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  • 【期刊】 miR-20a海绵体构建及在白血病细胞株Jurkat中的表达

    刊名:中国实验血液学杂志 作者:吴顺泉 ; 徐珍珍 ; 林君 ; 战榕 关键词:miR-20a ; miRNA海绵 ; Jurkat细胞 机构:福建省血液病研究所 ; 福建省血液病研究所 ; 福建省血液病学重点实验室 ; 福建医科大学附属协和医院 年份:2012
    摘要:本研究构建miR-20a基因的miRNA海绵载体,建立Jurkat-S稳定细胞株,为进一步研究的miR-20a功能及应用干扰技术治疗奠定基础。设计、合成1对含有2个重复针对miR-20a成熟序列第9-12碱基错配的序列,并带有酶切位点,退火后连接到pCDNA3.0-L表达载体上;载体双酶切后再与退火产物连接,重复4次后进行酶切及荧光素酶活性鉴定;亚克隆到慢病毒表达载体,与psPAX2、PMD2G共转染HEK 293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染Jurkat细胞,建立稳定细胞株;应用实时PCR和Western blot技术分别检测Jurkat-S稳定细胞中P21及E2F1 mRNA和蛋白的表达,并与对照组进行比较。结果表明,成功构建了针对miR-20a基因的海绵载体,病毒滴度为5×107TU/ml;建立了稳定转染的Jurkat-S细胞株。有效干扰验证显示,miR-20a海绵能明显上调P21及E2F1的mRNA及蛋白表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建miR-20a基因的miRNA海绵载体,建立稳定干扰miR-20a表达的Jurkat-S细胞株。
  • 【会议】 基于低影响开发的山地住区海绵体构建策略研究

    摘要:山地城镇复杂地貌增加了径流流量、流速、水质以及就地消纳和利用的难度,是当前山地城市海绵体建构的亟待突破的问题,而住区作为其中重要的局域集水单元,其海绵体系的建构对山地城市具有重要的意义。基于重庆市悦来新城海绵住区设计实践,梳理出LID设施立地条件困难,汇水单元破碎化、连接度弱等山地海绵住区建设问题,提出局域层级式雨景单元系统的建构策略。并以首地·江山赋为例,构建2种典型的海绵空间建设类型:行列式布局下小而分散、散点式布局下大而集中的适宜性雨景单元系统。以期促进对山地住区降雨径流过程管控策略的优化,为其低影响开发建设提供理论与实践经验。
  • 【期刊】 微小RNA-221/222海绵体载体的构建及验证

    刊名:中华口腔医学研究杂志(电子版) 作者:周李杰 ; 赵玮 ; 江方方 ; 刘子锋 ; 欧阳颖 ; 余东升 关键词:微小RNA ; 海绵体载体 ; 第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因 ; ; 鳞状细胞 机构:中山大学光华口腔医学院 ; 中山大学光华口腔医学院 ; 附属口腔医院 年份:2015
    摘要:目的构建微小RNA(mi R)-221/222海绵体载体并初步探讨其在口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中的作用。方法利用mi RNA海绵体技术设计合成含3个has-mi R-221和3个hasmi R-222反义序列的DNA片段,经酶切连入p DC316-m CMV-EGFP质粒载体,合成mi R-221/222海绵体载体。将mi R-221/222海绵体载体转染入OSCC细胞系UM1,检测转染效率,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测mi R-221和mi R-222表达水平,Western blot检测转染后PTEN蛋白表达水平,Transwell实验检测细胞的侵袭能力。结果成功构建mi R-221/222海绵体载体,测序验证与设计序列完全一致;UM1各组细胞转染效率均在70%以上;实时荧光定量PCR显示,mi R-221/222海绵体载体组mi R-221和mi R-222表达水平较p DC316质粒组和UM1细胞组明显降低(t1=111.69,P1=0.001;t2=6.98,P2=0.002;t3=236.55,P3=0.001;t4=22.06,P4=0.001);Western blot显示,海绵体转染组较对照组PTEN蛋白水平表达明显升高;Transwell实验显示,海绵体转染组细胞侵袭能力较对照组减弱。结论实验成功构建了mi R-221/222海绵体载体,并初步验证其对OSCC细胞侵袭性的抑制作用,为后续mi R-221/222的功能研究奠定基础。
  • 【期刊】 胶原海绵支架体外构建组织工程膀胱黏膜

    刊名:中国组织工程研究 作者:张明 ; 徐明曦 ; 吴稼晟 ; 李伟 ; 孙康 ; 王忠 ; 周哲 ; 卢慕峻 关键词:膀胱黏膜 ; 胶原 ; 尿路上皮细胞 ; 组织工程 ; 支架材料 机构:上海交通大学医学院附属第九人民医院泌尿外科 ; 上海交通大学医学院附属第九人民医院泌尿外科 ; 上海交通大学材料科学与工程学院金属基复合材料国家重点实验室 年份:2012
    摘要:背景:组织工程膀胱黏膜层的构建在组织工程膀胱修复中占有重要的地位,但目前并没有最合理的构建方法。目的:探讨胶原海绵支架复合猪膀胱尿路上皮细胞体外构建膀胱黏膜结构的可行性。方法:刮取猪膀胱黏膜层后用酶消化方式进行猪膀胱尿路上皮细胞原代培养,并进行尿路上皮细胞标志物免疫荧光和RT-PCR鉴定。制备疏松多孔的胶原海绵支架材料,将第3代尿路上皮细胞接种在胶原海绵支架上,体外培养4~8d后观察尿路上皮细胞和胶原海绵材料的复合情况。结果与结论:原代培养的猪膀胱尿路上皮细胞呈"多角形"、"铺路石"样,以克隆团形式生长。免疫荧光鉴定AE1/AE3阳性,RT-RCR检测uroplakin-ⅠA、uroplakin-Ⅱ阳性。胶原海绵复合尿路上皮细胞体外培养4~8d后,细胞在胶原海绵支架上生长良好,覆盖胶原材料的表面并长入材料内部,保持了尿路上皮细胞的特性。体外培养6d时,尿路上皮细胞与胶原支架复合效果最好,同时细胞数量也最多。结果初步表明了胶原海绵复合膀胱尿路上皮细胞可以构建组织工程膀胱黏膜,且体外培养6d为最佳时间点。
  • 【期刊】 山地城市海绵型绿地立体构建途径

    刊名:山地学报 作者:刘骏 ; 何颖 关键词:山地城市 ; 绿地系统 ; 海绵型绿地 ; 低影响开发 年份:2018
    摘要:随着海绵城市建设理念的提出以及试点城市建设的开展,针对特殊类型海绵城市建设的研究越来越受到重视。本文以山地城市为研究对象,在梳理其降雨径流过程特征的基础上,分析了山地城市在雨洪管理方面所存在的问题,阐述了基于降雨径流过程的山地城市山、水、城、绿地之间的关系,总结了山地城市四类海绵型绿地(山顶绿地、斜坡绿地、平台式绿地和沟谷绿地)的特征及其在雨洪管理方面的作用,依据降雨径流"产流-汇流"的过程,结合"源头-过程-终端"的不同环节,提出山地城市海绵型绿地立体构建的途径,以此提升山地城市绿地系统的雨洪调蓄功能。
  • 【期刊】 山地城市海绵型绿地立体构建途径

    刊名:山地学报 作者:刘骏 ; 何颖 关键词:山地城市 ; 绿地系统 ; 海绵型绿地 ; 低影响开发 年份:2018
    摘要:随着海绵城市建设理念的提出以及试点城市建设的开展,针对特殊类型海绵城市建设的研究越来越受到重视。本文以山地城市为研究对象,在梳理其降雨径流过程特征的基础上,分析了山地城市在雨洪管理方面所存在的问题,阐述了基于降雨径流过程的山地城市山、水、城、绿地之间的关系,总结了山地城市四类海绵型绿地(山顶绿地、斜坡绿地、平台式绿地和沟谷绿地)的特征及其在雨洪管理方面的作用,依据降雨径流“产流-汇流”的过程,结合“源头-过程-终端”的不同环节,提出山地城市海绵型绿地立体构建的途径,以此提升山地城市绿地系统的雨洪调蓄功能。
  • 【期刊】 ES细胞源表皮样干细胞与胶原海绵体构建组织工程化皮肤

    刊名:中山大学学报(医学科学版) 作者:程树军 ; 黄锦桃 ; 李海标 关键词:表皮样干细胞 ; 组织工程 ; 胶原 机构:中山大学基础医学院组胚教研室 ; 中山大学基础医学院组胚教研室 ; 中山大学基础医学院组胚教研室 ; 中山大学基础医学院组胚教研室 年份:2006
    摘要:目的探讨以ES细胞源表皮样干细胞构建组织工程皮肤的方法,为构建新的组织工程皮肤奠定基础。方法先把成纤维细胞放置于胶原海绵真皮支架内,体外培养2d,再放置ES细胞源表皮样干细胞,体外培养3d,观察其形态和进行免疫组化检测。结果成纤维细胞与ES细胞源表皮样干细胞均在真皮支架内黏附,免疫组化表明ES细胞源表皮样干细胞仍呈β1整合素强阳性和CK15、CK19阳性。结论结果提示ES细胞源表皮样干细胞在体外构建的组织工程化皮肤内仍维持未分化状态。
  • 【期刊】 胶原海绵为载体构建大鼠羊膜上皮细胞复合体的实验研究

    刊名:中国美容医学 作者:王颖倩 ; 王德伟 ; 许家军 ; 李玲巧 ; 周宏 关键词:大鼠 ; 羊膜上皮细胞 ; 胶原海绵支架 ; 体外培养 机构:苏州大学附属第三医院烧伤整形科 ; 苏州大学附属第三医院烧伤整形科 ; 第二军医大学解剖学教研室 年份:2013
    摘要:目的:大鼠羊膜上皮细胞(AECs)体外培养并种植于胶原海绵形成细胞支架复合体后,探讨细胞在支架上分别于体内及体外时的生长情况。方法:取第三代AECs细胞种植于胶原海绵支架。光镜下及用荧光标记法观察细胞种植前后的增殖情况;ELISA法检测细胞支架上清液中VEGF、bFGF、TGFβ的含量。并通过荧光标记示踪法观察细胞支架植于体内后细胞的存活情况。结果:AECs在胶原海绵支架上生长情况良好,细胞支架上清液中VEGF、bFGF、TGFβ的含量随时间增长呈不断上升趋势,将细胞支架移植于体内后经过观察发现细胞仍存活良好。结论:AECs在胶原海绵支架上及体内移植后生长情况良好,这为利用AECs胶原海绵支架复合体进行细胞治疗奠定了实验基础。
  • 【期刊】 明胶海绵支架体内构建组织工程化颌下腺的研究

    刊名:临床口腔医学杂志 作者:朱耀旻 ; 王洋 ; 周青 ; 王玉新 ; 郑苍尚 关键词:组织工程 ; 颌下腺细胞 ; 明胶海绵支架 ; 细胞培养 机构:深圳市第二人民医院口腔科 ; 深圳市第二人民医院口腔科 ; 深圳市第二人民医院神经内科 ; 中国医科大学口腔医学院口腔外科 年份:2010
    摘要:目的:研究采用组织工程技术通过颌下腺细胞与明胶海绵复合物的体内移植,探讨在同种异体动物体内构建具有生命活力的组织工程化颌下腺的可行性。方法:选用Wistar大鼠18只,分三组。A组:明胶海绵材料与鼠颌下腺细胞复合培养物;B组:单纯明胶海绵材料;C组:空白切开缝合对照。材料植入大鼠背部,术后3、7和15 d分期观察植入物的大体形态、组织学和超微结构,BrdU标记表达,及免疫排斥反应变化。结果:A组植入体内后颌下腺细胞在材料生长,形成的组织表面白色且有光泽、致密,组织学可见材料排列较为规则,15 d细胞仍成活并大量增殖,BrdU表达为阳性;B组植入体内7 d后材料逐渐变细,15 d后材料被逐渐降解吸收出现中断;A组分别于3、7、15 d进行扫描电镜观察可见颌下腺细胞数目逐渐增多,黏附在材料表面上生长,伸出突起,并可见明显的细胞分裂增殖,细胞形成功能性团块;A、B两组与C组相比3、5、7 d时白细胞数量增多明显,但逐步降低,第15天三组白细胞数量趋于一致。三组淋巴细胞数量变化不大,无显著性差异。结论:同种异体颌下腺细胞与明胶海绵材料复合构建的组织工程颌下腺,植入免疫功能正常的动物体内,细胞具有生命力,能够在材料上黏附生长、增殖,免疫反应随时间增加逐渐趋于正常。
  • 【会议】 高校校园海绵化更新体系构建——以西南大学为例

    作者:陈俊熹;徐煜辉; 关键词:校园更新;;海绵校园;;LID;;海绵城市;;体系 机构:重庆大学建筑城规学院; ; 重庆大学建筑城规学院; 年份:2018
    摘要:高校的海绵化更新在实践中多由海绵城市中的LID设施拼凑而成,各处雷同且缺乏系统性。在对高校海绵化更新案例分析的基础上,针对其更新过程中存在的景观缺乏特色及设施杂乱无序等一系列问题,结合西南大学校园更新的案例,构建了明确功能分区、完善校园水系统、组合使用LID设施的"面—线—点"多层级更新体系,并提出了校园海绵化更新的策略。
  • 【期刊】 海绵城市控制指标体系构建探讨

    刊名:现代园艺 作者:李颜 关键词:海绵城市 ; 指标体系 ; 构建策略 机构:北京建筑大学 ; 北京建筑大学 年份:2019
    摘要:海绵体对于构建海绵城市有着积极作用,良好的海绵体系不仅能够为相关人员提供参考依据,使其有着清晰的发展方向,还能推动海绵城市的发展,因此,相关人员要高度重视海绵体,构建合理的指标体系,从而提高对海绵体的评定。
  • 【期刊】 海绵城市控制指标体系构建探讨

    刊名:规划师 作者:王诒建 关键词:海绵城市 ; 控规 ; 控制指标体系 机构:邢台市规划设计研究院 ; 邢台市规划设计研究院 年份:2016
    摘要:海绵城市的建设是今后我国城市生态文明建设的重要内容。文章针对现行控规编制中缺乏有关海绵城市控制要求的问题,将海绵城市的规划总目标分解为具体的控制要求,与控规指标体系进行衔接,构建海绵城市控制指标体系,并引入单位面积雨水控制容积、透水铺装率、下沉式绿地率和绿色屋顶率等指标,使海绵城市的建设更具可操作性。
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