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  • 【专利】 一种鉴别猪圆环病毒的多重PCR检测试剂盒

    作者:田永祥 ; 杨克礼 ; 段正赢 ; 郭锐 ; 周丹娜 ; 袁芳艳 ; 刘泽文 ; 刘威 ; 高婷 年份:2018
    摘要:本发明公开了一种鉴别猪圆环病毒(PCV)的多重PCR试剂盒。该试剂盒包括如下3对快速区分PCV1、PCV2和PCV3基因型的多重PCR检测引物:PCV1‑F和PCV1‑R,PCV2‑F和PCV2‑R,PCV3‑F和PCV3‑R。该试剂盒可用于检测猪圆环病毒并区分不同的基因型。本发明具有快速、简便、特异性强、敏感性高的特点,并且可同时进行大批量的样品检测,只需一次扩增反应即能鉴别样品是否属于PCV1、PCV2或PCV3感染,亦或是其中两者或三者的共同感染,可为猪圆环病毒的疫情监测、流行病学调查及综合防控提供技术支持,具有良好的应用前景。
  • 【会议】 羊口疮病毒湖北株F1L基因的克隆与遗传进化分析

    作者:田永祥 ; 郭锐 ; 周丹娜 ; 段正赢 ; 杨克礼 ; 刘泽文 ; 袁芳艳 ; 刘威 ; 刑崔昱 ; 裴小英 关键词:羊口疮病毒 ; F1L基因 ; 克隆 ; 遗传进化分析 机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 ; 山西农业大学 ; 武汉市动物卫生监督所 年份:2016
    摘要:为了分析羊口疮病毒湖北株(ORFV-HB-YX株)F1L基因遗传变化规律,参照GenBank公布的ORFVF1L基因序列设计特异性引物,对ORFV-HB株F1L基因进行PCR扩增、克隆、测序以及遗传进化分析。结果显示,F1L基因PCR扩增产物大小为999bp,编码333个氨基酸,系统进化树显示HB-YX株与GenBank参考毒株的核苷酸序列同源性为95.0%~98.0%,与福建FJ-GO株同源性高达98%亲缘关系最近,属于同一分支。
  • 【期刊】 环糊精衍生物在金属催化有机合成中的应用分析

    刊名:中国化工贸易 作者:田永祥 关键词:金属催化有机合成 ; 环糊精衍生物 ; 应用 机构:天津力生化工有限公司 ; 天津力生化工有限公司 年份:2018
    摘要:伴随我国能源资源需求量的日益增大,对金属催化提出更高要求.从近年来金属催化有机合成情况看,主要选择环糊精衍生物,其用于金属催化有机合成中可发挥重要作用.本次研究将对环糊精衍生物金属离子配体、超分子催化剂表现以及反相相转移催化剂应用表现进行分析.
  • 【期刊】 消防车水力性能实验室及测试装置的设计与实现

    刊名:消防技术与产品信息 作者:田永祥 ; 朱义 ; 蒋旭东 ; 万明 关键词:消防车 ; 水力性能测试 ; 实验室 ; 检测装置 ; 设计 机构:公安部上海消防研究所 ; 公安部上海消防研究所 年份:2018
    摘要:提出了消防车水力性能测试实验室的总体设计要求,并开发了一套消防车水力性能检测系统。依据国家相关标准要求,设计了消防车水力性能测试装置系统的整体方案,详细论述了装置的水力管路设计、硬件配置、软件功能等要求。该装置实现了消防车水力性能实验自动化,并可扩展成多工位同时测试,满足了对消防车水力性能检验的需求。
  • 【期刊】 玻璃酸钠在膝骨关节炎关节镜术后的临床应用

    刊名:中国药物与临床 作者:田永祥 ; 王小民 ; 焦斌虎 关键词:膝骨关节炎 ; 关节肿痛 ; 关节镜术后 ; 膝关节骨关节炎 ; 变性坏死 ; 骨关节疾病 ; 玻璃酸钠 ; 退变性 机构:山西省临猗县人民医院骨科 ; 山西省临猗县人民医院骨科 ; 山西医科大学第一医院骨科 年份:2020
    摘要:膝关节骨关节炎(Kneeosteoarthritis;KOA)是骨科常见的一种退变性骨关节疾病;其确切发病机制尚不完全明确;临床上主要表现为关节内软骨、滑膜变性坏死及关节肿痛、活动受限;病情易迁延不愈、易反复发作[1];据近年有关调查;60岁以上人群为KOA高发人群;60~75岁以上人群KOA患病率可达50%;且随着社会老龄化趋势的加剧;其发病人口基数及发病率有逐渐上升趋势[2];既往观点认为关节镜术后应用玻璃酸钠的有利于缓解疼痛;改善生活质量;
  • 【期刊】 羊口疮病毒湖北株B2L基因的克隆与遗传进化分析

    刊名:中国兽医杂志 作者:田永祥 ; 郭锐 ; 周丹娜 ; 段正赢 ; 杨克礼 ; 刘泽文 ; 袁芳艳 ; 刘威 关键词:羊口疮病毒 ; B2L基因 ; 克隆 ; 遗传进化分析 机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室 ; 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 年份:2017
    摘要:为了分析羊口疮病毒湖北株(ORFV-HB-YX株)B2L基因遗传变化规律,参照Gen Bank公布的ORFV-B2L基因序列设计特异性引物,对ORFV-HB株B2L基因进行PCR扩增、克隆、测序以及遗传进化分析。结果显示,B2L基因PCR扩增产物大小为1 137 bp,编码379个氨基酸,系统进化树显示HB-YX株与Gen Bank参考毒株的核苷酸序列同源性为97.0%~99.0%,与福建FJ-GS株同源性高达99%亲缘关系最近,属于同一分支。
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒S1蛋白表达及反应原性分析

    刊名:畜牧与兽医 作者:田永祥 ; 桂锐 ; 童岑 ; 周丹娜 ; 郭锐 ; 刘威 ; 刘东宇 ; 李坤 ; 张辉 ; 李家奎 关键词:猪流行性腹泻病毒 ; S1蛋白 ; 反应原性 机构:华中农业大学动科动医学院 ; 华中农业大学动科动医学院 ; 湖北省农业科学研究院畜牧兽医研究所 年份:2017
    摘要:为了获得反应原性较好的猪流行性腹泻病毒(PEDV)S1蛋白,利用原核表达系统对S1基因(60~845 bp)进行扩增并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3),以1 mmol/L IPTG诱导表达4 h,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示:成功构建了pET-30A-S1质粒,重组蛋白得到了表达且具有良好的反应原性,能够被兔PEDV多抗血清识别。本研究为进一步建立ELISA检测方法和亚单位疫苗的研制奠定了物质基础。
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒S1蛋白表达及反应原性分析

    刊名:畜牧与兽医 作者:田永祥 ; 桂锐 ; 童岑 ; 周丹娜 ; 郭锐 ; 刘威 ; 刘东宇 ; 李坤 ; 张辉 关键词:猪流行性腹泻病毒 ; 反应原性 机构:华中农业大学动科动医学院 ; 华中农业大学动科动医学院 ; 湖北省农业科学研究院畜牧兽医研究所 年份:2017
    摘要:为了获得反应原性较好的猪流行性腹泻病毒(PEDV) S1蛋白,利用原核表达系统对S1基因(60~845 bp)进行扩增并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌BL21 (DE3),以1 mmol/L WTG诱导表达4h,进行SDS-PAGE和Westem blot分析.结果显示:成功构建了pET-30A-S1质粒,重组蛋白得到了表达且具有良好的反应原性,能够被兔PEDV多抗血清识别.本研究为进一步建立ELISA检测方法和亚单位疫苗的研制奠定了物质基础.
  • 【期刊】 一例乌骨羊羔羊白肌病病例分析

    刊名:黑龙江畜牧兽医 作者:田永祥 ; 郭锐 ; 周丹娜 ; 段正赢 ; 杨克礼 ; 刘泽文 ; 袁芳艳 ; 刘威 关键词:乌骨羊 ; 羔羊 ; 白肌病 ; ; 维生素E ; 黑色素 机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 年份:2017
    摘要:羔羊白肌病又称肌肉营养不良症,是由饲料中微量元素硒和维生素E缺乏或不足而引起的疾病,以骨骼肌﹑心肌和肝脏组织病变﹑坏死为特征。乌骨羊体内的乌骨主要是由黑色素形成,硒元素又是合成黑色素不可缺少的元素之一。由于我国大面积国土缺硒,加上养殖户日常生产管理不善,不在饲料中添加硒,极易引发白肌病。笔者对咸宁市某乌骨羊场病羊通过临床症状、剖检病变、血硒检测确诊为乌骨羊羔羊白肌病,并对预防、治疗和发病原因进行了讨论。在缺硒地区养殖场一定要注重硒元素在饲料中的添加。
  • 【期刊】 猪圆环病毒2型 Cap 基因的克隆与原核表达

    刊名:江西农业学报 作者:田永祥 ; 杨克礼 ; 时代 ; 段正赢 ; 周丹娜 ; 郭锐 ; 刘泽文 ; 袁芳艳 ; 刘威 ; 孟丽 关键词:猪圆环病毒2型 ; 克隆 ; 原核表达 机构:湖北省农业科学院 ; 湖北省农业科学院 ; 畜牧兽医研究所 ; 动物胚胎工程与分子育种湖北省重点实验室 ; 河南省信阳市浉河区畜牧局 年份:2017
    摘要:利用PCV2鄂州株的基因序列设计特异性引物,分别在上、下游引物中加入Sac I和Hind III酶切位点,扩增出PCV2鄂州株的ORF2基因;将该片段克隆至pET-28a原核表达载体,经PCR、酶切鉴定,成功构建了阳性重组表达质粒pET-ORF2。将其转入大肠杆菌Rosetta中,经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳分析确定重组蛋白大小为34.5 kD,主要以包涵体的形式表达。优化后确定最佳诱导条件为:37℃,至OD值0.4~0.6时加入终浓度为1 mmol/L的IPTG,诱导5 h。表达产物经His-tag镍柱纯化后进行Western-blot分析,结果表明表达的重组蛋白能够与PCV2标准阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。
  • 【期刊】 猪肺炎支原体脂蛋白LppT的多克隆抗体制备及鉴定

    刊名:江苏农业科学 作者:田永祥 ; 刘威 ; 袁芳艳 ; 周丹娜 ; 刘泽文 ; 杨克礼 ; 段正赢 ; 郭锐 ; 蔡行 ; 肖少波 关键词:猪肺炎支原体 ; 脂蛋白 ; LppT ; 多克隆抗体 机构:华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 ; 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 年份:2017
    摘要:试验构建猪肺炎支原体重组表达质粒pET30a-LppT,通过快速定点突变试剂盒将LppT基因中513、945、1 860、2 547 bp处的A突变为G,使改造后的LppT基因能在大肠杆菌系统中正确表达,IPTG诱导重组蛋白的表达并进行了蛋白纯化,纯化的目的蛋白与佐剂混合、乳化制备免疫原,免疫新西兰大白兔制备LppT蛋白多克隆抗体。SDS-PAGE分析结果显示,IPTG诱导表达后获得1条特异性蛋白条带,分子质量约为110 ku,与预期蛋白大小一致。可溶性分析结果表明目的蛋白以可溶形式表达于上清中,纯化的蛋白经SDS-PAGE分离后,用制备的LppT多克隆抗体进行Western Blot检测,结果表明制备的LppT多克隆抗体具有较强的特异性。
  • 【期刊】 湖北地区猪瘟病毒流行株E2基因的序列测定与分析

    刊名:《养猪》 作者:田永祥 ; 郭锐 ; 周丹娜 ; 刘威 ; 段正赢 ; 杨克礼 ; 刘泽文 ; 袁芳艳 ; 高婷 关键词:猪瘟病毒 ; E2基因 ; 序列分析 机构:湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室 ; 农业部兽用药物与诊断技术湖北科学观测实验站 ; 动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 年份:2018
    摘要:为分析猪瘟病毒湖北流行株(CSFV—HBWH-2017株)E2基因遗传变化规律,每照GenBank公布的CSFV—E2基因序列设计特异性引物,对CSFV—HBWH-2017株E2基因进行PCR扩增、克隆、测序以及遗传进化分析。结果显示,E2基因PCR扩增产物大小为1489bp,编码496个氡基酸,系统进化树显示HBWH-2017株与GenBank每考毒株的核苷酸序列同源性为86.0%~96.0%,与湖南HNLY-2011株同源性高达96%亲缘关系最近,属于同一分支2.1c亚型,表明2.1c毒株已经戎为湖北地区流行毒株。
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