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  • 【期刊】 小鼠GM—CSF基因真核表达载体的构建及其表达活性的鉴定

    刊名:中国免疫学杂志 作者:张叔人 ; 高全立 ; 周春霞 ; 马文波 ; 张书岭 ; 王东梅 ; 张友会 关键词:GM-CSF基因 ; 基因表达 ; 免疫治疗 ; 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 ; T淋巴细胞瘤 ; 免疫治疗 机构:河南省血液病治疗中心 ; 河南省血液病治疗中心 ; 河南省肿瘤医院血液科 ; 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室 年份:2002
    摘要:目的:构建小鼠GM-CSF基因的高效真核表达载体,筛选导入该载体后高水平表达GM-CSF的小鼠淋巴瘤细胞系RMA,并探讨转GM-CSF基因瘤苗治疗小鼠T淋巴细胞瘤的方法.方法:PCR扩增小鼠GM-CSF cDNA 3'端770 bp的片段,将其插入真核表达载体pcDNA3;用电穿孔法将构建的载体导入小鼠淋巴瘤细胞系RMA,有限稀释法制备单个细胞克隆,经RT-PCR、骨髓祖细胞增殖实验和集落形成实验筛选相对高表达GM-CSF的RMA克隆,该克隆细胞经丝裂霉素灭活后免疫小鼠以诱导其产生抵抗RMA肿瘤细胞再攻击的能力.结果:构建的重组质粒含有预期片段,插入方向正确,核酸序列无误;且获得了高表达GM-CSF的RMA克隆,将其用丝裂霉素灭活免疫小鼠后使它们产生了抗肿瘤免疫保护力.结论:转GM-CSF基因瘤苗可能作为有效的抗T淋巴细胞瘤瘤苗.
  • 【期刊】 IL-1β、IL-8在非小细胞肺癌中的病理学和临床意义

    刊名:肿瘤防治杂志 作者:张叔人 ; 申维玺 ; 刘玉梅 ; 孙燕 关键词:癌,非小细胞肺 ; IL-1β ; IL-8 ; 免疫组织化学 机构:广州医学院临床肿瘤研究中心@广州市肿瘤医院 ; 广州医学院临床肿瘤研究中心@广州市肿瘤医院 ; 中国医学科学院@中国协和医科大学肿瘤医院@肿瘤研究所 年份:2004
    摘要:目的:研究白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素8(IL-8)在非小细胞肺癌中的阳性率及其与肺癌组织学类型、分化程度和病理TNM分期等的关系.方法:以术后大体肺石腊包埋组织为材料,用免疫组化方法测定了IL-1β、IL-8在肺癌细胞中的染色情况.结果:共选择88例肺癌患者,IL-1β、IL-8的阳性率分别是52例(59%)、49例(56%).IL-1β、IL-8与肺癌组织学类型、分化程度无明确的关系(P>0.05).Ⅰ期肺癌细胞IL-1β、IL-8染色的阳性率高于Ⅱ期和Ⅲ期肺癌(P<0.05).结论:IL-1β、IL-8在Ⅰ期肺癌的阳性率高于Ⅱ期和Ⅲ期肺癌,说明早期肺癌患者的细胞因子反应状态和免疫功能较好.
  • 【期刊】 结直肠癌患者外周血CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞检测及其表型分析

    刊名:中国肿瘤临床与康复 作者:张叔人 ; 梁建明 ; 钟永 ; 解亦斌 ; 马洁 关键词:结直肠肿瘤 ; 调节性T淋巴细胞 机构:中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所中心实验室 ; 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所中心实验室 ; 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤研究所免疫室 ; 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院腹部外科 年份:2010
    摘要:目的分析CD4+ CD25high T细胞(Treg)在50例结直肠癌患者外周血中的分布及其表型特征,初步探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测结直肠癌患者及健康人外周血中Treg的比例,探讨其表型特征并分析Treg比例与临床分期间的关系。结果与正常对照(3.1±1.46)%相比,结直肠癌患者外周血中Treg比例明显增加(11.22±5.47)%,二者差异有显著统计学意义(P<0.01);手术后,患者外周血中Treg的比例相比术前显著下降(P<0.01);患者外周血CD4+ CD25high T细胞水平在疾病的临床分期间差异无显著性(P>0.05)。表型分析显示:Treg高表达CD45RO、HLA-Ⅰ、Foxp3分子,较高水平表达OX40、GITR、CD152、CD95、CD95L、B7-H1,较低水平表达CD62L,低表达CD80、CD86、B7-H4分子,基本不表达CD45RA、CD69分子,HLA-DR、CD154的表达水平在个体间差异较大,同时大部分细胞CD127表达阴性。结论结直肠癌患者外周血CD4+ CD25high T细胞水平明显升高,可能与患者肿瘤免疫功能低下密切相关。
  • 【期刊】 非B淋巴细胞来源的恶性肿瘤细胞中存在Ig重链片段的表达

    刊名:中国肿瘤生物治疗杂志 作者:张叔人 ; 陈璇 ; 张伟 ; 周春霞 ; 马文波 ; 张友会 ; 邱晓彦 关键词:IgH ; 癌细胞 ; RT-PCR 年份:1999
    摘要:免疫球蛋白Ig是由两条重链及两条轻链组成的糖蛋白,分别由定位于不同染色体上的3个不连锁的Igc,Igλ,IgH基因所编码.目前的免疫学理论认为,在正常的机体内,Ig基因只有在B细胞来源的细胞中进行选择性重排及表达,是B淋巴细胞的特有产物.然而,我们曾用免疫学方法检测表明癌细胞可能表达免疫球蛋白.近期设计了23条PCR引物,分别位于Ig重链前导,肽区,FRIJ链区,恒定区,并用RTPCB的方法对4个来源于人的恶性肿瘤细胞系HT-29(大肠癌),MCF-7(乳腺癌),HeLaMR(宫颈癌),PC3M(前列腺癌)及来源于健康人外周血的单个核细胞的阳性对照进行了检测.
  • 【期刊】 冷冻联合免疫疗法治疗小鼠B16黑素瘤

    刊名:肿瘤 作者:张叔人 ; 张保宁 ; 周春霞 ; 曲平 ; 袁兴华 ; 高峰 ; 李景敏 ; 关秋平 ; 张友会 关键词:免疫治疗 ; 冷冻疗法 ; 肿瘤细胞 ; 培养的 机构:中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院外科 ; 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院外科 ; 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院 年份:2000
    摘要:目的 探讨冷冻治疗附加免疫治疗可能获得更好的抗肿瘤疗效。方法  B16黑素瘤皮下接种 C5 7BL / 6小鼠 ,待肿瘤长至 3mm~ 5 m m时荷瘤鼠分为四组。 1冷冻免疫组 :第 0天 ,用深部冷冻治疗仪治疗荷瘤鼠 1次。冷冻治疗前2天每只小鼠腹腔注射 1mg环磷酰胺 1次 ,肿瘤局部每天注射 IFN -α 5万单位 ,共 2天。从第 0天至第 10天 ,每天给小鼠注射 1万单位 r IL - 2。 2、3、4组分别为冷冻治疗组、免疫治疗组和未治疗对照组。根据肿瘤大小和存活时间评价疗效。用 3H- Td R释放法测定脾细胞的细胞毒活性。结果 肿瘤接种后第 31天 ,仅第 1组肿瘤平均大小与对照组相比有显著差异 (P<0 .0 1)。各组平均存活期依次为 6 8.7、5 5 .3、5 1.6和41天。肿瘤完全缓解率组 1为 43.8% ,组 2为 11.8% ,而其他两组无 1例缓解。组 1治愈小鼠用 B16再次攻击均未产生肿瘤。组 1小鼠脾细胞体外细胞毒实验按效靶比为 5 0∶ 1时 ,对 B16的杀伤率为 42 .1% ,对 EL 4杀伤仅为 3.5 %。结论 用 IFN -α和 r IL - 2免疫治疗协同冷冻治疗可能通过诱发全身性、特异性抗肿瘤免疫反应 ,获得更好的疗效。
  • 【期刊】 HL-60细胞Ig样蛋白的表达及IgH V-D-J序列分析

    刊名:中华血液学杂志 作者:张叔人 ; 邱晓彦 ; 侯春梅 ; 沈继铭 ; 唐佩弦 ; 毛宁 机构:中国医学科学院 ; 中国医学科学院 ; 中国协和医科大学肿瘤研究所 年份:1999
    摘要:HL60为髓系白血病传代细胞,在诱导分化的条件下,可向粒细胞及单核细胞分化。到目前为止,未见到该细胞可向B细胞分化及产生免疫球蛋白(Ig)的研究报道。然而,我们在探讨癌细胞内的Ig样蛋白表达情况时,偶然发现HL60细胞内也同多种上皮来源的肿瘤细胞...
  • 【期刊】 应重视肿瘤生物治疗的质量控制问题

    刊名:中华医学杂志 作者:张叔人 机构:中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室 ; 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室 年份:1996
    摘要:应重视肿瘤生物治疗的质量控制问题⒇张叔人随着分子生物医学的发展,肿瘤抗原和T细胞识别机制研究不断深入,同时也推动了肿瘤生物治疗研究的进展。肿瘤生物治疗研究,涉及细胞水平、分子水平和基因水平三方面的工作,目前均处于萌芽状态,尚未成熟,尚不能与手术、放射...
  • 【期刊】 人白细胞介素15cDNA克隆及其在大肠杆菌中的表达

    刊名:中国肿瘤生物治疗杂志 作者:张叔人 ; 王盛典 ; 张友会 年份:1997
    摘要:白细胞介素15(IL-15)是近几年新发现的细胞因子,为了深入研究该因子,找们从人单核细胞中克隆了IL-15的cDNA,构建了原核表达质粒,并成功地制备了高纯度基因重
  • 【期刊】 B7基因转导非免疫原性肿瘤B16并联合应用IFN-γ的抗肿瘤研究

    刊名:中华肿瘤杂志 作者:张叔人 ; 郑述凌 ; 王冬梅 ; 马文波 ; 周春霞 ; 曲平 ; 张友会 关键词:非免疫原性肿瘤 ; B7-1基因 ; 干扰素-γ ; 基因表达 ; 基因.MHCI类 机构:中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所肿瘤医院 ; 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所肿瘤医院 年份:1998
    摘要:目的探索非免疫原性肿瘤的免疫基因治疗。方法将B71基因导入非免疫原性肿瘤细胞B16,在体外经IFNγ处理后,观察细胞表面分子的表达变化,以及肿瘤细胞在小鼠体内的成瘤性。结果单独B7基因转导的B7+B16在小鼠体内持续生长。体外用IFNγ处理肿瘤细胞,可明显增加细胞表面MHCI类分子的表达,与B7-B16比较,B7+B16在小鼠体内的成瘤性明显降低。结论单独B7基因导入并表达,不能改变B16在体内恶性增殖的特性。同时提高细胞表面B7与MHCI分子的表达,两者可协同发挥作用,诱发肿瘤排斥。
  • 【期刊】 T细胞和肿瘤逃逸关系研究进展

    刊名:癌症进展 作者:张叔人 ; 王辉丽 关键词:肿瘤逃逸 ; 免疫治疗 ; 调节性细胞 ; TIL ; 特异性杀伤T细胞 机构:中国医学科学院肿瘤研究所免疫室 ; 中国医学科学院肿瘤研究所免疫室 ; 中国医学科学院肿瘤研究所免疫室 年份:2008
    摘要:T细胞自身的低反应性或无能,加上外界的调节性T细胞及体内大量细胞因子合成对杀伤性T细胞的抑制等促进了肿瘤的免疫逃逸。T细胞特异性杀伤肿瘤是肿瘤免疫治疗的中心环节。如何消除免疫抑制因子和刺激活化信号从而纠正免疫失衡是我们治疗顽固抵抗性肿瘤考虑的首选问题。
  • 【期刊】 真核生物DNA聚合酶6的研究现状

    刊名:自然科学进展 作者:张叔人 ; 林晓燕 ; 徐恒 关键词:DNA聚合酶 ; 蛋白功能 ; 生物学功能 ; 研究现状 ; 分子表达 ; DNA修复 ; 基因表达 ; 真核生物 ; 复制酶 ; DNA复制 机构:EmoryUniversitySchoolofMedicine.GA30332,USA ; EmoryUniversitySchoolofMedicine.GA30332,USA 年份:2005
    摘要:DNA聚合酶δ(DNA polymerase δ)是真核生物DNA复制的主要复制酶,同时还参与DNA修复,对保持真核生物基因组的结构完整性和遗传稳定性具有重要作用.对DNA聚合酶δ蛋白功能活性及其基因表达机制的研究因受技术上的限制而未能深入研究.由于其重要的生物学功能,目前引起人们的更多关注和重视.文中就该酶的生物学功能、亚基组成、核心酶的分子表达调控以及与其他蛋白相互作用等方面对N内外DNA聚合酶δ的研究进行简要综述.
  • 【会议】 慢周期肿瘤细胞疫苗研究

    作者:张叔人 ; 孙青 ; 王慧茹 ; 钟永 ; 周春霞 ; 马文波 ; 王冬梅 年份:2012
    摘要:目的:虽然近年来人类在肿瘤治疗领域取得了长足的进步,但是肿瘤的复发和转移所造成的死亡率仍在增加。慢周期肿瘤细胞被认为会抵抗传统的放射、化学药物治疗,进而成为肿瘤复发和转移的根源。因此,清除慢周期细胞将大大提高肿瘤治疗的效果。本实验旨在探讨以慢周期肿瘤细胞作为疫苗的疗效。方法:采用流式分选技术分离慢周期细胞,并以体内成瘤实验及侧群细胞分析来探讨慢周期细胞与干细胞的相关性;5-氟尿嘧啶(5-Fu)体内外分别处理小鼠结肠癌细胞CT-26,探讨其对5-Fu的耐受性;体外混合淋巴细胞肿瘤细胞培养(MLTC)及ELISA实验比较化疗抵抗的慢周期细胞t CT-
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