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  • 【专利】 禽白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法

    作者:王培坤 ; 林璐璐 ; 杨永立 ; 李海娟 ; 磨美兰 ; 韦天超 ; 黄腾 ; 韦平 年份:2017
    摘要:本发明公开了一种白血病病毒混合感染中单一病毒的纯化方法,通过测定混合感染病毒的TCID50进行终点稀释,采用稀释后的病毒液接种DF‑1细胞,收集上清与细胞培养物并用分型鉴定引物与IFA的对其进行鉴定,从而获得单一亚型的禽白血病病毒。该法对实验条件要求简单,具有很高的实际应用价值。实验结果证明,本发明可以成功的对不同亚型混合感染的ALV进行纯化,可为禽白血病病毒分子生物学特征及其致病性的研究提供技术支持。
  • 【期刊】 犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒的拯救与鉴定

    刊名:中国兽医学报 作者:文兆海 ; 毛丽萍 ; 胡远 ; 程瑶 ; 周海莹 ; 陈凯云 ; 翟少华 ; 简子健 关键词:重组狂犬病病毒 ; 犬瘟热病毒N基因 ; 反向遗传学 ; RT-PCR ; 间接免疫荧光 机构:新疆农业大学动物医学学院 ; 新疆农业大学动物医学学院 年份:2018
    摘要:探究犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒的拯救及鉴定,为后期犬瘟热-狂犬病二联口服弱毒活疫苗的研制奠定基础。采用脂质体转染的方法,将纯化后的重组质粒(pcDNA-N-G-EGFP-CDVN-PM-L)与辅助性表达质粒(pcDNAN、pcDNA-G、pcDNA-P、pcDNA-L)共转染BSR细胞,通过RT-PCR和间接免疫荧光技术进行检测并鉴定。结果显示,对盲传至第6代、第9代病毒液进行RT-PCR检测,均出现与预期相符的目的片段(狂犬病病毒N基因片段大小为1 315bp,犬瘟热病毒CDV-N基因片段大小为1 653bp)。间接免疫荧光试验后在激光共聚焦显微镜下,试验组均可观察到大量绿色荧光表达。RT-PCR结果与间接免疫荧光试验结果相吻合,表明犬瘟热病毒N基因重组狂犬病病毒拯救成功。
  • 【期刊】 禽腺病毒感染SPF鸡的病变和病毒分布初步研究

    刊名:中国家禽 作者:殷国政 ; 司振书 ; 刘延伟 ; 李哲 ; 李玉保 ; 路建彪 关键词:禽腺病毒 ; 血清4型 ; 病毒分布 ; 全身性感染 机构:聊城大学农学院 ; 聊城大学农学院 年份:2019
    摘要:鸡心包积液-肝炎综合征是一种急性传染病,由血清4型禽腺病毒引起。为了解该病原的主要致病特点,采用Ⅰ群4型禽腺病毒聊城分离株(SDLC 201601)接种SPF鸡胚,观察鸡胚病变;人工感染1日龄SPF鸡,对病死鸡进行剖检,观察主要病理变化,并采用PCR方法对各脏器进行病毒DNA的检测。结果发现,鸡胚试验组至接毒后第8天鸡胚全部死亡,接毒6 d后死亡胚出现心包积液、肝脏肿大、变性或出血及肾脏肿大、出血等典型病变。SPF鸡试验组在感染后第3天出现死亡并达到死亡高峰,第4天全部死亡,死亡率为100%,SPF鸡对照组无发病死亡;SPF鸡试验组死亡鸡主要病变在肝脏、心脏及肾脏等器官,其中肝脏的病变评分最高;死亡鸡的脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、气管、胰腺、小肠、法氏囊、肌胃、腺胃等脏器均检测到该病毒的DNA。表明该毒株对1日龄SPF鸡感染性强,可侵袭各组织脏器,为全身性感染,致死率可达100%。
  • 【期刊】 一种基于PE病毒转图和CNN的病毒识别方法

    刊名:软件 作者:吕臻 ; 张宇 关键词:CNN ; 深度学习 ; 图像分类 ; 病毒分类识别 ; 不平衡样本 机构:浙江省嘉兴市公安局科技信息通信处 ; 浙江省嘉兴市公安局科技信息通信处 ; 贵州省遵义市公安局科技信息通信处 年份:2018
    摘要:随着互联网的爆炸式的发展,计算机病毒也是层出不穷,如何快速的对新增病毒进行响应和查杀也是一个较大的挑战[1]。普通的特征检测方法对于新样本的检测存在滞后性,往往无法有效查杀新增样本。通常的机器学习查杀病毒,则存在特征难以提取,训练集样本不均衡的问题。本文中提出一种方法,通过CNN算法和文件图像化表示算法结合进行病毒扫描的方法。本文中发现,通过CNN,可以有效的提取文件图像化后的特征,达到了自动提取特征的目的。修改了CNN中softmax算法,从而解决了样本不均衡问题。
  • 【期刊】 猪群感染圆环病毒3型病例的诊断和病毒鉴定

    刊名:猪业科学 作者:贺东生 ; 俞丽 ; 苏丹萍 ; 梁伟放 ; 李锦辉 关键词: ; PCR鉴定 ; PCV3 ; CAP段基因 ; 序列分析 机构:华南农业大学兽医学院 ; 华南农业大学兽医学院 年份:2017
    摘要:2017年8月,华南某猪场保育猪出现慢性消瘦和呼吸道综合征的病猪。经实验室PCR诊断,排除猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)后显示为猪圆环病毒3型(PCV3)阳性。采用特异性CAP段基因引物扩增该片段,使用DNAMAN7.0和MEGA6.06软件进行同源性分析。结果,成功克隆了该病毒的CAP段基因,序列长度为671 bp,并进行基因测序和遗传进化分析。序列同源性分析表明该毒株为PCV3,命名为PCV3/CN/Guangzhou/2017。
  • 【专利】 用牛免疫缺陷病毒Gag蛋白的重组病毒样颗粒

    摘要:在此描述了包含一种或多种不同类型的目标病原体蛋白质的牛免疫缺陷病毒gag蛋白质(“Bgag”)重组病毒样颗粒(“VLPs”)。还描述了包含新型Bgag VLPs的组成成分以及制造和使用新型Bgag VLPs的方法。
  • 【专利】 病毒性腹泻病毒I型E2蛋白的表达及应用

    摘要:本发明涉及牛病毒性腹泻病毒I型E2蛋白的表达及应用。其优点为:(1)建立了高效获取BVDV E2蛋白的表达、纯化方法,可制备纯的BVDV E2蛋白;(2)仅用BVDV的E2蛋白免疫兔子制备抗体,比用全病毒免疫牛本身制备的抗体特异性好,背景浅,易判定;使用FITC标记二抗,建立了间接荧光法,因此敏感性更好;操作简单:采用预混液,减少操作时间;(3)用纯的BVDV E2蛋白包被,优化了封闭条件、血清及抗体保存液,建立了BVDV抗体间接ELISA方法,组装了敏感且价格低廉的BVDV抗体间接ELISA试剂盒,可改变长期依赖进口BVDV抗体ELISA试剂盒的局面。
  • 【期刊】 RNA病毒利用外泌体促进病毒感染的研究进展

    刊名:微生物学通报 作者:周昌娈 ; 谭磊 ; 丁铲 关键词:外泌体 ; RNA病毒 ; 感染 机构:中国农业科学院上海兽医研究所 ; 中国农业科学院上海兽医研究所 年份:2017
    摘要:外泌体是一种由细胞主动向胞外分泌的囊泡类小体,因其能在细胞间传递蛋白、脂类和核酸等分子,而被认为是一种新的重要的细胞间通讯方式。RNA病毒,如HIV-1、HCV等,作为一类重要的病原体,一直影响着全人类的健康。近来的研究发现,病毒能够利用外泌体的某些相关功能促进其复制与传播。然而,对外泌体与病毒感染的相关研究才刚刚起步,尚有很多方面并未被详细认知,所要研究的内容还有很多。本文主要总结了外泌体在一些RNA病毒感染中的促进作用及其可能的机制,以期让大家了解RNA病毒与外泌体之间已有的相互关系。
  • 【期刊】 猪圆环病毒2d亚型病毒样颗粒的制备与鉴定

    刊名:中国兽医科学 作者:侯强 ; 侯绍华 ; 贾红 ; 姜一曈 ; 鑫婷 ; 李明 ; 陈青 ; 朱鸿飞 关键词:猪圆环病毒2d亚型 ; 核衣壳蛋白 ; 杆状病毒表达系统 ; 病毒样颗粒 机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 ; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 ; 北京农学院农业部都市农业(北方)重点实验室 年份:2017
    摘要:本研究从临床病料中扩增获得猪圆环病毒2型(PCV2)Cap基因,并进行序列分析和抗原性比对,然后利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞内将Cap基因进行表达,目的蛋白进行Western-blot、IFA、质谱鉴定以及透射电镜和免疫电镜检测。结果表明,扩增获得的PCV2 Cap基因属于PCV2d亚型,在抗原性方面与国内PCV2a、PCV2b代表性毒株及疫苗株存在4个部位的差异;在昆虫细胞内PCV2d Cap蛋白成功表达并具有良好的免疫原性;PCV2d Cap蛋白在昆虫细胞内完成自组装,形成与天然病毒结构相似的病毒样颗粒(VLP)。本研究首次在昆虫细胞内制备出PCV2d亚型病毒样颗粒,为PCV2d亚单位疫苗研制及诊断抗原开发奠定了基础。
  • 【期刊】 寨卡病毒感染者13例病毒核酸检测结果分析

    刊名:中国公共卫生 作者:陈茂余[1] ; 岑小莉[2] ; 刘鹰航[1] ; 陈阿群[1] ; 冯绮雯[1] ; 韦志楠[1] ; 郑南才[1] ; 王立华[1] ; 梁均和[1] ; 杨治文[2] 关键词:寨卡病毒 寨卡病毒感染者 检测 流行病学 机构:江门市疾病预防控制中心传染病预防控制科 ; 江门市疾病预防控制中心传染病预防控制科 年份:2017
    摘要:目的 分析广东省江门市13例寨卡病毒感染者生物样品病毒核酸结果。方法 采用描述性方法 对2016年2—4月江门市报告的寨卡病毒感染者进行流行病学分析。采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRTPCR)方法 检测研究对象的血液、尿液和唾液寨卡病毒核酸。结果 2016年2—4月江门市共确诊10例寨卡病毒病病例和发现3例寨卡病毒隐性感染者,均自委内瑞拉输入。13例感染者中,男性6例,女性7例;最小年龄5岁,最大年龄46岁,中位数是19岁,≤14岁儿童占46.15%(6/13)。寨卡病毒核酸阳性检出持续时间,血液最短0 d,最长4 d,中位数0 d;尿液最短2 d,最长32 d,中位数5.5 d;唾液最短0 d,最长10 d,中位数3.5 d;尿液样品比血液样品病毒核酸阳性持续时间长(P〈0.01);唾液样品比血液样品病毒核酸阳性持续时间长(P〈0.05)。结论 寨卡病毒感染者血液、尿液和唾液3种生物样品病毒核酸阳性持续时间不一致。
  • 【期刊】 小鹅瘟病毒与H9N2离流感病毒混合感染的诊治

    刊名:河南畜牧兽医:综合版 作者:王红利 关键词:小鹅瘟病毒 ; 混合感染 ; 流感病毒 ; H9N2 ; 诊治 ; 基因序列测定 ; 实验室检测 ; PCR扩增 机构:郏县畜牧局 ; 郏县畜牧局 年份:2018
    摘要:近年来,随着养鹅数量及规模的增加,鹅养殖密度的增大,多种鹅传染病不断发生,尤其是对养鹅业影响严重的小鹅瘟和禽流感,近几年的发生呈上升趋势。笔者通过对发病鹅群临床症状及病变的观察,同时结合实验室检测,PCR扩增和目的基因序列测定.
  • 【期刊】 广东猪群新发非典型瘟病毒病的诊断和病毒鉴定

    刊名:猪业科学 作者:贺东生 ; 殷三鸿 ; 石坚 ; 李锦辉 ; 苏丹萍 ; 周霞 ; 刘博闻 关键词: ; PCR鉴定 ; APPV ; E2基因 ; 序列分析 机构:华南农业大学兽医学院 ; 华南农业大学兽医学院 ; 东莞市动物疫病预防控制中心 年份:2018
    摘要:2018年4月,广东某猪场新生仔猪出现全身震颤发抖、消瘦和哺乳困难,并导致死亡。经实验室PCR诊断,排除猪瘟病毒(CSFV)等传染病后显示为猪非典型性猪瘟(Atypical Porcine Pestivirus,APPV)阳性。针对其编码的E2基因设计一对特异性引物扩增该片段,使用DNA Star和MEGA 7.0软件进行同源性分析。结果:成功克隆了该病毒的E2段基因,序列长度为723 bp,并进行基因测序和遗传进化分析。序列同源性分析表明该毒株为APPV,命名APPV/CN/HUANAN/201801。
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