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  • 【期刊】 SPA单结构域突变体组合噬菌体文库的构建及体外进化筛选

    刊名:安徽医科大学学报 作者:王锦红 ; 林子玉 ; 丁莹莹 ; 周鹏 ; 高彩霞 ; 冯娇娇 ; 潘卫 ; 邓松华 关键词:AC突变体 ; 噬菌体展示文库 ; 筛选 ; 人免疫球蛋白G 机构:安徽医科大学病理生理学教研室 ; 安徽医科大学病理生理学教研室 ; 第二军医大学病原生物学教研室 年份:2015
    摘要:目的使用人免疫球蛋白G(IgG)对金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)单结构域突变体组合文库进行体外分子进化筛选,判断不同突变体组合的特异结合优势,探索优势组合分子结构与功能间的关系。方法通过Overlap PCR获得SPA中A和C单结构域突变体片段组合构成的噬菌体文库,再使用人IgG对文库进行体外亲和筛选,期望通过对特定结合分子的定向改造及体外进化获得具有高结合优势的组合分子。结果成功构建符合体外筛选要求的SPA单结构域A在29、30位氨基酸定点突变文库(A1)、SPA单结构域C在36、37位定点突变文库(C1)和SPA单结构域A在37位后插入3个氨基酸随机肽(AI37)、SPA单结构域C在20位后插入3个随机连接肽(CI20),将A1、C1随机组合构建的噬菌体展示文库命名为库A1C1,将AI37、CI20随机组合构建的噬菌体展示文库命名为库AI37CI20。两个文库各自经过4、5轮亲和筛选,文库进化完全。Phage-ELISA高光密度值的单克隆,测序结果分析为A(Q29K30)A(I29I30)和AI-TQSA。结论通过定向改造技术获得了高结合能力的定点突变分子A(Q29K30)A(I29I30)和插入突变分子AI37-TQSA,为Ig结合分子的定向改造及具有新的Ig结合特性的重组Ig结合分子的进一步研究奠定了基础。
  • 【期刊】 高效液相色谱法测定长寿长乐口服液中五味子乙素含量

    刊名:中国药业 作者:王锦红 ; 何羽 关键词:高效液相色谱法 ; 长寿长乐口服液 ; 五味子乙素 ; 含量测定 机构:贵州省毕节地区药品检验所 ; 贵州省毕节地区药品检验所 年份:2009
    摘要:目的建立长寿长乐口服液的五味子乙素含量测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Lichrospher5-C18柱(200mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(72∶28),流速1.0mL/min,柱温35℃,检测波长254nm。结果五味子乙素进样量在0.234~2.223μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999(n=5),平均回收率为99.42%,RSD为1.09%(n=6)。结论HPLC法简便、准确,可用于长寿长乐口服液的质量控制。
  • 【期刊】 镁合金板料温冲压成形数值模拟技术

    刊名:材料导报 作者:王锦红 ; 夏伟 ; 周照耀 ; 郧建国 关键词:镁合金 ; 热冲压成形 ; 数值模拟 ; 材料模型 机构:华南理工大学机械工程学院金属新材料制备与成形研究开发中心 ; 华南理工大学机械工程学院金属新材料制备与成形研究开发中心 ; 韶关学院信息工程学院机电系 ; 华南理工大学机械工程学院金属新材料制备与成形研究开发中心 ; 华南理工大学机械工程学院金属新材料制备与成形研究开发中心 ; 韶关学院信息工程学院机电系 年份:2006
    摘要:用板料成形的方法对变形镁合金进行加工可以制造更薄更轻的零件,符合轻质化的发展趋势。利用有限元数值模拟的方法可以对实际的冲压过程进行模拟,达到改进工艺与模具的目的。对于板料加热状态下的数值模拟,为了使结果准确,最重要的就是要建立正确的材料本构关系模型,这一材料模型需给出应变、应变率、应力与温度之间的关系。在经典的塑性成型计算中,材料模型包含两方面的内容①初始屈服表面的确定,②流动法则和加工硬化模型的建立。总结了经典屈服模型和材料本构关系模型以及国内外学者在经典理论基础上建立起来的镁合金材料模型;探讨了板料成形有限元数值模拟技术以及目前常用的模拟软件;并在此基础上综述了镁合金冲压变形的热-机耦合的数值模拟的研究进展。
  • 【会议】 提高经胸超声心动图声学造影诊断卵圆孔未闭敏感度的探讨

    作者:王锦红 机构:四川绵阳市中心医院 ; 四川绵阳市中心医院 年份:2016
    摘要:目的:探讨经胸超声心动图声学造影(cTTE)诊断卵圆孔未闭(PFO)的价值,寻找提高cTTE诊断卵圆孔未闭敏感度的方法。材料与方法:1、采用GE公司VividE9多普勒超声诊断仪,配备2.5MHz相控阵探头及经食管探头。经受试者同意后,对我院不明原因脑卒中、偏头疼、短暂性脑缺血发作等症状的高度怀疑PFO的159例患者行cTTE检查,其中男性91例,女性68例,年龄20-60岁。2、在常规经胸超声心动图检查心脏结构基础上,大动脉短轴切面、心尖四腔心切面及剑下双房切面观察房间隔,检查卵圆窝处是否有回声分离,彩色多普勒显像(CDFI),观察房水平是否有过隔血流。经左侧肘正中静脉快速注入10ml手震生理盐水,观察静息状态下及Valsalva动作后是否有微泡自右房进入左房及左室内。3、对其中诊断为阴性的105例患者行经食管超声心动图(TEE)检查,其中11例患者发现为PFO。5、对这11例患者再次行cTTE检查,更换中级职称以上超声医师,检查前与患者充分沟通,再次对Valsalva动作进行训练,检查过程前反复练习医师、护士、患者的配合。结果和讨论:11例患者中9例患者可观察到房水平右向左分流,诊断PFO。cTTE诊断卵圆孔未闭过程中,很多因素可导致出现假阴性结果。总结可能的原因和改进方法有以下几点:1、患者胸廓及肺内气体干扰,声窗受限,图像质量差。超声医师因尽量耐心调节仪器参数或声窗,取得最满意的图像。2、Valsalva动作过程中声窗变化,超声医师未能及时调整好声窗,错过时相较短的右向左分流。在推注手震生理盐水前,提前观察在Valsava动作后声窗的变化情况是可以避免的。3、检查前,对患者Valsalva动作训练不足,检查时未能完成有效Valsava动作,右房压力未超过左房。提前做好患者Valsalva动作的训练可避免。4、检查过程中,特别是Valsalva过程中医师、护士、患者三者配合不好,右房压力超过左房瞬间微气泡未能到达右房。通过医师、护士、患者的共同反复练习,可以改善配合,避免上述情况。目前评价PFO的影像学检查方法主要有TEE及cTTE。前者是目前诊断PFO的金标准,但为侵入性操作,患者检查过程痛苦,后者安全、无创且痛苦小。改进以上几点后,可以提高cTTE诊断卵圆孔未闭的敏感度,使部分患者免受TEE检查带来的创伤。
  • 【期刊】 CAE在电源盒上盖注射模设计中的优化应用

    刊名:模具工业 作者:王锦红 ; 李海林 ; 钟燕锋 关键词:电源盒上盖 ; 数值模拟 ; 浇注系统 ; 冷却系统 机构:广东岭南职业技术学院现代制造学院 ; 广东岭南职业技术学院现代制造学院 ; 广州市今明科技有限公司 年份:2009
    摘要:对一电源盒上盖注射成型进行充模流动和冷却分析,根据分析结果对电源盒上盖注射模的浇注系统和冷却系统进行优化设计,同时验证在合适的注射压力、注射时间、保压压力、保压时间、冷却时间等工艺条件下注射出合格塑件,满足质量要求。
  • 【期刊】 Banach空间中非线性中立型泛函微分方程θ-方法的收缩性

    刊名:科技信息 作者:王锦红 ; 张宏伟 ; 宋豪杰 关键词:非线性收缩性θ-方法 ; 中立型泛函微分方程 ; Banach空间 机构:长沙理工大学数学与计算科学学院 ; 长沙理工大学数学与计算科学学院 年份:2010
    摘要:中立型泛函微分方程(NFDEs)广泛出现于生物学、物理学、控制理论以及工程技术等领域,近四十年来人们对其进行了大量研究。但由于其困难性,对其数值解的研究基本局限于线性问题和一些特殊的非线性问题,而对于更为一般的中立型非线性初值问题的研究很少。这篇文章致力于研究巴拿赫空间中非线性中立型泛函微分方程初值问题θ-方法的非线性收缩性,获得了θ-方法求解NFDEs的收缩性的结果 。
  • 【专利】 一种高亲和力免疫球蛋白结合分子及其制备方法

    摘要:本发明涉及一种高亲和力免疫球蛋白结合分子及其制备方法。该方法是以来自不同种属免疫球蛋白结合分子葡萄球菌A蛋白protein A的A、B、C、D、E结构域、大消化链球菌protein L的B1、B2、B3、B4、B5结构域、C和G群链球菌蛋白G protein G的G1、G2为结构单元,将上述结构单元随机连接,构建重组Ig结合分子文库,将该文库展示在噬菌体表面;以免疫球蛋白对噬菌体展示重组Ig结合分子文库进行3-4轮亲和筛选,获得系列高亲和力免疫球蛋白结合分子。这种分子显示出很高的免疫球蛋白结合活性,可用于抗体的检测和纯化,在酶联免疫吸附试验、免疫层析检测、免疫组化等免疫学诊断中具有广阔的应用前景。
  • 【期刊】 浅谈注射模抽芯机构的设计

    刊名:模具制造 作者:王锦红 ; 田晶 ; 李海林 关键词:产品倒勾 ; 抽芯机构 ; 注射模设计 机构:广东岭南职业技术学院现代制造学院 ; 广东岭南职业技术学院现代制造学院 年份:2010
    摘要:针对塑胶产品的倒勾问题,总结出其成型模具抽芯机构的组成及常见形式,为模具设计者提供相关参考。
  • 【会议】 HIV-1 Tat:艾滋病治疗性疫苗的希望与挑战

    作者:王锦红 ; 潘卫 ; 廖文婷 ; 陈秋莉 ; 吴昊 ; 李岚 ; 曹洁 ; 张华群 ; 钱宝华 ; 柴逸峰 机构:第二军医大学病原生物学教研室 ; 第二军医大学病原生物学教研室 ; 北京佑安医院传染病中心 ; 长海医院输血中心 ; 第二军医大学药学院 年份:2015
    摘要:目的:了解HIV-1 Tat在细胞和活体水平对生物代谢的影响、机体抗-HIV Tat的抗体反应特点及HIV Tat的免疫原性特点,为研发HIV Tat为靶点的治疗性疫苗提供基础。方法:应用UHPLC-TOF/MS和GC-MS进行代谢组学分析;应用NEIBM-ELISA方法进行抗-HIV Tat的抗体反应特点研究;对
  • 【期刊】 HIV-1 HXB2株ta(tB41-101N)融合基因原核表达质粒的构建及表达

    刊名:中国生物制品学杂志 作者:王锦红 ; 廖文婷 ; 陈璐 ; 曹洁 ; 陈秋莉 ; 唐萍 ; 庞强 ; 黄德胜 ; 潘卫 关键词:HIV-1 ; Tat蛋白 ; 融合蛋白 ; 原核表达 ; 重叠延伸PCR 机构:第二军医大学微生物教研室 ; 第二军医大学微生物教研室 ; 安徽医科大学病理生理学教研室 年份:2009
    摘要:目的构建HIV-1HXB2株ta(tB41-101N)融合基因原核表达质粒,表达并纯化Ta(tB41-101N)融合蛋白,为进一步研究其免疫原性奠定基础。方法在HIV-1HXB2株天然Tat蛋白N-端添加Tat41-101位氨基酸(aa),采用PCR法从HIV-1HXB2株tat基因中扩增分别编码Tat41-101aa和Tat1-101aa的tat41-101和tat1-101两个基因片段,重叠延伸PCR法扩增其融合基因ta(tB41-101N),并构建其原核表达质粒pET32a-ta(tB41-101N),经双酶切及测序验证后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。融合蛋白经Ni2+-NTA柱亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE、Westernblot及ELISA鉴定。结果重叠延伸PCR扩增出约500bp的ta(tB41-101N)融合基因,酶切及测序结果表明重组表达质粒pET32a-ta(tB41-101N)构建正确。SDS-PAGE分析显示,表达的Ta(tB41-101N)融合蛋白相对分子质量约为36000,约占菌体总蛋白的7%,纯化后纯度约为60%;Westernblot和ELISA分析显示,Ta(tB41-101N)融合蛋白与小鼠抗Tat单抗及抗-HIV阳性血清(抗Tat抗体阳性)均呈特异性阳性反应。结论已成功构建了HIV-1HXB2株ta(tB41-101N)融合基因原核表达质粒,并表达了其融合蛋白,该蛋白较好地保留了天然Tat蛋白的免疫反应性,为Tat新型疫苗的研究奠定了基础。
  • 【期刊】 高效液相色谱法测定健儿消食口服液中黄芩苷含量

    刊名:现代医药卫生 作者:王锦红 ; 洪宇农 关键词:高效液相色谱法 ; 健儿消食口服液 ; 黄芩苷 ; 含量测定 机构:贵州德祥制药有限责任公司 ; 贵州德祥制药有限责任公司 ; 贵州德祥制药有限责任公司 年份:2005
    摘要:目的:建立健儿消食口服液中黄芩苷含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定。色谱柱为Lichrospher5-C18(5μm,200×4.6mm);流动相:甲醇-水-磷酸(47:53:0.2);流速1.0ml/min;柱温35℃;检测波长280nm。结果:黄芩苷在0.125~1.25μg范围内与峰面积具有良好的线性关系,r=0.9998。平均回收率为99.5%,RSD为0.92%。结论:本方法简便、准确,可用于健儿消食口服液含量测定和质量控制。
  • 【期刊】 愈伤灵胶囊的薄层鉴别研究

    刊名:中国药业 作者:王锦红 ; 洪宇农 关键词:愈伤灵胶囊 ; 薄层色谱法 ; 三七 ; 红花 ; 当归 ; 落新妇 ; 冰片 机构:贵州省毕节地区药品检验所 ; 贵州省毕节地区药品检验所 ; 贵州省人民医院门诊西药房 年份:2009
    摘要:目的建立愈伤灵胶囊的薄层鉴别方法。方法采用薄层色谱(TLC)法对愈伤灵胶囊中三七、红花、当归、落新妇、冰片进行定性鉴别。结果在薄层层析色谱中均能检出三七、红花、当归、落新妇和冰片,阴性对照无干扰。结论TLC法简便易行、专属性强、分离度重现性好,可用于愈伤灵胶囊的质量控制。