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  • 【专利】 一个高产药用天然产物的硬紫草转基因毛状根株系

    摘要:本发明公开了一个能高产药用天然产物(紫草宁及其衍生物)的硬紫草的转基因毛状根株系。该株系是通过构建一个硬紫草乙烯合成的关键酶基因(LeACS-1)的植物过表达载体,然后将该载体转入发根农杆菌ATCC15834后侵染硬紫草无菌苗而获得。该株系所产紫草宁及其衍生物的含量是直接用ATCC15834侵染硬紫草无菌苗所获得的毛状根株系的2.73倍。另外,该株系亦易于繁殖、生长迅速。本发明不仅可有效解决我国野外硬紫草资源日益短缺、人工栽培周期长、受气候及地理条件等因素制约等问题,并且可高效大量生产硬紫草药用天然产物。该高产株系将为利用硬紫草毛状根工厂化生产硬紫草药用天然产物提供材料支撑,具有广阔的开发应用前景。
  • 【期刊】 乙烯对植物次生代谢产物合成的双重调控效应

    刊名:植物学报 作者:戚金亮 ; 方荣俊 ; 赵华 ; 廖永辉 ; 汤程贻 ; 吴凤瑶 ; 朱煜 ; 庞延军 ; 陆桂华 ; 王小明 ; 杨荣武 ; 杨永华 关键词:乙烯 ; 次生代谢产物 ; 信号转导途径 ; 双重调控 机构:南京大学生命科学学院 ; 南京大学生命科学学院 ; 植物分子生物学研究所 ; 医药生物技术国家重点实验室 ; 江苏科技大学 ; 南通大学 ; 南京大学淮安高新技术研究院 年份:2014
    摘要:植物次生代谢产物是人类重要的药物及化工原料来源,其产生与植物正常的生长发育及对环境的适应密切相关,并受到多种因素的调控。乙烯作为一种植物内源激素,广泛参与植物的生长、发育、抗逆和次生代谢产物合成等重要生理过程的调控。该文综述了乙烯的信号转导机制及其调控作用;重点归纳了乙烯对植物次生代谢产物形成所表现出的双重调控效应,即在一定浓度范围内,乙烯对植物次生代谢产物的合成起促进作用,低于或超过该浓度范围则起抑制作用;并对今后该领域的研究方向进行了展望。
  • 【期刊】 酸性土壤中大豆根际微生物群体感应的初步研究

    刊名:中国油料作物学报 作者:戚金亮 ; 刘玥 ; 华小梅 ; 郭靖 ; 扈冬青 ; 朱敏敏 ; 杨统一 ; 李永春 ; 杨永华 关键词:大豆 ; 酸性土壤 ; 铝毒 ; 根际微生物 ; 群体感应 ; AHL 机构:南京大学生命科学学院 ; 南京大学生命科学学院 ; 医药生物技术国家重点实验室 ; 南京大学-南京林业大学植物分子生物学联合研究所 ; 环境保护部南京环境科学研究所 年份:2013
    摘要:采用盆栽及室内模拟实验对铝胁迫下大豆根际微生物的群体感应进行了初步探索。利用高效检测菌株根癌农杆菌Agrobaoterium tumefaciens KYC55(pJZ372;pJZ384;pJZ410)对在酸性土壤中种植了耐铝大豆BX10和铝敏感大豆BD2的根际土、非根际土中群体感应信号分子高丝氨酸酰基内酯(AHL)进行检测。结果表明,在大豆根际土中AHL活性显著高于非根际土,且BX10根际土中AHL含量显著高于BD2(P<0.01);随大豆生长时期的推移,BX10和BD2根际土及非根际土中AHL均逐渐升高。模拟酸铝环境的室内实验表明,不同浓度的铝胁迫对中华根瘤菌Sinorhizobium sp.1128的生长、AHL产生水平、胞外多糖的产生以及根毛吸附作用均产生显著影响,从而进一步验证了铝胁迫对群体感应的影响。
  • 【专利】 针刺幼苗茎节法高效诱导紫草毛状根的产生及应用

    作者:戚金亮 ; 赵胡 ; 夏红梅 ; 杨永华 ; 邹爱兰 ; 刘洪昌 ; 丁燕雯 ; 朱煜 年份:2010
    摘要:本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种采用发根农杆菌侵染紫草幼苗茎节诱导产生毛状根的方法,并用此毛状根生产药用次生代谢产物(如紫草宁及其衍生物等)。具体内容涉及紫草无菌苗的获得、发根农杆菌ATCC15834菌株的活化及侵染方法、毛状根除菌培养、毛状根的分子鉴定及大量繁殖、应用此毛状根在M9和RC培养基中大量生产药用次生代谢产物。本发明为紫草毛状根的产生提供了一种高效快速的诱导方法,并为利用此毛状根大量商业化生产药用次生代谢产物提供了一种新的途径。
  • 【期刊】 太湖蓝藻水华污染对黄颡鱼遗传多样性的影响

    刊名:江苏农业科学 作者:戚金亮 ; 祖慧琳 ; 朱煜 ; 郑典元 ; 刘昊琰 ; 张浩 ; 杨永华 ; 杨荣武 关键词:RAPD ; 黄颡鱼 ; 蓝藻水华 ; 遗传多样性 机构:连云港师范高等专科学校 ; 连云港师范高等专科学校 年份:2012
    摘要:利用随机扩增多态性DNA分子标记技术,对江苏太湖和安徽升金湖共4个区域的黄颡鱼种群中共192条个体进行遗传多样性的比较,并分析太湖蓝藻水华产生的藻毒素及其衍生污染物的复合污染对种群遗传结构的影响。在试验的引物中筛选出6条在PCR扩增时能得到清晰、稳定性和重复性好条带的引物,各引物扩增得到的总位点数为8~18个,多态位点比率为50.00%~100.00%,其中胥口湾黄颡鱼的多态位点比率呈现最高(86.46%),而梅梁湾黄颡鱼最低(67.71%)。4个黄颡鱼种群的Shannon指数和Nei基因多样性指数大小都表现出和多态位点比率一致的趋势,即胥口湾黄颡鱼>升金湖黄颡鱼>东太湖黄颡鱼>梅梁湾黄颡鱼。由此可见,即使实际距离相隔不远,不同水质环境下黄颡鱼种群的多样性已经表现出一定程度的差异,并且随着水环境污染的严重,黄颡鱼的多样性也随之降低。在水质最佳的胥口湾区域,多样性呈现最高,作为对照区域的升金湖区域,其种群多样性同样也高于污染严重区域的梅梁湾地区。总体来看,近年来太湖蓝藻水华产生的环境污染在一定程度上影响着生物多样性,因此改善环境,保护生物多样性刻不容缓。
  • 【期刊】 不同大豆品种对根际土壤微生物群落影响的差异

    刊名:南京林业大学学报(自然科学版) 作者:戚金亮 ; 钱秋平 ; 杨统一 ; 程林润 ; 李永春 ; 杨永华 关键词:大豆 ; 根际微生物 ; 红壤 ; 磷脂脂肪酸 机构:金华市农业科学研究院 ; 金华市农业科学研究院 ; 南京大学-南京林业大学植物分子生物学联合研究所 年份:2010
    摘要:采用磷脂脂肪酸(phospholipid fatty acid,PLFA)分析法研究4个大豆品种(台湾75、中黄42、春丰早和六月半)对根际土壤微生物区系的影响。结果发现:尽管不同大豆品种在红壤(黄筋泥土)中的生物量和产量差别很大,但对根际土壤好氧菌、厌氧菌、革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、放线菌和原生动物的影响不大;六月半品种显著影响根际土壤真菌PLFA总量,改变了细菌/真菌的比值;与六月半相比,春丰早显著增加了根际微生物群落的多样性、群落的优势种群和均匀度;中黄42显著提高了根际微生物群落优势种群的丰富度;中黄42和台湾75对根际土壤微生物Shannon均匀度的影响也有显著差异;但是4种大豆品种对根际土壤微生物群落的McIn-tosh和Gini多样性指数没有显著影响。主成分分析结果表明,六月半和中黄42品种对根际微生物的影响差异明显,而春丰早和台湾75变化相近,差异不明显。
  • 【期刊】 桑树幼叶cDNA文库的构建及部分表达序列标签分析

    刊名:蚕业科学 作者:戚金亮 ; 方荣俊 ; 扈冬青 ; 赵卫国 ; 汪伟 ; 张林 ; 刘利 ; 潘刚 ; 沈兴家 ; 潘一乐 ; 杨永华 关键词:桑树 ; cDNA文库 ; RNA转录5′末端转换 ; 表达序列标签 机构:江苏科技大学生物与环境工程学院 ; 江苏科技大学生物与环境工程学院 ; 中国农业科学院蚕业研究所 ; 农业部家蚕生物技术重点开放实验室 ; 南京大学生命科学学院 ; 中国农业科学院蚕业研究所农业部家蚕生物技术重点开放实验室 年份:2008
    摘要:基于为鉴定和克隆桑树功能基因提供基础信息的目的,采用RNA转录5′末端转换(SMART)法构建了桑树幼叶全长cDNA文库。该文库容量为1.02×106pfu/mL,重组率95%,符合构建基因文库的质量要求。从构建的桑树幼叶cDNA文库中随机挑取48个克隆进行表达序列标签(EST)测序,有效序列为32条,经UniGene数据库归并后为32条,UniGene比率为100%;与NCBI核酸数据库进行比对、查询和注释,在32条序列中有29条序列具有同源性,其中16条为全长序列,完整性比率为55.2%;初步发现具有已知功能基因的ESTs 6个,具有推测功能基因的ESTs 5个,未命名或未知功能基因的ESTs 21个。
  • 【期刊】 紫草宁脂质体质量控制和抑制HUVEC细胞VEGF基因表达的研究

    刊名:上海中医药杂志 作者:戚金亮 ; 夏红梅 ; 邹爱兰 ; 王小明 ; 杨永华 关键词:紫草宁 ; 紫草宁脂质体 ; 质量控制 ; 血管内皮生长因子基因表达 ; 缓慢释放 机构:南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室 ; 南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室 ; 安徽中医学院 年份:2013
    摘要:目的探讨紫草宁脂质体的质量控制方法及其对HUVEC细胞VEGF基因表达水平的影响。方法采用大豆卵磷脂、胆固醇等膜材料将药物紫草宁包囊在脂质体中,对其外观大小、Zeta电位、含量、包封率进行质量控制,将紫草宁脂质体放置不同的环境中进行稳定性考察。采用Q-PCR技术研究紫草宁及其脂质体对HUVEC细胞VEGF基因水平的影响。结果紫草宁脂质体的颗粒小于220 nm;Zeta电位大于30 mv;三批样品含量为0.22 g/L,0.21 g/L,0.21 g/L;包封率分别为51.50%,81.31%,96.72%;紫草宁脂质体在4℃环境下较为稳定。紫草宁及其脂质体对HUVEC细胞VEGF基因表达有下调作用。结论紫草宁及其脂质体通过抑制VEGF基因,从而抑制VEGF蛋白的表达,最终抑制血管新生。紫草宁脂质体的抑制作用较紫草宁弱,是脂质体中的紫草宁从中缓慢释放的结果。
  • 【专利】 大豆根际土壤微生物群落宏基因组文库的构建及其应用

    摘要:本发明属于环境微生物学技术领域,具体涉及大豆根际土壤宏基因组文库的构建及其应用,其特征包括根际土壤样本获得、菌体细胞回收、细菌基因组DNA提取、DNA酶切及与pUC19连接、转化大肠杆菌后蓝白斑筛选得到阳性克隆,及构建成含9504个阳性克隆的宏基因组文库,随机挑取克隆测序并进行生物信息学分析。该发明在明确根际微生物群落(包括固氮菌群)结构、遗传、功能多样性具有重要的意义,并为深入探讨其在改善土壤营养状况中的作用机制、开发利用大豆根际土壤中的不可培养微生物资源及深入揭示整个土壤微生物群落的生态过程和功能提供重要的信息,具有重要的应用价值。
  • 【期刊】 紫草LePS-2基因启动子的克隆及序列分析

    刊名:南京中医药大学学报 作者:戚金亮 ; 丁燕雯 ; 朱煜 ; 邹爱兰 ; 杨永华 关键词:紫草 ; LePS-2 ; 启动子 ; 染色体步移 ; 调控元件 机构:南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室 ; 南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室 ; 南京大学-南京林业大学植物分子生物学联合研究所 年份:2012
    摘要:目的克隆紫草LePS-2基因的启动子,分析该启动子的调控元件,为研究LePS-2基因的表达调控机制奠定基础。方法以紫草愈伤组织基因组DNA为模板,利用Genome walking技术扩增LePS-2基因上游启动子序列,将序列提交至PLACE网站对该启动子进行调控元件预测。结果获得LePS-2基因启动子区域序列1164bp,PLACE软件分析表明,该启动子中存在根特异性元件、暗诱导性元件、激素应答与调节相关元件以及一些转录因子结合位点等。结论启动子元件ATATT和YTCANTYY可能分别赋予LePS-2表达的根特异性和暗诱导性;另外在LePS-2基因启动区域还发现MJ应答元件TGACG,表明MJ有可能参与对LePS-2的表达调控。
  • 【期刊】 甘薯质膜相对透性和水分状况与品种抗旱性的关系

    刊名:华南农业大学学报 作者:戚金亮 ; 张明生 ; 杜建厂 ; 杨春贤 ; 杨永华 ; 谈锋 关键词:甘薯 ; 水分胁迫 ; 抗旱性 ; 质膜相对透性 ; 水分状况 机构:南京大学生命科学学院 ; 南京大学生命科学学院 ; 南京大学生命科学学院 ; 南京大学生命科学学院 ; 西南师范大学生命科学学院 ; 南京大学生命科学学院 ; 西南师范大学生命科学学院 ; 贵州大学农学院 年份:2006
    摘要:对水分胁迫下甘薯植株质膜相对透性(RPP)和水分状况与品种抗旱性关系的研究结果表明,水分胁迫下不同甘薯品种叶片的RPP和水分饱和亏(W SD)均明显增大,叶片相对含水量(wRW)、自由水与束缚水含量比值(wf/wb)及藤叶与块根含水量比对照均不同程度下降.wRW与品种抗旱性呈极显著正相关(r=0.908 0,P<0.01),RPP、W SD、wf/wb及块根含水量的相对值与品种抗旱性均呈极显著负相关(r=-0.679 7~-0.893 7,P<0.01),藤叶含水量的相对值与品种抗旱性间的相关性不显著(r=-0.367 5,P=0.177 8).因此,除藤叶含水量外,其余指标均可用于甘薯品种抗旱性的评定.
  • 【专利】 一种适于转基因植物土壤微生态系统评价的体系及其应用

    作者:戚金亮 ; 杨永华 ; 桂恒 ; 彭欣 ; 陈丰 ; 张培培 ; 杨荣武 ; 沈恒冠 ; 庞延军 年份:2010
    摘要:本发明属于土壤生态系统及微生物技术领域,具体涉及一种基于模糊数学和典范对应分析方法(canonicalcorrespondenceanalysis,CCA)来评价转基因植物种植对土壤微生态影响的技术体系及其应用。本方案提供了一种综合考虑土壤微生物与物理化学指标的评价方法,应用该方法可有效评价转基因作物种植对土壤微生态系统带来的影响,对于我国乃至全球转基因植物释放前的安全评价具有重大的理论意义和实用价值。
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