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  • 【期刊】 在疾病防控领域做出重大贡献的劳模卢亦愚

    刊名:中国职工教育 年份:2015
    摘要:浙江省疾病预防控制中心重点实验室主任卢亦愚,多年从事病毒性传染病的检测、研究以及公共卫生工作。历任计划免疫实验室主任、病毒研究所副所长、所长、省公共卫生应急检测重点实验室主任。留学归国后,几十年如一日,勤勤恳恳、开拓创新,在浙江省的SARS、禽流感、手足口等重大传染病的防控上,取得优异成绩做出重要贡献。2010年被卫生部等授予"全国医药卫生系统先进个人称号";2013年被评为浙江省疾病预防控制系统"感动人物";2014年被评为"浙江省劳动模范"。
  • 【专利】 禽流感H7N9病毒双重荧光RT-PCR检测试剂盒及检测方法

    作者:卢亦愚 ; 徐昌平 ; 冯燕 ; 陈寅 年份:2013
    摘要:本发明提供了一种禽流感H7N9病毒双重荧光RT-PCR检测试剂盒,其特异性引物和探针如下:H7引物和探针:5’-GAAGAGGCAA TGCAAAATAGAATACA-3’,5’-CCGAAGCTAAACCAAAGTATCAC A-3’,FAM-ACCCAGTCAAACTAAGCAGCGGC TACAA-BHQ1;N9引物和探针:5’-CAGAAGGCCTGTTGCAGAAAT-3’,5’-CGTTGTGG CATACACATTCAGA-3’,HEX-AACACATGGGCCCGAAACATACTA AGAACA-BHQ1。本发明试剂盒灵敏、快速,能同时对病毒的HA基因和NA基因进行检测,在实际工作中发挥了很好的作用。
  • 【专利】 一种风疹病毒RT-PCR荧光检测试剂盒及检测方法

    作者:卢亦愚 ; 徐昌平 ; 冯燕 ; 吴华森 ; 钟淑玲 年份:2012
    摘要:本发明提供了一种风疹病毒RT-PCR荧光检测试剂盒,主要包括RT-PCR反应试剂以及特异性引物和探针,所述特异性引物和探针如下:上游引物:5’-CCCAGCACTCCACGCAAT-3’下游引物:5’-TCTTTAGGGCCCCACTCRAT-3’荧光探针:FAM-TCGCGGTATACCCGCCGCC-BHQ1;本发明试剂盒对风疹病毒的检测有高度的特异性,与麻疹、腮腺炎病毒、流感及其他病毒均无交叉反应;本发明试剂盒检测的灵敏度达0.01TCID50,可直接从疑似风疹患者的含漱液标本中检测风疹病毒核酸,从病毒核酸提取至完成检测仅需3 h左右,非常适用于风疹病毒感染引起突发疫情的实验室早期诊断 。
  • 【专利】 一种沙门氏菌的核酸恒温扩增检测试剂盒及检测方法

    作者:卢亦愚 ; 徐昌平 ; 余蓓蓓 ; 冯燕 ; 须周恒 ; 胡宗悦 年份:2015
    摘要:本发明公开了一种沙门氏菌核酸的恒温扩增检测试剂盒及检测方法,该试剂盒包含DNA提取试剂、恒温扩增反应液、阳性对照和阴性对照;本发明的检测试剂盒特异性高、灵敏度高;核酸扩增反应全部恒定同一温度,恒温扩增仅需35分钟,核酸试纸条检测结果需1-2分钟,全程从接受样品到获得结果整个检测过程仅需1小时左右,且整个反应过程只需一个恒温仪器,特别适合食品中等沙门氏菌的现场快速检测与排除。
  • 【期刊】 嗜肺军团菌核酸等温扩增快速检测技术研究

    刊名:中国卫生检验杂志 作者:卢亦愚 ; 张兵 ; 徐昌平 ; 程东庆 ; 冯燕 关键词:嗜肺军团菌 ; MIP基因 ; 环介导的等温扩增技术 ; 横向流动试纸条 ; pH显色 机构:[1]浙江中医药大学 ; [1]浙江中医药大学 ; [2]浙江省疾病预防控制中心 年份:2018
    摘要:目的建立一种嗜肺军团菌的核酸等温扩增试纸条及pH显色快速检测方法,从而实现对空调冷却水样中嗜肺军团菌的快速现场检测。方法基于嗜肺军团菌特异性mip基因设计引物,建立环介导等温扩增体系,并结合反应产物横向流动试纸条和pH显色检测技术,进而验证方法的灵敏性、特异性,并对浙江省不同地区的中央空调冷却水水样进行检测。结果环介导的等温扩增试纸条及pH显色检测方法灵敏度可高达3 cfu/μl,特异性好,且检测时间仅需40 min左右。检测的灵敏度与荧光定量PCR的方法基本一致,对外环境空调冷却水的检测阳性率与荧光定量也相符。结论建立的嗜肺军团菌试纸条与pH显色快速检测方法,灵敏度高,特异性好,适合现场快速检测。
  • 【期刊】 银花平感颗粒的体外抗甲型H1N1流感病毒作用

    刊名:中医杂志 作者:卢亦愚 ; 杜海霞 ; 万海同 ; 何昱 ; 杨洁红 ; 周惠芬 关键词:银花平感颗粒 ; 甲型H1N1流感病毒 ; 小鼠肺泡巨噬细胞 ; TLR7/MyD88信号通路 机构:浙江中医药大学 ; 浙江中医药大学 ; 浙江省疾病预防控制中心 年份:2017
    摘要:目的探讨银花平感颗粒体外抗甲型A/PR8/34(H1N1)流感病毒的作用机制。方法采用MTT比色法测定药物对巨噬细胞的最大无毒浓度(TC_0),半数细胞毒性浓度(TC_(50))及药物不同给药方式的抗病毒有效率,采用Probit回归分析计算其对病毒感染的半数抑制浓度(IC_(50))及治疗指数(TI);流感病毒H1N1感染培养的RAW264.7细胞,用利巴韦林(62.5μg/ml),银花平感颗粒高(500μg/ml)、中(250μg/ml)、低(125μg/ml)各剂量进行干预,4、16、24 h后收集细胞,实时荧光定量PCR法观察各组细胞中Toll样受体7(TLR7)、髓样分化因子88(My D88)、核因子p65(NF-κB p65)、干扰素调节因子7(IRF7)的变化。结果银花平感颗粒在31.25~500μg/ml范围内可降低流感病毒复制,其中药物治疗组在给药24 h后,抗病毒有效率最高;与正常对照组同时间比较,模型对照组TLR7、My D88、IRF7、NF-κB p65 mRNA表达水平均显著升高,且16 h达最高峰,较本组4 h、24 h差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);经药物干预后,银花平感颗粒高、中剂量组及利巴韦林组均显著下调流感病毒诱导4、16、24 h后的TLR7、My D88、IRF7和NF-κB p65 mRNA表达水平(P<0.05或P<0.01),尤以银花平感颗粒高剂量组对TLR7、My D88和NF-κB p65 mRNA表达水平的下调作用较利巴韦林组更为显著(P<0.05)。结论银花平感颗粒体外可明显抑制流感病毒复制,主要是通过治疗给药而发挥抗病毒作用,其抗病毒效果可能与其抑制TLR7/My D88/IRF7信号通路及NF-κB p65的激活有关,且高剂量对流感的治疗效果优于利巴韦林。
  • 【期刊】 嗜肺军团菌核酸等温扩增快速检测技术研究

    刊名:《中国卫生检验杂志》 作者:卢亦愚 ; 张兵 ; 徐昌平 ; 程东庆 ; 冯燕 关键词:嗜肺军团菌 ; MIP基因 ; 环介导的等温扩增技术 ; 横向流动试纸条 ; pH显色 机构:浙江中医药大学 ; 浙江中医药大学 ; 浙江省疾病预防控制中心 年份:2018
    摘要:目的建立一种嗜肺军团菌的核酸等温扩增试纸条及pH显色快速检测方法,从而实现对空调冷却水样中嗜肺军团菌的快速现场检测。方法基于嗜肺军团菌特异性mip基因设计引物,建立环介导等温扩增体系,并结合反应产物横向流动试纸条和pH显色检测技术,进而验证方法的灵敏性、特异性,并对浙江省不同地区的中央空调冷却水水样进行检测。结果环介导的等温扩增试纸条及pH显色检测方法灵敏度可高达3 cfu/μl,特异性好,且检测时间仅需40 min左右。检测的灵敏度与荧光定量PCR的方法基本一致,对外环境空调冷却水的检测阳性率与荧光定量也相符。结论建立的嗜肺军团菌试纸条与pH显色快速检测方法,灵敏度高,特异性好,适合现场快速检测。
  • 【期刊】 麻黄汤体外抗甲型H1N1流感病毒作用及机制研究

    刊名:中国中药杂志 作者:卢亦愚 ; 魏文扬 ; 万海同 ; 虞立 ; 何昱 关键词:麻黄汤 ; MDCK细胞 ; 甲型H1N1流感病毒 ; 病毒载量 ; TLR4 ; TLR7 机构:浙江中医药大学 ; 浙江中医药大学 ; 浙江省疾病预防控制中心 年份:2018
    摘要:为探讨麻黄汤体外抗甲型H1N1流感病毒的作用及可能机制,该研究以感染甲型H1N1流感病毒的狗肾(MDCK)细胞为载体,细胞病变(CPE)法测定甲型H1N1流感病毒鼠肺适应株(A/PR8/34)对MDCK细胞的半数细胞培养物感染剂量(TCID50);采用阻断流感病毒侵入宿主细胞和抗流感病毒生物合成2种不同方式给药,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定麻黄汤体外抗甲型H1N1流感病毒的有效率(ER)、半数抑制浓度(EC50)和治疗指数(TI);并且通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测技术,分别在给药后24,48 h,考察麻黄汤对感染甲型H1N1流感病毒的MDCK细胞中病毒载量以及TLR4,TLR7,My D88,TRAF6 mRNA表达的影响。实验结果显示,甲型H1N1流感病毒对MDCK细胞的TCID50为1×10-4.32/mL;2种给药方式抗流感病毒的EC50分别为4.92,1.59 g·L-1,TI分别为12.53,38.78,并且当质量浓度为5.00 g·L-1时,麻黄汤抗流感病毒的ER分别为50.21%和98.41%,说明麻黄汤可以阻断流感病毒侵入宿主细胞,并可显著抑制流感病毒在细胞内的生物合成;同时,相比于病毒组,给药后24,48 h麻黄汤各剂量组的病毒载量表达均显著降低,高、中剂量组显著下调了细胞中TLR4,TLR7,My D88,TRAF6 mRNA的表达水平,从而表明麻黄汤发挥抗流感病毒的作用机制,可能与其抑制细胞内流感病毒的复制以及TLR4和TLR7信号通路中的相关基因有关。
  • 【期刊】 银花平感颗粒体内抗甲型H1N1流感病毒作用

    刊名:中国中药杂志 作者:卢亦愚 ; 彭学谦 ; 何昱 ; 周惠芬 ; 张宇燕 ; 杨洁红 ; 陈俊奎 ; 万海同 关键词:银花平感颗粒 ; 甲型H1N1流感病毒 ; 肺指数 ; 肺部病理改变 ; 病毒载量 ; 免疫功能 机构:浙江中医药大学 ; 浙江中医药大学 ; 浙江省疾病预防控制中心 年份:2015
    摘要:为探讨银花平感颗粒(YHPG)体内抗甲型流感病毒A/PR/8/34(H1N1)作用及其对流感病毒感染小鼠免疫功能的影响,采用滴鼻感染ICR小鼠建立流感病毒肺炎模型,感染后第3天和第7天测定各组动物肺指数并观察肺组织病理变化;采用实时荧光定量RT-PCR和流式细胞技术,观察各组肺组织病毒载量以及外周血T细胞亚群(CD4+,CD8+,CD4+/CD8+)的变化。结果表明,YHPG(15,30 g·kg-1)剂量组在感染后第3天和第7天均能显著降低流感病毒感染小鼠肺指数和肺组织病毒载量,减轻肺组织病理变化,同时还可显著提高外周血CD4+T细胞水平和CD4+/CD8+比值,降低CD8+T细胞水平。说明YHPG可抑制流感病毒复制、减轻流感病毒感染小鼠肺部损伤以及调节流感病毒小鼠免疫功能下降,对甲型H1N1流感病毒感染小鼠有一定的治疗作用。
  • 【期刊】 双重荧光定量PCR检测西尼罗病毒和基孔肯雅病毒

    刊名:临床检验杂志 作者:卢亦愚 ; 余蓓蓓 ; 谢鑫友 ; 徐昌平 ; 张钧 关键词:西尼罗病毒 ; 基孔肯雅病毒 ; 荧光定量PCR 机构:浙江大学医学院附属邵逸夫医院检验科 ; 浙江大学医学院附属邵逸夫医院检验科 ; 浙江省疾病预防控制中心 年份:2013
    摘要:目的建立同时检测西尼罗病毒(WNV)、基孔肯雅病毒(CHIKV)的双重荧光定量PCR法,为临床疑似病例的诊断提供依据。方法分别针对WNV CAP基因、CHIKV E1基因保守区设计特异性引物和TaqMan探针,建立并优化双重荧光定量PCR反应体系,评价方法的特异性和灵敏度。结果建立的双重荧光定量PCR可同时检测WNV、CHIKV核酸,标准曲线相关系数(r)分别达0.999、0.998,灵敏度达10 copies/μL,具有良好的特异性。结论建立了同时检测WNV、CHIKV的双重荧光定量PCR法,但尚需临床进一步验证。
  • 【期刊】 基于DPO引物的多重RT-PCR技术检测常见呼吸道病毒

    刊名:中国卫生检验杂志 作者:卢亦愚 ; 徐昌平 ; 冯燕 ; 陈寅 ; 钟淑玲 关键词:呼吸道病毒 ; DPO引物 ; 多重RT-PCR 机构:浙江省疾病预防控制中心 ; 浙江省疾病预防控制中心 年份:2013
    摘要:目的:应用DPO引物技术建立一种同时检测流感等5种常见呼吸道病毒的多重RT-PCR检测方法。方法:设计针对流感病毒甲、乙型,呼吸道合胞病毒,腺病毒,以及肠道病毒通用的高特异性DPO引物,通过对多重RT-PCR反应体系的优化,建立上述5种病原体的多重RT-PCR检测技术。结果:建立的多重RT-PCR方法可同时扩增甲型流感病毒等5种病原体的基因片段,检测敏感性分别为102copies/ml、103copies/ml、102copies/ml、103copies/ml、102copies/ml,并与副流感等其它呼吸道病毒无交叉反应。结论:本研究建立的多重RT-PCR可以同时准确分型甲、乙型流感病毒,呼吸道合胞病毒,腺病毒和肠道病毒,为呼吸道感染的病原学诊断提供了有效的实验室检测手段。
  • 【期刊】 浙江省甲型H1N1流感病毒血凝素基因序列分析

    刊名:中国人兽共患病学报 作者:卢亦愚 ; 李敏红 ; 周敏 ; 茅海燕 ; 张严峻 ; 陈寅 关键词:甲型H1Nl流感病毒 ; 血凝素 ; 序列分析 ; 种系发生树 机构:浙江省疾病预防控制中心 ; 浙江省疾病预防控制中心 年份:2013
    摘要:目的分析浙江省2009-2011年甲型H1N1流感病毒血凝素基因(HA)序列进化特征。方法提取浙江省2009-2011年8株甲型H1N1流感病毒基因组RNA,RT-PCR扩增血凝素基因,测序并拼接出ORF;从GenBank数据库下载2009-2012年国内外甲型H1N1流感病毒HA基因序列,选择20株作为代表进行分析。采用MEGA软件对其进行种系发生树的构建。结果扩增并测序获得8株甲型H1N1流感病毒1 701bp的HA基因ORF,与国内外甲型H1N1流感病毒HA序列比对后发现所有序列的同源性均较高,2009年和2010年浙江省3株病毒HA与北美早期毒株A/California/04/2009(H1N1)同源性达到99.4%~99.5%,2011年浙江省5株病毒HA与A/California/04/2009(H1N1)同源性为98.5%~99.1%。在1株来自重症患者的毒株中发现了D222G突变。结论与早期毒株相比,虽然浙江省2011年的甲型H1N1流感病毒血凝素基因累积了更多的变异,但所有毒株的同源性达到98.5%以上。血凝素中D222G突变可能与重症甲型H1N1流感病毒感染相关。
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