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  • 【期刊】 安徽鸭减蛋-死亡综合征的诊断与病原鉴定初报

    刊名:中国家禽 作者:王桂军 机构:安徽农业大学动物科技学院 ; 安徽农业大学动物科技学院 年份:2011
    摘要:2010年4~11月,安徽鸭场发生多起鸭群产蛋下降,死亡率5%~20%不等。发病鸭的年龄在36周龄左右,主要表现精神萎顿、喜卧、采食减少,拉绿色稀便和产蛋率下降(产蛋率下降30%~50%)等症状。病程在30d左右,10%~30%的发病鸭死亡
  • 【期刊】 焦炉荒煤气余热回收装置的传热分析

    刊名:资源节约与环保 作者:王桂军 ; 占利斌 ; 潘少静 关键词:上升管 ; 螺旋盘管 ; 荒煤气 机构:华电重工股份有限公司 ; 华电重工股份有限公司 ; 南京军区锅炉检验所 ; 杭州锅炉集团股份有限公司 年份:2015
    摘要:介绍了一种新型的上升管螺旋盘管式荒煤气余热回收装置,并对其传热规律进行分析,得出该装置的传热系数约为34W/(m~2·K),为荒煤气余热回收装置的设计提供理论依据。
  • 【期刊】 鸭源呼肠孤病毒Sigma A蛋白的原核表达及免疫活性检测

    刊名:中国预防兽医学报 作者:王桂军 ; 朱英奇 ; 陈宗艳 ; 李传峰 ; 孟春春 ; 刘光清 关键词:鸭源呼肠孤病毒 ; Sigma A基因 ; 原核表达 ; 免疫原 机构:安徽农业大学动物科技学院 ; 安徽农业大学动物科技学院 ; 中国农业科学院上海兽医研究所 年份:2013
    摘要:为制备新型鸭源呼肠孤病毒(DRV)TH11株Sigma A蛋白的多克隆抗体,本研究采用RT-PCR方法扩增DRV TH11株Sigma A的编码基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。采用SDS-PAGE和western blot对表达产物进行鉴定。结果表明,Sigma A基因不仅可以在大肠杆菌中高水平表达,表达产物的分子量约66 ku,而且表达产物能够被特异性DRV多克隆抗体识别,证明表达的Sigma A蛋白具有良好的免疫活性。以纯化的Sigma A蛋白免疫实验兔制备抗Sigma A蛋白的多克隆抗体,间接ELISA检测结果显示其效价达1∶20 000以上。间接免疫荧光试验表明,多克隆抗体能够特异性识别DRV的Sigma A蛋白,表明Sigma A蛋白具有良好的免疫原性。本研究为进一步研究Sigma A蛋白的功能,以及建立DRV检测方法奠定了基础。
  • 【期刊】 HPLC手性固定相法测定患者血浆中布洛芬对映体的浓度

    刊名:中国现代应用药学 作者:王桂军 ; 施宪宝 ; 单丽娜 ; 郭斌 ; 周盾 ; 冯玉军 关键词:高效液相色谱法 ; 布洛芬 ; 手性固定相 ; 对映体 机构:辽宁医学院附属第一医院 ; 辽宁医学院附属第一医院 ; 秦皇岛市妇幼保健院药剂科 年份:2013
    摘要:目的建立用高效液相色谱法测定血浆中布洛芬对映体浓度的方法。方法用正己烷-异丙醇混合液(100∶5)提取血浆样品中布洛芬,在Chirobiotic V(250 mm×4.6 mm,5μm)柱上,以甲醇-冰醋酸-三乙胺(100∶0.04∶0.02)为流动相进行分离,于226 nm波长处检测,内标为吲哚美辛。结果 R-布洛芬、S-布洛芬和内标没有干扰,分离度良好。R-布洛芬和S-布洛芬血药浓度在0.01~5 mg·L 1内线性关系良好。两个对映体相对回收率分别为99.1%~102.2%和99.3%~102.4%,绝对回收率分别为66.8~72.9和66.3~71.4,日内RSD分别为4.2%~5.4%和3.6%~5.1%,日间RSD分别为5.9%~7.3%和6.2%~7.9%。结论该方法准确、快速、简便、灵敏度高、重复性好,可同时测量血浆中R-布洛芬和S-布洛芬的药物浓度,并可用于药动学参数的研究及患者血药浓度监测。
  • 【期刊】 以J亚型禽白血病病毒LTR为启动子的真核表达载体构建

    刊名:中国预防兽医学报 作者:王桂军 ; 王蓓 ; 陈宗艳 ; 李传峰 ; 孟春春 ; 刘光清 关键词:禽白血病病毒 ; 启动子 ; LTR 机构:安徽农业大学动物科技学院 ; 安徽农业大学动物科技学院 ; 中国农业科学院上海兽医研究所 年份:2013
    摘要:为构建以J亚型禽白血病病毒(ALV-J)的LTR元件为启动子的真核表达载体,本研究将ALV-J LTR克隆至pBluescript II SK(+)载体中,并在5'LTR和3'LTR之间分别插入报告基因(eGFP)和新城疫病毒(NDV)的NP基因,得到重组质粒pSK-LTR-GFP和pSK-LTR-NP。将上述重组质粒分别转染293T细胞、BHK-21细胞和鸡胚成纤维细胞(CEF),应用RT-PCR、western blot和荧光显微镜检测目的基因的表达。结果表明,无论是在哺乳动物细胞(BHK-21和293T)还是在禽原代细胞中,LTR均能够启动外源基因(eGFP和NP)良好转录和表达。流式细胞技术分析显示,报告基因在293T细胞中的表达在48 h达到峰值。本研究为利用ALV-J LTR元件构建输送或表达外源基因的质粒载体奠定了基础。
  • 【期刊】 北部湾经济区房地产行业可持续发展税收政策研究

    刊名:商业会计 作者:王桂军 ; 习成龙 ; 陈华 ; 胡小玲 ; 戴鹏 关键词:北部湾经济区 ; 房地产行业 ; 可持续发展 ; 税收政策 机构:北京航空航天大学北海学院 ; 北京航空航天大学北海学院 年份:2015
    摘要:当前北部湾经济区房地产行业税收政策中存在着开发环节税负分布不合理、税种交叉重叠、税费结构不合理及税收征管手段落后等问题,为此,政府必须对现有税收政策进行调整。调整思路是:优化设计房地产开发、保有和转让环节的税收负担比例;降低土地增值税和企业所得税,稳步推进物业税或财产税的征收,努力改进税收的征管方法等,以此来推动北部湾经济区房地产行业的可持续发展。
  • 【期刊】 抗羊口疮病毒囊膜蛋白B2L小鼠多克隆抗体的制备和应用

    刊名:细胞与分子免疫学杂志 作者:王桂军 ; 周祺 ; 顾香雪 ; 许泽军 ; 黄荣 ; 黄军生 ; 李浩然 ; 李涛 ; 周晓雅 ; 苏观志 ; 殷冬冬 关键词:羊口疮病毒 ; B2L ; 多克隆抗体 机构:安徽农业大学动物科技学院 ; 安徽农业大学动物科技学院 ; 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室 年份:2018
    摘要:目的获取羊口疮病毒(ORFV)囊膜蛋白B2L并制备鼠抗B2L蛋白多克隆抗体。方法采用PCR扩增获得B2L基因,并将其分别克隆至原核表达载体p ET-32a和真核表达载体p3×FLAG-CMV-14。两个重组表达载体均经过鉴定,重组原核表达载体使用BL21大肠杆菌表达,异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白。通过Tris-尿素溶液洗去非目的蛋白,Western blot法鉴定。将定量的纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备鼠抗ORFV B2L多克隆抗体。将真核表达重组质粒p3×FLAG-B2L转染Vero细胞、BHK-21细胞,使用间接免疫荧光法(IFA)对抗B2L蛋白的多克隆抗体鉴定,并应用于免疫组织化学染色检测患病羊唇部组织ORFV的表达。结果 Western blot法确定了制备的B2L蛋白的特异性; IFA结果表明制备的小鼠抗B2L多克隆抗体有特异性和反应原性,免疫组织化学染色法结果表明该抗体可以检测出患病羊唇部组织的ORFV。结论成功制备了特异性的小鼠抗B2L多克隆抗体。
  • 【期刊】 鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

    刊名:中国微生态学杂志 作者:王桂军 ; 王勇 ; 殷冬冬 ; 宫晓华 ; 王瑞 ; 许漩 ; 唐井玉 ; 兰梦蝶 关键词:鸭坦布苏病毒 ; E蛋白 ; 原核表达 ; 多克隆抗体 机构:安徽农业大学动物科技学院 ; 安徽农业大学动物科技学院 年份:2016
    摘要:目的用RT-PCR技术扩增鸭坦布苏病毒(DTMUV)AH-F10株E基因,并克隆至pET32a(+)载体,构建重组表达质粒pET32a-E,表达E蛋白。方法重组表达质粒转化感受态细胞BL21(DE3),经IPTG诱导后,获得含6个His标签的融合蛋白,大小约54kDa。表达的蛋白以包涵体形式存在。对目的蛋白进行纯化,用纯化的E蛋白免疫Balb/c小鼠,制备多克隆抗体血清。结果SDS-PAGE和Western blot试验结果表明E基因在大肠埃希菌中成功表达,并能与抗DTMUV多克隆抗体产生特异性反应,具有良好的反应原性。间接免疫荧光试验表明免疫小鼠后获得的多克隆抗体能与DTMUV反应。结论本研究为DTMUV新型疫苗和诊断试剂盒的进一步研究奠定了基础。
  • 【期刊】 安徽省猪圆环病毒2型毒株的分离与鉴定

    刊名:中国微生态学杂志 作者:王桂军 ; 苏金存 ; 李超 ; 魏建忠 ; 孙裴 ; 李郁 关键词:猪圆环病毒2型 ; 安徽株 ; 分离 ; 鉴定 机构:安徽农业大学动物科技学院 ; 安徽农业大学动物科技学院 年份:2010
    摘要:目的从病原学角度了解安徽省猪群中PCV2的感染情况。方法PCR检测临床疑似PCV2感染的病料,阳性病料接种于PK15细胞中进行PCV2的分离和增殖,再经PCR检测、间接免疫荧光试验、电镜观察,以及ORF2基因序列分析等鉴定。结果9份临床病料中均扩增出630bp的PCV2特异性DNA片段,分离鉴定获得5株PCV2,分离毒株之间及其与27株国内外参考毒株之间的ORF2基因序列同源性在87.3%~99.8%。结论首次从病原学角度证实安徽省猪群中PCV2感染的普遍存在,分离毒株与国内外参考毒株的同源性均较高。
  • 【期刊】 猪瘟病毒NS3蛋白对牛肾细胞生长的影响

    刊名:西北农业学报 作者:王桂军 ; 孙裴 ; 张彦明 ; 魏建忠 ; 李郁 关键词:猪瘟病毒 ; NS3蛋白 ; 牛肾细胞 ; 生长影响 机构:安徽农业大学动物科技学院 ; 安徽农业大学动物科技学院 ; 西北农林科技大学动医学院 年份:2010
    摘要:猪瘟病毒蛋白NS3被认为与培养细胞发生病变存在紧密联系,为了进一步探讨NS3蛋白单独作用及其表达水平对培养细胞CPE发生的影响,本研究构建了2种携带NS3基因的真核表达载体,分别在牛源细胞MDBK中表达NS3蛋白,利用荧光显微镜观察宿主细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western-blot检测目的蛋白表达情况。研究结果表明,2种载体均在MDBK中成功表达NS3蛋白;其中pCD-NA3.1-NS3质粒所表达的目的蛋白量较大,并使宿主细胞表现出明显的形态学变化;细胞凋亡检测结果表明NS3蛋白大量表达的宿主细胞凋亡率显著高于对照组。猪瘟NS3蛋白可以不需要猪瘟病毒其他蛋白的参与,具有直接造成宿主细胞发生病变的能力,但较低的蛋白存在水平并不能对宿主细胞造成可检测的损伤,推测活体内若能有效干扰瘟病毒NS3蛋白的产生或其功能可能会降低猪瘟或牛病毒性腹泻-黏膜病的发病率或使临床表现减轻。
  • 【期刊】 鸡传染性喉气管炎病毒江苏分离株的分离鉴定

    刊名:中国兽医杂志 作者:王桂军 ; 高巍 ; 梅梅 ; 张建军 ; 柯浩 关键词:鸡传染性喉气管炎病毒 ; 分离 ; 鉴定 机构:扬州大学兽医学院 ; 扬州大学兽医学院 ; 安徽农业大学动物科技学院 ; 扬州威克生物工程有限公司 年份:2010
    摘要:江苏某养殖场28周龄蛋鸡发生以呼吸困难、咳血和产蛋下降为主要症状的疾病。利用特异性引物,从发病鸡喉头及其分泌物中扩增出鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,ILTV)TK基因的1.3 kb大小片段;发病鸡喉头及分泌物接种鸡胚后,在鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上形成痘斑,产生特征性的多核巨细胞和核内包涵体;第3代分离毒的毒价为10-6.2EID50/0.2 mL;分离毒株可被ILT标准阳性血清中和,中和价为1∶40;人工发病试验显示,接种鸡有ILT典型的呼吸道症状和病理变化。以上结果表明,分离病毒为ILTV,将此分离株命名为XZ09。
  • 【期刊】 加味四逆散治疗肝胃气滞型胆汁返流性胃炎80例

    刊名:江苏中医药 作者:王桂军 ; 李大卓 关键词:胆汁返流性胃炎 ; 肝胃气滞 ; 加味四逆散 机构:高邮市龙虬镇卫生院 ; 高邮市龙虬镇卫生院 ; 高邮市中医院 年份:2010
    摘要:自2006年以来,我们以加味四逆散治疗肝胃气滞型胆汁返流性胃炎(BRG)80例,疗效满意,现报告如下:1一般资料本组80例中,男36例,女44例;年龄20~69岁,平均年龄42.5岁;病程最短7d,最长20年,平均病程8.8年。疾病诊
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