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  • 【期刊】 让军功章的光芒为人类健康幸福而闪耀——专访Science Bulletin编委杨瑞馥研究员

    刊名:科学通报 作者:闫蓓 ; 安瑞 年份:2014
    摘要:2014年8月,中央军委主席习近平签署通令,给1个单位、24名个人记功,其中军事医学科学院研究员杨瑞馥被记三等功,以表彰其在本职岗位上做出的突出成绩和完成任务中的出色表现.杨瑞馥研究员现任军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物国家重点实验室主任、国家生物医学分析中心分析微生物实验室主任,同时也是《科学通报》英文版
  • 【期刊】 不同盐分浓度对副溶血弧菌毒力表型的影响

    刊名:中华医院感染学杂志 作者:杨瑞馥 ; 马立芝 ; 郭李平 ; 王立祥 ; 梁权辉 ; 邱业峰 ; 周冬生 ; 吕志强 关键词:副溶血弧菌 ; 毒力表型 ; 盐分浓度 机构:武警总医院急救医学中心 ; 武警总医院急救医学中心 ; 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 ; 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 ; 大连晶泰生物技术有限公司 ; 武警总医院急救医学中心 ; 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 ; 军事医学科学院实验动物中心 年份:2017
    摘要:目的 研究副溶血弧菌(VP)在不同盐分浓度下毒力表型的变化.方法 利用小鼠致死性实验、兔回肠袢实验、Raw264细胞毒性实验和兔红细胞溶血活性实验比较标准强毒株RIMD2210633株在高盐(2%NaCl)和低盐(0.5 %NaCl)条件下毒力表型的变化.结果 0.5% NaCl试验组副溶血弧菌的生长速度较2%NaCl试验组有所减慢,而产生的肠积液量、对Raw264细胞的细胞毒性及对兔红细胞的相对溶血活性却显著高于2%NaCl试验组(P<0.05);然而0.5% NaCl试验组菌体的小鼠致死率却低于2%NaCl试验组,两组小鼠存活率分别为80.o%和53.3%.结论 在低盐条件下,VP的生长速度下降,肠毒性、Raw264细胞毒性和溶血活性均增强,而小鼠致死毒性反而减弱.
  • 【期刊】 鼠疫耶尔森氏菌基因转录调控的研究进展

    刊名:微生物学通报 作者:杨瑞馥 ; 刘磊 ; 郑山根 ; 郑娅琼 ; 蔡李平 关键词:鼠疫耶尔森氏菌 ; 基因转录调控 ; 生物膜 ; 毒力 机构:中国人民解放军武汉总医院输血科 ; 中国人民解放军武汉总医院输血科 ; 军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 年份:2019
    摘要:细菌基因转录调控是多种调控机制中研究最为广泛的一种模式。复杂而精细的基因转录调控网络有助于细菌应答外界环境压力,在病原菌致病与传播中均发挥着关键作用。本文以鼠疫耶尔森氏菌基因转录调控的相关研究进展为基础展开论述,重点阐述细菌的转录调控机制、转录调控的研究策略及鼠疫菌致病与传播中转录调控的作用,以期为深入研究鼠疫菌致病与传播中的基因转录调控分子机制提供新思路。
  • 【期刊】 模拟失重对大肠杆菌K12基因表达及表型的影响

    刊名:微生物学通报 作者:杨瑞馥 ; 容丹 ; 王佳平 ; 王海立 ; 高建义 ; 韩延平 ; 李勇枝 关键词:模拟失重 ; 大肠杆菌 ; 转录组测序 机构:中国航天员科研训练中心 ; 中国航天员科研训练中心 ; 军事医学科学院微生物所病原微生物生物安全国家重点实验室 年份:2017
    摘要:[目的]通过低剪切力模拟失重(Low-shear modeled microgravity,LSMMG)连续传代培养大肠杆菌,检测大肠杆菌在模拟失重条件下的表型变化及基因改变.[方法]利用旋转细胞培养系统模拟失重环境对大肠杆菌K12进行连续传代培养,对菌株进行增殖速率、耐酸性和生物膜形成的测定,以此评估LSMMG对大肠杆菌K12表型的影响.利用转录组测序检测模拟失重条件下差异表达的基因,与表型作比对.[结果]模拟失重导致大肠杆菌增殖速率降低,耐酸性下降,生物膜形成能力增强;模拟失重条件下,营养代谢相关差异表达基因有25个,其中20个表达下降,2个与耐酸相关基因表达均下降.[结论]模拟失重会引起大肠杆菌表型及相应的基因变化,其中生物膜形成能力的增强可能对航天飞行造成潜在威胁.
  • 【期刊】 环介导恒温扩增技术快速检测鼠疫耶尔森菌

    刊名:军事医学 作者:杨瑞馥 ; 冯娜 ; 周亚洲 ; 范艳晓 ; 汪琼 ; 毕玉晶 ; 韩延平 ; 周育森 ; 王效义 关键词:鼠疫耶尔森菌 ; 环介导恒温扩增技术 ; 检测 机构:安徽医科大学 ; 安徽医科大学 ; 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 年份:2015
    摘要:目的建立简单、快速环介导恒温扩增技术(LAMP)检测鼠疫耶尔森菌的方法。方法基于鼠疫菌染色体上特异的核酸序列3a设计引物;应用浊度仪和目视法对反应结果进行检测;通过对鼠疫菌和其他近源菌同时进行检测评价方法的特异性;通过对不同稀释浓度的鼠疫菌DNA模板进行LAMP和PCR检测以确定方法的灵敏度。结果用建立的LAMP法对与鼠疫菌近源30种其他菌株进行扩增,结果均为阴性,该方法具有很高的特异性。LAMP法检测鼠疫菌DNA的灵敏度可达到20 pg,比常规PCR法高10倍。检测反应在25 min以内完成。结论该方法具有快速、灵敏、特异、操作简单的特点,有望发展成为现场快速检测鼠疫菌的有效手段。
  • 【期刊】 AphA蛋白对副溶血弧菌vopT的转录调控研究

    刊名:微生物学通报 作者:杨瑞馥 ; 张伟 ; 侯书宁 ; 何婷 ; 徐淼 ; 黄新祥 ; 周冬生 ; 张义全 关键词:副溶血弧菌 ; 转录调控 ; AphA ; vopT 机构:河北北方学院附属第一医院微生物科 ; 河北北方学院附属第一医院微生物科 ; 江苏大学医学院 ; 北京微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 年份:2015
    摘要:【目的】研究副溶血弧菌AphA对vop T的转录调控机制。【方法】提取野生株(WT)和aphA突变株(ΔaphA)的总RNA,采用引物延伸实验研究vop T的转录起始位点,并根据产物的丰度差异判断AphA对其调控关系。分别将WT和ΔaphA的总RNA逆转录成c DNA,利用实时定量RT-PCR进一步研究AphA对靶基因的调控关系。将vop T的启动子区克隆入p HRP309质粒的β-半乳糖苷酶基因上游,构建Lac Z重组质粒,并将该重组质粒转入WT和ΔaphA中,通过测定并比较两株菌中β-半乳糖苷酶活性的差异来判定AphA对vop T的调控关系。PCR扩增靶基因整个启动子区DNA序列,并纯化His-AphA蛋白,利用凝胶阻滞实验(EMSA)验证His-AphA对靶基因启动子区是否具有直接的结合作用。【结果】vop T只有一个转录起始位点A(-86),且其转录活性受AphA的间接抑制。RT-PCR和EMSA结果显示AphA对vtrA的转录也具有间接的抑制作用。【结论】AphA间接抑制vop T转录,且该间接抑制作用与VtrA无关。
  • 【期刊】 QseBC双组分调控系统对伤寒沙门菌动力的调节作用

    刊名:军事医学 作者:杨瑞馥 ; 吉滢 ; 倪斌 ; 张义全 ; 黄新祥 关键词:伤寒沙门菌 ; QseBC双组分系统 ; flhD ; 动力 机构:江苏大学医学院 ; 江苏大学医学院 ; 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 年份:2015
    摘要:目的研究伤寒沙门菌Qse BC双组分调控系统对伤寒菌动力的调节作用。方法比较伤寒沙门菌野生株(WT)、qse B缺陷株(Δqse B)和qse C缺陷株(Δqse C)动力差异,选取主要鞭毛基因flh D进行实时定量RT-PCR检测,同时检测qse B的表达水平;构建qse B高表达株,比较其与空载体对照株动力和flh D表达差异。结果与WT相比,Δqse B动力无变化,Δqse C动力减弱;在Δqse C中,flh D表达量下调至约1/4而qse B表达上调;qse B高表达株动力较WT减弱,flh D表达下调。结论 qse BC双组分调控系统能调节伤寒菌动力和主要鞭毛基因flh D的表达;qse B高表达时可抑制细菌动力。
  • 【期刊】 微生物全基因组测序在预防医学领域的应用

    刊名:传染病信息 作者:杨瑞馥 ; 崔玉军 关键词:基因组 ; 微生物学 ; 序列分析 ; 流行病学研究 ; 病原 机构:军事医学科学院微生物流行病研究所病原与生物安全国家重点实验室 ; 军事医学科学院微生物流行病研究所病原与生物安全国家重点实验室 年份:2014
    摘要:病原微生物引起传染病疫情时,预防医学工作者会面临以下几个重要问题:1病原从哪里来,可能的传播途径是什么;2病原有哪些生存能力、毒力和耐药特性;3病原所致疾病有着怎样的流行规律。高通量测序技术以及与之相伴的信息学分析技术的飞速发展,为上述问题提供了新的思路和解决方案。本文从流行病学调查溯源、病原体特性的快速判定、疾病流行规律分析以及疫苗变异监测和使用效果评价四个方面,总结归纳了新一代全基因组测序技术在预防医学领域中的应用实例,并对该研究方向存在的问题及未来发展进行了展望。
  • 【期刊】 AphA蛋白促进副溶血弧菌c-di-GMP合成和生物膜形成

    刊名:微生物学报 作者:杨瑞馥 ; 黄倩 ; 张义全 ; 胡小许 ; 王丽 ; 钟青萍 ; 周冬生 ; 黎晓敏 关键词:副溶血弧菌 ; 生物膜形成 ; c-di-GMP ; AphA ; scrABC ; scrG 机构:西南大学动物科技学院 ; 西南大学动物科技学院 ; 军事医学科学院微生物流行病研究所 ; 病原微生物生物安全国家重点实验室 ; 华南农业大学食品学院 年份:2014
    摘要:【目的】综合运用表型和分子生化实验研究AphA蛋白对副溶血弧菌生物膜形成的调节机制。【方法】利用菌落褶皱和结晶紫染色实验比较aphA突变株(ΔaphA)和野生株(WT)的表型差异;进而利用色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)的方法分别检测ΔaphA和WT中c-di-GMP分子含量;提取ΔaphA和WT的总RNA,采用实时定量RT-PCR的方法研究AphA对scrABC和scrG的调控关系;分别构建克隆有scrABC和scrG上游启动子区的LacZ重组质粒,并将重组质粒转入ΔaphA和WT中,通过测定并比较两株菌中β-半乳糖苷酶活性差异来进一步研究AphA对scrABC和scrG的调控关系;PCR扩增scrABC和scrG的整个启动子区DNA序列,并纯化His-AphA蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)验证AphA对靶基因启动子区是否具有直接的相互作用。【结果】表型结果显示AphA能促进c-di-GMP的合成和生物膜形成;实时定量RT-PCR和LacZ结果表明AphA能抑制scrABC和scrG的转录表达;EMSA结果证明AphA不能结合到scrABC和scrG的启动子区DNA上。【结论】AphA间接抑制scrABC和scrG的表达是其促进副溶血弧菌c-di-GMP合成及生物膜形成的机制之一。
  • 【期刊】 肺炎克雷伯菌CRP对kfuABC操纵子的转录调控机制研究

    刊名:重庆医科大学学报 作者:杨瑞馥 ; 杨世亚 ; 张义全 ; 王丽 ; 周冬生 ; 李迎丽 ; 邱景富 关键词:肺炎克雷伯菌 ; 环磷酸腺苷受体蛋白 ; kfuABC ; 转录调控 机构:重庆医科大学公共卫生与管理学院营养与食品卫生教研室 ; 重庆医科大学公共卫生与管理学院营养与食品卫生教研室 ; 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 年份:2014
    摘要:目的:利用分子生物学实验研究肺炎克雷伯菌环磷酸腺苷受体蛋白(cAMP receptor protein,CRP)对kfuABC操纵子的转录调控机制。方法:设计相关跨基因引物,用Real-time PCR方法验证kfuABC的转录结构。以肺炎克雷伯菌野生株NTUHK2044(wild type,WT)的总RNA为模板,利用引物延伸的方法寻找kfuA的转录起始位点,确定其核心启动子区。构建含kfuA启动子区DNA序列的LacZ重组质粒,并将其转入突变株△crp(肺炎克雷伯菌野生株基因组中crp基因敲除)和WT中,通过测定比较两株菌中β-半乳糖苷酶活性差异来判定CRP调控子对kfuA的调控关系;分别提取△crp和WT的总RNA,进一步采用实时定量Real-time PCR的方法验证CRP对kfuA的调控关系。通过凝胶阻滞实验验证His-CRP是否对kfuA启动子区具有直接的结合作用,进一步采用DNaseⅠ足迹实验确定具体的结合位点。结果:肺炎克雷伯菌kfuA、kfuB和kfuC位于同一个操纵子kfuABC;引物延伸实验结果显示kfuABC只有一个转录起始位点T;CRP能够结合到kfuABC启动子区-204到-171之间的碱基序列上(转录起始位点为+1),抑制其转录表达。结论:CRP能直接结合到kfuABC启动子区抑制其转录表达。
  • 【期刊】 降钙素原上转发光免疫层析定量检测方法的建立

    刊名:中华检验医学杂志 作者:杨瑞馥 ; 李鲁平 ; 于洋 ; 谷海峰 ; 闵微 ; 赵焕生 ; 郭兆彪 ; 周蕾 机构:沈阳市第六人民医院检验科 ; 沈阳市第六人民医院检验科 ; 北京热景生物技术有限公司 ; 军事医学科学院微生物流行病研究所 年份:2014
    摘要:降钙素原(procalcitonin,PCT)以其高灵敏度、高诊断特异性以及持续稳定的特点作为脓毒症诊断指标之一[1-3],2009年JAMA文章报道基于PCT为指导可以减少抗生素使用[4].目前PCT的临床检测方法主要有半定量胶体金比色法、电化学发光法和酶联免疫荧光法,此3种方法各有缺陷,均无法满足急诊科、重症监护室等对患者体征状况进行快速、及时的评价监测的需求.本研究将PCT与即时检验(point of care testing,POCT)的概念结合,建立一种上转发光免疫层析技术(up-converting phosphor technology based lateral flow assay,UPT-LF)快速定量检测PCT,并对其性能进行了系统评价,并以罗氏电化学发光法(Elecsys BRAHMS PCT)做为参比试剂进行了临床验证.
  • 【期刊】 副溶血弧菌基因回补实验方法的建立与应用

    刊名:南方医科大学学报 作者:杨瑞馥 ; 陈振鸿 ; 王丽 ; 张义全 ; 冯娇 ; 常德 ; 安莉 ; 刘长庭 ; 周冬生 关键词:副溶血弧菌 ; 基因回补 ; pBAD33 ; aphA ; opaR 机构:解放军总医院南楼呼吸科 ; 解放军总医院南楼呼吸科 ; 重庆医科大学检验医学院 ; 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室 年份:2014
    摘要:目的建立以pBAD33质粒为载体的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP)基因回补实验平台。方法 PCR扩增aphA和opaR的整个ORF区序列,并将其直接克隆入pBAD33质粒中,构建重组质粒。分别将重组质粒转入到ΔopaR和ΔaphA中(分别代表opaR和aphA的突变株),以构建出相应的回补株C-ΔaphA和C-ΔopaR。分别在aphA和opaR基因内设计特异性引物,采用RT-PCR方法,验证在相应的回补突变株中aphA和opaR是否转录。利用引物延伸实验研究野生株(WT)、ΔopaR、ΔaphA、C-ΔaphA和C-ΔopaR中mfpA(aphA负调控,opaR正调控其表达)的相对RNA水平。结果 aphA和opaR在相应的回补株中发生转录;且mRNA水平与野生株一致。结论成功建立了以pBAD33质粒为载体的VP基因回补方法,并得到应用。
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