酶5(PP5)基因为其重要的潜在靶基因。与阴性对照组相比,转染组上调miR-1908表达可引起PP5的蛋白表达增加(P〈0.05),但其mR NA表达无明显改变(P〉0.05)。[结论]miR-1908可能通过对PP5基因正向调控或间接调控影响A549细胞周期,研究结果加深了对miRNAs在肺癌细胞中的作用及其机制的理解,并为miRNAs在肺癌中的进一步研究提供线索。
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