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  • 【论文】 细菌共培养对猪源粪肠球菌生物学特性的影响

    作者:武二丽 关键词:粪肠球菌N41 ; 生长特性 ; 毒力基因 ; 荧光定量PCR ; 生物膜 ; 黏附 机构:河南农业大学 ; 河南农业大学 年份:2016
    摘要:粪肠球菌是人和动物肠道的一种条件致病菌,但近年来粪肠球菌在医院内对人和动物感染日益增多。细菌与细菌以及细菌与病毒之间存在着较为常见的混合感染,混合感染过程中各微生物之间的相互作用和相互影响不清楚,尤其是肠球菌这种毒力较弱的细菌与其他微生物混合感染后的相互影响还不清楚。大肠杆菌O157:H7、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌与肠球菌一样也是人和动物肠道或皮肤常见的病原体,目前在粪肠球菌致病过程中这三种细菌对其影响尤其是在分子水平的影响仍不清楚。本研究通过在体外共培养条件将这三种细菌与粪肠球菌N41共培养后,观察其细菌生长曲线变化,以及N41相关毒力基因转录水平的变化,然后体外观察共培养后N41的生物膜形成能力、黏附、抗吞噬作用,为研究细菌间相互作用机制以及猪源粪肠球菌混合感染的预防和治疗打下良好的基础。生长特性影响通过对共培养条件下大肠杆菌O157:H7、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌对粪肠球菌N41分离株生长特性以及与单独培养时生长特性相比,各种细菌共培养后其生长特性均受到不同程度的影响。共培养后,这三种细菌的生长都受到粪肠球菌N41的不同程度的抑制作用。其中,大肠杆菌菌体峰浓度降低约30倍,沙门氏菌菌体峰浓度降低约110倍,而金黄色葡萄球菌菌体峰浓度降低约8倍。此外共培养后,大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌对粪肠球菌N41株具有较弱的抑制作用,而金黄色葡萄球菌和N41共培养后,N41菌体浓度上升967倍,可见金黄色葡萄球菌对N41有较强的促进作用。毒力基因转录水平影响依据生长曲线,分别提取对数中期(ML)、对数后期(LL)、稳定前期(EL)和稳定期(S)的总RNA,并根据GenBank上已发表的粪肠球菌V583菌株的基因序列设计26种毒力基因引物,进行SYBR Green I实时荧光定量PCR测定。结果显示,粪肠球菌N41与大肠杆菌O157:H7共培养时,在N41菌株26种毒力基因中,大肠杆菌O157:H7促进了ebpABC、fsrAB、gel E、ace、esp等13种毒力基因在四个不同生长时期的转录,而毒力基因CylR1、CylR2、psr、atn、efaA和AS在四个生长时期变化不明显。粪肠球菌N41与沙门氏菌共培养时,沙门氏菌促进了ebpA、ebpC、gelE、ace、esp、fsrA、psr等12种毒力基因在四个不同生长时期的转录,而毒力基因CylR1、Cyl R2、efaA和AS在四个生长时期变化不明显。粪肠球菌N41与金黄色葡萄球菌共培养时,金黄色葡萄球菌促进了ebpABC、fsrABC、gel E、ace、esp、cylL-L、cylL-S等22种毒力基因在四个不同生长时期的转录,毒力基因efaA和AS在四个生长时期变化不明显。此外分别与三种细菌共培养后,毒力基因SlyA和sprE在四个生长期中的转录量都处于下降趋势。由此表明,大肠杆菌O157:H7、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌整体都促进了粪肠球菌N41菌株多种毒力基因mRNA的转录水平。体外黏附、侵入抗吞噬影响体外观察共培养细菌的生物膜形成量,N41的黏附和抗吞噬作用。在生物被膜试验中,金黄色葡萄球菌与N41共培养后生物膜形成总量增加,差异显著。细菌黏附试验的比较结果显示,N41与沙门氏菌和金黄色葡萄球菌共培养后,黏附到猪肠上皮细胞的N41菌落总数都有明显变化,差异显著。在小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验中,N41与金黄色葡萄球菌共培养后,N41对小鼠腹腔巨噬细胞的抗吞噬作用有明显变化,差异显著。这说明与沙门氏菌共培养后,N41菌株的黏附能力增强了,而与金黄色葡萄球菌共培养后,N41菌株的黏附和抗吞噬能力都增强了。
  • 【期刊】 加强市场监管对农村市场体系建设的必要性

    刊名:商情 作者:武二丽 关键词:农村市场 ; 市场特点 ; 市场监管 机构:山西财经大学国贸学院 ; 山西财经大学国贸学院 年份:2013
    摘要:从农村市场的含义及特点入手,指出了农村市场在发展中所遇到的监管问题,分析了这些问题出现的原因,并根据这些原因给出了加大对农村市场监管力度的具体对策及建议.
  • 【期刊】 共培养沙门菌对粪肠球菌N41株生长特性及毒力基因的影响

    刊名:中国兽医学报 作者:武二丽 ; 和春昊 ; 金钺 ; 刘玲玲 ; 胡慧 ; 曹晗 ; 王亚宾 ; 陈丽颖 关键词:粪肠球菌N41 ; 沙门菌 ; 生长特性 ; 毒力基因 ; 荧光定量PCR 机构:河南农业大学牧医工程学院 ; 河南农业大学牧医工程学院 ; 河南农业大学牧医工程学院 ; 河南省动物性食品安全重点实验室 年份:2017
    摘要:为探讨共培养条件下沙门菌对粪肠球菌N41分离株生长特性及其不同生长时期26种毒力基因转录的影响,将N41菌株、沙门菌菌株单独/混合培养后,分别进行菌落计数并绘制生长曲线,观察其生长状况及影响,同时提取其对数中期、对数后期、稳定前期和稳定期的总RNA,SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法分析N41菌株26种毒力基因的转录情况.结果显示,共培养后沙门菌和N41生长均受到影响,其中,在N41菌体浓度降低约3.9倍,而沙门菌苗体浓度降低约110倍.在N41菌株26种毒力基因中,沙门菌促进了ebpA、ebpC、rnjB、ace、ebpR、psr等12种毒力基因在4个不同生长时期的转录,但同时也降低了毒力基因SlyA和sprE在4个生长期中转录水平;另外,除了CylL-S、CylL-L、efaA和AS在4个生长时期变化不明显外,其余的大部分毒力基因都在对数后期转录水平有明显上升,但在其他生长时期则表现不同.这说明,两菌共培养后,N41菌株明显抑制了沙门菌的生长,同时沙门菌也整体促进了N41菌株毒力基因的转录.本试验为研究细菌间相互作用机制以及肠球菌的致病机制奠定基础.
  • 【会议】 检测生鲜猪肉中大肠杆菌O157:H7和沙门氏菌的双重PCR方法建立与应用

    作者:武二丽 ; 张秀方 ; 刘肖 ; 张伟强 ; 胡慧 ; 邵刘云 ; 王亚宾 ; 陈丽颖 机构:河南农业大学牧医工程学院 ; 河南农业大学牧医工程学院 年份:2014
    摘要:引言几年来,食源性致病菌是食源性疾病的首要因素。其多数爆发案例是通过致病性细菌污染食品而引起的。其中,大肠杆菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)是两种重要的致病菌。猪肉作为我国消费量最大的肉类食品,也是大肠杆菌和沙门氏菌污染的高危畜产品,对其进行致病菌检测具有重要的食品卫生学意义。本研究以大肠杆菌O157:H7抗原rfbE基因和沙门氏菌侵袭蛋白invA基因为研究对
  • 【期刊】 双重PCR检测生鲜猪肉中大肠杆菌O157∶H7和沙门菌方法的建立与应用

    刊名:中国食品卫生杂志 作者:武二丽 ; 张秀方 ; 刘肖 ; 张伟强 ; 胡慧 ; 邵刘云 ; 王亚宾 ; 陈丽颖 关键词:大肠杆菌O157∶H7 ; 沙门菌 ; 生鲜猪肉 ; 双重PCR ; 食源性致病菌 ; 食品安全 机构:河南农业大学牧医工程学院 ; 河南农业大学牧医工程学院 年份:2015
    摘要:目的建立生鲜猪肉中大肠杆菌和沙门菌的双重PCR检测方法,并初步调查生鲜猪肉中大肠杆菌和沙门菌的污染情况。方法以大肠杆菌O157∶H7 rfb E基因和沙门菌inv A基因为靶基因设计引物。通过对单个基因PCR和多重基因PCR扩增进行特异性、敏感性试验以及优化反应体系,建立快速检测大肠杆菌和沙门菌的双重PCR法。在郑州市不同地区的综合性超市、冷鲜肉专卖店和农贸市场随机抽检144份生鲜猪肉样品,分别进行了PCR检测和常规微生物学检验。结果建立的双重PCR方法特异性好,抗干扰能力强,灵敏度可达到10 pg/μl。在144份样品中检测出大肠杆菌的样品数为10份,检出率为6.94%;检出沙门菌的样品数为13份,检出率为9.03%;大肠杆菌和沙门菌同时检出的有2份,占总样品的1.39%。结论初步建立了同步、简便、快速、灵敏地检测生鲜猪肉中大肠杆菌、沙门菌的双重PCR方法;生鲜猪肉中存在致病菌的污染问题,将威胁到食品安全和人体健康,不容忽视。
  • 【期刊】 聚焦长流水——“唐韵古城 美丽灵武”摄影采风第二季起航

    刊名:宁夏画报:生活版 作者:霍晓刚 ; 钟培源 ; 马力 ; 刘继军 ; 刘纲 关键词:灵武市 ; 文化旅游 ; 流水沟 ; 采风活动 ; 自然天成 ; 宁夏画报 ; 唐韵 ; 细雨霏霏 ; 采风团 ; 田园生活 年份:2016
    摘要:六月的灵武,万木葱茏、草长莺飞,由宁夏画报社与灵武市文化旅游广电局共同策划组织的"唐韵古城美丽灵武"摄影采风活动第二季再次启程。此次采风的目的地是灵武市著名的休闲度假景区——长流水生态旅游区。长流水生态旅游区地处毛乌素沙漠边缘,是自然天成的集旅游休闲、娱乐垂钓、沙漠越野、野营探险、野生动植物观赏、影视剧外景拍摄等为一体的绿色景区。景区因长流水沟而得名,流域内潺潺溪流,清澈甜美,叮咚作响,欢畅西去。探寻溪流源头,更显神奇。原来在沙漠深处方圆两公里内有三股清泉,分别从沙山脚下、细草根处、石头缝隙中渗滴而出,
  • 【期刊】 别样的感动——武警总医院千二科护士长陕海丽创新服务理念纪实

    摘要:武警总医院干二科护士长陕海丽,她以天使般的仁爱情怀,用以人为本的价值取向和服务追求,着力探索创新护理服务的新理念新模式,不断满足患者日益增长的健康需求,使满意服务步入了感动服务的崭新境地。
  • 【期刊】 宾川—丽江地区二叠纪玄武岩岩石地球化学特征及其成因

    刊名:地球科学与环境学报 作者:朱士飞 ; 秦勇 ; 钱壮志 ; 高艳青 关键词:宾川—丽江地区 ; 大陆溢流玄武岩 ; 岩石化学 ; 地幔柱 ; 构造背景 机构:中国矿业大学资源与地球科学学院 ; 中国矿业大学资源与地球科学学院 ; 中国矿业大学资源与地球科学学院 ; 长安大学地球科学与资源学院 ; 徐州空军学院机场工程系 年份:2008
    摘要:通过对云南省宾川—丽江地区岩石学和地球化学研究,系统阐述了玄武岩岩石地球化学及其岩浆活动特征。认为研究区玄武岩可划分为高镁、低镁和过渡3个系列火山岩,其岩石地球化学性质呈现递变性,富集轻稀土和大离子亲石元素,具有与洋岛玄武岩相似的地球化学特征,为板内拉张玄武岩。同时运用现代岩石成因理论探讨了玄武岩的地幔源区特征、岩浆过程及可能的形成机制。运用多个玄武岩大地构造环境判别图解,确定玄武岩形成于大陆拉张环境,与地幔柱活动有关。起源于地幔柱的岩浆与岩石圈相互作用,经历不同程度的壳源混染,形成系列玄武岩。
  • 【期刊】 论历史科学与历史文学——兼与何兆武、张丽艳二君商榷

    刊名:江西社会科学 作者:孙金玲 关键词:历史科学 ; 历史文学 ; 历史哲学 ; 两重性 机构:潍坊学院历史文化与旅游学院 ; 潍坊学院历史文化与旅游学院 年份:2006
    摘要:历史学具有近代意义上的科学属性,它既有普遍规律可循,又是可以实证的。历史学分为三个不同的层次,即实证史学、思辨史学、叙事史学,它具有科学性与艺术性、抽象思维与形象思维、科学价值与审美价值的两重性。历史学既是科学,又是文学。
  • 【期刊】 2011年7月第二届A90中国奇幻武侠新势力征文大赛第二季度混战华丽开启!

    刊名:今古传奇(奇幻版上半月版) 年份:2011
    摘要:A90赛题:英雄释题:问英雄,天下谁是英雄?奇幻Q4、Q5、Q6团,武侠A13、A14、A15团,六大天团正面交锋!谁将夺得第二赛季的王者桂冠?谁将问鼎英雄宝座?同一赛题,同台竞技。精彩战局,一触即发!一起期待吧,第二季度的天团之战!
  • 【期刊】 滇西丽江树底桥及宁蒗万马场二叠纪玄武岩地球化学特征及成因

    刊名:矿物岩石 作者:倪平泽 ; 肖龙 ; 何琦 ; 魏启荣 关键词:峨眉山玄武岩 ; 地球化学 ; 岩石成因 ; 地幔柱 ; 反演计算 ; 云南 机构:中国地质大学研究生院 ; 中国地质大学研究生院 ; 中国地质大学研究生院 ; 中国地质大学地球科学学院 ; 中国地质大学地球科学学院 年份:2007
    摘要:滇西丽江及宁蒗、永胜地区广泛分布二叠纪玄武岩,它们可能是峨眉山大火成岩省的一部分。通过对丽江树底桥及宁蒗万马场二叠纪玄武岩进行的地球化学系统采样研究,认为这些玄武岩富集大离子亲石元素及高场强元素,具有与洋岛玄武岩相似的地球化学特征。与典型的峨眉山玄武岩地球化学成分的对比研究认为其属于峨眉山高钛玄武岩,为峨眉山地幔柱活动的产物。利用稀土元素进行反演模拟,估算高钛玄武岩源区的成分及岩浆的演化趋势,模拟计算结果显示,丽江树底桥玄武岩可能来自于尖晶石二辉橄榄岩与石榴石二辉橄榄岩的过渡源区(尖晶石∶石榴石=65∶35~1∶1)2%~3%的部分熔融,并经历了以单斜辉石为主的分离结晶作用(5%~15%);万马场玄武岩来自于相似的源区(尖晶石∶石榴石=45∶55~1∶1)3%左右的部分熔融,分离结晶程度≤5%。
  • 【期刊】 云南省丽江—宾川地区二叠纪玄武岩地球化学特征及其构造背景研究

    刊名:矿物岩石 作者:朱士飞 ; 秦勇 ; 钱壮志 ; 高艳青 关键词:宾川—丽江 ; 大陆溢流玄武岩 ; 岩石地球化学 ; 地幔柱 ; 构造背景 机构:中国矿业大学资源与地球科学学院 ; 中国矿业大学资源与地球科学学院 ; 中国矿业大学资源与地球科学学院 ; 长安大学地球科学与国土资源学院 ; 徐州空军学院机场工程系 年份:2008
    摘要:在峨眉山大火成岩省中,宾川—丽江地区的溢流玄武岩厚度最大,发育较为完整。该区岩石w(SiO2)(36.72%~51.44%),微量元素中不相容元素如大离子亲石元素K,Rb,Cs,Ba,Th富集;高场强元素Ta,Nd,Hf,Zr以及LREE含量低。它们的岩石地球化学性质呈现递变性,富集轻稀土和大离子亲石元素,具有与洋岛玄武岩相似的地球化学特征,为板内拉张玄武岩。通过对其进行岩石学和地球化学研究,系统分析该区玄武岩岩石地球化学及其岩浆活动特征。认为研究区玄武岩可划分为3个系列:高镁(wMgO=12.3%~14.3%)、低镁(wMgO=2.48%~7.53%)和过渡系列(wMgO=10.4%~11.3%)火山岩。高镁系列玄武岩岩石接近原始岩浆的组成,岩浆源区可能为下地幔,形成深度大,源区地幔部分熔融比例小;低镁系列玄武岩受到较强的地壳混染作用的影响,显示出富集岩石圈地幔或地壳物质的参与,形成深度浅,熔融比例较大,可能有地壳物质混染;过渡系列介于前两者之间。根据玄武岩大地构造环境判别图解,确定玄武岩形成于大陆拉张环境,与地幔柱活动有关。
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