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  • 【期刊】 血清抗PLA2R抗体检测对特发性膜性肾病诊断效能的meta分析

    刊名:临床检验杂志 作者:张加勤 ; 练明建 ; 卢榕 ; 洪国粦 关键词:抗PLA2R抗体 ; 特发性膜性肾病 ; 诊断价值 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 年份:2017
    摘要:目的 利用meta分析评估血清抗M型磷脂酶A2受体(M-type phospholipase A2 receptor,PLA2R)抗体检测对特发性膜性肾病(IMN)的诊断效能.方法 检索PubMed、Embase、万方和中国知网,从建库到2017年5月关于血清抗PLA2R抗体检测诊断IMN的相关中英文文献.严格地按照制定的纳入和排除标准筛选文献,采用QUADAS进行文献质量评价.采用Meta-disc 1.4进行异质性分析和效应量合并,采用Stata 12.0进行发表偏倚评估.结果 20篇文献纳入研究,文献质量较好,异质性检验提示不存在阈值效应.合并敏感性为0.69(95% CI:0.67 ~0.72),合并特异性为0.97(95% CI:0.96 ~0.98),合并曲线下面积为0.880.敏感性分析提示结果稳定,Deek漏斗图提示不存在发表偏倚.结论 血清抗PLA2R抗体检测对IMN诊断具有可接受的敏感性和较高的特异性,应该受到临床的重视.
  • 【期刊】 荧光PCR探针熔解分析法检测质粒介导ampC耐药基因的应用与评价

    刊名:中华医院感染学杂志 作者:张加勤 ; 郑港森 ; 刘赞赞 ; 宋秀宇 ; 李庆阁 ; 黄朝阳 ; 马晓波 ; 房丽丽 关键词:质粒 ; AmpC酶 ; 聚合酶链反应 ; 肺炎克雷伯菌 ; 大肠埃希菌 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学生命科学院生物医学科学系 ; 厦门市中心血站 年份:2016
    摘要:目的探讨多重荧光PCR-探针熔解分析法应用于临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ampC耐药基因的检测方法,并评价该方法的临床应用价值。方法收集医院2009年7月-2010年6月的临床分离菌株,首先采用头孢西丁纸片法进行耐药表型筛选,再同时应用传统PCR技术与荧光PCR-探针熔解曲线法对临床分离菌株进行检测,并对ampC耐药基因扩增产物进行DNA测序。结果经头孢西丁纸片法筛选出176株对头孢西丁不敏感临床分离菌株,其中97株为肺炎克雷伯菌、79株为大肠埃希菌;在176株临床分离株中,荧光PCR-探针熔解分析法检测出36株ampC耐药基因阳性菌株,包括18株DHA型、12株CIT型和5株EBC型,还有1株肺炎克雷伯菌同时含有DHA型和EBC型;而传统PCR技术检出32株ampC耐药基因阳性,两个检测结果的符合率为97.7%;DNA测序后经BLAST比对,荧光PCR-探针熔解分析法检测ampC基因型与所检测目的基因型一致。结论荧光PCR-探针熔解分析法能高效检测出质粒介导ampC耐药基因,其方法简便、敏感性高、特异性强,具有良好的临床应用价值。
  • 【期刊】 变异链球菌clpP基因启动子的克隆及活性测定

    刊名:中国人兽共患病学报 作者:张加勤 ; 侯香华 ; 张世阳 ; 郑港森 ; 马晓波 ; 赵元勋 ; 黄朝阳 ; 洪国粦 关键词:变异链球菌 ; clpP ; 启动子 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门市医院感染管理中心 ; 厦门大学附属第一医院肾内科 年份:2018
    摘要:目的克隆变异链球菌clpP基因启动子,并进行初步验证。方法 PCR分别扩增变异链球菌clpP基因5′-侧翼序列FclpP及其突变体FclpP-ΔRS,插入β-半乳糖苷酶(β-glucuronidase,gusA)报道基因表达载体pIB107 BamHI/XhoI酶切位点之间,构建clpP基因5′-侧翼序列及其突变体gusA报道基因表达载体pFclpP和pFclpP-ΔRS,PCR、酶切及测序鉴定;经Bgl II线性化后转化变异链球菌UA159,卡那霉素筛选阳性克隆,得到clpP基因5′-侧翼序列及其突变体gusA报道基因表达株SClpP和SClpP-ΔRS,经PCR及测序鉴定后,测定SClpP、SClpP-ΔRS、阳性对照SAmi和阴性对照SIB107的GusA活性。结果成功扩增出变异链球菌clpP基因5′-侧翼序列及其突变体;变异链球菌clpP基因gusA报道基因表达载体经PCR、酶切及测序鉴定正确无误;PCR及测序结果表明成功构建clpP基因5′-侧翼序列及其突变体变异链球菌gusA报道基因表达株SClpP和SClpP-ΔRS;GusA活性测定证实变异链球菌clpP基因5′-侧翼序列及其变体gusA报道基因表达株SClpP和SClpP-ΔRS的GusA活性分别是阴性对照pIB107的34.6和8.7倍,是阳性对照松鼠葡萄球菌ami基因启动子片段gusA报道基因表达株活性的5.2和1.3倍,提示插入片段FclpP和FclpP-ΔRS具有较强的启动子活性。结论成功定位并克隆变异链球菌clpP基因启动子,为今后研究clpP基因上游调控序列提供试验和理论依据。
  • 【期刊】 老年糖尿病合并肝硬化患者白蛋白相关生化指标检验的临床意义研究

    刊名:糖尿病新世界 作者:张加勤 ; 赵元勋 ; 郑燕青 ; 洪国粦 关键词:糖尿病合并肝硬化 ; 老年 ; 血清白蛋白 ; 前白蛋白 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 年份:2017
    摘要:目的探讨老年糖尿病合并肝硬化患者白蛋白相关生化指标检验的临床意义。方法选取2016年1月—2017年3月于该院就诊的老年糖尿病合并肝硬化患者122例,给予相应治疗,分别于干预后1、2、3周检测患者血清中ALB、PA水平,同时评估糖尿病合并肝硬化患者治疗效果。采用溴甲酚氯法检测ALB,免疫比浊法检测PA。结果干预后1周有效者18例,无效者104例;第2周有效者40例,无效者82例;第3周有效者85例,无效者37例。干预前及干预后1、2、3周老年糖尿病合并肝硬化患者ALB均差异无统计学意义(P>0.05)。和干预前及干预后1周相比,干预后2、3周PA显著上升(P<0.05)。结论检测老年糖尿病合并肝硬化患者ALB、PA水平有助于评估患者治疗疗效。
  • 【期刊】 抗穆勒氏管激素和睾酮检测对多囊卵巢综合征的预测价值

    刊名:中国卫生标准管理 作者:张加勤 ; 逯晓辉 ; 洪国粦 ; 王前明 ; 黄宇 ; 高海杰 关键词:多囊卵巢综合征 ; 抗穆勒氏管激素 ; 睾酮 ; ROC ; 联合检测 ; 诊断 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门市妇幼保健院生殖医学科 年份:2019
    摘要:目的探讨抗穆勒氏管激素(AMH)、睾酮(T)及两者联合检测对多囊卵巢综合征(PCOS)的诊断价值。方法选取2015年7月—2017年9月在厦门大学附属第一医院生殖医学科就诊的PCOS患者210例作为PCOS组,选择因男方因素不孕而于生殖医学科就诊的健康女性288例作为对照组。比较两组促卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕激素(P)、泌乳素(PRL)、睾酮(T)和抗穆勒氏管激素(AMH)水平,用SPSS绘制ROC曲线及统计分析。结果(1)PCOS组LH、T、AMH均明显高于对照组,FSH、E2均明显低于对照组(P <0.05)。(2)AMH预测PCOS的敏感度为79.05%,特异度为69.44%;T预测PCOS的敏感度为66.67%,特异度为67.36%;AMH联合T预测PCOS的敏感度为82.86%,特异度为67.71%。结论 AMH与T联合检测预测PCOS的敏感度高于AMH单项检测,对PCOS的临床预测有重要的指导意义。
  • 【期刊】 荧光PCR探针熔解分析法检测质粒介导ampC耐药基因的应用与评价  

    刊名:《中华医院感染学杂志》 作者:张加勤 ; 郑港森 ; 刘赞赞 ; 宋秀宇 ; 李庆阁 ; 黄朝阳 ; 马晓波 ; 房丽丽 关键词:质粒 ; AMPC酶 ; 聚合酶链反应 ; 肺炎克雷伯菌 ; 大肠埃希菌 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学生命科学院生物医学科学系 ; 厦门市中心血站 年份:2016
    摘要:目的探讨多重荧光PCR-探针熔解分析法应用于临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ampC耐药基因的检测方法,并评价该方法的临床应用价值。方法收集医院2009年7月-2010年6月的临床分离菌株,首先采用头孢西丁纸片法进行耐药表型筛选,再同时应用传统PCR技术与荧光PCR-探针熔解曲线法对临床分离菌株进行检测,并对ampC耐药基因扩增产物进行DNA测序。结果经头孢西丁纸片法筛选出176株对头孢西丁不敏感临床分离菌株,其中97株为肺炎克雷伯菌、79株为大肠埃希菌;在176株临床分离株中,荧光PCR-探针熔解分析法检测出36株ampC耐药基因阳性菌株,包括18株DHA型、12株CIT型和5株EBC型,还有1株肺炎克雷伯菌同时含有DHA型和EBC型;而传统PCR技术检出32株ampC耐药基因阳性,两个检测结果的符合率为97.7%;DNA测序后经BLAST比对,荧光PCR-探针熔解分析法检测ampC基因型与所检测目的基因型一致。结论荧光PCR-探针熔解分析法能高效检测出质粒介导ampC耐药基因,其方法简便、敏感性高、特异性强,具有良好的临床应用价值。
  • 【期刊】 变异链球菌ldh基因启动子的克隆及活性检测

    刊名:中国人兽共患病学报 作者:张加勤 ; 黄珊珊 ; 徐巧丽 ; 饶慧华 ; 马晓波 ; 黄朝阳 ; 房丽丽 ; 郑港森 ; 宋秀宇 关键词:变异链球菌 ; ldh基因 ; 启动子 机构:厦门大学附属第一医院暨福建医科大学厦门市第一教学医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院暨福建医科大学厦门市第一教学医院检验科 ; 福建医科大学第一临床医学院 ; 厦门市中心血站 年份:2016
    摘要:目的克隆变异链球菌ldh基因启动子,并验证其活性。方法以变异链球菌UA159基因组为模版,PCR扩增变异链球菌ldh基因候选启动子,将其插入β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase,gusA)报告基因表达载体pIB107 BamH I/XhoI之间,构建ldh基因启动子gusA报告载体pCKS11,PCR、酶切及测序鉴定;经ScaI酶线性化后转化变异链球菌UA159,卡那霉素筛选阳性克隆SCKS11,经PCR和测序鉴定后,检测其GusA活性。结果成功扩增出大小为269bp的ldh基因候选启动子;经PCR、酶切及测序鉴定,变异链球菌ldh基因候选启动子gusA报告基因表达载体pCKS11构建正确;PCR和测序鉴定,ldh基因候选启动子gusA报告株SCKS11构建成功;变异链球菌ldh基因候选启动子启动的GusA活性是无启动子的阴性对照的5.8倍,是阳性对照变异链球菌clpP基因启动子的0.9倍。结论成功克隆变异链球菌ldh基因启动子序列,具有较强的启动转录活性,为研究ldh基因的表达调控机制奠定基础。
  • 【期刊】 维持血液透析患者血清铝负荷及其相关因素研究

    刊名:中国全科医学 作者:张加勤 ; 侯香华 ; 邵思南 ; 李弋南 ; 周凌辉 ; 张燕林 关键词:血清铝 ; 肾功能衰竭 ; 慢性 ; 肾透析 ; 影响因素分析 机构:厦门大学附属第一医院暨福建医科大学教学医院肾内科 ; 厦门大学附属第一医院暨福建医科大学教学医院肾内科 ; 厦门大学附属第一医院暨福建医科大学教学医院检验科 年份:2015
    摘要:背景铝在人体内的蓄积给维持血液透析患者带来了严重危害,然而目前国内对血液透析患者血清铝水平的大规模调查尚不多见。目的检测福建省慢性肾衰竭维持血液透析患者血清铝水平,探讨影响血清铝水平的因素。方法收集2012年1月—2013年12月福建省厦门市、漳州市、龙岩市、泉州市、三明市15所医院透析中心慢性肾衰竭维持血液透析患者和健康体检者血清标本,共收集慢性肾衰竭维持血液透析患者449例,健康体检者262例,采用AA800原子吸收光谱仪检测血清中铝水平。采用多重线性回归分析影响慢性肾衰竭患者血清铝水平的因素。结果慢性肾衰竭维持血液透析患者血清铝水平为(18.34±6.16)μg/L,高于健康对照者的(1.57±0.45)μg/L(t=2.324,P<0.05)。52例(11.6%)慢性肾衰竭维持血液透析患者血清铝水平超过了国际肾脏病组织推荐的慢性肾衰竭患者血清铝允许上限值(30μg/L)。男性慢性肾衰竭维持血液透析患者血清铝水平为(18.45±6.48)μg/L,女性为(18.22±5.64)μg/L,两者比较,差异无统计学意义(t=1.058,P>0.05)。各透析中心透析液及所在城市饮用水铝水平比较,差异有统计学意义(F=4.252、3.316,P<0.05)。服用磷结合剂、Vit D制剂、注射促红细胞生成素(EPO)及近期接受输血治疗的血液透析患者血清铝水平高于未接受上述治疗患者(P<0.05)。慢性肾衰竭维持血液透析患者中不同饮茶量、食加工面食比例者血清铝水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同食肉食比例患者血清铝水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。多重线性回归结果显示,饮茶量、面食饮食、饮用水铝含量、每日尿量、透析频率、透析液铝含量、服用磷结合剂、服用Vit D、注射EPO、输血为影响慢性肾衰竭患者血清铝水平的因素(P<0.05)。结论福建省慢性肾衰竭维持血液透析患者铝负荷较高,饮食习惯、治疗措施及透析情况影响患者血清铝水平。
  • 【期刊】 胆囊炎和胆管炎患者胆汁分离菌的细菌学特征及药敏分析

    刊名:山西职工医学院学报 作者:张加勤 ; 张轶 ; 于爱莲 ; 赵元勋 ; 马晓波 关键词:胆道感染 ; 胆汁 ; 病原菌 ; 耐药性 机构:厦门大学附属第一医院 ; 厦门大学附属第一医院 ; 山东省泰山医学院 年份:2015
    摘要:目的:分析胆道感染的主要致病菌及其药敏情况,为临床治疗提供实验依据。方法:收集2012年12月~2014年10月厦门某三甲医院临床胆囊或胆管炎症患者的胆汁标本,进行细菌培养,分离菌的鉴定和药敏检测采用VITEK 2 COMPACT全自动微生物分析系统。结果:311株非重复分离菌中,革兰阴性细菌占64.3%,主要由大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌引起(占其中66.0%);革兰阳性细菌占32.5%,主要由粪肠球菌和屎肠球菌引起(占其中60.4%);真菌占3.2%。分离菌包括两种或两种以上的患者为63例;近半数的大肠埃希菌对喹诺酮类抗生素耐药,对左氧氟沙星和环丙沙星的耐药率分别为44.1%和46.2%。主要分离菌的药敏情况为:大肠埃希菌敏感率在80%以上的抗生素包括替加环素、阿米卡星、头孢替坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶和头孢吡肟,未检出碳青霉烯类耐药菌株;肺炎克雷伯菌对左氧氟沙星和环丙沙星的敏感率分别为80%和76.5%,3、4代头孢菌素对肺炎克雷伯菌的体外活性较好。肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌中检出碳青霉烯耐药菌株;非发酵菌中铜绿假单胞菌对常见抗生素普遍敏感。对粪肠球菌和屎肠球菌体外活性较好的药物有替加环素、万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁。结论:本地区胆道感染分离菌主要以革兰阴性细菌为主,其中以大肠最为常见,而革兰阳性细菌以粪肠球菌为主。抗菌药物治疗时对革兰阴性菌可首选头孢菌素如头孢他啶或复合制剂如哌拉西林/他唑巴坦,针对革兰阳性菌首选利奈唑胺或替考拉宁。
  • 【期刊】 闽南地区人群中HLA-B* 5801基因频率的分析

    刊名:中国免疫学杂志 作者:张加勤 ; 李珣 ; 何颖豪 ; 黄朝阳 ; 逯晓辉 ; 胡斌 ; 宋秀宇 关键词:闽南地区 ; HLA-B*5801 ; 基因频率 机构:厦门大学附属第一医院暨福建医科大学教学医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院暨福建医科大学教学医院检验科 年份:2015
    摘要:目的:了解闽南地区人群中HLA-B*5801的基因频率,探讨筛查HLA-B*5801的必要性。方法:本研究选取闽南地区178名需服用别嘌呤醇的患者(痛风患者40例,高尿酸血症患者89例和痛风性关节炎患者49例)和100名健康人,从全血中提取DNA,采用实时荧光PCR技术(Real-time PCR)和碱基序列测序(SBT)技术对所有DNA样本进行测定。结果:通过检测发现有22%的患者及16%的健康人含有HLA-B*5801,在患者中HLA-B*5801的基因频率为0.13,在健康人中为0.09,PCR法与SBT法检测结果一致。结论:闽南地区人群中HLA-B*5801的基因频率较高,因此需服用别嘌呤醇的患者在服药前有必要进行HLA-B*5801的筛查。
  • 【期刊】 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒型AmpC酶基因型的检测分析

    刊名:国际检验医学杂志 作者:张加勤 ; 郑港森 ; 刘赞赞 ; 黄朝阳 ; 马晓波 ; 李庆阁 ; 宋秀宇 关键词:β-内酰胺酶 ; 质粒 ; 大肠埃希菌 ; 肺炎克雷伯菌 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学生命科学院生物医学科学系 年份:2015
    摘要:目的针对该院临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒型AmpC酶基因型进行研究分析。方法收集2011年7月至2012年8月对头孢西丁不敏感无重复临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共176株,采用聚合酶链反应(PCR)法和扩增全基因序列分析大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶基因型。结果 PCR结果显示,AmpC酶基因(ampC基因)阳性率为18.2%主要以DHA型为主,阳性率为59.4%,CIT型为37.5%,EBC为3.1%;其中,大肠埃希菌ampC基因阳性率为11.4%,以CIT型为主,阳性率为77.8%,DHA型和EBC型阳性率均为11.1%;肺炎克雷伯菌ampC基因阳性率为23.7%,以DHA型为主,阳性率为78.3%,CIT型为21.7%。基因序列结果显示,DHA型有18株为DHA-1基因型和1株摩根摩根菌ampC基因型,一致率97.0%,CIT型有10株为CMY-2基因型,1株CMY-42基因型和1株CMY-4基因型;EBC型为阴沟肠杆菌ampC基因型,一致率为99.0%。将32株基因序列提交GenBank,均被接受,其登录号为KJ127248~KJ127279。结论该院临床分离大肠埃希菌ampC基因主要以CMY-2型为主,而肺炎克雷伯菌主要以DHA-1型为主。
  • 【期刊】 铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株的构建

    刊名:中国人兽共患病学报 作者:张加勤 ; 饶慧华 ; 徐巧丽 ; 黄朝阳 ; 房丽丽 ; 马晓波 ; 宋秀宇 关键词:铜绿假单胞菌 ; clpP基因 ; 双亲杂交 ; 同源重组 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 ; 福建医科大学第一临床医学院 年份:2015
    摘要:目的构建铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株。方法分别以质粒pUCGM和铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板PCR扩增庆大霉素抗性基因(GM)和铜绿假单胞菌clpP基因及其3′、5′侧翼序列,将clpP基因及其3′、5′侧翼序列克隆至pMD19T载体,EcoRV切除clpP基因37bp~453bp片段后,引入庆大霉素抗性基因,构建重组质粒pCKR2;EcoRⅠ/HindⅢ双酶切重组质粒pCKR2,回收FclpP-GM-clpPR片段,与自杀质粒pEX18Tc连接,得到clpP基因缺陷的同源重组载体pCKR3;将pCKR3质粒转化大肠埃希菌SM10,与铜绿假单胞菌PAO1双亲杂交,庆大霉素筛选得到铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株。结果经酶切鉴定同源重组载体pCKR3构建正确;PCR和DNA测序鉴定铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株构建成功。结论本研究成功敲除了铜绿假单胞菌clpP基因,为进一步研究clpP基因的生物学功能奠定了基础。