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  • 【期刊】 一株蛴螬绿僵菌的分子鉴定

    刊名:茶叶学报 作者:王定锋 ; 李良德 ; 李慧玲 ; 张辉 ; 王庆森 ; 吴光远 关键词:分子鉴定 ; 绿僵菌 ; 蛴螬 ; rDNA-ITS ; β-tubulin ; RPB2 机构:福建省农业科学院茶叶研究所 ; 福建省农业科学院茶叶研究所 年份:2018
    摘要:以形态特征为主要依据的传统分类鉴定方法,难以区分绿僵菌属内隐秘种,而DNA分子鉴定能更加准确的对绿僵菌属隐秘种的分类地位进行鉴别。为明确一株分离自蛴螬的绿僵菌Ma1518菌株的具体分类归属,我们通过对该菌株的rDNA-ITS序列、β-tubulin序列和RPB2序列进行PCR扩增、测序及系统进化树构建,明确其为平沙绿僵菌Metarhizium pinghaense。
  • 【期刊】 卷边桩菇组织分离与ITS序列分子鉴定

    刊名:林业科技通讯 作者:张妍 ; 冯连荣 ; 王克瀚 ; 和敬渊 ; 宋立志 关键词:分子鉴定 ; 卷边桩菇 ; 组织分离 ; ITS序列 机构:辽宁省杨树研究所 ; 辽宁省杨树研究所 ; 辽宁省经济林研究所 ; 北京林业大学林学院 年份:2016
    摘要:为了研究卷边桩菇[Paxillus involutus(Batsch)Fr.]不同分离部位、不同培养基对菌丝生长的影响,并鉴别卷边桩菇组织分离株的真伪,对采集的野生卷边桩菇子实体进行了菌种分离,并对获得的菌丝进行了rDNA ITS序列分析。结果表明:A3是卷边桩菇菌丝分离较适宜的培养基配方,菌盖与菌柄连接处为分离的最佳部位。对卷边桩菇分离株rDNA ITS片段进行PCR扩增,扩增产物长度为724bp,登录NCBI与GenBank中已知的菌种进行Blastn比对,序列相似性在99%~93%之间,下载相似性高的菌种的ITS序列,通过ClustalW进行序列比对,MEGA5.2构建系统发育树,通过树图分析,鉴定出分离的菌株为卷边桩菇纯菌种。
  • 【期刊】 蓝舌病病毒7型毒株的分离与分子鉴定

    刊名:畜牧兽医学报 作者:吕敏娜 ; 杨恒 ; 孙铭飞 ; 李娟 ; 林栩慧 ; 张健騑 ; 廖申权 ; 戚南山 ; 吴彩艳 ; 李华春 ; 陈琴苓 关键词:蓝舌病病毒 ; 分离 ; 鉴定 ; 血清型 ; 序列分析 机构:广东省农业科学院动物卫生研究所广东省兽医公共卫生公共实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室 ; 广东省农业科学院动物卫生研究所广东省兽医公共卫生公共实验室广东省畜禽疫病防治研究重点实验室 ; 云南省畜牧兽医科学院 年份:2017
    摘要:为监测广东省蓝舌病流行状况,2014年从广东省某一奶牛场采集血液样品,检测虫媒病病原,对经RT-PCR检测蓝舌病病毒核酸阳性的样品进行病毒分离并鉴定.经鸡胚静脉接种后取肝,研磨后离心取上清转接C6/36细胞和BHK-21细胞,出现CPE,RT PCR检测蓝舌病病毒的VP7基因并进行序列比对,电镜观察病毒粒子,证实分离到蓝舌病病毒,命名为GD/ST2014.进一步扩增VP2基因,进行系统发育树分析,以及血清中和试验,表明此分离株为血清型7型.这是国内首次报道牛源蓝舌病病毒血清型7型的分离鉴定.
  • 【期刊】 林麝捻转血矛线虫的分子鉴定

    刊名:中国预防兽医学报 作者:林海 ; 程建国 ; 蔡永华 ; 付文龙 ; 王洪永 ; 颜其贵 ; 杨光友 关键词:林麝 ; 捻转血矛线虫 ; 虫种鉴定 ; PCR ; ITS 机构:四川农业大学动物医学院 ; 四川农业大学动物医学院 ; 四川养麝研究所 ; 四川逢春制药有限公司 年份:2017
    摘要:为鉴定林麝粪样中疑似血矛属线虫虫卵的虫种,本研究提取四川和陕西地区林麝粪样中疑似血矛属线虫的虫卵DNA,对其核糖体内转录间隔区(ITS)全序列进行PCR扩增与序列分析。结果显示14个疑似血矛属线虫的虫卵DNA样品ITS全序列片段大小为786 bp~788 bp,序列相似性为99.0%~100%;经序列BLAST比对和系统发育分析,所有疑似血矛属线虫的虫卵样品均为捻转血矛线虫,与NCBI基因库中多株捻转血矛线虫的ITS序列相似性为97.0%~99.5%。研究结果表明,寄生于林麝的血矛属线虫为捻转血矛线虫,从而为控制林麝捻转血矛线虫病提供了重要依据。
  • 【期刊】 东方次睾吸虫囊蚴的分子鉴定

    刊名:黑龙江畜牧兽医 作者:李荣 ; 邵志辉 ; 李超 ; 刘书浩 ; 鲁昌明 ; 段红 ; 高俊峰 ; 王春仁 关键词:东方次睾吸虫 ; 囊蚴 ; 核糖体内转录间隔区(ITS)序列 ; 核苷酸同源性 ; 序列分析 ; 进化分析 ; 淡水鱼 机构:黑龙江八一农垦大学动物科技学院 ; 黑龙江八一农垦大学动物科技学院 ; 黑龙江省兽医科学研究所 年份:2016
    摘要:为了鉴定淡水鱼体内的囊蚴是否为东方次睾吸虫囊蚴,试验采用PCR方法分别对5尾麦穗鱼的吸虫囊蚴核糖体内转录间隔区(ITS)进行扩增、克隆及序列分析。结果表明:5个样品的ITS序列长度均为1 077 bp,ITS1、5.8S和ITS2的长度分别为629 bp、160 bp和288 bp,5个样品的ITS核苷酸同源性为99.7%~100%;与Gen Bank中已发表的东方次睾吸虫成虫ITS1和ITS2序列的核苷酸同源性分别为98.7%~98.9%和99.7%~100%;基于ITS2序列构建的进化树显示,除布氏姜片吸虫外,每科均形成一个分支;5个东方次睾吸虫囊蚴与东方次睾吸虫成虫在同一分支上,与华支睾吸虫关系最近。说明麦穗鱼体内的囊蚴为东方次睾吸虫囊蚴。
  • 【期刊】 郑州草坪白三叶草根瘤菌的分离与分子鉴定

    刊名:内蒙古农业大学学报(自然科学版) 作者:张俊杰 ; 杨旭 ; 刘苏萌 ; 郭晨 ; 吴昌兴 ; 汪博 关键词:分子鉴定 ; 白三叶草 ; 根瘤菌 ; RFLP 机构:郑州轻工业学院食品与生物工程学院 ; 郑州轻工业学院食品与生物工程学院 年份:2016
    摘要:【目的】为研究郑州市区草坪白三叶草根瘤菌的遗传多样性。【方法】实验采用包括16S rDNA及IGS PCR-RFLP和16S rDNA基因序列分析方法。【结果】该研究从郑州市4个不同采样地点的草坪中采集白三叶草根瘤,并分离得到根瘤菌40株;经16S rDNA PCR-RFLP分析,初步确定所有供试菌株属于同一个属。而IGS PCR-RFLP分析将供试菌株分为四个类群,且来自郑州大学的供试菌株具有更加丰富的遗传多样性。对不同IGS型代表菌株的16S rDNA基因序列分析结果与16S rDNA PCR-RFLP的结果一致,表明所有供试菌都属于根瘤菌属(Rhizobium)。【结论】一共分离得到根瘤菌40株,它们都属于根瘤菌属,且分离自郑州大学的根瘤菌具有更加丰富的多样性。
  • 【期刊】 蛋鸡Ⅰ群腺病毒湖北株的分离与分子鉴定

    刊名:中国动物传染病学报 作者:墨海峡 ; 陈雪姣 ; 周鹏 ; 江涛 ; 欧阳金旭 ; 杨玉莹 ; 汪招雄 关键词:心包积水-肝炎综合症 ; 腺病毒 ; 分离 ; 蛋鸡 机构:[1]长江大学动物科学学院 ; [1]长江大学动物科学学院 ; [2]湖北省荆州市畜牧兽医局 年份:2018
    摘要:从蛋鸡养殖场采集疑似“心包积水-肝炎综合症”蛋鸡的肝脏,分离病毒,处理后接种于SPF鸡胚。应用PCR方法扩增Ⅰ群腺病毒hexon基因并进行序列分析;将分离的病毒感染30日龄健康雏鸡,观察感染后鸡群临床症状和病死鸡病理变化。结果显示:分离的3株禽腺病毒病毒基因同源性为100%;与Ⅰ群腺病毒血清4型同源性为99.8%;与Ⅱ群禽腺病毒和Ⅲ群禽腺病毒同源性为43.1%~78.6%;病毒感染雏鸡后,第3d出现鸡只死亡,第5d达到死亡高峰期,整个试验阶段鸡只死亡率达到60%,解剖、死亡鸡可见典型心包积液-包涵体肝炎症状,肾细胞中出现空泡和坏死。结果表明,本研究成功分离1株Ⅰ群腺病毒,命名为Ⅰ群腺病毒湖北株。
  • 【期刊】 蛋鸡Ⅰ群腺病毒湖北株的分离与分子鉴定

    刊名:中国动物传染病学报 作者:墨海峡 ; 陈雪姣 ; 周鹏 ; 江涛 ; 欧阳金旭 ; 杨玉莹 ; 汪招雄 关键词:心包积水-肝炎综合症 ; 腺病毒 ; 分离 ; 蛋鸡 机构:长江大学动物科学学院 ; 长江大学动物科学学院 ; 湖北省荆州市畜牧兽医局 年份:2018
    摘要:从蛋鸡养殖场采集疑似"心包积水-肝炎综合症"蛋鸡的肝脏,分离病毒,处理后接种于SPF鸡胚。应用PCR方法扩增Ⅰ群腺病毒hexon基因并进行序列分析;将分离的病毒感染30日龄健康雏鸡,观察感染后鸡群临床症状和病死鸡病理变化。结果显示:分离的3株禽腺病毒病毒基因同源性为100%;与Ⅰ群腺病毒血清4型同源性为99.8%;与Ⅱ群禽腺病毒和Ⅲ群禽腺病毒同源性为43.1%~78.6%;病毒感染雏鸡后,第3 d出现鸡只死亡,第5 d达到死亡高峰期,整个试验阶段鸡只死亡率达到60%,解剖、死亡鸡可见典型心包积液-包涵体肝炎症状,肾细胞中出现空泡和坏死。结果表明,本研究成功分离1株Ⅰ群腺病毒,命名为Ⅰ群腺病毒湖北株。
  • 【期刊】 圆圃棘口吸虫的形态与分子鉴定

    刊名:吉林畜牧兽医 作者:王晓旭 ; 刘泽轩 ; 张艳 ; 王春仁 关键词:圆圃棘口吸虫 ; 形态学鉴定 ; 分子生物学鉴定 机构:黑龙江八一农垦大学 ; 黑龙江八一农垦大学 ; 黑龙江大庆 年份:2017
    摘要:通过形态学和分子生物学的方法对大庆市犬小肠内采集的吸虫进行鉴定,采用苏木素染色法将虫体制成装片,在显微镜下观察其形态结构初步鉴定为圆圃棘口吸虫.提取该虫体的DNA,对内转录间隔区(Internal transernal spacer region,ITS)序列进行PCR扩增、测序和分析.经BLAST比对,发现与GenBank已发表的圆圃棘口吸虫序列的相似性达到99.6%.通过采用形态学及分子生物学两种方法证实从犬体内分离出的吸虫为圆圃棘口吸虫.
  • 【期刊】 四翼无刺线虫形态和分子鉴定

    刊名:中国人兽共患病学报 作者:高正琴 ; 岳秉飞 关键词:四翼无刺线虫 ; 直接镜检 ; 多重PCR ; 测序 机构:中国食品药品检定研究院 ; 中国食品药品检定研究院 年份:2015
    摘要:目的四翼无刺线虫是一种重要的人兽共患寄生虫病的病原,其对实验动物的感染危害严重。然而,缺乏有效检测鉴定四翼无刺线虫的技术。本研究目的是建立四翼无刺线虫诊断方法,为国家标准的修订提供科学依据。方法应用直接镜检法对肠道中的四翼无刺线虫进行筛查。应用多重PCR和测序技术鉴定四翼无刺线虫特定基因nd1、nd5、cox1、cytb、ITS2和28SrRNA。结果采用直接镜检实时动态显微视频技术在肠道中检出数量众多的四翼无刺线虫虫卵、幼虫和成虫。根据四翼无刺线虫的卵细胞、幼虫、雌雄成虫的大小和形态来鉴定虫种。应用多重PCR和测序技术从分离获得的四翼无刺线虫中鉴定出特定基因nd1、nd5、cox1、cytb、ITS2和28SrRNA,与其他不同种寄生虫无交叉反应。SPF和清洁级实验动物四翼无刺线虫感染率分别为41.5%和40.8%。结论直接镜检法和多重PCR结合测序技术能够快速准确检测鉴定出四翼无刺线虫。实验动物在四翼无刺线虫的传播中可能起着重要的储存作用。因此,需要考虑该寄生虫的潜在健康危害,以防传染人类。
  • 【期刊】 北京大兴区甘薯根腐病原菌的分离及分子鉴定

    刊名:生物技术进展 作者:李凌燕 ; 肖海峻 ; 王伟青 ; 潘妍 ; 孔庆顺 关键词:分子鉴定 ; 甘薯根腐病 ; 尖孢镰刀菌 ; ITS 机构:北京农业职业学院 ; 北京农业职业学院 ; 北京市大兴区庞各庄镇农业技术推广站 年份:2016
    摘要:针对北京市大兴区大肆爆发的甘薯根腐病病害,为确定造成该病害的优势真菌类型,开展了病害真菌的现状调查和快速检测鉴定工作。从患病甘薯根部分离真菌,通过真菌ITS区PCR扩增及系统发生关系等对病原菌的分子生物学鉴定和类群组成特点进行了分析。结果分离到两株病原真菌,分子鉴定结果表明这两株真菌均是尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。研究结果为甘薯根腐病病原菌的快速鉴定提供了依据,以期对甘薯根腐病的防治决策提供一定的参考。
  • 【期刊】 牡丹根腐病病原的形态与分子鉴定

    刊名:北方园艺 作者:成玉梅 ; 赵丹 ; 康业斌 关键词:分子鉴定 ; 牡丹 ; 镰刀菌 ; 形态鉴定 机构:河南科技大学化工与制药学院 ; 河南科技大学化工与制药学院 ; 信阳师范学院华锐学院 ; 河南科技大学林学院 年份:2015
    摘要:以河南洛阳各大主要牡丹园栽培的牡丹典型根腐病病株为试材,采用组织分离法获得纯菌株,并对所得菌株进行致病性测定、形态学鉴定及rDNA-ITS序列分析,研究牡丹根腐病的病原菌种类。结果表明:分离获得的4个菌株在PDA培养基上均产生茂密、呈疏松棉絮状的菌丝及黄、红、紫等色素,大型分生孢子镰刀形或椭圆形,无色,多胞;小型分生孢子卵圆形至椭圆形,无色,单胞或双胞。致病性测定表明,4个菌株能侵染离体牡丹根尖使其变黑。在GenBank序列数据库中,F1~F4菌株的DNA序列与编号为HM214456.1和AB498917.1等的F.solani ITS区段DNA序列的同源性为99%~100%。据此,将河南洛阳牡丹根腐病的病原菌鉴定为F.solani。
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