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  • 【期刊】 汪以真:生物饲料安全应当未雨绸缪

    摘要:汗以真指出,当前生物发酵饲料行业仍存在产品的稳定性不高、霉菌毒素的滋生严重、应用技术的基础研究缺乏和生物饲料发酵原料的国家标准或行业标准尚未制定等方面的问题。在菌种、原辅材料、发酵技术及发酵过程也存在潜在安全隐患。
  • 【期刊】 汪以真:生物饲料安全应当未雨绸缪

    摘要:汗以真指出,当前生物发酵饲料行业仍存在产品的稳定性不高、霉菌毒素的滋生严重、应用技术的基础研究缺乏和生物饲料发酵原料的国家标准或行业标准尚未制定等方面的问题。在菌种、原辅材料、发酵技术及发酵过程也存在潜在安全隐患。
  • 【期刊】 汪以真:对饲用抗生素说"不"

    刊名:今日科技 作者:周海鹰 ; 钱昊 ; 闻正顺 年份:2017
    摘要:随着经济的发展,人们对餐桌食品安全要求越来越高,而食品生产加工链条环环相扣,处于上游的饲料首当其冲,这中间猪饲料中的"饲用抗生素"更是被人们关注和重视.限抗、替抗、禁抗……各种呼声源源不断,而且越炒越热. 然而,你又对饲用抗生素了解多少? 我国是全球饲用抗生素使用量很大的国家,在我国的畜禽养殖的大环境下,饲用抗生素的使用对预防疾病、提高生产性能、降低养殖成本发挥了巨大的作用,但同时也带来了细菌耐药性、动物产品药物残留和环境污染等系列问题.
  • 【会议】 脂肪细胞mRNAm6A甲基化水平调控及与脂肪沉积的关系

    作者:汪以真 ; 王新霞 ; 朱琳娜 ; 陈菁青 关键词:FTO ; mRNA m6A甲基化 ; 脂肪沉积 ; 超表达 ; 干扰 机构:浙江大学动物科学学院 ; 浙江大学动物科学学院 年份:2014
    摘要:肥胖相关基因(FTO)在小鼠中已经证明可以调控脂肪含量,但是对其作用机制并不清楚;同时有研究表明FTO是一种去甲基酶,尤其对于mRNA的N6-甲基腺苷具有特异性,因此本研究主要目的是研究FfO是否是通过对mRNA的m6A去甲基化实现其对脂肪沉积的调控。(实验结果)(1)超表达去甲基酶FTO基因显著降低了猪脂肪细胞mRNA m6A水平(P<0.05),提高了细胞内甘油三酯含量(P<0.05),并降低了培养基中的甘油含量,提高了成脂分化相关基因c/EBPβ(P<0.05)和PPARγ、脂肪酸从头合成相关基因FAS(P<0.05)和ACC的表达,同时降低了脂肪分解相关基因ATGL(P<0.05)、HSL(P<0.05)的表达。FTO shRNA慢病毒侵染猪脂肪细胞显著提高了细胞mRNA m6A甲基化水平(P<0.05),显著降低了细胞内的甘油三酯含量(P<0.05),极显著地提高了培养基中甘油含量(P<0.01),同时,FTO shRNA慢病毒侵染极显著降低了猪脂肪细胞中成脂分化相关成脂分化相关基因c/EBPβ(P<0.05)、PPARγ的表达(P<0.01),降低了脂肪酸从头合成相关基因FAS(P<0.05)、ACC(P<0.01)的表达,同时提高了脂肪分解相关基因ATGL(P<0.05)、HSL的表达。上述结果提示,作为一种RNA去甲基酶,FTO基因表达能够负调控猪脂肪细胞mRNA m6A甲基化水平,同时正调控脂肪沉积。(2)环亮氨酸处理显著抑制猪脂肪细胞mRNA m6A的甲基化,三甲基甘氨酸能显著提高猪脂肪细胞mRNA m6A甲基化水平,且均呈现剂量依赖效应。在对细胞脂肪沉积的影响方面:环亮氨酸极显著提高了猪脂肪细胞内甘油三酯含量(P<0.01),并显著降低了培养基中的甘油含量(P<0.05),促进了脂肪沉积;相反,三甲基甘氨酸显著降低猪脂肪细胞内甘油三酯含量(P<0.05),同时提高了培养基中的甘油含量,抑制脂肪沉积。在成脂代谢相关基因表达检测方面:环亮氨酸处理显著提高了成脂分化相关基因c/EBPβ、PPARγ的基因表达(P<0.05),提高了脂肪酸从头合成相关基因FAS、ACC(P<0.05)的表达,显著降低了脂肪分解相关基因ATGL(P<0.05)、HSL(P<0.01)的表达;与环亮氨酸相反,三甲基甘氨酸处理显著降低了成脂分化相关基因c/EBPβ(P<0.01)、PPARγ(P<0.05)的基因表达,有降低脂肪酸从头合成相关基因FAS、ACC基因表达的趋势,同时提高了脂肪分解相关基因ATGL、HSL(P<0.01)的基因表达。脂肪代谢相关基因表达结果与细胞内的脂肪沉积变化一致。上述结果提示,甲基化抑制剂和甲基供体能够通过调控mRNA m6A甲基化水平,进而影响脂肪沉积。本研究对于揭示FTO调控脂肪沉积的可能机制提供了积极的线索。
  • 【会议】 脂肪细胞mRNA m~6A甲基化水平调控及与脂肪沉积的关系

    作者:汪以真 ; 王新霞 ; 朱琳娜 ; 陈菁青 关键词:FTO ; mRNA m6A甲基化 ; 脂肪沉积 ; 超表达 ; 干扰 机构:浙江大学动物科学学院 ; 浙江大学动物科学学院 年份:2014
    摘要:肥胖相关基因(FTO)在小鼠中已经证明可以调控脂肪含量,但是对其作用机制并不清楚;同时有研究表明FTO是一种去甲基酶,尤其对于mRNA的N6-甲基腺苷具有特异性,因此本研究主要目的是研究FTO是否是通过对mRNA的m6A去甲基化实现其对脂肪沉积的调控。(实验结果)(1)超表达去甲基酶FTO基因显著降低了猪脂肪细胞mRNA m6A水平(P<0.05),提高了细胞内甘油三酵含量(P<0.05),并降低了培养基中的甘油含量,提高了成脂分化相关基因c/EBPβ(P<0.05)和PPARγ、脂肪酸从头合成相关基因FAS(P<0.05)和ACC的表达,同时降低了脂肪分解相关基因ATGL(P<0.05)、HSL(P<0.05)的表达。FTO shRNA慢病毒侵染猪脂肪细胞显著提高了细胞mRNA m6A甲基化水平(P<0.05),显著降低了细胞内的甘油三酯含量(P<0.05),极显著地提高了培养基中甘油含量(P<0.01),同时,FT()shRNA慢病毒侵染极显著降低了猪脂肪细胞中成脂分化相关成脂分化相关基因c/EBPβ(P<0.05)、PPARγ的表达(P<0.01),降低了脂肪酸从头合成相关基因FAS(P<0.05)、ACC(P<0.01)的表达,同时提高了脂肪分解相关基因ATGL(P<0.05)、HSL的表达。上述结果提示,作为一种RNA去甲基酶,FTO基因表达能够负调控猪脂肪细胞mRNA m6A甲基化水平,同时正调控脂肪沉积。(2)环亮氨酸处理显著抑制猪脂肪细胞mRNA m6A的甲基化,三甲基甘氨酸能显著提高猪脂肪细胞mRNA m6A甲基化水平,且均呈现剂量依赖效应。在对细胞脂肪沉积的影响方面:环亮氨酸极显著提高了猪脂肪细胞内甘油三酯含量(P<0.01),并显著降低了培养基中的甘油含量(P<0.05),促进了脂肪沉积;相反,三甲基甘氨酸显著降低猪脂肪细胞内甘油三酯含量(P<0.05),同时提高了培养基中的甘油含量,抑制脂肪沉积。在成脂代谢相关基因表达检测方面:环亮氨酸处理显著提高了成脂分化相关基因c/EBPβ、PPARγ的基因表达(P<0.05),提高了脂肪酸从头合成相关基因FAS、ACC(P<0.05)的表达,显著降低了脂肪分解相关基因ATGL(P<0.05)、HSL(P<0.01)的表达;与环亮氨酸相反,三甲基甘氨酸处理显著降低了成脂分化相关基因c/EBPβ(P<0.01)、PPARγ(P<0.05)的基因表达,有降低脂肪酸从头合成相关基因FAS、ACC基因表达的趋势,同时提高了脂肪分解相关基因ATGL、HSL(P<0.01)的基因表达。脂肪代谢相关基因表达结果与细胞内的脂肪沉积变化一致。上述结果提示,甲基化抑制剂和甲基供体能够通过调控mRNA m6A甲基化水平,进而影响脂肪沉积。本研究对于揭示FTO调控脂肪沉积的可能机制提供了积极的线索。
  • 【专利】 METTL3基因敲除的细胞系及其构建方法与干扰载体

    作者:汪以真 ; 宗鑫 ; 赵婧 年份:2018
    摘要:本发明公开了一种METTL3基因敲除的细胞系及其构建方法与干扰载体。METTL3基因敲除的细胞系,利用m6A甲基转移酶基因Mettl3在通过基因编辑方法获得耐受LPS刺激导致脂肪酸吸收障碍的猪肠道上皮细胞系。一种耐受LPS刺激导致脂肪酸吸收障碍的猪肠道上皮细胞系。一种针对猪源m6A甲基转移酶基因Mettl3的基因干扰载体。本发明公开了Mettl3基因的一种新功能,参与调控肠道上皮细胞脂肪酸吸收转运,并提供了通过基因编辑手段改善LPS刺激导致的脂肪酸吸收障碍的方法。本发明不仅为研究Mettl3在脂肪酸吸收过程中的作用奠定基础,还利用基因编辑的方法改善了LPS刺激导致的脂肪酸吸收障碍。
  • 【期刊】 提高母猪繁殖性能的关键营养技术研究与应用

    刊名:中国畜牧杂志 作者:汪以真 ; 蒋宗勇 ; 陈代文 ; 徐子伟 ; 李德发 ; 单安山 ; 吴志君 ; 高开国 ; 王丽 ; 杨雪芬 关键词:国家生猪产业技术体系 ; 母猪 ; 繁殖性能 ; 营养技术 机构:广东省农业科学院动物科学研究所 ; 广东省农业科学院动物科学研究所 ; 四川农业大学动物营养研究所 ; 浙江省农业科学院 ; 中国农业大学动物科技学院 ; 浙江大学饲料科学研究所 ; 东北农业大学 年份:2015
    摘要:母猪繁殖性能是制约我国生猪产业发展的重要因素。本文围绕国家生猪产业技术体系"十二五"重点任务"提高母猪生产效率综合养殖技术研发与应用",概述了营养与饲料研究室和有关综合试验站在母猪后备、妊娠和泌乳阶段通过关键营养技术提高母猪繁殖性能的研究成果。
  • 【专利】 Enterobacter cloacae制备生物纳米单质硒的方法及应用

    作者:汪以真 ; 宋德广 ; 路则庆 ; 王凤芹 ; 程远之 ; 李笑笑 年份:2016
    摘要:本发明公开了Enterobacter?cloacae制备生物纳米单质硒的方法及应用。一种Enterobacter?cloacae制备生物纳米单质硒的方法,以亚硒酸盐为原料,以Enterobacter?cloacae?Z0206为发酵菌,发酵生产生物纳米单质硒;包括以下步骤:(1)活化的Enterobacter?cloacae?接种于发酵培养基中,加入亚硒酸钠溶液;(2)振荡培养;(3)收集发酵液处理得到生物纳米单质硒或者生物纳米单质硒-多糖复合物。本发明对于制备的各种参数和条件等做了优化,克服了产品潜在的缺陷和生产的不确定性,易于大规模的应用和生产。本发明制备的生物纳米单质硒或者复合物添加至猪饲料中替代亚硒酸钠,达到促进生长,改善抗氧化功能和免疫功能的效果。
  • 【期刊】 不同脂肪酸对体外培养猪肌管细胞脂质代谢的影响

    刊名:中国畜牧杂志 作者:汪以真 ; 席玲玲 ; 蔡旻 ; 王新霞 关键词:脂肪酸 ; 猪肌管细胞 ; 脂肪酸代谢 ; 脂肪沉积 机构:浙江大学饲料科学研究所 ; 浙江大学饲料科学研究所 ; 农业部动物营养与饲料重点开放实验室 ; 浙江省动物饲料与营养重点实验室 年份:2017
    摘要:本研究旨在探究日粮中不同饱和度脂肪酸棕榈酸、油酸、亚油酸在体外培养的猪肌管细胞内的代谢和沉积差异.体外分离培养猪骨骼肌卫星细胞后,诱导成肌分化,分别用100μmol/L普通和[1-14C]标记棕榈酸、油酸、亚油酸孵育猪肌管细胞24 h后,细胞甘油三酯测定、同位素示踪法跟踪3种脂肪酸的代谢过程,实时荧光定量和Western blot检测脂质代谢相关基因和蛋白的表达.结果表明:亚油酸组细胞中甘油三酯沉积量最高(P<0.05);同位素示踪法发现亚油酸在细胞中的氧化量和摄取量均最高(P<0.05),且在细胞甘油三酯中的沉积量最高(P<0.05);亚油酸能够显著提高肌管细胞脂肪酸摄取相关基因CD36、FABP4、FATP1,脂肪酸氧化相关基因CPT1、CytC、AMPKα2的表达(P<0.05),以及线粒体功能相关蛋白NRF1表达,并能够显著促进甘油三酯合成相关基因D GA T2、FAS的表达(P<0.05).相比于饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸,多不饱和脂肪酸亚油酸能够促进猪肌管细胞脂肪沉积,并能促进肌管细胞脂肪酸摄取、氧化、甘油三酯合成及促进相关基因表达.
  • 【专利】 小鼠脂联素基因超表达载体的构建及用途

    作者:汪以真 ; 向兰 ; 戚建华 ; 黄艳娜 年份:2011
    摘要:本发明提供一种小鼠脂联素基因超表达载体的构建方法,通过将RT-PCR技术克隆得到的小鼠脂联素片段并连接到pTarget哺乳动物表达载体系统上,转化大肠杆菌DH5α,构建得到pTarget/ADP超表达载体的重组质粒,构建好的pTarget/ADP超表达载体对ADP具有很好的增强基因表达量的效果。本发明开拓了目前研究动物脂肪代谢调控和基因功能研究的思路。所用的超表达载体方便易得,载体构建方法简单、可行,能够特异、高效地增强ADP基因的表达,可在制备治疗肥胖及代谢性综合症药物中的应用。或在建立动物模型进行ADP对糖和脂肪代谢的调节及肌纤维生长,发育的影响研究中的应用。
  • 【期刊】 菌酶协同发酵改善玉米-豆粕型饲料营养价值的研究

    刊名:中国粮油学报 作者:汪以真 ; 张煜 ; 石常友 ; 王成 ; 王凤芹 ; 路则庆 关键词:菌酶协同 ; 生物发酵 ; 玉米-豆粕型饲料 ; 抗营养因子 ; 仔猪生长性能 机构:浙江大学饲料科学研究所浙江省动物营养与饲料重点实验室农业部(华东)动物营养与饲料重点实验室 ; 浙江大学饲料科学研究所浙江省动物营养与饲料重点实验室农业部(华东)动物营养与饲料重点实验室 年份:2018
    摘要:本研究从枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和乳酸菌中筛选发酵菌株,在降解饲料抗营养因子的基础上,添加复合酶制剂,探究菌酶协同发酵对一种玉米-豆粕型饲料的营养价值改善效果和仔猪饲喂效果。结果表明:1)枯草芽孢杆菌BS12具有较强的抗原蛋白降解能力,粪肠球菌EF有较强的产酸能力;2)将芽孢杆菌BS12与乳酸菌EF按8:1比例混合,总菌量为1×10~7CFU/g,添加0.50%的复合酶制剂,37℃固态发酵72 h后,饲料中β-伴球蛋白、大豆球蛋白、中性洗涤纤维降解率分别到达80.74%(P〈0.05)、86.87%(P〈0.05)和39.36%(P〈0.05),乳酸含量达到122.57 mmol/kg,pH降低至5.0,饲料粗蛋白体外消化率从78.46%提高(P〈0.05)至85.77%,蛋氨酸、苯丙氨酸分别提高(P〈0.05)15.15%和17.60%,丙氨酸,半胱氨酸,色氨酸分别提高(P〈0.05)了10.11%,10.05%和9.89%;3)使用发酵饲料替代10%的基础日粮后,仔猪平均日增重和采食量得到提高。综上所述,菌酶协同发酵饲料,在提高饲料养分消化率和减少饲用抗生素使用等方面具有良好的应用前景。
  • 【会议】 抗菌肽PR-39对大肠杆菌感染动物的肠道屏障功能的影响

    作者:汪以真 ; 夏溪 ; 刘丹 ; 胡汪洋 关键词:抗菌肽 ; PR-39 ; 肠道屏障功能 ; 紧密连接蛋白 机构:浙江大学饲料科学研究所动物分子营养学教育部重点实验室 ; 浙江大学饲料科学研究所动物分子营养学教育部重点实验室 年份:2014
    摘要:病原性大肠杆菌容易导致仔猪肠道传染性疾病,且对常见有效的抗生素耐药性越来越高。抗菌肽因其广谱抗菌活性和不易产生耐药性等特点引起了人们的高度重视。本实验利用猪肠道上皮细胞模型和小鼠感染大肠杆菌模型研究猪源抗菌肽PR-39对大肠杆菌感染动物的肠道屏障功能的影响。(方法)本研究以极化的猪空肠上皮细胞系IPEC-J2为模型,利用细胞电阻值测定、细菌黏附数测定、实时荧光定量、Western-blot等方法,研究PR-39对大肠杆菌O157:H7感染肠道上皮细胞的影响;以O157:H7灌胃C57小鼠为模型,利用Ussing chamber、H&E染色观察、透射电镜观察、免疫荧光等方法,研究PR-39对大肠杆菌O157:H7感染小鼠肠道屏障的影响。(结果)体外实验结果表明,PR-39与上皮细胞作用24 h后,在洗去PR-39后再感染大肠杆菌或不洗去PR-39直接感染大肠杆菌的情况下,都能够显著缓解大肠杆菌导致的细胞通透性增加(P<0.05),显著减少细胞上黏附的大肠杆菌数量(P<0.05),并且对大肠杆菌感染所致的细胞紧密连接蛋白表达量下降有缓解作用。体内实验结果表明,腹腔注射PR-39能缓解大肠杆菌导致的小鼠体重下降,能够减少大肠杆菌对小鼠回肠及结肠形态的破坏,维持紧密连接结构形态正常,并且对大肠杆菌感染所致肠道紧密连接蛋白ZO-1和Occludin表达量下降有缓解作用。(结论)综上所述,PR-39对大肠杆菌感染所致的动物肠道屏障功能受损具有保护作用。本研究为研发新型抗菌免疫制剂,有效替代或减少抗生素作为饲料添加剂的使用、提高畜产品安全性提供了理论基础。