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  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒结构蛋白的研究进展

    刊名:畜牧与兽医 作者:王加圆 ; 汪怿旸 ; 金文杰 关键词:猪流行性腹泻病毒 ; 结构蛋白 ; 细胞侵入 年份:2018
    摘要:猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种急性、高度传染性的肠道疾病,PEDV由4个结构蛋白、15个非结构蛋白和ORF3组成。15个非结构蛋白仅在病毒复制过程中发挥了一定的作用,而4个结构蛋白构成了整个病毒颗粒,在病毒的复制和转录过程中均发挥了重要的作用。现对结构蛋白S(纤突蛋白)、M(小包膜糖蛋白)、E(膜糖蛋白)和N(核衣壳蛋白)在病毒复制和转录中的作用、免疫保护中的作用以及在细胞侵入及流行病学中的作用进行综述。
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒结构蛋白及疫苗的研究进展

    刊名:畜牧与兽医 作者:郭春和 ; 黄毓茂 ; 项林盛 ; 唐丽云 ; 甘建平 ; 郭强 ; 焦茂兴 关键词:猪流行性腹泻病毒 ; 结构蛋白 ; 疫苗 机构:华南农业大学兽医学院 ; 华南农业大学兽医学院 ; 安徽温氏畜牧有限公司 ; 宜春学院 年份:2011
    摘要:猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)由冠状病毒引起,患病仔猪以呕吐、腹泻、脱水为特征,具有较高的致死率,给生猪的发展带来了巨大的经济损失,故防制PED非常重要。PEDV S、E、M、N蛋白病毒粒子的结构蛋白,在体外能自我装配成病毒样颗粒(VLPs),并能刺激机体产生抗PED中和抗体,所以研究PED结构蛋白对PED新型疫苗研制至关重要。本文对PEDV结构蛋白分析及疫苗研究进行了综述,为PEDV的深入研究提供参考。
  • 【会议】 猪流行性腹泻病毒结构蛋白基因及ORF3基因的遗传变异分析

    作者:王隆柏 ; 周伦江 ; 林裕胜 ; 吴学敏 ; 刘玉涛 机构:福建省农业科学院畜牧兽医研究所 ; 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 年份:2014
    摘要:引言猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征的一种高度接触性肠道传染病,是导致世界各养猪国家仔猪早期死亡的重要疫病之一~([1,2])。近年来,PEDV再次席卷全球,造成了数以百万的仔猪发病死亡,又一次成为困扰世界性养猪的重要疫病。本研究对从福建不同地区采集发生PED的病料进行结构蛋白基因(S基因、E基因、M
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒P55野生毒株主要结构蛋白遗传分析

    刊名:福建畜牧兽医 作者:高杏丹 ; 陈曦 ; 杨金先 ; 俞伏松 ; 李英英 ; 林天龙 ; 宋铁英 关键词:猪流行性腹泻病毒 ; M基因 ; N基因 ; 序列分析 ; 遗传分析 机构:福建师范大学生命科学学院 ; 福建师范大学生命科学学院 ; 福建省农业科学院生物技术研究所 年份:2013
    摘要:猪流行性腹泻病毒近年来在福建省呈现了不断扩散和暴发的态势。本文以筛选到的PEDV野生毒株P55为研究对象,通过对其主要结构蛋白M和N基因的序列比较和遗传进化分析,结合前期的S1和ORF3蛋白研究结果,综合评定该毒株的分子遗传学特征。序列分析结果显示,P55的M和N基因与参考序列比较,均未发现片段缺失和插入,仅N蛋白序列中存在少量点突变;遗传距离分析结果显示,P55的M和N蛋白的变异度较S1和ORF3低。上述结果表明,与P55毒力相关的分子机制除了ORF3外,还可能存在其他基因区域的协同作用。该结果为预防和控制该类变异毒株的流行提供了参考。
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒蛋白结构与功能的初探

    刊名:世界华人消化杂志 作者:茅翔 ; 任晓峰 关键词:猪流行性腹泻病毒 ; 非结构蛋白 ; 结构蛋白 机构:南京农业大学动物医学院 ; 南京农业大学动物医学院 ; 东北农业大学动物医学学院预防兽医系 年份:2013
    摘要:猪流行性腹泻猪流行性腹泻病毒引起的猪肠道传染性疾病.该病毒属于尼多病毒目,冠状病毒属.虽然猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)首次在欧洲发生,但是目前已经成为包括中国、韩国、日本、菲律宾以及泰国等亚洲国家猪产业中严重的传染性疾病,造成了严重的经济损失.目前猪传染性胃肠炎(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)和猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)二联灭活苗及弱毒苗的应用大大降低了两种病毒病的发生率,但是我国目前PED的流行仍呈逐年上升趋势.目前对PEDV的致病机制了解较少,本综述目的旨在借助其他冠状病毒病毒蛋白结构和功能的研究成果,对PEDV编码的病毒蛋白进行初步分析,以期为深入研究PEDV提供一些新的思路.
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒主要结构蛋白在杆状病毒中的表达及免疫原性分析

    刊名:畜牧与兽医 作者:谭博敏 ; 蒋志琼 ; 余希尧 ; 钟泽民 ; 黄毓茂 关键词:猪流行性腹泻病毒 ; 抗原表位 ; 杆状病毒表达 机构:华南农业大学兽医学院 ; 华南农业大学兽医学院 年份:2014
    摘要:为了研制一种有效控制猪流行性腹泻的疫苗,本试验设计了两对引物,分别扩增猪流行性腹泻病毒(PEDV)主要抗原表位S1(S蛋白中一个有效的抗原位点)和M蛋白的基因。将两段基因克隆到杆状病毒双表达载体pFastBacTMDuai中,构建了重组转移质粒pFBD-S1-M,并将其转化至DH10BacTM感受态细胞中制备重组穿梭质粒Bacmid-S1-M,转染Sf9昆虫细胞后,拯救出能够共表达S1和M蛋白的重组杆状病毒rBacmid-S1-M。表达产物经过SDS-PAGE和Western blot检测,共表达的重组S1和M蛋白产物能够与PEDV多克隆抗体发生特异性反应,表明共表达的蛋白具有良好的反应原性。本研究为PEDV基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒M蛋白的原核表达

    刊名:福建农林大学学报(自然科学版) 作者:刘梦茜 ; 李春燕 ; 陈仕怡 ; 袁晓琴 ; 星东 ; 王全溪 关键词:猪流行性腹泻病毒 ; 原核表达 机构:福建农林大学动物科学学院 ; 福建农林大学动物科学学院 年份:2017
    摘要:本试验设计了M基因的特异性引物,扩增了M基因,成功构建了重组质粒,并转化至Escherichia coli BL21(DE3)感受态细胞中,优化了异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达条件.结果表明,重组表达的融合蛋白Pet-32a-M大小约为43 ku,与预期大小相符.十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,M蛋白为包涵体蛋白,且在IPTG浓度为0.8 mmol·L-1,温度为37℃,诱导时间为8 h的条件下,蛋白表达效果最佳.蛋白免疫印迹检测结果进一步显示,重组蛋白Pet-32a-M在体外可以被成功表达.
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒M蛋白的原核表达

    刊名:福建农林大学学报:自然科学版 作者:刘梦茜 李春燕 陈仕怡 袁晓琴 星东 王全溪 关键词:猪流行性腹泻病毒 M蛋白 原核表达 机构:福建农林大学动物科学学院 ; 福建农林大学动物科学学院 年份:2017
    摘要:本试验设计了M基因的特异性引物,扩增了M基因,成功构建了重组质粒,并转化至Escherichia coli BL21(DE3)感受态细胞中,优化了异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达条件.结果表明,重组表达的融合蛋白Pet-32a-M大小约为43 ku,与预期大小相符.十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明,M蛋白为包涵体蛋白,且在IPTG浓度为0.8 mmol·L^-1,温度为37 ℃,诱导时间为8 h的条件下,蛋白表达效果最佳.蛋白免疫印迹检测结果进一步显示,重组蛋白Pet-32a-M在体外可以被成功表达.
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒S蛋白和M蛋白串联表达的研究

    刊名:福建农林大学学报(自然科学版) 作者:陈媛 ; 郑庆礼 ; 李春燕 ; 袁晓琴 ; 王全溪 关键词:猪流行性腹泻病 ; S基因 ; M基因 ; 串联表达 机构:福建农林大学动物科学院 ; 福建农林大学动物科学院 年份:2018
    摘要:猪流行性腹泻病毒(porcine epizootic diarrhea virus,PEDV)的M和S蛋白与中和抗体的形成有关,同时获得这两种蛋白质对预防和控制PED有重要的意义.本研究在实验室保存的M蛋白重组质粒的基础上构建了Pet-32a-M-S串联重组质粒.通过PCR鉴定、酶切鉴定和测序证实串联重组质粒构建成功.将Pet-32a-M-S质粒转染到BL21感受态细胞中,筛选诱导的最佳条件,最后进行Western blot鉴定.结果表明,串联重组蛋白最佳诱导条件为25℃、8 h、0.6 mmol·L-~(1)IPTG; Western blot鉴定结果表明,重组质粒能够同时诱导PEDV的S和M蛋白.因此,本试验成功获得PEDV S和M蛋白在体外的串联诱导表达,为PEDV亚单位疫苗的研究提供了基础.
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒蛋白对Vero E6核蛋白B23.1的影响

    刊名:中国兽医杂志 作者:石达 ; 吕茂杰 ; 陈建飞 ; 时红艳 ; 张志榜 ; 冯力 关键词:猪流行性腹泻病毒 ; 核衣壳蛋白 ; VeroE6细胞 ; 核蛋白B23.1 机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 ; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 ; 兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室 年份:2012
    摘要:为了解猪流行性腹泻病毒(PEDV)核蛋白N对Vero E6细胞核仁蛋白B23.1的影响,将本实验室构建的DsRed-N1/B23.1重组质粒转染Vero E6细胞,转染6h后接种PEDV,分别在转染后12、18h和24h三个时间点,进行病毒感染细胞的间接免疫试验,同时设未感染对照组,而后利用激光共聚焦显微镜分析感染和转染细胞中B23.1蛋白的变化。结果表明,PEDV N蛋白与Vero E6核蛋白B23.1有共定位特征,在PEDV感染Vero E6细胞12h后,B23.1蛋白开始发生变化,随着时间的延长逐渐碎裂、分散。这个结果提示,病毒可能通过破坏核仁的结构和核仁蛋白的功能,进而为病毒的复制提供便利。
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒的分子结构和遗传特性

    刊名:山东畜牧兽医 作者:高淑娟 机构:山东省泰安市岱岳区畜牧兽医局 ; 山东省泰安市岱岳区畜牧兽医局 年份:2017
    摘要:猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea, PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)引起的一种高度接触性肠道传染病,以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征[1].PED于1971年在英国的养殖场首次出现,随后传遍整个欧洲大陆,以冬季零星爆发为主要特征.
  • 【期刊】 猪流行性腹泻病毒S1蛋白表达及反应原性分析

    刊名:畜牧与兽医 作者:桂锐 ; 童岑 ; 周丹娜 ; 郭锐 ; 刘威 ; 田永祥 ; 刘东宇 ; 李坤 ; 张辉 关键词:猪流行性腹泻病毒 ; 反应原性 机构:华中农业大学动科动医学院 ; 华中农业大学动科动医学院 ; 湖北省农业科学研究院畜牧兽医研究所 年份:2017
    摘要:为了获得反应原性较好的猪流行性腹泻病毒(PEDV) S1蛋白,利用原核表达系统对S1基因(60~845 bp)进行扩增并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌BL21 (DE3),以1 mmol/L WTG诱导表达4h,进行SDS-PAGE和Westem blot分析.结果显示:成功构建了pET-30A-S1质粒,重组蛋白得到了表达且具有良好的反应原性,能够被兔PEDV多抗血清识别.本研究为进一步建立ELISA检测方法和亚单位疫苗的研制奠定了物质基础.
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