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  • 【期刊】 单核细胞增生李斯特菌抗酸应激机制

    刊名:微生物学通报 作者:何珂 ; 程昌勇 ; 方春 ; 宋厚辉 ; 方维焕 关键词:单核细胞增生李斯特菌 ; 酸应激耐受 ; 调控机制 机构:浙江农林大学动物科技学院 ; 浙江农林大学动物科技学院 ; 浙江大学动物预防医学研究所 年份:2017
    摘要:单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,简称单增李斯特菌)是重要的人畜共患食源性病原,在青贮饲料、发酵食品、宿主胃内以及巨噬细胞吞噬体内都会遭遇酸应激。该菌有多种抗酸应激系统,如F0F1-ATPase、谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase system,GAD)、精氨酸脱亚胺酶(Arginine deiminase,ADI)、鲱氨酸脱亚胺酶(Agmatine deiminase,Ag DI)系统等。在环境pH(pHex)4.5条件下可维持其细胞内pH(pHi)稳态,在pHex 3.5时仍能存活;用温和酸应激(pHex 4.5)预处理单增李斯特菌,可以通过酸耐受反应(Acid tolerance response)提高其在致死性酸性环境中的存活率,这一过程受σB正调控,即σB激活可以保护单增李斯特菌应对多种环境应激。因此,σB可以作为新型抗菌药物的靶标。更为重要的是,弱酸性发酵食品要严格控制李斯特菌的污染,以降低消费者的感染风险。
  • 【会议】 actA单基因敲除减毒李斯特菌株的构建

    作者:秦源 ; 郭永红 ; 周云 ; 贾战生 机构:第四军医大学唐都医院传染科 ; 第四军医大学唐都医院传染科 ; 西安交通大学医学院第二附属医院感染科 年份:2014
    摘要:目的利用基因工程方法构建李斯特菌(Listeria Monocytogenes,LM)10403s actA单基因敲除重组载体,获得减毒重组LM菌株用于构建疫苗。方法以LM 10403s菌液为模板PCR扩增actA同源臂,分别用引物actA-SOE-A/actA-SOE-B、引物actA-SOE-C/actA-SOE-D PCR扩增,胶回收两个片段;将回收片段等摩尔比例混合后作为模板使用引物actA-SOE-A/actA-SOE-D进行SOE PCR(Gene Splicing By Overlap Extension PCR,重叠延伸PCR),胶回收SOE PCR片段。经PstⅠ及XbaⅠ双酶切后,目的基因
  • 【专利】 使用重组李斯特菌菌株的组合疗法

    作者:R·珀蒂 ; A·瓦勒查 ; Y·佩特森 ; R·辛格 年份:2015
    摘要:本公开涉及包含溶瘤病毒、嵌合抗原受体T细胞(CAR T细胞)、治疗性或免疫调节性单克隆抗体、靶向性胸苷激酶抑制剂(TKI)或掺有工程化T细胞受体的过继转移细胞,以及包含融合至肿瘤相关抗原的截短LLO、截短ActA或PEST序列肽的融合蛋白的减毒活重组李斯特菌菌株的组合物。本公开还涉及治疗肿瘤、防御肿瘤和诱导对肿瘤的免疫应答的方法,所述方法包括在进行或不进行另外的放射疗法的情况下施用所述组合物的步骤。
  • 【期刊】 展开性变奏:李斯特钢琴作品曲式结构探微

    刊名:艺术研究 作者:方芳 关键词:李斯特 ; 展开性变奏 ; 钢琴作品 ; 曲式结构 机构:沈阳音乐学院 ; 沈阳音乐学院 年份:2015
    摘要:变奏曲就是对乐曲主题或者在主题之下对乐曲进行的种种变化,在历史中的许多作曲家都常常用到展开性变奏这种手法,这种手法的运用是的主题更加的鲜明,具有矛盾的统一性。弗朗兹·李斯特是匈牙利著名的钢琴家、作曲家,有"钢琴王子"的美誉,展开性变奏在他的钢琴作品中有很突出的表现。我们主要就展开性变奏,讲一下李斯特钢琴作品的结构。
  • 【期刊】 食源性单增李斯特菌LPXTG蛋白基因的检测

    刊名:中国兽医杂志 作者:丁剑 ; 马勋 ; 陈朔 ; 曹树珠 ; 王贝贝 ; 杜冬冬 ; 张奇文 关键词:单核细胞增多性李斯特菌 ; LPXTG基序表面蛋白 ; PCR 机构:石河子大学动物科技学院 ; 石河子大学动物科技学院 年份:2017
    摘要:单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)作为四大重要食源性病原菌之一,对人类及多种畜禽健康威胁极大。LM细胞胞壁表面分布多种毒力蛋白,在感染机体过程中发挥重要作用,其中有一类至关重要的表面蛋白其C末端含有保守基序LPXTG,分选酶A能够识别基序LPXTG,共价结合到肽聚糖上,呈现在细胞表面发挥毒力作用。本试验以不同食品中分离得到的24株单增李斯特菌为试验对象,设计合成了41对预测含LPXTG基序表面蛋白的引物,利用PCR技术进行扩增,凝胶电泳成像系统检测扩增产物片段大小,计算24株食品源单增李斯特菌LPXTG基序表面蛋白的携带。结果表明,不同LM分离株LPXTG蛋白基因的携带率不同:其中仅有12.5%(3/24)的分离株携带率在85%以上;不同LPXTG蛋白基因的检出率不同,在41个检测对象中,有8个基因的检出率100%,有3个基因的检出率不足20%,Lmo1115基因在所有分离株中均未检测到。本研究对了解食品源LM分离株的LPXTG蛋白基因的分布以及探明食品源LM的致病性具有重要意义。
  • 【期刊】 RapidChek检测食品中单增李斯特菌的方法评价

    刊名:食品安全质量检测学报 作者:马云 ; 唐静 ; 赵立青 ; 李正义 ; 王昌军 ; 方佩佩 ; 姜英辉 ; 贾俊涛 关键词:单增李斯特菌 ; RapidChek检测方法 ; 方法评价 机构:山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 ; 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 年份:2017
    摘要:目的评价RapidChek法检测食品中单增李斯特菌的检测效果并验证。方法采用t检验,比较RapidChek方法与GB 4789.30-2016方法的培养基增菌效果。依据ISO 16140:2003《食品和动物饲料微生物学-可替代方法的验证方案》,比较RapidChek检测方法与GB 4789.30-2016检测方法的检测效果,涉及的性能指标有相对准确性、相对特异性和相对灵敏度、包含性和排他性。结果 RapidChek检测方法增菌培养基效果优于GB 4789.30-2016方法增菌培养基LB_1。根据RapidChek检测方法、GB 4789.30-2016培养基+RapidChek试纸条方法、RapidChek培养基+GB 4789.30分离鉴定方法的统计检验得出,3种方法与参照方法在相对准确性、相对特异性和相对灵敏度方面无显著性差异。在包含性和排他性方面,RapidChek检测方法与GB 4789.30-2016检测方法的检测结果均一致。结论在所验证的指标上,RapidChek检测方法(包括与GB4789.30-2016组合的方法)与GB 4789.30-2016方法无差异。
  • 【期刊】 膜性肾病合并李斯特菌脑膜脑炎一例

    刊名:中国妇幼健康研究 作者:吕洁 ; 张静静 ; 徐亚光 机构:山东省聊城市第二人民医院肾内科 ; 山东省聊城市第二人民医院肾内科 年份:2017
    摘要:李斯特菌脑膜炎在我国是一种少见的急性细菌性脑膜炎,免疫缺陷者、老年人和孕妇是其易感人群,致死致残率较高,有文献已经明确易感人群包括:慢性基础疾病者(服用免疫抑制剂、肿瘤、肾脏疾病、糖尿病,酗酒、肝病及结缔组织疾病患者),老年人,孕妇及其胎儿/新生儿~([1])。膜性肾病患者长期应用糖皮质激素和免疫抑制剂,属于易感人群,但国内少有报道。现将我院诊断的膜性肾病合并李斯特菌脑膜炎1例报告如下。
  • 【期刊】 三种李斯特菌菌体蛋白提取方法的比较

    刊名:生命科学研究 作者:徐宗凯 ; 林青青 ; 周梦莹 ; 刘思静 ; 黄耀 ; 李文熙 ; 李兴桥 ; 余倩 ; 汪川 关键词:李斯特菌 ; 蛋白质 ; 提取 ; 超声破壁 机构:四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系 ; 四川大学华西公共卫生学院卫生检验与检疫系 年份:2015
    摘要:通过对3种李斯特菌菌体蛋白提取方法主要是破壁方式的比较,找到一种可高效提取李斯特菌菌体蛋白的方法,为该菌的深入研究提供可靠技术。以绵羊李斯特菌新鲜液体培养物为材料,收集菌沉淀,分别选用3种破壁方式破除细胞壁,三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)-丙酮沉淀法沉淀破壁液中的菌体蛋白,采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和Western-blot分析所得菌体蛋白。溶菌酶-超声破壁-TCA-丙酮沉淀法提取得到的李斯特菌菌体蛋白SDS-PAGE条带清晰丰富,Western-blot条带特异。溶菌酶-超声破壁-TCA-丙酮沉淀法可有效提取李斯特菌菌体蛋白,满足常用蛋白分析技术的要求,是一种提取李斯特菌菌体蛋白的可靠方法。
  • 【期刊】 两株不同毒力单增李斯特菌致病性试验

    刊名:中国兽医杂志 作者:李晓云 ; 李巍 ; 伊娜娜 ; 张子群 ; 刘兵 ; 初纯明 ; 宋铭忻 关键词:单增李斯特菌 ; 致病性 ; 细胞因子 机构:东北农业大学动物医学学院 ; 东北农业大学动物医学学院 年份:2015
    摘要:选取毒力差异显著的两株单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm),建立不同毒力及菌量的小鼠感染模型(A组低剂量攻弱毒、B组半数致死量攻弱毒、C组半数致死量攻强毒、D组过量攻强毒),研究不同毒力LM对机体的致病性差异以及机体对不同毒力菌株的免疫应答差异。结果表明,不同毒力LM在小鼠体内的迁移能力不同,感染后2 h,C组和D组小鼠心脏中就可检出LM菌,感染后4 h,A组和B组还各有1只小鼠心脏中未检出细菌,至感染后6 h,D组的1只小鼠脑中就可检出细菌,感染后8 h,A组和B组各有1只小鼠脑中可检出细菌,至感染后2 d A组还有1只小鼠脑中未检出细菌;剖检及组织病理观察显示,感染LM后4组小鼠都出现不同程度的肝损伤和脑损伤,损伤程度与细菌毒力呈正相关;血清炎性因子检测可见,3种因子的表达量呈现相似的变化趋势,即在感染早期表达量上升至峰值,随后逐渐下降至平稳,除高剂量攻强毒的小鼠比其他3组小鼠更早的引起机体免疫应答反应外,组间无显著差异(P>0.05),表明弱毒LM同样可刺激机体产生一定强度的免疫应答。
  • 【期刊】 单核细胞增生李斯特氏菌生物膜形成特性

    刊名:安徽农业科学 作者:陈康勇 ; 彭芳 ; 薛竣仁 ; 钟为铭 ; 高志鹏 关键词:单核细胞增生李斯特氏菌 ; 生物膜 ; 形成特性 机构:湖南农业大学动物科学技术学院 ; 湖南农业大学动物科学技术学院 ; 湖南农业大学动物科学技术学院 ; 水产高效健康生产湖南省协同创新中心 年份:2017
    摘要:[目的]研究单增李斯特氏菌生物膜的形成特性.[方法]采用24孔板法培养生物膜,分别采用结晶紫染色法和光学显微镜进行生物膜的定量和定性研究,观察在不同培养时间(8、16、24、32、40、48 h)单增李斯特氏菌生物膜的形成状况.[结果]随着培养时间的增加,单增李斯特氏菌生物膜生物量逐渐增加,生物膜经历了黏附、微菌落形成、大菌落形成到成熟的全部过程.[结论]试验结果为单增李斯特氏菌生物膜相关研究提供了理论依据.
  • 【期刊】 山羊源产单核细胞李斯特菌的分离与鉴定

    刊名:动物医学进展 作者:马光强 ; 刘丽娟 ; 文明 ; 王开功 ; 程振涛 ; 周碧君 关键词:产单核细胞李斯特菌 ; 分离鉴定 ; hly基因 ; 序列分析 ; 山羊 机构:贵州大学动物科学学院 ; 贵州大学动物科学学院 ; 贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室 年份:2016
    摘要:从贵州省盘县某养羊场病例组织样本中分离出1株疑似产单核细胞李斯特菌(Lm)。通过革兰染色、生化鉴定、PCR扩增hly基因、克隆、测序、序列分析及药敏试验等方法对可疑菌株进行分析鉴定。结果显示,该分离菌的培养特性、菌落形态、菌体形状特征、生理生化特征均与文献报道的产单核细胞李斯特菌相同,并从该分离菌株基因组中扩增到大小约850bp的Lm的特异性DNA片段,其序列与GenBank中其他Lm地方株核苷酸同源性在39.1%~99.7%之间,其中与从发病动物分离到的加拿大、瑞士参考株同源性最高,均达到99.7%,与其他途径分离到的参考菌株同源性都很低,分子水平上进一步证实分离菌株为产单核细胞李斯特菌,且从不同途径分离的地方株hly基因差异大。研究结果为本病临床防控与治疗提供理论依据。
  • 【期刊】 全细胞SELEX法筛选单增李斯特菌的ssDNA适配体

    刊名:现代食品科技 作者:孙程 ; 徐宝霞 ; 徐珍霞 ; 陈福生 ; 吴仁蔚 关键词:单增李斯特菌 ; ssDNA适配体 ; 全细胞SELEX ; 二级结构 机构:华中农业大学食品科学与技术学院 ; 华中农业大学食品科学与技术学院 年份:2018
    摘要:以单增李斯特菌活细胞为靶标,采用指数富集配基的系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,SELEX)从含40个随机碱基序列的单链DNA(single-stranded DNA,ss DNA)文库中筛选与之特异性结合的适配体。酶联配体吸附法(ELASA)测定筛选过程中次级文库与单增李斯特菌结合力的变化。对筛选得到的适配体进行序列测定,RNA structure软件预测二级结构,ELASA测定适配体与靶标的结合能力和特异性。结果显示,每轮筛选后次级文库与靶标的亲和力增强,特异性适配体逐步得到富集。测序获得23条适配体,其序列同源性不高,但预测的二级结构有些相似,根据二级结构将其分为3个群,分析结果表明二级结构与适配体的亲和力有关。挑选亲和力较强的21号(Lma-21)和35号(Lma-35)适配体能特异性地识别单增李斯特菌。本研究为开发食源性病原菌单增李斯特菌的新型检测试剂提供了基础材料。
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