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  • 【论文】 类弹性蛋白融合止血肽RADA-16的止血性能研究

    作者:杨莎莎 关键词:止血 ; 类人弹性蛋白 ; 自组装多肽 ; 融合蛋白 ; RADA-16 机构:西北大学 ; 西北大学 年份:2018
    摘要:不可控出血是造成战伤死亡、意外死亡和外科手术死亡的重要原因,理想的止血材料对减少出血致死十分重要。自组装多肽RADA-16(RADARADARADARADA)是化学合成的一种小肽。1%的RADA-16溶液(w/v)接触出血创面后,迅速自组装成网状纳米纤维屏障,可在15s内终止成年仓鼠脑、脊髓、股动脉、肝等部位的创伤出血。已被美国麻省理工学院下属公司开发为止血产品。由于来源依赖合成,纯化困难,价格昂贵,目前仅用于脑外科手术,应用范围和受惠人群极大受限。解决该问题的关键在于降低RADA-16的生产成本。基因工程菌发酵是目前低成本获取药用蛋白的首选方法。但是,RADA-16相对而言分子量偏低,稳定性太差而难以获得理想的表达水平。因此提高RADA-16在宿主细胞中的稳定性是实现基因工程法生产RADA-16的关键,而将RADA-16与其他蛋白融合表达有利于提高其表达产物稳定性。类弹性蛋白是基于天然牛弹性蛋白序列中高频出现的短小重复序列VPGXG(X是Pro以外的任何一种氨基酸),利用过基因重组技术得到的一种多肽,具有天然弹性蛋白的部分活性,已被应用于细胞培养、组织修复、药物缓释和标签纯化蛋白。本研究拟利用基因工程技术将课题组已经克隆化的不同长度的类人弹性蛋白编码基因与RADA-16编码基因连接重组,构建类人弹性蛋白(hELPs)融合RADA-16原核表达载体并在大肠杆菌中诱导表达,筛选出能够高效、稳定过表达的融合蛋白hELPs-RADA-16的工程化大肠杆菌菌株并对其止血性能进行分析。研究获得以下结果(1)成功构建了三种原核表达载体pET28a(+)-h ELP36-RADA-16、pET28a(+)-h ELP60-RADA-16、pET28a(+)-h ELP96-RADA-16;(2)将上述三种质粒成功导入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并实现过表达,表达产物分别称为h ELP36R、h ELP60R、h ELP96R,灰度扫描分析、SDS-PAGE检测结果显示h ELP36R、h ELP60R、h ELP96R的表达量分别为16.35%,17.80%,21.57%且以可溶形式在BL21(DE3)表达和积累,Western-Blot分析结果显示过表达的蛋白为目的蛋白;(3)利用二轮相变可逆循环纯化3种融合蛋白,得到的h ELP36R、h ELP60R、h ELP96R蛋白纯度分别为:58.84%,73.73%,79.2%。镍填料进一步纯化发现h ELP36R在200mol/m L咪唑洗脱缓冲液时纯度较高94.72%,h ELP60R在300mol/m L咪唑洗脱缓冲液时纯度较高96.91%,发现h ELP96R在300mol/m L咪唑洗脱缓冲液时纯度较高96.37%但镍填料纯化对提高h ELP60R、h ELP96R纯度作用不大;(4)无菌蛋白包被96孔板进行细胞增殖和细胞迁移实验,实验结果显示三种融合蛋白在培养早期能够促进细胞增殖,但是培养72h后,与胶原蛋白和RADA-16阳性对照组相比,各处理组之间细胞的增殖能力没有显著性差异,培养24h时具有显著性细胞迁移能力(P<0.001),但是在培养36h,48h时没有表现出显著性差异;(5)以h ELP36R、h ELP60R、h ELP96R冻干蛋白膜片进行小鼠肝脏止血实验,阳性对照为吸附有浓度为1%的RADA-16纱布,鼠尾胶原蛋白,阴性对照不做任何处理。与阴性对照组相比,三种融合蛋白均有止血能力(P<0.001),h ELP36R的平均止血时间为27.21±1.84s,h ELP60R的平均止血时间为18.65±1.97s,h ELP36R和h ELP60R的止血时间均大于阳性对照组RADA纱布(14.44±1.33s)和胶原蛋白(21.23±1.84s)组,h ELP96R的止血时间(15.86±1.21s)介于胶原蛋白和RADA纱布之间。
  • 【期刊】 宫颈冷刀锥切术中2种止血方法的止血效果比较

    刊名:安徽医学 作者:沈伟[1] ; 赵卫东[1] ; 马杰[1] 关键词:止血 ; 宫颈冷刀锥切术 ; 电凝 ; 宫颈上皮内病变 机构:[1]安徽省肿瘤医院妇瘤科 ; [1]安徽省肿瘤医院妇瘤科 年份:2017
    摘要:目的比较电凝法和缝合法对宫颈冷刀锥切术(CKC)创面止血的效果。方法选择2014年1月1日至2016年1月1日安徽省肿瘤医院收治的151例宫颈高级别上皮内病变行CKC患者,根据止血方法分为电凝组(71例)和缝合组(80例),比较两组患者的止血效果。结果电凝组平均手术时间(32.75±7.86)min,术中出血量(18.12±5.65)mL,均优于缝合组,两组差异有统计学意义(P<0.05)。术后6个月,电凝组宫颈转化区可见率为64.79%,缝合组为38.75%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者的术后感染、出血、宫颈管粘连的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论CKC采取电凝止血,术中出血少、手术时间短、宫颈成形佳,值得临床推广。
  • 【期刊】 腔道止血器对大鼠肛管创面止血效果的实验研究

    刊名:实用临床护理学杂志 作者:吴晓艳 ; 邓波 ; 秦朗 ; 黄泽浩 ; 刘珉甬 ; 李俊 关键词:止血 ; 腔道止血器 ; 创伤 ; 大鼠 机构:西南医科大学附属医院 ; 西南医科大学附属医院 ; 西南医科大学护理学院 ; 西南医科大学护理医疗器械研发实验室 年份:2017
    摘要:目的比较三种止血材料对肛管创伤出血创面的止血效果。方法 21只大鼠,均分为三组,在距肛缘0.3 cm的肛管粘膜处制备一个0.3×0.2 cm出血模型,分别采用腔道止血器、明胶海绵与凡士林油纱止血。观察指标:(1)止血时间(每隔1分钟肉眼观察);(2)出血量(称止血材料及大鼠重量);(3)再次出血(3、15 min肉眼观察);(4)24 h存活及再出血;(5)病检:炎症反应。结果 (1)止血时间:腔道止血器优于凡士林油纱与明胶海绵(P=0.004);(2)出血量:腔道止血器优于凡士林油纱(P=0.006),与明胶海绵比较,差异无统计学意义(P=0.851);(3)再次出血:3分钟时腔道止血器优于凡士林油纱(P=0.008),与明胶海绵比较差异无统计学意义(P=0.851);三种止血材料15 min比较,差异无统计学意义;(4)24 h存活及再出血:三组实验动物均无死亡及再出血。(5)病检:炎症反应:腔道止血器较另外两组弱。结论腔道止血止血效果优于凡士林油纱、可吸收性明胶海绵。
  • 【期刊】 止血用于痔上粘膜环切术止血的临床疗效观察

    刊名:临床医药文献电子杂志 作者:黄茵 ; 刘贺 关键词:止血 ; 立止血 ; 痔上粘膜环切术 机构:广西南宁市第三人民医院 ; 广西南宁市第三人民医院 ; 广西壮族自治区人民医院 年份:2018
    摘要:目的 探讨立止血用于痔上粘膜环切术止血的疗效.方法 160例痔上粘膜环切术病人,术前30分钟使用立止血2 ku肌注.术中观察切口渗血情况、术后早期凝血情况,用药前后均作凝血功能和肝、肾功能检查.结果 本组病人使用立止血后吻合口仅有少量渗血,并能缩短术后30 min的出、凝血时间,未发现肝、肾功能损害.结论 立止血用于手术止血使用剂量小、药效快、作用强、安全性高,用于痔上粘膜环切术止血效果较好.
  • 【期刊】 腔道止血器对大鼠肛管创面止血效果的实验研究

    刊名:实用临床护理学电子杂志 作者:吴晓艳 ; 邓波 ; 秦朗 ; 黄泽浩 ; 刘珉甬 ; 李俊 关键词:止血 ; 腔道止血器 ; 创伤 ; 大鼠 机构:西南医科大学附属医院 ; 西南医科大学附属医院 ; 西南医科大学护理学院 ; 西南医科大学护理医疗器械研发实验室 年份:2017
    摘要:目的 比较三种止血材料对肛管创伤出血创面的止血效果.方法 21只大鼠,均分为三组,在距肛缘0.3 cm的肛管粘膜处制备一个0.3×0.2 cm出血模型,分别采用腔道止血器、明胶海绵与凡士林油纱止血.观察指标:①止血时间(每隔1分钟肉眼观察);②出血量(称止血材料及大鼠重量);③再次出血(3、15 min肉眼观察);④24 h存活及再出血;⑤病检:炎症反应.结果 ①止血时间:腔道止血器优于凡士林油纱与明胶海绵(P=0.004);②出血量:腔道止血器优于凡士林油纱(P=0.006),与明胶海绵比较,差异无统计学意义(P=0.851);③再次出血:3分钟时腔道止血器优于凡士林油纱(P=0.008),与明胶海绵比较差异无统计学意义(P=0.851);三种止血材料15 min比较,差异无统计学意义;④24 h存活及再出血:三组实验动物均无死亡及再出血.⑤病检:炎症反应:腔道止血器较另外两组弱.结论 腔道止血止血效果优于凡士林油纱、可吸收性明胶海绵.
  • 【期刊】 甲状腺腔镜手术中巧用硅胶管喷洒止血止血

    刊名:局解手术学杂志 作者:谢姗珊 ; 周娅颖 关键词:止血 ; 硅胶管 ; 甲状腺腔镜手术 机构:第三军医大学西南医院手术麻醉科 ; 第三军医大学西南医院手术麻醉科 年份:2015
    摘要:甲状腺腔镜手术操作空间有限,难度较大,术中创面出血的情况时有发生。手术医生通常会使用电凝钩或超声刀进行术中止血,创面渗血时则需要使用止血止血止血粉主要为传统手术而设计,使用时开启喷头,对准出血部位按压均匀喷洒即可达到止血目的。而甲状腺腔镜手术操作空间狭小,止血粉喷头无法接近手术创面,使用时存在诸多弊端。因此,我们在实际工作中将直径4.5 mm的一次性硅胶管根据手术所需制作成延长
  • 【期刊】 四肢解剖型多普勒气囊止血带的止血压力研究

    刊名:中国骨与关节损伤杂志 作者:祖罡[1] ; 胡秀良[2] ; 毕大卫[3] ; 王震[4] 关键词:四肢解剖型多普勒气囊止血带 ; 传统直型充气止血带 ; 止血压力 机构:[1]杭州市红十字会医院骨科 ; [1]杭州市红十字会医院骨科 ; [2]浙江中医药大学 ; [3]杭州市萧山区第一人民医院 ; [4]浙江萧山医院 年份:2018
    摘要:目的设计四肢解剖型多普勒气囊止血带,并与传统直型气囊止血带进行比较,评价新型止血带的应用效果。方法自2014—01—2016—12征集40名不同年龄段的男性健康志愿者,按年龄段分成4组(每组10人),21-30岁组、31~40岁组、41,50岁组、51。60岁组。按体重指数(BMI)分为3组,偏瘦组(BMI〈20)、正常组(20≤BMI〈25)、偏胖组(25≤BMI〈30):偏瘦组9人,正常组19人,偏胖组12人。将四肢解剖型多普勒气囊止血带和传统直型充气止血带环绕绑缚于志愿者的上臂及大腿,比较2种止血带阻断血流所需压力。结果各组上臂使用解剖型止血带时阻断血流压力均低于直型止血带,差异有统计学意义(P〈0.05);大腿使用解剖型止血带时阻断血流压力均明显低于直型止血带,差异有显著统计学意义(P〈0.01)。结论四肢解剖型多普勒气囊止血带可有效降低止血压力,减少止血带相关并发症。
  • 【期刊】 产后出血止血方法的选择及止血失败原因浅述

    刊名:全文版:医药卫生 作者:徐艳清 关键词:产后出血 ; 止血方法 ; 影响因素 机构:湖北省襄阳市保康县中医院,湖北 ; 湖北省襄阳市保康县中医院,湖北 年份:2016
    摘要:目的,讨论产后出血止血方法的选择及止血失败原因。方法,对2010年5月至2015年5月我院86例产后出血进行回顾性研究,所有患者按照止血方式的不同分为填塞组(23例)、结扎组(20例)、缝合组(22例)、缝合+填塞组(21例),比较不同止血方式的应用效果,分析影响产后出血治疗效果的因素。产后大出血止血失败的主要原因是宫缩乏力、分娩方式、凝血功能障碍。结论,产后出血需根据患者实际情况选择合适的止血方法。
  • 【期刊】 紧急止血纱布对猪致死性股动脉出血的止血作用

    刊名:黑龙江畜牧兽医:下半月 作者:瞿应良 ; 杨晓春 关键词:动脉出血 ; 大血管出血 ; 止血作用 ; 止血纱布 ; 止血材料 ; 紧急止血 ; 死亡原因 ; 总死亡人数 ; 动物模型 ; 股动脉损伤 机构:杭州沸创医疗科技有限公司 ; 杭州沸创医疗科技有限公司 ; 浙江大学药学院 年份:2017
    摘要:据卫生部的统计,每年各类伤害发生约2亿人次,其中因伤害死亡的人数约占总死亡人数的9%左右,位居死亡原因的前列,大血管出血是战争时期与和平时期伤员死亡的重要原因。大血管出血最初5 min使用紧急止血产品止血能极大降低死亡率。自2003年沸石在伊拉克战场上被用作止血材料以来,沸石止血材料已经成功挽救了成千上万的生命。
  • 【期刊】 内镜下单极电凝止血与鼻腔填塞止血疗效比较

    刊名:河南医学研究 作者:石磊 关键词:鼻出血 ; 鼻内镜电凝止血 ; 填塞止血 年份:2016
    摘要:目的比较鼻内镜下单极电凝止血与鼻腔填塞止血治疗鼻出血的临床疗效。方法选择如东县人民医院2011年1月至2012年12月收治的175例鼻出血患者作为研究对象,采用鼻内镜下单极电凝止血的91例患者作为观察组,采用鼻腔填塞止血的84例患者作为对照组,比较两组的止血效率、平均住院时间和不良反应发生情况。结果观察组的一次性止血成功率为93.4l%,明显高于对照组的71.43%,差异有统计学意义(P〈0.05);观察组术后不良反应发生率为3.30%,明显低于对照组的92.86%,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论鼻内镜下单极电凝止血治疗鼻出血一次性止血成功率高、不良反应小,值得推荐应用,但鼻腔填塞止血操作简单,在出血点不明确时亦可使用,临床应根据患者的病情选择合适的治疗方案。
  • 【期刊】 止血用于痔上粘膜环切术止血的临床疗效观察

    刊名:临床医药文献电子杂志 作者:黄茵;刘贺; 关键词:立止血;;痔上粘膜环切术;;止血 机构:广西南宁市第三人民医院 ; 广西南宁市第三人民医院 ; 广西壮族自治区人民医院 年份:2018
    摘要:目的探讨立止血用于痔上粘膜环切术止血的疗效。方法 160例痔上粘膜环切术病人,术前30分钟使用立止血2 ku肌注。术中观察切口渗血情况、术后早期凝血情况,用药前后均作凝血功能和肝、肾功能检查。结果本组病人使用立止血后吻合口仅有少量渗血,并能缩短术后30 min的出、凝血时间,未发现肝、肾功能损害。结论立止血用于手术止血使用剂量小、药效快、作用强、安全性高,用于痔上粘膜环切术止血效果较好。
  • 【期刊】 Dieulafoy病传统止血止血失败后应用蝴蝶夹补救1例

    刊名:临床消化病杂志 作者:林艺志 ; 林炳慧 ; 周剑金 ; 谢雄炳 ; 杨伟超 ; 蔡志宏 ; 杨天赐 ; 沈诗萍 ; 苏军凯 关键词:止血 ; 蝴蝶夹 ; 上消化道出血 ; @@ 机构:漳州正兴医院消化内镜中心 ; 漳州正兴医院消化内镜中心 年份:2017
    摘要:@@
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