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  • 【期刊】 F-box结构域参与FBXO39蛋白对MCF-7细胞增殖的调控

    刊名:中国病理生理杂志 作者:李芳;刘罗根;黄果;戈欣;欧阳靖霖;章运生; 关键词:F-box结构域;;FBXO39蛋白;;乳腺癌;;细胞定位;;细胞增殖 机构:湖南环境生物职业技术学院化学教研室 ; 湖南环境生物职业技术学院化学教研室 ; 南华大学附属第二医院临床研究所 ; 湖南省乳甲疾病防治临床医学研究中心 ; 南华大学附属第二医院超声医学科 年份:2019
    摘要:目的:探讨F-box结构域对FBXO39蛋白调控MCF-7细胞增殖的影响。方法:以MCF-7细胞cDNA文库为模板,采用PCR方法扩增FBXO39基因的全长cDNA序列并克隆到真核表达载体pEGFP-C2;以pEGFP-FBXO39质粒为模板,构建pEGFP-FBXO39ΔF(F-box结构域缺失)质粒;将重组质粒转染MCF-7细胞后,Western blot验证FBXO39和FBXO39ΔF的表达水平;激光共聚焦显微镜观察FBXO39和FBXO39ΔF的亚细胞定位情况;免疫荧光检测内源性FBXO39在MCF-7细胞中的定位。MTT和EdU试剂盒检测MCF-7细胞的增殖情况;流式细胞术检测MCF-7细胞周期;免疫组化检测FBXO39在乳腺癌及其癌旁组织中的表达差异。结果:本研究成功构建了pEGFP-FBXO39和pEGFP-FBXO39ΔF真核表达载体。F-box结构域对FBXO39蛋白的细胞定位没有影响。FBXO39促进了MCF-7细胞的增殖,而FBXO39ΔF对MCF-7细胞增殖无明显影响。FBXO39高表达于乳腺癌组织。结论:F-box结构域对FBXO39蛋白的细胞定位没有产生明显影响,但对维持FBXO39的生物学作用至关重要。FBXO39可能与乳腺癌的发生相关。