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  • 【专利】 采用有机溶剂检测及评定丝绵是否增重的方法

    摘要:本发明涉及丝绵检测技术领域,尤其是一种采用有机溶剂检测及评定丝绵是否增重的方法,用有机溶剂把非水溶性增重剂从已知重量的干燥丝绵中溶解去除,收集经有机溶剂溶解作用后的丝绵,清洗、烘干后称重,并计算得到丝绵的失重率,按照失重率结果对丝绵是否使用增重剂进行评定。本发明所得到的一种采用有机溶剂检测及评定丝绵是否增重的方法,操纵简单方便,能快速的对丝绵上是否使用增重剂进行检测和评定,且结果准确,稳定性高。
  • 【专利】 一种罗氏沼虾螺原体可视化快速检测试剂盒及方法

    作者:沈锦玉 ; 潘晓艺 ; 蔺凌云 ; 徐洋 ; 袁雪梅 ; 姚嘉赟 ; 尹文林 年份:2017
    摘要:本发明公开了一种罗氏沼虾螺原体可视化快速检测试剂盒及方法,其中,罗氏沼虾螺原体可视化快速检测试剂盒包括螺原体DNA提取试剂和反应试剂,所述的反应试剂中含有用于检测罗氏沼虾螺原体扩增用核酸引物组,该引物组包含引物MrSpi‑P1、引物MrSpi‑B1、引物MrSpi‑P2、引物MrSpi‑B2、引物MrSpi‑P3和引物MrSpi‑B1;本发明的快速诊断试剂盒建立了一套经过优化的快速扩增反应体系,不但使得罗氏沼虾螺原体定性检测更加简便快速、特异性高、灵敏度高,而且该试剂盒可用于现场检测,具有很高的科研和经济价值。
  • 【专利】 一种高通量快速筛选罗氏沼虾免疫增强剂的方法

    作者:沈锦玉 ; 林锋 ; 刘莉 ; 曹铮 ; 郝贵杰 ; 盛鹏程 年份:2014
    摘要:本发明公开了一种高通量快速筛选罗氏沼虾免疫增强剂的方法。本发明包括待筛选免疫增强剂的处理、罗氏沼虾血淋巴细胞的采集与培养以及罗氏沼虾非特异性免疫指标的检测与分析三大步骤。本发明能够在体外快速、高通量的进行罗氏沼虾免疫增强剂的筛选。
  • 【会议】 硫酸阿米卡星在鳗鲡体内的药动学和残留研究

    作者:沈锦玉 ; 尹文林 ; 何平 ; 姚嘉赟 ; 徐洋 ; 郝贵杰 ; 潘晓艺 关键词:硫酸阿米卡星 ; 鳗鲡 ; 药代动力学 ; 残留 ; 柱前衍生 ; 固相萃取 机构:浙江省淡水水产研究所 ; 浙江省淡水水产研究所 ; 浙江省三门县食品检验检测中心 年份:2014
    摘要:[目的]研究硫酸阿米卡星在鳗鲡体内的药物代谢动力学及其在组织中的残留。[方法]利用高氯酸提取、固相萃取净化组织,2,4,6-三硝基苯磺酸、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、三氟乙酸柱前衍生后,高效液相紫外检测法测定了硫酸阿米卡星在鳗鲡体内药代动力学和残留。色谱条件为流动相为:45%0.02M磷酸二氢钾:41%乙腈:14%甲醇,50%氢氧化钾溶液调节p H为7.7;流速:1.5 ml/min;检测波长为340nm。[结果]利用衍生法所得药物在0.05-50μg/ml浓度范围内线性关系良好(R=0.9995),最低检测限为0.05μg/ml(μg/g)。血液和肌肉中的平均回收率分别为75.9±2.9%和76.9±4.6%。鳗鲡在(26±1)℃时,以50mg/kg单剂量肌肉注射给药物后,鳗鲡血液中的药-时浓度符合一级吸收二室模型,其主要的药动学参数为:达峰时间(Tpeak)0.597h,分布半衰期(T1/2α)3.52h,表明硫酸阿米卡星在鳗鲡体内吸收分布迅速。峰浓度(Cmax)为22.229μg/ml,消除半衰期(T1/2β)为46.945h,推测该药物可能残留时间比较长。鳗鲡在26±1℃时,50mg/kg单剂量肌肉注射硫酸阿米卡星后,5d后在肌肉组织中未检出,19d后血液中未检出。[结论]肌肉注射阿米卡星后,停药期为475-513度日。
  • 【专利】 一种中华鳖动脉炎病毒快速检测试剂盒及其检测方法

    作者:沈锦玉 ; 潘晓艺 ; 蔺凌云 ; 袁雪梅 ; 徐洋 ; 姚嘉赟 ; 尹文林 年份:2016
    摘要:本发明公开了一种中华鳖动脉炎病毒快速检测试剂盒及其检测方法,其中,中华鳖动脉炎病毒快速检测试剂盒包括病毒RNA提取试剂和反应试剂,所述的反应试剂中含有用于检测中华鳖动脉炎病毒扩增用核酸引物组,该引物组包含引物TSAV?F3、引物TSAV?B3、引物TSAV?FIP和引物TSAV?BIP;本发明的快速诊断试剂盒建立了一套经过优化的环介导等温扩增反应体系,不但使得中华鳖动脉炎病毒定性检测更加简便快速、特异性高、灵敏度高,而且该试剂盒是检测中华鳖动脉炎病毒的第一个试剂盒,填补了中华鳖动脉炎病毒无检测方法的缺口,具有很高的科研和经济价值。
  • 【专利】 大黄酸在防治水产动物水霉病中的应用

    作者:沈锦玉 ; 姚嘉赟 ; 蔺凌云 ; 尹文林 ; 袁雪梅 ; 徐洋 ; 潘晓艺 ; 郝贵杰 年份:2015
    摘要:大黄酸在防治水产动物水霉病中的应用。本发明公开了一种防治水产动物水霉病的水霉防治剂,它是由下列重量百分比的原料组成:大黄酸5%~25%,表面活性剂5%~10%,溶解剂10~20%,其余为溶剂。该防治剂按以下步骤进行:1)称取大黄酸、表面活性剂、溶解剂、溶剂各原料,备用;2)将大黄酸和溶解剂二甲基亚砜或N,N-二甲基甲酰胺混合搅拌至完全溶解;3)将表面活性剂、溶剂加入步骤2)所得的混合溶液中搅拌均匀,即得水霉防治剂。本发明采用大黄酸,可以杀灭水霉菌,起到治本的效果;毒性小,对水产动物无毒害、残留少;防治剂的制备简单、使用方便、药效快、效果明显,生产成本低。
  • 【专利】 一种舒伯特气单胞菌快速检测试剂盒及其检测方法

    作者:沈锦玉 ; 潘晓艺 ; 尹文林 ; 郝贵杰 ; 姚嘉赟 ; 徐洋 ; 蔺凌云 ; 袁雪梅 年份:2013
    摘要:一种舒伯特气单胞菌快速检测试剂盒,组成:(1)DNA提取试剂:5-15mMTris、0.5-1.5mM EDTA的TE缓冲液;蛋白酶K,浓度15-20mg/mL;100%的氯仿;100%的异丙醇;乙醇,浓度70%;双蒸水;(2)PCR反应试剂,每个PCR反应管中含有10×PCR反应缓冲液2.5μL,浓度为10μM的dNTPs0.5μL,浓度为5U/μL的Taq DNA聚合酶0.3μL,10μM的特异性寡核苷酸引物A0.5μL,10μM的特异性寡核苷酸引物B0.5μL,灭菌去离子水19.2μL,引物A:5’-CAGCGAGGAGGAAAGGTTGGTGGT-3’,引物B:5’-AAGCCACGCCTCAAGGGCACAA-3’。本发明用于检测舒伯特气单胞菌。
  • 【专利】 一种生物絮团的培养方法及水产养殖方法

    作者:沈锦玉 ; 王超 ; 徐洋 ; 蔺凌云 ; 尹文林 ; 姚嘉赟 ; 潘晓艺 ; 袁雪梅 年份:2016
    摘要:本发明涉及一种生物絮团培养方法及水产养殖方法,其中的生物絮团培养方法包括:向水体中添加有机碳源,有机碳源的添加量满足水体中的C/N比为15~17:1;向水体中加入地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌及干酪乳杆菌,所述地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌及干酪乳杆菌的加入总量满足每ml水体中加入0.8×105~1.2×105cfu;向水体中曝气,维持水体中的溶解氧在6mg/L以上。其通过在水体中加入有益菌,并通过调整水体中有机碳源的添加量,保持水体中一定的C/N比,可有效促进水体内有益菌的大量繁殖、加快生物絮团的形成,从而获得大粒径生物絮团。
  • 【期刊】 黄颡鱼免疫球蛋白单克隆抗体的制备与特性

    刊名:江苏农业科学 作者:沈锦玉 ; 徐洋 ; 蔺凌云 ; 尹文林 ; 姚嘉赟 ; 潘晓艺 ; 袁雪梅 关键词:黄颡鱼 ; 免疫球蛋白 ; 单克隆抗体 年份:2018
    摘要:采用饱和硫酸铵(SAS)盐析法结合Protein A亲和柱层析法提取了黄颡鱼血清免疫球蛋白,经SDS-PAGE测定该纯化蛋白重链和轻链的分子量分别约为73 ku和30 ku。应用杂交瘤单克隆抗体技术获得2株抗黄颡鱼免疫球蛋白的单抗杂交瘤细胞,分别命名为B10-C3和F6-F2,并对这2株单抗的特性进行分析。2株单抗的亚级份测定均为IgG2a;腹水抗体效价为1∶(7.29×10~5);2株单抗具有Western-Blot反应特性,能识别黄颡鱼免疫球蛋白的重链;单抗F6-F2对纯化的黄颡鱼免疫球蛋白的检测灵敏度为20 ng,单抗B10-C3对纯化的黄颡鱼免疫球蛋白的检测灵敏度为39 ng;2株单抗都与黄颡鱼免疫球蛋白发生特异性结合,而与鲇鱼、鳗鲡、鲫鱼、草鱼、鳊鱼、鲈鱼、鳜鱼和白鱼等血清免疫球蛋白无交叉反应。上述结果表明,B10-C3和F6-F2这2株单抗具有高度灵敏和特异等特点,可用于黄颡鱼病原早期诊断和免疫应答水平监测,同时揭示了同目不同属的鲇鱼和黄颡鱼血清Ig之间的相似度较低。
  • 【期刊】 淡水鱼虾细菌病诊断与防控技术研究进展

    刊名:中国动物检疫 作者:沈锦玉 ; 蔺凌云 ; 潘晓艺 ; 袁雪梅 ; 姚嘉赟 ; 徐洋 ; 尹文林 关键词:细菌性疾病 ; ; ; 诊断技术 ; 防控技术 机构:浙江省淡水水产研究所浙江省鱼类营养与健康重点实验室 ; 浙江省淡水水产研究所浙江省鱼类营养与健康重点实验室 年份:2018
    摘要:本文概述了淡水鱼虾常见的细菌性疾病,包括细菌性败血症、细菌性肠炎、细菌性烂鳃、链球菌病、迟缓爱德华氏菌病、鮰类肠败血症、诺卡氏菌病、急性肝胰腺坏死病和螺原体病等,并对近年来国内外主要淡水养殖细菌性病害检测方法的研究情况进行综述,包括基于病原菌生理生化特征的检测方法、基于分子生物学技术的检测方法(如常规定性PCR检测方法、实时定量PCR技术、环介导等温扩增技术、16S r RNA检测技术、核酸探针杂交法和基因芯片技术等),以及基于免疫学相关技术的检测方法(如免疫酶技术、免疫荧光技术、胶体金免疫层析技术和抗体芯片技术等),提示在防控方面应该注重监测预警、免疫、药物、生态和综合防控等技术。本文为淡水养殖细菌性病害的诊断、检测方法的标准化及推动相应检测产品的商品化提供了参考。
  • 【期刊】 泥鳅致病性维氏气单胞菌的分离与鉴定

    刊名:浙江农业学报 作者:沈锦玉 ; 袁雪梅 ; 姚嘉赟 ; 蔺凌云 ; 潘晓艺 ; 徐洋 ; 尹文林 关键词:泥鳅 ; 致病性 ; 维氏气单胞菌 ; 药敏试验 机构:农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省鱼类健康与营养重点实验室浙江省淡水水产研究所 ; 农业部淡水渔业健康养殖重点实验室浙江省鱼类健康与营养重点实验室浙江省淡水水产研究所 年份:2018
    摘要:从患病的泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)肝脏中分离得到优势菌NQ150728。对该菌进行了人工感染试验,并利用VITEK-2全自动微生物鉴定仪及16S rRNA、gyr B序列分析对纯培养细菌进行鉴定。此外,对分离的菌株进行药敏实验。结果显示,人工回感试验泥鳅患病症状同自然发病症状,证明其对泥鳅有致病性。VITEK-2全自动微生物鉴定仪鉴定菌株NQ150728为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。16S rRNA、gyr B基因序列测定结果及系统发育树的构建也表明其为维氏气单胞菌。药敏试验结果表明,该菌对头孢曲松、利福平、恩诺沙星、四环素、氯霉素、头孢哌酮、氧氟沙星、洛美沙星、克拉霉素、氟罗沙星、头孢噻吩、多西环素、新霉素、头孢他啶、大观霉素、环丙沙星、呋喃妥因、头孢拉定、米诺环素、头孢氨苄、氨曲南、左氟沙星、甲氧嘧啶、甲氧胺嘧啶等24种药物高度敏感。
  • 【期刊】 黄颡鱼免疫球蛋白单克隆抗体的制备与特性

    刊名:《江苏农业科学》 作者:沈锦玉 ; 徐洋 ; 蔺凌云 ; 尹文林 ; 姚嘉赟 ; 潘晓艺 ; 袁雪梅 关键词:黄颡鱼 ; 免疫球蛋白 ; 单克隆抗体 年份:2018
    摘要:采用饱和硫酸铵(SAS)盐析法结合Protein A亲和柱层析法提取了黄颡鱼血清免疫球蛋白,经SDS-PAGE测定该纯化蛋白重链和轻链的分子量分别约为73 ku和30 ku。应用杂交瘤单克隆抗体技术获得2株抗黄颡鱼免疫球蛋白的单抗杂交瘤细胞,分别命名为B10-C3和F6-F2,并对这2株单抗的特性进行分析。2株单抗的亚级份测定均为IgG2a;腹水抗体效价为1∶(7.29×10^5);2株单抗具有Western-Blot反应特性,能识别黄颡鱼免疫球蛋白的重链;单抗F6-F2对纯化的黄颡鱼免疫球蛋白的检测灵敏度为20 ng,单抗B10-C3对纯化的黄颡鱼免疫球蛋白的检测灵敏度为39 ng;2株单抗都与黄颡鱼免疫球蛋白发生特异性结合,而与鲇鱼、鳗鲡、鲫鱼、草鱼、鳊鱼、鲈鱼、鳜鱼和白鱼等血清免疫球蛋白无交叉反应。上述结果表明,B10-C3和F6-F2这2株单抗具有高度灵敏和特异等特点,可用于黄颡鱼病原早期诊断和免疫应答水平监测,同时揭示了同目不同属的鲇鱼和黄颡鱼血清Ig之间的相似度较低。
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