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  • 【会议】 福建省慢性肾衰竭患者血清铝负荷及相关因素分析

    作者:张加勤 ; 侯香华 关键词:血清铝 ; 慢性肾功能衰竭 ; 影响因素 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 年份:2014
    摘要:目的:维持血液透析患者铝中毒不容忽视,慢性铝中毒主要表现为骨软化症、骨营养不良、铝中毒性骨病、难治性贫血、免疫功能下降、甲状腺功能减退等。铝还可通过血脑屏障进入脑组织,引起神经元损伤,影响智力发育,可引起学习、记忆能力下降、运动失调等严重的神经毒作用。大量研究表明,铝所导致的神经系统功能障碍,是一个长期的慢性病理过程,涉及脑发育的各个阶段,许多神经系统疾病,如阿尔茨海默病(Alzheimers Disease,AD)、透析性痴呆、帕金森病(Parkinsons Disease,PD)等均与慢性铝蓄积有关。准确而及时的铝负荷测定是诊断和治疗铝中毒,避免铝在体内蓄积引起不良事件的基础。然而目前对国内慢性肾衰竭患者血清铝水平的临床调查及相关影响因素分析的报道尚不多见。为此我们检测福建省慢性肾衰竭患者血清铝水平,探讨慢性肾衰竭患者血清铝的影响因素。方法:收集福建省内5个城市的15所医院肾内科病房、透析中心自2012年1月至2013年12月之间慢性肾衰竭患者和健康体检者血清标本。用美国PE公司AA800原子吸收光谱仪检测血清中铝含量。取样品、质控品或标准品20μL与基底改进剂5μL混匀后自动上样,检测条件为波长309.3nm,灯电流80mA;狭缝0.7 nm,进样量20μL;保护气为氩气(Ar),原子化时停气;两步干燥,斜坡升温。由仪器自带程序计算样品铝含量。数据处理用SPSS 16.0软件包完成。计数资料分别赋值,例如:性别(女=0,男=1)、是否接受VitD、EPO、磷结合剂及输血等治疗(未服用=0,服用=1)等;计量资料以原始数据为统计量,经正态性检验及方差齐性检验,结果以均数±标准差表示,两者比较采用t检验,多组比较采用方差分析,其中两两比较采用LSD法;对所得数据和资料进行统计学处理,多元线性回归分析筛选慢性肾衰竭患者血清铝的影响因素。P<0.05为差异有统计学意义。结果:共530名慢性肾功能衰竭患者进入调查,平均年龄为53.27±14.28岁。262名健康体检者作为对照,平均年龄为49.15±12.34岁。福建省慢性肾衰竭患者血清铝平均水平为17.33±5.15μg/L,显著高于正常人血清铝水平1.57±0.45μg/L(P<0.001);慢性肾衰竭患者血清铝水平与性别、身高、体重、血压无显著相关,与透析频率、24h尿量呈显著负相关,与年龄呈显著正相关,与使用VitD、EPO和磷结合剂、近期接受输血、透析方式显著相关。腹膜透析患者血清铝水平(28.22±10.02μg/L)显著高于血液透析患者血清铝水平(18.30±4.58μg/L),P<0.05。饮食中肉类占10%~20%的慢性肾功能衰竭患者血清铝含量为9.01±3.00μg/L,显著低于肉食比例≤10%及≥20%的患者(P<0.05)。结论:福建省慢性肾衰竭患者血清铝水平仍较高,肾功能下降、饮食习惯、治疗措施及透析情况影响患者血清铝水平。故有必要对慢性肾衰竭患者血清铝水平进行系统、规律地监测,同时减少含铝食物的摄取,停止使用含铝制剂,适当的进食肉类食物,合理使用VitD、EPO及尽量避免输血,充分透析以降低慢性肾功能衰竭患者血清铝负荷,警惕医源性铝中毒。
  • 【期刊】 临床分离金黄色葡萄球菌的调查与耐药性分析

    刊名:中华医院感染学杂志 作者:张加勤 ; 郑港森 ; 黄朝阳 ; 黄宇 ; 马晓波 关键词:耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 ; 甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌 ; 耐药性 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 年份:2015
    摘要:目的了解医院临床分离金黄色葡萄球菌的分布及耐药性,为临床治疗相关感染提供参考依据。方法收集2013年1-12月医院临床送检各类培养标本中分离金黄色葡萄球菌共676株,采用法国生物梅里埃公司VITEK-2Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统对菌株进行细菌鉴定和药物敏感性检测,并用Excel软件进行数据分析。结果 2013年各种临床标本分离金黄色葡萄球菌共676株,标本分布主要以痰液为主占61.69%,其次是分泌物和脓液,分别占17.44%和8.73%;临床科室分布依次是儿科、耳鼻喉头颈外科和新生儿室,分别占19.53%、11.54%和8.28%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为24.41%,诱导克林霉素耐药菌株检出率为18.64%;金黄色葡萄球菌对万古霉素、替加环素、喹奴普汀/达福普汀、利奈唑胺的耐药率最低,均为0,对红霉素、克林霉素和四环素耐药率较高,MRSA对红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星等耐药率均比甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)高,且两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论临床分离金黄色葡萄球菌对红霉素、克林霉素和四环素的耐药性已比较高,应注意在临床的合理使用;MRSA表现出耐药性高、多药耐药的特性,应加强监测控制,防止其流行传播。
  • 【期刊】 维持血液透析患者血清铝负荷及其相关因素研究

    刊名:中国全科医学 作者:张加勤 ; 侯香华 ; 邵思南 ; 李弋南 ; 周凌辉 ; 张燕林 关键词:血清铝 ; 肾功能衰竭 ; 慢性 ; 肾透析 ; 影响因素分析 机构:厦门大学附属第一医院暨福建医科大学教学医院肾内科 ; 厦门大学附属第一医院暨福建医科大学教学医院肾内科 ; 厦门大学附属第一医院暨福建医科大学教学医院检验科 年份:2015
    摘要:背景铝在人体内的蓄积给维持血液透析患者带来了严重危害,然而目前国内对血液透析患者血清铝水平的大规模调查尚不多见。目的检测福建省慢性肾衰竭维持血液透析患者血清铝水平,探讨影响血清铝水平的因素。方法收集2012年1月—2013年12月福建省厦门市、漳州市、龙岩市、泉州市、三明市15所医院透析中心慢性肾衰竭维持血液透析患者和健康体检者血清标本,共收集慢性肾衰竭维持血液透析患者449例,健康体检者262例,采用AA800原子吸收光谱仪检测血清中铝水平。采用多重线性回归分析影响慢性肾衰竭患者血清铝水平的因素。结果慢性肾衰竭维持血液透析患者血清铝水平为(18.34±6.16)μg/L,高于健康对照者的(1.57±0.45)μg/L(t=2.324,P<0.05)。52例(11.6%)慢性肾衰竭维持血液透析患者血清铝水平超过了国际肾脏病组织推荐的慢性肾衰竭患者血清铝允许上限值(30μg/L)。男性慢性肾衰竭维持血液透析患者血清铝水平为(18.45±6.48)μg/L,女性为(18.22±5.64)μg/L,两者比较,差异无统计学意义(t=1.058,P>0.05)。各透析中心透析液及所在城市饮用水铝水平比较,差异有统计学意义(F=4.252、3.316,P<0.05)。服用磷结合剂、Vit D制剂、注射促红细胞生成素(EPO)及近期接受输血治疗的血液透析患者血清铝水平高于未接受上述治疗患者(P<0.05)。慢性肾衰竭维持血液透析患者中不同饮茶量、食加工面食比例者血清铝水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同食肉食比例患者血清铝水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。多重线性回归结果显示,饮茶量、面食饮食、饮用水铝含量、每日尿量、透析频率、透析液铝含量、服用磷结合剂、服用Vit D、注射EPO、输血为影响慢性肾衰竭患者血清铝水平的因素(P<0.05)。结论福建省慢性肾衰竭维持血液透析患者铝负荷较高,饮食习惯、治疗措施及透析情况影响患者血清铝水平。
  • 【期刊】 双纸片抑制增效试验在 AmpC 酶检测中应用分析

    刊名:《国际检验医学杂志》 作者:张加勤 ; 郑港森 ; 黄朝阳 ; 马晓波 关键词:双纸片抑制增效 ; 肺炎克雷伯菌 ; 头孢菌素酶 ; 头孢西丁 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 年份:2014
    摘要:目的:探讨分析双纸片抑制增效试验在肺炎克雷伯菌产 AmpC 酶的检测应用,评价该方法在临床实验室的应用价值。方法采用头孢西丁纸片法,头孢西丁三维试验,双纸片抑制增效试验,以及耐药基因多重 PCR 技术对临床分离菌株进行检测。结果137株临床分离肺炎克雷伯菌中,对头孢西丁不敏感的菌株共有22株,头孢西丁三维试验阳性有11株;双纸片抑制增效试验 FOX/FOX+PBA 双纸片组中阳性有18株,CTT/CTT+PBA 双纸片组中阳性有11株;多重 PCR 技术检测阳性有19株。头孢西丁三维试验阳性结果与 PCR 结果符合率为47.4%(9/19),双纸片抑制增效试验中,CTT/CTT+PBA 双纸片组阳性结果与 PCR 结果符合率为57.9%(11/19);FOX/FOX+PBA 双纸片组阳性结果与 PCR 结果符合率为94.7%(18/19)。结论双纸片抑制增效试验,其方法简便,结果准确性高,其中 FOX/FOX+PBA 双纸片组可应用于临床分离肺炎克雷伯菌产 AmpC 酶的检测。
  • 【期刊】 双纸片抑制增效试验在AmpC酶检测中应用分析

    刊名:国际检验医学杂志 作者:张加勤 ; 郑港森 ; 黄朝阳 ; 马晓波 关键词:双纸片抑制增效 ; 肺炎克雷伯菌 ; 头孢菌素酶 ; 头孢西丁 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 年份:2014
    摘要:目的探讨分析双纸片抑制增效试验在肺炎克雷伯菌产AmpC酶的检测应用,评价该方法在临床实验室的应用价值。方法采用头孢西丁纸片法,头孢西丁三维试验,双纸片抑制增效试验,以及耐药基因多重PCR技术对临床分离菌株进行检测。结果 137株临床分离肺炎克雷伯菌中,对头孢西丁不敏感的菌株共有22株,头孢西丁三维试验阳性有11株;双纸片抑制增效试验FOX/FOX+PBA双纸片组中阳性有18株,CTT/CTT+PBA双纸片组中阳性有11株;多重PCR技术检测阳性有19株。头孢西丁三维试验阳性结果与PCR结果符合率为47.4%(9/19),双纸片抑制增效试验中,CTT/CTT+PBA双纸片组阳性结果与PCR结果符合率为57.9%(11/19);FOX/FOX+PBA双纸片组阳性结果与PCR结果符合率为94.7%(18/19)。结论双纸片抑制增效试验,其方法简便,结果准确性高,其中FOX/FOX+PBA双纸片组可应用于临床分离肺炎克雷伯菌产AmpC酶的检测。
  • 【期刊】 慢性肾衰竭患者血清铝负荷及相关因素分析

    刊名:实验与检验医学 作者:张加勤 ; 侯香华 ; 邵思南 ; 李弋南 ; 周凌辉 ; 张燕林 关键词:血清铝 ; 慢性肾功能衰竭 ; 回归分析 机构:厦门大学附属第一医院 ; 厦门大学附属第一医院 ; 福建医科大学教学医院肾内科 ; 福建医科大学教学医院检验科 年份:2014
    摘要:目的探讨慢性肾衰竭患者血清铝水平的变化及其影响因素。方法收集530例慢性肾衰竭患者与262例健康体检者血清标本,采用石墨炉原子吸收光谱法测定血清中铝含量。对所得数据和资料进行统计学处理,多元线性回归筛选分析慢性肾衰竭患者血清铝的影响因素。结果慢性肾衰竭患者血清铝水平为17.33±3.15μg/L,显著高于正常人血清铝水平1.57±0.45μg/L(P<0.001);慢性肾衰竭患者血清铝水平与性别、体重、身高、血压、饮食中肉食所占的比例无显著相关,与尿量周透析次数成负相关,与年龄、使用维生素D(VitD)、红细胞生成素(EPO)和磷结合剂、近期接受输血、透析次数成正相关,与透析方式显著相关。结论慢性肾衰竭患者铝负荷较高,肾功能下降、饮食习惯、治疗措施及透析情况影响患者血清铝水平。
  • 【期刊】 变异链球菌clpP基因启动子的克隆及活性测定

    刊名:中国人兽共患病学报 作者:张加勤 ; 侯香华 ; 张世阳 ; 郑港森 ; 马晓波 ; 赵元勋 ; 黄朝阳 ; 洪国粦 关键词:变异链球菌 ; clpP ; 启动子 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门市医院感染管理中心 ; 厦门大学附属第一医院肾内科 年份:2018
    摘要:目的克隆变异链球菌clpP基因启动子,并进行初步验证。方法 PCR分别扩增变异链球菌clpP基因5′-侧翼序列FclpP及其突变体FclpP-ΔRS,插入β-半乳糖苷酶(β-glucuronidase,gusA)报道基因表达载体pIB107 BamHI/XhoI酶切位点之间,构建clpP基因5′-侧翼序列及其突变体gusA报道基因表达载体pFclpP和pFclpP-ΔRS,PCR、酶切及测序鉴定;经Bgl II线性化后转化变异链球菌UA159,卡那霉素筛选阳性克隆,得到clpP基因5′-侧翼序列及其突变体gusA报道基因表达株SClpP和SClpP-ΔRS,经PCR及测序鉴定后,测定SClpP、SClpP-ΔRS、阳性对照SAmi和阴性对照SIB107的GusA活性。结果成功扩增出变异链球菌clpP基因5′-侧翼序列及其突变体;变异链球菌clpP基因gusA报道基因表达载体经PCR、酶切及测序鉴定正确无误;PCR及测序结果表明成功构建clpP基因5′-侧翼序列及其突变体变异链球菌gusA报道基因表达株SClpP和SClpP-ΔRS;GusA活性测定证实变异链球菌clpP基因5′-侧翼序列及其变体gusA报道基因表达株SClpP和SClpP-ΔRS的GusA活性分别是阴性对照pIB107的34.6和8.7倍,是阳性对照松鼠葡萄球菌ami基因启动子片段gusA报道基因表达株活性的5.2和1.3倍,提示插入片段FclpP和FclpP-ΔRS具有较强的启动子活性。结论成功定位并克隆变异链球菌clpP基因启动子,为今后研究clpP基因上游调控序列提供试验和理论依据。
  • 【期刊】 变异链球菌ldh基因启动子的克隆及活性检测

    刊名:中国人兽共患病学报 作者:张加勤 ; 黄珊珊 ; 徐巧丽 ; 饶慧华 ; 马晓波 ; 黄朝阳 ; 房丽丽 ; 郑港森 ; 宋秀宇 关键词:变异链球菌 ; ldh基因 ; 启动子 机构:厦门大学附属第一医院暨福建医科大学厦门市第一教学医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院暨福建医科大学厦门市第一教学医院检验科 ; 福建医科大学第一临床医学院 ; 厦门市中心血站 年份:2016
    摘要:目的克隆变异链球菌ldh基因启动子,并验证其活性。方法以变异链球菌UA159基因组为模版,PCR扩增变异链球菌ldh基因候选启动子,将其插入β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase,gusA)报告基因表达载体pIB107 BamH I/XhoI之间,构建ldh基因启动子gusA报告载体pCKS11,PCR、酶切及测序鉴定;经ScaI酶线性化后转化变异链球菌UA159,卡那霉素筛选阳性克隆SCKS11,经PCR和测序鉴定后,检测其GusA活性。结果成功扩增出大小为269bp的ldh基因候选启动子;经PCR、酶切及测序鉴定,变异链球菌ldh基因候选启动子gusA报告基因表达载体pCKS11构建正确;PCR和测序鉴定,ldh基因候选启动子gusA报告株SCKS11构建成功;变异链球菌ldh基因候选启动子启动的GusA活性是无启动子的阴性对照的5.8倍,是阳性对照变异链球菌clpP基因启动子的0.9倍。结论成功克隆变异链球菌ldh基因启动子序列,具有较强的启动转录活性,为研究ldh基因的表达调控机制奠定基础。
  • 【期刊】 弓形虫乳酸脱氢酶LDH2基因启动子的克隆及鉴定

    刊名:中国人兽共患病学报 作者:张加勤 ; 侯香华 ; 宋秀宇 关键词:弓形虫 ; 乳酸脱氢酶 ; 启动子 ; 荧光素酶 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 年份:2013
    摘要:目的克隆弓形虫乳酸脱氢酶LDH2基因启动子并进行初步鉴定。方法 PCR扩增出LDH2基因5′侧翼序列系列截短突变体,定向插入载体pTX3–basic的Kpn I/Xhol I酶切位点之间,转化大肠埃希菌Top 10,氨苄西林筛选,建立重组LDH2基因5′侧翼序列系列截短突变体荧光素酶表达载体。转染刚地弓形虫速殖子,利用荧光素酶检测试剂盒测定所克隆片段的启动转录活性。结果成功扩增出LDH2基因5′侧翼序列系列突变体;系列重组荧光素酶表达质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确无误;系列重组荧光素酶表达质粒在弓形虫速殖子中的相对活性与阴性对照pTX3-basic基本相同,而在弓形虫缓殖子中,除pTX3-293和pTX3-193外,其他重组荧光素酶活性均是阴性对照pTX3-basic的40~50倍之多,是阳性对照pTX3-control的1.2~1.5倍,说明插入片段具有较强的启动子活性。结论成功定位并克隆弓形虫LDH2基因启动子,为今后研究LDH2基因上游调控序列提供试验和理论依据。
  • 【期刊】 一种高精度数控稳压电源的设计与实现

    刊名:化工自动化及仪表 作者:张加勤 ; 郭焱 关键词:直流电源 ; 单片机 ; A/D转换 ; D/A转换 ; 集成稳压器 机构:武汉工程大学理学院 ; 武汉工程大学理学院 年份:2013
    摘要:提出一种以AT89S52单片机为主控制单元的高精度数字控制稳压直流电源的设计方法,该电源系统以三端可调式集成稳压器LM317为基础稳压输出电路,以温度、电压和电流传感为反馈途径,结合单片机高效和高速的实时信息处理能力,实现对输出直流电压的高精度稳定控制、电压电流的实时显示和过温过压过流保护电路的功能。测试数据证实其性能达到了预期的设计指标。
  • 【期刊】 铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株的构建

    刊名:中国人兽共患病学报 作者:张加勤 ; 饶慧华 ; 徐巧丽 ; 黄朝阳 ; 房丽丽 ; 马晓波 ; 宋秀宇 关键词:铜绿假单胞菌 ; clpP基因 ; 双亲杂交 ; 同源重组 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 ; 福建医科大学第一临床医学院 年份:2015
    摘要:目的构建铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株。方法分别以质粒pUCGM和铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板PCR扩增庆大霉素抗性基因(GM)和铜绿假单胞菌clpP基因及其3′、5′侧翼序列,将clpP基因及其3′、5′侧翼序列克隆至pMD19T载体,EcoRV切除clpP基因37bp~453bp片段后,引入庆大霉素抗性基因,构建重组质粒pCKR2;EcoRⅠ/HindⅢ双酶切重组质粒pCKR2,回收FclpP-GM-clpPR片段,与自杀质粒pEX18Tc连接,得到clpP基因缺陷的同源重组载体pCKR3;将pCKR3质粒转化大肠埃希菌SM10,与铜绿假单胞菌PAO1双亲杂交,庆大霉素筛选得到铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株。结果经酶切鉴定同源重组载体pCKR3构建正确;PCR和DNA测序鉴定铜绿假单胞菌clpP基因缺陷株构建成功。结论本研究成功敲除了铜绿假单胞菌clpP基因,为进一步研究clpP基因的生物学功能奠定了基础。
  • 【期刊】 变异链球菌腺苷磷酸硫酸酶的原核表达及功能研究

    刊名:中国病原生物学杂志 作者:张加勤 ; 侯香华 ; 宋秀宇 关键词:变异链球菌 ; 腺苷磷酸硫酸酶 ; 核糖核酸酶 机构:厦门大学附属第一医院检验科 ; 厦门大学附属第一医院检验科 年份:2012
    摘要:目的构建变异链球菌aps基因原核表达载体,表达纯化目的蛋白,继而对其生物学功能进行初步鉴定。方法以变异链球菌UA159株基因组DNA为模板PCR扩增变异链球菌aps基因编码区,插入原核表达载体pASK-IBA43plus,转化E.coli Top 10,无水四环素诱导His-APS蛋白表达,经Ni-NTA纯化后,检测His-APS蛋白腺苷磷酸硫酸酶活性及核糖核酸酶活性。结果 PCR扩增出933bp的aps基因开放读码框,成功构建aps基因原核表达载体pASK-aps,并在E.coli Top 10中诱导表达,SDS-PAGE检测重组His-APS蛋白分子质量单位为38ku,该蛋白在Mg2+及Mn2+存在条件下能水解pAp,且呈时间及浓度依赖性,但不能降解Cy5标记的随机6nt寡核苷酸探针。结论重组His-APS蛋白具有腺苷磷酸硫酸酶活性,呈时间及浓度依赖性,但不具有核糖核酸酶活性。
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