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  • 【期刊】 铁蓄积对斑马鱼幼鱼骨发育的影响

    刊名:中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 作者:姜宇 ; 荣晓旭 ; 朱国兴 关键词:斑马鱼 ; 铁蓄积 ; 成骨代谢 机构:南京医科大学附属无锡市第二人民医院骨科 ; 南京医科大学附属无锡市第二人民医院骨科 年份:2017
    摘要:目的 通过对斑马鱼受精卵进行高铁环境干预,观察铁积蓄对斑马鱼幼鱼骨代谢的影响,探讨铁蓄积对于骨代谢的影响.方法 不同浓度的枸橼酸铁铵(ferric ammonium citrate,FAC) (25、50、100、200 mg/L)干预野生斑马鱼交配,收集鱼卵置于4个含相应FAC浓度的水环境中,每24小时予以更换含同样浓度FAC的水1次,同时设不含FAC为对照组,观察斑马鱼在不同铁环境下生存的情况.于第4天采用实时荧光定量聚合酶链反应(fluorescent quantification-polymerase chain reaction,FQ-PCR)法检测相关成骨代谢的基因表达,比较和对照组基因组的成骨下游基因的差异,并测量幼鱼的铁含量及铁染色,观察铁含量变化;于第9天进行茜素红染色,比较与对照组的硬骨形态差异.结果 不同浓度FAC处理后,斑马鱼骨矿化面积成剂量依赖性降低,其中200 mg/L FAC组与对照组对比T值为40.567(P<0.01);FQ-PCT结果显示:相关早期表达成骨代谢的基因表达量与对照组斑马鱼成骨基因表达相比显著下调,差异有统计学意义(P<0.05);铁染色结果显示:FAC组斑马鱼色素沉着变深,与对照组相比,100和200 mg/L两组的幼鱼铁含量升高[(21.5±3.4) μg/Lvs.(12.5±3.6)tμg/L,(22.8±2.9) μg/Lvs.(12.5±3.6) μg/L],差异有统计学意义(P<0.05);茜素红染色结果显示:与对照组相比,FAC组硬骨染色变浅且肋骨及尾鳍未发育.结论 高铁环境下造成斑马鱼体内铁蓄积,使斑马鱼成骨基因降低,造成骨发育迟缓,矿化障碍.
  • 【期刊】 CpG-ODN2006对斑马鱼抗创伤弧菌感染的作用

    刊名:福建农业学报 作者:陈华 ; 李素一 ; 张丽娟 ; 柯翎 ; 陈叙 ; 林晨韬 关键词:斑马鱼 ; CpG-ODN ; 创伤弧菌 ; 非特异性免疫 机构:福建省农业科学院生物技术研究所 ; 福建省农业科学院生物技术研究所 年份:2018
    摘要:为创建环境友好的免疫预防技术,分析CpG-ODN对斑马鱼抗创伤弧菌感染的作用,采用PBS(对照)和人工合成的CpG-ODN 2006(试验组)序列分别注射斑马鱼,48 h后创伤弧菌FJ03-X2进行攻毒,收集斑马鱼的肠道和肾脏组织提取RNA,逆转录成cDNA,通过Real-time RT-PCR检测相关基因的表达.结果表明,24 h后CpG-ODN2006组的免疫保护率高达70.0%;相关免疫基因表达检测结果发现CpG-ODN 2006组肠道中lysozyme、Myd88、tlrs和tnf的mRNA水平显著下调,而il1b和il 10则显著上调;肾脏中的基因表达差异更为明显:lysozyme显著上调,il1b、myd88、tnf、ifng1-2、il10、il22均显著下调.结果表明CpG-ODN 2006通过调节斑马鱼肾脏及肠道中非特异性免疫相关基因的表达,维持免疫系统的平衡,增强抗创伤弧菌FJ03-X2感染的能力.
  • 【期刊】 三丁基锡暴露对斑马鱼体脂的影响

    刊名:环境与职业医学 作者:徐剑 ; 纪磊 ; 李楠 ; 郑欢图 ; 钱浙斌 ; 林师道 ; 朱心强 关键词:斑马鱼 ; 三丁基锡 ; 肥胖 ; 体质量指数 ; 肝脂肪变性 机构:浙江省化工研究院有限公司生测安评中心 ; 浙江省化工研究院有限公司生测安评中心 ; 浙江大学营养学食品安全研究所 年份:2018
    摘要:[目的]研究三丁基锡对斑马鱼体脂的影响。[方法]采用受精后7 d的AB品系斑马鱼设空白对照、溶剂对照及3个试验组,每组100尾,试验组剂量分别为12.5、25.0、50.0 ng/L三丁基锡,将幼鱼连续染毒至受精后30 d。麻醉后,测量其体质量指数(body mass index,BMI),检测三酰甘油、总胆固醇水平,并通过HE染色观察其肝脏病理变化,冰冻切片油红O染色观察其肝脏脂肪变化。[结果]25.0、50.0 ng/L三丁基锡组的体重、BMI、三酰甘油水平较空白对照组升高(P<0.01);体重分别为(2.66±0.33)、(3.72±0.58)、(1.16±0.25)mg,BMI分别为(0.07±0.02)、(0.10±0.03)、(0.03±0.01)mg/mm~2,三酰甘油水平分别为(24.41±0.80)、(29.47±0.79)、(17.87±0.50)μmol/g(以每g蛋白计)。各剂量组总胆固醇水平与空白对照组间差异无统计学意义。HE染色结果显示25.0、50.0 ng/L剂量组中部分幼鱼肝脂肪变性。50.0 ng/L剂量组中肝组织油红O着色较空白对照组明显加深。[结论]三丁基锡可增加斑马幼鱼脂肪水平,具有致肥胖作用。
  • 【期刊】 低氧对斑马鱼细胞存活能力的影响

    刊名:南方农业学报 作者:武晓会 ; 刘洋 ; 狄治朝 ; 赵文静 ; 王丛丛 ; 许强华 关键词:斑马鱼 ; ZF-4细胞 ; 低氧 ; 氧化应激 ; 抗氧化酶 ; 存活能力 机构:上海海洋大学 ; 上海海洋大学 ; 海洋科学学院 ; 上海海洋大学 ; 海洋科学学院 ; 大洋渔业资源可持续开发省部共建教育部重点实验室 年份:2018
    摘要:[目的]明确低氧对斑马鱼细胞存活和抗氧化酶系统的影响,为揭示鱼类细胞低氧适应机理打下基础.[方法]采用不同浓度低氧处理斑马鱼胚胎上皮细胞(ZF-4细胞),检测低氧对其存活率的影响,并分析低氧应激下ZF-4细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮合酶(NOS)活性及丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的变化.[结果]1.0%O2处理可促进ZF-4细胞存活;SOD活性呈先降低后升高的变化趋势,在处理24 h时达最高值;CAT活性呈先降低后升高再降低的波动变化趋势,于处理8 h时达最低值;GSH活性在处理16 h时达最高值,随后开始下降;MDA含量与对照组无显著差异(P>0.05);NO含量和NOS活性在处理16 h时达最高值.经0.1%O2处理8 h后ZF-4细胞的存活率达最高值;SOD活性在处理24 h时显著高于对照组(P<0.05,下同);经0.1%O2处理后CAT活性极显著降低(P<0.01,下同),GSH活性则从处理8 h后极显著高于对照组;MDA含量显著或极显著降低;NO含量和NOS活性极显著降低.[结论]在极端缺氧环境下,斑马鱼细胞主要通过提高SOD和GSH等抗氧化酶活性以提高细胞的低氧适应能力,从而促进细胞存活.
  • 【期刊】 人参水煎液对斑马鱼血管生长作用

    刊名:辽宁中医药大学学报 作者:魏易洪 ; 周忠焱 ; 朱灵妍 ; 王少锋 ; 赵慧珍 ; 曹敏 ; 周端 ; 唐靖一 关键词:斑马鱼 ; 人参 ; 血管生长 机构:上海中医药大学附属龙华医院 ; 上海中医药大学附属龙华医院 ; 上海黄楼社区卫生服务中心 年份:2017
    摘要:目的:观察生晒参水煎液对斑马鱼血管生长的作用,为人参的临床应用提供理论依据。方法:选用转基因斑马鱼(fli1a-EGFP),建立正常血管生长模型和内皮细胞生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(VRI)诱导的血管损伤模型,使用不同浓度生晒参水煎液进行干预,分别观察斑马鱼肠下静脉和节间血管的情况。结果:斑马鱼正常血管生长模型中,生晒参水煎液各浓度组与对照组的肠下静脉平均出芽数、平均交叉数和血管直径无明显差异(P>0.05)。斑马鱼血管损伤模型中,与正常组比较,VRI组及人参水煎液各浓度组的完整型血管明显减少,缺陷型血管增多(P<0.01);与VRI组比较,人参水煎液3μg/m L组的完整型血管明显增多(P<0.05),缺陷型血管明显减少(P<0.01),100μg/m L组完整型血管明显减少(P<0.05),余无统计学差异(P>0.05)。结论:人参水煎液不能促进斑马鱼正常血管生长,但在较低浓度时可以抑制VRI诱导的血管损伤,而高浓度时则相反。
  • 【期刊】 斑马鱼胚胎背腹轴建立的分子机制

    刊名:中国实验动物学报 作者:闫一芳 ; 王强 关键词:斑马鱼 ; 背腹轴建立 ; Wnt信号通路 ; BMP信号通路 机构:中国科学院动物研究所膜生物学国家重点实验室 ; 中国科学院动物研究所膜生物学国家重点实验室 ; 中国科学院大学存济医学院 年份:2019
    摘要:脊椎动物胚胎发育起始于体轴的建立,是胚胎早期发育过程中最重要的事件之一。Wnt、BMP、Nodal和FGF等多个信号通路协同调控细胞分化和细胞运动,促进胚胎胚层的形成和空间上的分离,调控胚胎背腹轴、前后轴和左右轴线的分化,为胚胎进一步发育勾勒出蓝图。本文主要综述斑马鱼胚胎背腹轴建立的分子机制,包括背部组织中心简介;母源Wnt/β-catenin信号调控背部组织中心形成的分子机制;BMP信号调控背腹轴建立的分子机制。
  • 【期刊】 基于斑马鱼幼鱼模型的甘遂毒性评价

    刊名:天津中医药 作者:梅雪 ; 罗隽 ; 夏青 ; 冯娅茹 ; 索亚然 ; 李二文 ; 王昭懿 ; 马志强 ; 林瑞超 关键词:斑马鱼 ; 甘遂 ; 毒性评价 机构:北京中医药大学 ; 北京中医药大学 ; 中药品质评价北京市重点实验室 年份:2018
    摘要:[目的]以模式生物斑马鱼幼鱼为模型,评价甘遂不同溶剂连续提取物毒性差异及毒性特征。[方法]采用索氏提取法获得甘遂不同溶剂连续提取物。通过预实验,确定各提取物72 h最大不致死浓度和最小全致死浓度。在此区间设定6~8个药物浓度,建立致死曲线,计算半数致死浓度(LC50)。以毒性最大提取物的10%致死浓度(LC10)、最小致死浓度(LC1)、1/3 LC1和1/10 LC1为给药浓度,同时设立空白组和溶剂对照组,连续给药72 h,观察甘遂毒性特征。停药后将幼鱼置于养殖水中恢复48 h,观察毒性可逆性。[结果]甘遂不同提取部位毒性顺序为石油醚〉二氯甲烷〉乙酸乙酯〉乙醇提取物。甘遂的主要毒性为肝毒性和胃肠道刺激性。肝毒性既可造成肝肿大,又可导致肝变性,肝肿大不可逆,而肝变性具有可逆性。[结论]本实验首次利用单个模型以相同浓度单次给药,同时评价了甘遂对心脏、肝脏、肾脏、神经系统和胃肠道等脏器系统的毒性作用及可逆性。实验结果证实了甘遂的毒性集中于石油醚提取部位,并可对肝脏和胃肠道造成实质性损伤。本实验为斑马鱼模型在中药毒性评价中的应用提供了参考。
  • 【期刊】 铁过载对斑马鱼成骨影响的机制

    刊名:《中国骨质疏松杂志》 作者:姜宇 ; 阎一林 ; 朱国兴 ; 徐又佳 关键词:高通量转录组测序 ; 成骨基因 ; 转基因鱼 ; 骨形态发生蛋白2通道 机构:南京医科大学附属无锡市第二人民医院 ; 南京医科大学附属无锡市第二人民医院 ; 美国俄勒冈州立大学 ; 苏州大学附属第二医院骨科 年份:2016
    摘要:目的通过高通量转录组的方法测序高铁环境生存的斑马鱼与和野生型的斑马鱼,通过比较筛选出铁过载对于成骨影响的通道,通过在体以及离体的一系列实验证实铁过载对这些通道的作用。方法通过在斑马鱼高铁环境下生存,造成斑马鱼铁过载,在4天后提取其RNA和野生型斑马鱼提取的RNA进行高通量转录组测序比较,筛选出成骨Bmp2通道,并用定量QPCR验证。在体实验中将Runx2a标记的转基因斑马鱼在高铁环境下与正常环境在第九天进行比较,观察其荧光的变化;离体实验中,用Bmp2a带标签的c DNA和Runx2a带标签的c DNA的细胞进行转染,进行荧光素酶报告基因实验,然后用铁干预,观察其变化。结果通过高通量转录组测序发现高铁对于Bmp2抑制,并用定量验证发现铁过载后Runx2a,Runx2b,sp7等成骨基因均下调,观察发现Runx2a标记的转基因斑马鱼高铁环境下与正常环境相比基因表达明显下调,在细胞转染实验中,荧光素酶报告基因Runx2a在Bmp2a转染下大幅升高,转染铁后Runx2a下降。结论通过高通量转录组测序,我们发现铁过载对于BMP2的抑制影响,运用在体以及离体的一系列实验证实铁过载对Bmp2的抑制作用从而导致成骨代谢的异常。
  • 【期刊】 铁过载对斑马鱼成骨影响的机制

    刊名:中国骨质疏松杂志 作者:姜宇[1] 阎一林[2] 朱国兴[1] 徐又佳[3] 关键词:高通量转录组测序 成骨基因 转基因鱼 骨形态发生蛋白2通道 机构:南京医科大学附属无锡市第二人民医院 ; 南京医科大学附属无锡市第二人民医院 年份:2016
    摘要:目的通过高通量转录组的方法测序高铁环境生存的斑马鱼与和野生型的斑马鱼,通过比较筛选出铁过载对于成骨影响的通道,通过在体以及离体的一系列实验证实铁过载对这些通道的作用。方法通过在斑马鱼高铁环境下生存,造成斑马鱼铁过载,在4天后提取其RNA和野生型斑马鱼提取的RNA进行高通量转录组测序比较,筛选出成骨Bmp2通道,并用定量QPCR验证。在体实验中将Runx2a标记的转基因斑马鱼在高铁环境下与正常环境在第九天进行比较,观察其荧光的变化;离体实验中,用Bmp2a带标签的c DNA和Runx2a带标签的c DNA的细胞进行转染,进行荧光素酶报告基因实验,然后用铁干预,观察其变化。结果通过高通量转录组测序发现高铁对于Bmp2抑制,并用定量验证发现铁过载后Runx2a,Runx2b,sp7等成骨基因均下调,观察发现Runx2a标记的转基因斑马鱼高铁环境下与正常环境相比基因表达明显下调,在细胞转染实验中,荧光素酶报告基因Runx2a在Bmp2a转染下大幅升高,转染铁后Runx2a下降。结论通过高通量转录组测序,我们发现铁过载对于BMP2的抑制影响,运用在体以及离体的一系列实验证实铁过载对Bmp2的抑制作用从而导致成骨代谢的异常。
  • 【期刊】 氯化钡对斑马鱼心脏毒性的初步研究

    刊名:中国药理学通报 作者:石亚楠 ; 姚磊 ; 王佑华 ; 李强 ; 符德玉 关键词:斑马鱼 ; 氯化钡 ; 心律失常 ; 心脏毒性 ; 心率 ; 心脏损伤 机构:上海中医药大学附属岳阳医院心内科 ; 上海中医药大学附属岳阳医院心内科 ; 上海中医药大学附属龙华医院心内科 ; 复旦大学附属儿科医院儿科研究所 年份:2019
    摘要:斑马鱼是重要的模式生物之一,在心血管药物的筛选与评价方面发挥着重要的作用。心脏荧光转基因(cmlc2:GFP)斑马鱼有利于心脏形态与结构的观察[1]。氯化钡已广泛应用于抗心律失常的研究中[2-3],但其对斑马鱼心脏的影响报道较少。因此,本实验探究氯化钡对斑马鱼的心脏毒性,为构建斑马鱼心脏毒性模型提供依据。1 材料与方法1.1 药物与实验动物氯化钡试剂购自国药集团化学试剂有限公司,分子式为BaCl2·2H2O,纯度≥99.5%
  • 【期刊】 玻璃化冻存对斑马鱼卵母细胞的影响

    刊名:水产科学 作者:方晨 ; 韦祥相 ; 张钊 ; 李贤梅 ; 张小雪 关键词:斑马鱼 ; 卵母细胞 ; 玻璃化冻存 ; 谷胱甘肽 ; 线粒体三磷酸腺苷酶 机构:贵州大学动物科学学院水产系 ; 贵州大学动物科学学院水产系 年份:2017
    摘要:采用比色法测定了在不同玻璃化冻存液中冻存1、2、4、8d时斑马鱼卵母细胞中谷胱甘肽含量和三磷酸腺苷酶的活性,以研究玻璃化冻存对卵母细胞谷胱甘肽含量和线粒体三磷酸腺苷酶活性的影响。试验结果显示,V4组斑马鱼(玻璃化液组分是:1.5mol/L甲醇、6.0mol/L乙二醇、0.25mol/L蔗糖)卵母细胞冻存1、2、4、8d后存活率最高[分别为(48.89±2.58)%、(39.35±1.34)%、(24.18±2.32)%和(14.56±1.64)%],显著高于其他组。经玻璃化冻存后,斑马鱼卵母细胞谷胱甘肽含量和线粒体三磷酸腺苷酶活性均随冻存天数的增加而显著下降(P<0.05)。V4组的谷胱甘肽含量[(13.37±0.59)mg/g]和线粒体三磷酸腺苷酶活性较高,线粒体Ca~(2+)-三磷酸腺苷酶[(3.823±0.144)U/mg]、Mg~(2+)-三磷酸腺苷酶[(4.503±0.144)U/mg]和Na~+/K~+-三磷酸腺苷酶[(7.520±0.198)U/mg]活性最高。各组细胞的活性随着冻存天数的增加而逐渐下降。试验结果表明,玻璃化冻存不能完全避免低温和冷冻保护剂的毒性和对卵母细胞的损伤。
  • 【期刊】 CpG-ODN 2006对斑马鱼抗创伤弧菌感染的作用

    刊名:福建农业学报 作者:陈华 ; 李素一 ; 张丽娟 ; 柯翎 ; 陈叙 ; 林晨韬 关键词:斑马鱼 ; CPG-ODN ; 创伤弧菌 ; 非特异性免疫 机构:[1]福建省农业科学院生物技术研究所 ; [1]福建省农业科学院生物技术研究所 年份:2018
    摘要:为创建环境友好的免疫预防技术,分析CpG-ODN对斑马鱼抗创伤弧菌感染的作用,采用PBS(对照)和人工合成的CpG-ODN 2006(试验组)序列分别注射斑马鱼,48 h后创伤弧菌FJ03-X2进行攻毒,收集斑马鱼的肠道和肾脏组织提取RNA,逆转录成cDNA,通过Real-time RT-PCR检测相关基因的表达。结果表明,24 h后CpG-ODN 2006组的免疫保护率高达70.0%;相关免疫基因表达检测结果发现CpG-ODN 2006组肠道中lysozyme、Myd88、tlrs和tnf的mRNA水平显著下调,而il1b和il10则显著上调;肾脏中的基因表达差异更为明显:lysozyme显著上调,il1b、myd88、tnf、ifng1-2、il10、il22均显著下调。结果表明CpG-ODN 2006通过调节斑马鱼肾脏及肠道中非特异性免疫相关基因的表达,维持免疫系统的平衡,增强抗创伤弧菌FJ03-X2感染的能力。
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