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  • 【专利】 一种烟草根黑腐病菌的分离方法

    摘要:一种烟草根黑腐病菌的分离方法,采集具有烟草根黑腐病症状的烟草植株的根际土壤,将采集的根际土壤干燥磨碎后粘附于胡萝卜片上,然后将粘附有土壤的胡萝卜片放置在培养皿中培养2—4天,之后用加有50μL/mL青霉素和50μL/mL硫酸链霉素的无菌水冲洗胡萝卜片,继续培养2—4天后,挑取胡萝卜片上具有烟草根黑腐病典型病症的霉层,纯化培养后保存。利用胡萝卜片成分对烟草根黑腐病菌和其它真菌的不同影响,诱导烟草根黑腐病菌生长而抑制其它菌的生长,解决烟草根黑腐病菌易被其它真菌掩盖的问题。处理后的胡萝卜圆片表面可很快长出菌丝与典型的分生孢子梗、分生孢子及厚垣孢子,成功率达96%以上。
  • 【期刊】 矮化核桃枝枯病病原菌的形态与分子鉴定

    刊名:植物保护 作者:康业斌 ; 程相瑞 ; 李丙雪 ; 卢靖天 ; 陈倩倩 关键词:核桃 ; 枝枯病 ; 葡萄座腔菌 ; 形态鉴定 ; 分子鉴定 机构:河南科技大学林学院 ; 河南科技大学林学院 年份:2019
    摘要:为了明确河南省洛阳地区核桃枝条一种新病害的病原种类,对采自田间的典型症状枝条进行了常规组织分离,对单孢菌株进行了形态鉴定、rDNA ITS序列分析及致病性测定。结果表明,病原菌在PDA培养基上菌落初为白色,随着色素的积累,由中心向边缘变为灰绿色,再变成墨绿色,最终全部变成黑色;气生菌丝棉絮毛状,菌落边缘不整齐,近圆形或不规则形。分生孢子器散生或聚生,呈黑色小粒状,分生孢子器球形或近球形,深褐色,具孔口;分生孢子梗短缺,无色,杆状,末端产生分生孢子;分生孢子梭形、纺锤形,无色,无隔,基部钝圆,顶部稍尖,单孢(24.5~29.0)μm×(4.8~7.5)μm。离体枝条接种结果表明,该菌能侵染核桃枝条引起与田间相同的症状。据此将分离物鉴定为葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea。
  • 【期刊】 河南省烟草根黑腐病菌的分子鉴定及致病性分析

    刊名:烟草科技 作者:康业斌 ; 边传红 ; 丁玥琪 ; 赵世民 ; 李淑君 关键词:河南省 ; 烟草 ; 根黑腐病 ; 根串珠霉 ; 致病性 ; 形态鉴定 ; 分子鉴定 机构:河南科技大学林学院 ; 河南科技大学林学院 ; 河南省洛阳市开元大道263号 ; 河南省洛阳市烟草公司 ; 河南省洛阳市开元大道246号 ; 河南省农业科学院烟草研究所 ; 河南省许昌市魏都区永昌大道 年份:2017
    摘要:为明确引起河南省烟草根黑腐病的病原菌种类,选用具有典型根黑腐病的烟草病株及其根际土壤为试验样品,采用组织分离法和胡萝卜圆片法对病原菌进行分离,根据菌株形态及rDNA-ITS序列对病原菌种类进行鉴定,并采用灌根接种法测定病原菌对烟草的致病性.结果表明,用胡萝卜圆片法分离获得YYTB、LNTB、JXTB与JYTB 4株病原菌分离物,其中LNTB、JXTB菌株在PDA培养基上纯化获得JXTB"和LNTB"两株白色变异菌株.菌株YYTB、JYTB、JXTB和LNTB的形态学观察结果基本一致,菌落呈灰色至橄榄绿色,内生分生孢子梗无色至褐色,单生或簇生,内生分生孢子单孢,无色,杆状,两端钝圆,厚垣孢子黑褐色,簇生或单生.白色变异菌株JXTB"和LNTB"的形态学观察结果基本一致,菌落白色,厚垣孢子无色,分生孢子梗与内生分生孢子的形态特征及大小与YYTB、JYTB、JXTB和LNTB菌株无明显差异.6个菌株的rDNA-ITS序列与GenBank中登录号为AF275482、U97334[Thielaviopsis basicola(Berk.et Br.)Ferr.]的rDNA-ITS序列同源性在99%以上,且对豫烟6号烟苗均具有致病性,白色变异菌株JXTB"和LNTB"的致病性相对正常菌株YYTB、JYTB、JXTB和LNTB较弱.因此,将河南省烟草根黑腐病的病原菌鉴定为根串珠霉Thielaviopsis basicola(Berk.et Br.)Ferr..
  • 【期刊】 河南省烟草黑胫病菌群体遗传结构的SSR分析

    刊名:中国烟草学报 作者:康业斌 ; 崔林开 ; 赵珊珊 ; 高鹏飞 ; 郭金利 ; 胡艳红 关键词:烟草黑胫病菌 ; SSR ; 遗传多样性 ; 遗传结构 机构:河南科技大学林学院 ; 河南科技大学林学院 年份:2018
    摘要:为明确河南省烟草黑胫病菌群体的遗传结构,本研究利用SSR分子标记对来自河南省12个地区的32株烟草黑胫病菌进行分析。结果显示,6对SSR引物共扩增出24个条带,其中多态性条带23个,多态性条带比率为95.83%;Nei’s基因多样性指数和Shannon信息指数分别为0.2132和0.3356;遗传相似系数在0.61~1.00之间,相似系数0.80水平下UPGMA聚类可将32个菌株划分为5个类群,其中类群I和类群II包括29个菌株,为优势类群;主成分分析结果与UPGMA聚类分析结果基本一致;遗传结构分析推测河南省烟草黑胫病菌群体来自于3个祖先亚群,亚群I、亚群II和亚群III在群体中所占比例分别为13.59%、46.61和39.80%;单个菌株遗传构成分析显示87.50%菌株的遗传组分几乎由单一亚群组成。以上研究结果表明河南省烟草黑胫病菌群体的遗传多样性水平较低,遗传结构也较为简单。
  • 【期刊】 烟草疫霉SSR分子标记的开发与初步应用

    刊名:《植物病理学报》 作者:康业斌 ; 崔林开 ; 高鹏飞 ; 刘精精 ; 胡艳红 ; 赵启美 关键词:烟草疫霉 ; SSR ; 筛选 ; 聚类分析 机构:河南科技大学林学院 ; 河南科技大学林学院 年份:2018
    摘要:为开发烟草疫霉的SSR分子标记,利用MISA软件搜索烟草疫霉基因组序列中的SSR位点,共发现1311个SSR位点,优势SSR位点为二核苷酸和三核苷酸,分别占总SSR位点的56.45%和39.36%;根据分析到的SSR位点使用Primer 5.0软件设计48对SSR引物,以7株烟草疫霉的DNA为模板对这些引物进行筛选,共获得扩增条带清晰且具有多态性的SSR引物20对,然后使用其中的6对SSR对32株烟草疫霉进行UPGMA聚类分析,遗传相似系数在0.60~1.00之间,在相似系数0.70水平上,可将其划分为3个类群,类群Ⅰ包含29个菌株,类群Ⅱ包含1个菌株,类群Ⅲ包含2个菌株,显示出较低的遗传分化水平。这些SSR引物的开发将为研究我国烟草疫霉的遗传多样性、群体遗传结构以及遗传图谱构建等奠定基础。
  • 【期刊】 洛阳市烟草黑胫病与根腐病概述

    刊名:现代农业科技 作者:康业斌 ; 孙向阳 ; 苗圃 ; 董昆乐 ; 李丽华 ; 赵世民 ; 江凯 关键词:烟草黑胫病 ; 烟草根腐病 ; 疫霉 ; 镰刀菌 ; 致病机理 ; 河南洛阳 机构:河南省洛阳市烟草公司汝阳县分公司 ; 河南省洛阳市烟草公司汝阳县分公司 ; 河南省烟草公司洛阳市公司 ; 河南科技大学林学院 年份:2017
    摘要:烟草黑胫病和根腐病是洛阳地区危害最为严重的根茎病害.本文通过总结国内外文献,从病害症状、病原菌、致病机理几个方面概述了2种病害的特征和特性,为病害防治的研究提供理论依据.
  • 【期刊】 一株农用拮抗放线菌的分离与鉴定

    刊名:中国烟草学报 作者:康业斌 ; 陈倩倩 ; 边传红 ; 赵世民 ; 李淑君 关键词:烟草 ; 土传病原真菌 ; 拮抗放线菌 ; 金黄垂直链霉菌 机构:河南科技大学林学院 ; 河南科技大学林学院 ; 河南省烟草公司洛阳市公司 ; 河南省农科院许昌烟草研究所 年份:2018
    摘要:为烟草土传病害生物防治研究提供菌株资源,采用稀释平板法分离洛阳地区烟草根际土壤样品中的优势拮抗放线菌,平板对峙培养法与抑制菌丝生长速率法测定放线菌菌株的拮抗作用,16S rDNA分析鉴定菌株种类。结果表明:从烟草根际土壤中共分离、纯化获得108个放线菌单菌落,其中22株对瓜果腐霉、烟草疫霉、尖孢镰刀菌的至少一种有拮抗作用,菌株SA74对3种病原真菌的抑菌率均大于50%。根据形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,该菌株被鉴定为金黄垂直链霉菌(Streptomyces aureoverticillatus)。
  • 【期刊】 牡丹根腐病病原的形态与分子鉴定

    刊名:北方园艺 作者:康业斌 ; 成玉梅 ; 赵丹 关键词:牡丹 ; 镰刀菌 ; 形态鉴定 ; 分子鉴定 机构:河南科技大学化工与制药学院 ; 河南科技大学化工与制药学院 ; 信阳师范学院华锐学院 ; 河南科技大学林学院 年份:2015
    摘要:以河南洛阳各大主要牡丹园栽培的牡丹典型根腐病病株为试材,采用组织分离法获得纯菌株,并对所得菌株进行致病性测定、形态学鉴定及rDNA-ITS序列分析,研究牡丹根腐病的病原菌种类。结果表明:分离获得的4个菌株在PDA培养基上均产生茂密、呈疏松棉絮状的菌丝及黄、红、紫等色素,大型分生孢子镰刀形或椭圆形,无色,多胞;小型分生孢子卵圆形至椭圆形,无色,单胞或双胞。致病性测定表明,4个菌株能侵染离体牡丹根尖使其变黑。在GenBank序列数据库中,F1~F4菌株的DNA序列与编号为HM214456.1和AB498917.1等的F.solani ITS区段DNA序列的同源性为99%~100%。据此,将河南洛阳牡丹根腐病的病原菌鉴定为F.solani。
  • 【期刊】 烟草钟器腐霉的分子鉴定与致病力测定

    刊名:农学学报 作者:康业斌 ; 边传红 ; 王伟杰 ; 赵世民 关键词:烟草 ; 钟器腐霉 ; rDNA-ITS ; 致病性测定 机构:河南科技大学林学院 ; 河南科技大学林学院 ; 洛阳市烟草公司嵩县支公司 ; 河南省烟草公司洛阳市公司 年份:2015
    摘要:从河南省嵩县送检的烟草茎黑腐病样本上分离获得1株腐霉菌,为明确该菌的种类及对烟草的致病力,对所得菌株进行形态学鉴定、DNA序列分析和致病性测定。结果表明,菌株菌落呈放射状型,并逐渐变为花瓣型,菌丝无隔;孢子囊球形、梨形;藏卵器球形;雄器钟状或不规则;rDNA-ITS序列测定分析,该菌序列与Gen Bank上登录号KC014615.1和GU133597.1等的序列同源性大于99%,鉴定为钟器腐霉(Pythium vexans de Bary)。对培育到10叶期的‘中烟100’品种接种,7天后该菌的病情指数为48,对照瓜果腐霉(P.aphanidermatum)的病情指数为62.7,表明其对‘中烟100’的致病力不及瓜果腐霉。
  • 【期刊】 牡丹柱枝孢叶斑病化学防治药剂筛选的研究

    刊名:北方园艺 作者:康业斌 ; 徐建强 ; 杨改凤 ; 田娟 关键词:牡丹 ; 加拿大柱枝双孢霉 ; 多菌灵 ; 氟环唑 ; 嘧菌酯 机构:河南科技大学林学院 ; 河南科技大学林学院 年份:2015
    摘要:以引起牡丹柱枝孢叶斑病的加拿大柱枝双孢霉(Cylindrocladium canadense)为试材,采用菌丝生长速率法和菌丝干重法研究了3类8种杀菌剂对病菌菌丝生长的影响,并进一步采用插片法及染色法,研究了多菌灵、氟环唑及嘧菌酯对菌丝线性生长及菌落形态的影响。结果表明:苯并咪唑类、三唑类及甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂对病菌菌丝的线性生长及菌丝干重均有一定的抑制作用。3类杀菌剂均导致菌丝顶端分枝数增多、间距缩短;杀菌剂处理的菌落边缘菌丝茂密,放射性生长的幼龄菌丝束较少,向外扩展速度慢。3类杀菌剂对病菌都表现为抑菌作用,均可作为柱枝孢叶斑病化学防治的备选药剂而应用在牡丹病害的综合防控中。
  • 【期刊】 洛阳烟区烟株根围抗烟草疫霉放线菌的筛选与鉴定

    刊名:烟草科技 作者:康业斌 ; 陈奇园 ; 丁钥琪 ; 赵世民 ; 李淑君 关键词:洛阳烟区 ; 烟草 ; 烟草疫霉 ; 拮抗放线菌 ; 形态鉴定 ; 分子鉴定 机构:河南科技大学林学院 ; 河南科技大学林学院 ; 河南省烟草公司洛阳市公司 ; 河南省农科院许昌烟草研究所 年份:2019
    摘要:为筛选对烟草疫霉具有拮抗作用的放线菌菌株,有效防治烟草黑胫病,对洛阳烟区烟株根围土壤中分离的放线菌采用改良平板对峙法与菌丝生长速率法测定了供试菌株及其发酵液对烟草疫霉的拮抗作用,并通过形态学观察、生理生化测定及16S rDNA序列分析鉴定了优势拮抗放线菌的种类。结果表明:在获得的227个放线菌单菌落中,8个菌株的发酵液对烟草疫霉菌丝生长的抑制率达100%,被确定为优势拮抗放线菌。根据这些菌株的形态学观察、生理生化反应与16S rDNA序列分析结果,将菌株YY75鉴定为鲁萨链霉菌(Streptomyces lucensis),菌株YY124、YY135鉴定为高贵链霉菌(S. nobilis),菌株LN204、LN221、LN247鉴定为娄彻链霉菌(S. rochei),菌株SX92鉴定为珊瑚链霉菌(S. coralus),菌株SX59鉴定为金黄回旋链霉(S. aureoverticillatus),均属于放线菌门、放线菌纲、链霉菌目、链霉菌科、链霉菌属。
  • 【期刊】 全日制农业推广硕士专业实践技能的构成与培养

    刊名:高教论坛 作者:康业斌 关键词:农业推广硕士 ; 实践技能 ; 构成 ; 培养 机构:河南科技大学研究生处 ; 河南科技大学研究生处 年份:2012
    摘要:农业推广硕士的专业实践技能由基本技能、专业技能与创新能力构成,基本能力是形成基本技巧的前提,能力通过不断训练演变为基本技能,基本技能通过与专业实践的有效结合形成专业技能,专业技能进一步提升为创新能力。提出了在研究生阶段应进一步提升专业实践技能,强化创新能力尤其是实践创新能力的培养。
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